第九章-重要的病原菌.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第九章 重要的病原菌,第一节 分支杆菌属,（,Mycobacterium,）,第二节 炭疽杆菌（,B.anthracis,）,第三节 猪丹毒杆菌,第四节 厌氧芽孢杆菌属,第五节 嗜血杆菌属（,Haemophilus,）,第六节 布氏杆菌（,Brucella,）,第七节 巴氏杆菌属（,P.multocida,）,第八节 里氏杆菌属,本属菌均为细长略弯曲的杆菌，因有分枝生长的趋势而得名。主要特点是细胞壁含有大量脂质，不易着色。本属菌染成红色，非抗酸菌呈蓝色。对人和动物有致病性的主要是结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、禽分枝杆菌和副结核分枝杆菌，引起人畜和禽类慢性传染病。,第一节 分支杆菌属（,Mycobacterium,）,牛分枝杆菌（,M.bovis,）,一、形态与染色,细长、微弯的杆菌，无荚膜、芽孢和鞭毛。,革兰氏阳性菌，细胞壁有特殊的糖脂。不易着色，而,抗酸染色为红色,。,糖脂成份有效地刺激哺乳动物的免疫系统，分枝杆菌因此被制成,免疫佐剂,得到普遍应用。,专性需氧菌，对营养要求严格，在添加,特殊物质,的,培养基上,才能生长，但生长缓慢。,菌落粗糙，呈颗粒、结节或花菜样，乳白色或米黄色。,液体培养基易,形成,菌膜于,液面。,二、培养与生化特性,结核,三、抵抗力,对,外界环境的抵抗力很强，在干燥的环境中可存活,6,8,个月,。消毒药,作用不大，耐酸耐碱,。但对热、对紫外线敏感，对,链霉素、利福平等抗生素敏感，但易产生耐药性。,四、致病性,细胞内寄生,。主要,引起,牛结核病，肺、肝、肾、淋巴结、关节等处形成结核结节。,五、免疫性,1.,机体产生的抗体，无保护作用。,2.,以细胞免疫为主。,3.,传染性免疫,(,带菌免疫,),。,R,型 毒力强,S,型 毒力弱,卡介苗,（,BCG,）,即将牛分枝杆菌在含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中经,13,年,230,代传代而获得的减毒活疫苗株，现广泛用于预防接种。,六、变异性,.,涂片镜检,：,抗酸染色红色,.,分离培养：强酸或强碱,处理后，接种,罗杰二氏培养基,.,细菌鉴定：培养特性、生化特性,.,动物接种,：,兔有致病性,.,变态反应,：,PPD,皮内注射法,4mm,以上为阳性；,2-4mm,为可疑；,2mm,以下为阴性。,6.,血清学检查,:,ELISA,检测特异性抗体,七、微生物学诊断,第二节 炭疽杆菌,（,B.anthracis,）,炭疽芽胞杆菌俗称炭疽杆菌，是引起人类、各种家畜和野生动物炭疽（,Anthrax,）的病原。,一、形态及染色特性,革兰氏阳性大杆菌，菌体平直,，两端平截。在组织和血液中，单在或短链，经培养后形成长链，呈,竹节状,。,在组织中或含血液的培养基中可形成荚膜。芽孢在有氧条件下形成,，,位于菌体中央，不膨出菌体。无鞭毛。,二、培养特性,1.,需氧菌或兼性厌氧，最适生长温度,30-37,，营养要求不高，普通培养基中即能生长良好。,强毒菌株形成灰白色不透,明、大而扁平、表面干燥；,无毒或弱毒菌株形成稍小,而隆起、表面较为光滑湿,润、边缘比较整齐的光滑,型菌落。,强毒株菌落,炭疽杆菌卷发样菌落,2.,在血琼脂上一般不溶血，但个别菌株也可,轻微溶血。,3.,液体培养基中呈絮状沉淀生长,4.,明胶穿刺培养，呈倒松树状，表面液化呈漏斗状,5.,在含青霉素的培养基中，可形成串珠反应，与其它需氧芽孢杆菌区别。,串珠反应：在含青霉素,0.5U/ml,的培养基中，幼龄炭疽杆菌因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生质体相互连接成串。,三、,抵抗力,本菌繁殖体的抵抗力不强，同一般无芽孢杆菌。常用消毒剂均能于短时间内将其杀死。芽孢抵抗力较强，在干燥背光处可存活,40,年以上。煮沸,1h,或干热,140 3h,可杀灭芽孢，对碘敏感。,五、,抗原结构,（一）结构抗原,1.,荚膜抗原：,多肽，仅见于有毒菌株，与毒力和抗吞噬有关,2.,菌体抗原：,多糖，与细菌毒力无关。性质稳定，经加热煮沸,甚至高压蒸汽处理，抗原性不被破坏。,在病畜皮毛或腐败脏器中经长时间煮沸仍能与特异性抗体发生反应形成环状沉淀，称为,Ascoli,反应。,3.,芽胞抗原,：,是芽胞的外膜和皮质组成，具有免疫原性。,（二）保护性抗原（,PA,）,炭疽毒素（,PA,、,LF,、,EF,）的组成成分之一，具有免疫原性。,六、致病性,此,菌毒力主要与,荚膜和毒素,有关，荚膜可增强细菌抗吞噬能力，使之易于扩散；炭疽毒素是造成感染、动物致病和死亡的主要原因,，形成芽孢，抵抗力强。,炭疽毒素：水肿因子、保护性抗原、致死因子。,本主要感染草食动物，,此菌主要通过消化道传染，也可经呼吸道及皮肤创伤或通过吸血昆虫传播。,七、微生物学诊断,1.,细菌学检查,（）镜检：,大杆菌，两端平截，竹节状,（）分离培养：,用普通琼脂或血琼脂,（）纯培养,:,镜检、串珠试验、生化试验,（）动物试验：,将检验材料制成悬液或纯培养物,给小鼠注射，,24-36h,小鼠死于败血症,。,2.,血清学检查,（）,Ascoli,沉淀反应,环状沉淀反应。,用,加热抽提待检炭疽菌体多糖抗原与,已知抗体进行,的沉淀试验。,（）间接血凝试验,（）协同凝集试验,（）串珠荧光抗体检查,（）琼脂扩散试验,炭疽痊愈动物可获得坚强的免疫，再次感染者很少,第,号,炭疽芽孢苗,、无毒,炭疽芽孢苗,预防接种,高免血清进行紧急预防接种,青霉素作为首选药物进行治疗,八、免疫防治,第三节 猪丹毒杆菌（,Erysipelothrix,）,即,猪丹毒,丝菌,，可引起猪丹毒，亦可使羊、禽等发病，在人引起类丹毒。,革兰氏阳性的细杆菌，组织涂片或血液涂片中，呈单在、成对或小丝状，无鞭毛、无荚膜、,不产生芽孢,。,一、形态与染色,急性病例 慢性病例,二、培养与生化特性,微需氧菌，普通琼脂上生长不良，血平板上生长茂盛，灰白色露滴状小菌落，并形成,溶血环,，生长温度为,5,42,，最适温度为,30,37,。,生化特性：糖发酵能力极弱，,明胶穿刺培养呈试管刷状生长,，但不液化明胶。,三、抵抗力,本菌对腐败和干燥环境有较强的抵抗力，对常用消毒剂抵抗力不强，,0.5,甲醛数十分钟可杀死。,最初被分为,A,、,B,、,N,型。,A,型,：,强毒型，多分离自急性病例,B,型,：,弱毒型，多分离自慢性病例，免疫原性较好,N,型,：,无毒型,目前：,25,个血清型和,1a,、,1b,及,2a,、,2b,亚型,四、血清型,五、致病性,通过消化道感染，进入,血流，主要感染猪。,猪：急性败血症、亚急性疹块型、慢性疣状心内膜炎和关节炎。,人,可经外伤感染,，发生皮肤,病变，称“类丹毒”,。,实验动物中小白鼠和鸽子较易感。,猪丹毒病猪,涂片镜检：,G+,纤细的小杆菌,分离培养：,血平板,细菌鉴定：,培养特性和生化特性,血清学诊断：,凝集试验,六、微生物学诊断,1,显微镜检查：,败血型或疹块型：,耳血、疹块、心血、肝、脾、肾 慢性心内膜炎：心内膜疣状物,关节炎：关节液,2,分离培养：取病料接种于血液琼脂。,3,动物试验：,小白鼠（皮下,0.2ml,病料乳剂）,鸽（胸肌,1ml,）,免疫,：猪丹毒的弱毒苗和甲醛铝胶苗。,治疗：,抗,猪丹毒,血清用于,紧急预防和治疗，也可用,青霉素,治疗。,七、防治,第四节,厌氧芽孢杆菌属,（,Clostridium,）,多数,严格厌氧,，革兰氏染色,阳性,，能,形成芽孢,，,芽孢往往,比菌体粗,，但位置不固定。,能,产生多种,外毒素和侵袭性酶,，致病性强。,产气荚膜梭菌,、破伤风梭菌,、,肉毒梭菌、气肿疽梭菌、腐败,梭菌、诺维梭,菌等。,一、产,气荚膜梭菌（,Cl.perfringens,）,旧名魏氏梭,菌，一定,条件下，可引起多种严重,疾患，局部,组织出现坏死、水肿、产,气。其中,A,型可引起食物中毒。,（一）形态,及染色特征,G+,粗大杆菌。,一般条件下,不形成芽孢，,在无糖培养基上可形成,。芽孢大,而卵圆，位于菌体中央或近端，使菌体膨胀。多数菌株可形成荚膜，无鞭毛。,无芽孢 有芽孢 有荚膜,魏氏梭菌在动物体内形态,最适温度：,37,-47,，生长非常迅速,。,普通培养基：圆形、光滑,、隆起、灰白色的,圆,屋顶样菌落,。,葡萄糖血清琼脂：形成,圆盘形,、边缘锯齿状,、表面有辐射状,条纹的“勋章样”大菌落。,血液琼脂：双层溶血环，似靶状。,（二）培养,特性,血平板上，多数菌株有,双层溶血环,，内环,完全溶血，外环不完全溶血。,（,三）,生化,特性,肉渣汤培养基,牛乳培养基,高糖琼脂培养基,接种产气荚膜杆菌,本菌最突出的生化特性是对牛乳培养基的“,暴烈发酵,”。,依据主要致死性毒素与其抗毒素的中和试验，分为：,A,型,：,人气性坏疽和食物中毒,B,型,：,羔羊痢疾,C,型,：,绵羊,猝狙，仔猪红痢,D,型,：,牛肠毒血症,E,型,：,犊牛、羔羊肠毒血症,（四）,致病性,1.,直接涂片镜检：,G,+,大杆菌，并有荚膜,2.,分离培养：,接种血平板，有双层溶血环,3.,纯培养：,引起牛奶暴烈发酵,4.,动物试验：,小鼠、家兔或鸽,5.,肠毒素检查,：,取回肠内容物加适量灭菌生理盐水稀释，经离心沉淀后取上清液分成两份，一份不加热，一份加热，分别静脉注射家兔或小鼠。如有毒素存在，不加热组动物常于数分钟至数小时内死亡，而加热组动物不死亡。,（五）,微生物学,诊断,二、破伤风,梭菌（,Cl.tetani,）,引起人畜破伤风。有,芽孢,，广泛,存在,于土壤和粪便中,。本病以,骨骼肌发生强直性,痉挛,为,特征,，也称强直,梭菌。,一、,形态,G+,，两端钝圆、细长的杆菌,，无荚膜，多具周鞭毛,而能运动。在动物体内外均能,形成圆形芽孢，,位于,菌体一端，,呈,鼓槌状,。,破伤风梭菌,（二）,培养,特性,严格厌氧菌,。,普通,培养基上即能生长，形成不规则菌落，中心紧密、四周疏松似羽毛。,不易获得单个菌落,，扩散成薄膜状覆盖整个平板,表面。,产生两种很强的外毒素,：,1.,破伤风痉挛毒素,：,引起神经兴奋性的异常增高和骨骼肌痉挛。,2.,破伤风溶血素,：,不耐热，对氧敏感，可溶解马及家兔的红细胞，与破伤风梭菌的致病性无关。,（三）致病性,（四）微生物学,诊断,一般不需微生物学诊断。如有特殊需要，可采取创伤部的分泌物或坏死组织进行细菌学检查。,主动免疫：明矾,沉淀破伤风类毒素,被动免疫：破伤风抗毒素血清。,五、免疫防治,（一）形态及染色：本菌为,G,+,大杆菌，多单在，偶尔成对或短链。可形成卵圆形大于菌体的,偏端芽胞,。,（二）培养特性：,严格厌氧，产生毒素的最佳生长温度为,25,30,，,鲜血琼脂平板上为小而扁平、颗粒状，中央低隆，边缘不规则绒球状的菌落。,（三）毒素类型：分为,A,G,型，,C,型分,C,及,C,两个亚型。,引起人类致病的有：,A,、,B,、,E,、,F,型,引起畜禽致病的有：,C,、,D,三、肉毒梭菌,（四）致病性：可产生毒素，,其外毒素为目前所知最强烈的细菌外毒素，主要作用于神经系统,。,（五）抵抗力：芽孢抵抗力强；,肉毒毒素不耐热,。,（六）微生物学诊断：,1,毒素检查：毒素检出及中和实验,2,细菌检查：厌氧分离,（七）免疫治疗：,牛羊等肉毒症：明矾沉淀类毒素；,人的肉毒症状：多价抗毒素血清。,四、气肿疽梭菌,（一）培养特性：,1,鲜血琼脂上形成圆形，平坦，中心隆起似,钮扣状菌落,，,型溶血,。,2.,肉汤培养初为一致混浊，后上部清亮，底部有沉淀。,（二）抵抗力：芽孢抵抗力极强，土壤中可存活,25,年。,（三）致病性：主要引起,牛气肿疽：肌肉丰满部产生气性水肿，呈暗红色，又称黑腿病,。,实验动物：豚鼠易感。,气肿疽梭菌形态,气肿疽梭菌厌氧钮扣样菌落,五、腐败梭菌,G,+,专性厌氧菌，中央或近端芽孢，主要经创口感染，引起家畜恶性水肿，又称恶性水肿杆菌。,可引起绵羊的急性死亡，称羊快疫,。,致病因素,:,坏死毒素、溶血毒素、透明质酸酶。,六、诺维氏梭菌,又称水肿梭菌，产生强烈的外毒素，并引起恶性水肿，其中,B,型可致绵羊,“,黑疫,”,。严格厌氧，血琼脂上可见溶血环；含组织块的液体培养内，初浑浊，后上液清，底部沉淀，有难闻气体放出。,第五节,嗜血,杆菌属（,Haemophilus,）,嗜血,杆菌是一群酶系统不完全的革兰氏阴性杆菌，生长需要血液中的生长因子，尤其是,X,因子和,V,因子,。,一、,形态及染色,多为短杆状，有时呈多形性，无鞭毛，无芽胞，新分离的致病菌株有荚膜。,G,-,菌，两极着色。,二、培养特性,初次分离培养时供给,5%10%CO,2,，,可促进生长，本,属菌生长需供给,X,因子和,V,因子，巧克力,平板上生长较佳。,本属菌对外界的抵抗力不强,分离到的嗜血杆菌要及时移植或冻干保存,。,三、抵抗力,四、致病性,毒力,因子包括荚膜、菌毛和内毒素,等。,与,兽医有关的嗜血杆菌有：,副猪嗜血杆菌：,可引起猪的心肌炎、腹膜炎、胸,膜炎及关节炎等，常与猪流感病毒联合引起猪流感。,副禽嗜血杆菌：,可引起,鸡传染性鼻炎，导致产蛋量,迅速下降。,五、微生物学诊断,1.,显微镜检查：,两极着色,2.,分离培养：,血平板（生长不好或不长）,巧克力平板（生长良好）,3.,卫星现象：,可疑菌落 鲜血平板 再接金葡菌 培养 卫星现象,4.,生化试验,5.,血清学试验,布氏杆菌,又名布鲁氏菌,1887,年,Bruce,从死亡士兵脾脏中分到第一株布鲁菌，可引起多种动物发病。主要寄居于肝、脾和淋巴组织内的单核细胞中，是胞内寄生菌。,第六节 布氏杆菌（,Brucella,）,一、形态及染色特性,球形、球杆形或短,杆形。,多单在,，无芽孢、荚膜和鞭毛。,革兰氏染色阴性,，着色,不佳,。,柯兹洛夫斯基染色法,染,成鲜红色,，其他菌呈绿色。,二、培养特性,本菌,专性需氧,，在初代分离培养时尚需,5%-10%C,O,2,。,在培养基中加入少量,血液、血清,或肝浸液可促进生长，,不溶血。生长缓慢,，常需,5-10d,甚至,20-30d,。,液体培养基上呈轻微浑浊生长，时间长可,形成很厚的菌膜,；,在固体,培养基上有,S,、,M,、,R,型菌落,，大小不一。,三、抗原性及变异性,（一）属内抗原：,A,、,M,、,R,抗原,光滑型布氏杆菌有,A,和,M,二种菌体抗原成分,，是细菌,的凝集抗原，各菌种含量不同。不与非,S,型菌发生交叉凝集。,R,抗原：非,S,型菌的共同抗原，不与,S,型菌发生凝集。,变异,：,SR,丧失,A,、,M,抗原，暴露,R,抗原,（二）属外抗原,可与巴氏杆菌、变形杆菌、大肠杆菌等属细菌发生交叉凝集反应。,四、种及致病性,（一）分类,6,个种,马耳他布氏杆菌,Br.melitensis,（羊型）,1-3,流产布氏杆菌,Br.abortus,（牛型）,1-9,猪布氏杆菌,Br.suis 1-5,绵羊布氏杆菌,Br.ovis,沙林鼠布氏杆菌,Br.neotomae,犬布氏杆菌,Br.canis,主要致病物质有,内毒素、荚膜和透明质酸酶,。侵袭力,强，可,通过,完整的,皮肤、粘膜进入体内，并有很强的,繁殖与扩散,能力。,动物体内常局限于,腺体组织与生殖器官,（与赤藓醇含量,较高有关），故病畜主要表现为睾丸炎、附睾炎、乳腺,炎、子宫炎等。孕期动物对布氏杆菌最敏感，感染后常,引起流产。,（二）致病性,细菌学检查：,意义不大。,血清学检查：,用已知的布氏杆菌检查动物的血清抗体,凝集试验（虎红平板凝集试验）,感染初期检测。大动物血清凝集价达,1,：,100,时阳性，,1,：,25,可疑；小动物,1,：,50,为阳性，,1,：,25,为可疑。,补体结合试验,慢性布氏杆菌病诊断。规定,1,：,10,被检血清阻止溶血,在,50%,以上即阳性。,变态反应检测,不宜作早期诊断。布氏杆菌水解素注射，观察红肿反,应。,1-2cm,为弱,+,；,2-3cm,为,+,；,4-6cm,为强,+,。,五、微生物学诊断,六、免疫及治疗,免疫：,(1),羊型,5,号苗（,M5,）,弱毒活苗、用于羊、牛、气溶胶、注射,(2),猪,2,号苗（,S2,）,弱毒活苗，用于猪羊钦水、注射,治疗：,(1)0.1%KmnO4,、,0.2%,呋喃西林,(2),抗菌素、磺胺,第七节 巴氏杆菌属（,Pasteurella),本,属细菌已报道有,20,多种，多杀性巴氏,杆菌是,本属中最重要的畜禽致病菌，可引起多种动物发生,出血性败血症或传染性肺炎,。,一、形态及染色,两端钝圆，,中央微凸,的,G,-,短杆菌,，,单个存在，有时成,双排列。病,料涂片用瑞氏染色或美蓝染色时，可见,典型的,两极着色,。,巴氏杆菌,两极,浓染,二、培养特性,对营养要求较严格。在普通培养基上,生长贫瘠；而在血液,或血清培养基中生长良好,，呈,灰白色、露滴状、针尖,大小菌落，,不溶血。,血清琼脂平板：,新分离的强毒菌的菌落，在,45,折射光线下观察，表面呈不同程度的荧光，根据有无荧光及荧光的颜色，分三型：,Fg,型：,菌落呈蓝绿色带金光，对猪、牛、羊等为强毒株。,Fo,型：,菌落呈橘红色带金光，对禽类和兔为强毒株。,Nf,型,：菌落不带荧光。,Fg,Fo,1.,菌体抗原,:,16,个型，,以阿拉伯数字表示,2.,荚膜抗原,:,多糖成分，,有,6,个型，,大写英文字母表示,我国分离的禽多杀性巴氏杆菌以,5,A,为多,，,其次为,8,：,A,。,三、血清型,本菌抵抗力不强，普通消毒药常用浓度对本菌都有很好的消毒力。在无菌蒸馏水和生理盐水中很快,死亡。,冻,干菌种在低温中可保存长达,26,年,。,四、,抵抗力,对多种动物致病，,主要,引起,出血性败血症及肺炎，如牛出败、,猪,肺疫,、,禽霍乱,等。,动物患病痊愈,后获得,较强的免疫力,，对其他,血清型具有交叉保护力。高免多价血清,具有良好,的紧急预防和治疗作用。,五、致病性与免疫性,六、微生物学诊断,1.,涂片或触片镜检,染色（美蓝或瑞氏），两极着色,2.,分离培养,血琼脂平板上呈露滴状小菌落，不溶血。,3.,动物试验,病,料悬液或培养物,接种小白鼠，引起,小白鼠,迅速死亡。,七、防治,我国目前生产使用的多杀性巴氏杆菌菌苗：,1.,牛出败氢氧化铝菌苗,2.,猪肺疫氢氧化铝菌苗,3.,禽霍乱氢氧化铝菌苗,4.,禽霍乱油乳剂菌苗,治疗：土霉素、四环素、链霉素和磺胺类药均有效。,第八节,里,氏杆菌属（,Riemerella,),鸭疫里,氏杆菌,是,本属的代表种,，是,雏鸭传染性浆膜炎的病原菌,。,一,.,形态及染色,菌体呈杆状或椭圆形，多为单个，少数成双或短链排列。可形成荚膜，无芽胞，无鞭毛。,G,-,菌，两极着色。,营养要求较高，普通培养基和麦康凯培养基上不生长，在,巧克力或胰蛋白胨大豆琼脂（,TSA,）平板,上，呈圆形、微突起、表面光滑、奶油状,小菌落。,生化,试验大多阴性，不发酵葡萄糖和蔗糖，与多杀性巴氏杆菌相区别。,二,.,培养及生化特性,三,.,血清型,21,个型，以阿拉伯数字表示，我国多数属,1,型。,四,.,致病性,主要感染雏鸭，尤其,23,周龄者，引起急性或慢性的败血症和浆膜炎。,五,.,诊断,涂片镜检,:,两极着色,分离培养,:,巧克力培养基,生化试验,:,不发酵葡萄糖和蔗糖,思考题,1.,牛分支杆菌的主要生物学特性。,2.,炭疽杆菌的主要培养特性有哪些？,3.,猪丹毒杆菌的诊断要点。,4.,产气荚膜梭菌分型及其对动物的致病性,?,5.,破伤风梭菌的主要生物学特性。,6.,布氏杆菌病的微生物学诊断方法,.,6.,嗜血杆菌进行分离培养时，什么叫,“,卫星现象,”,？,8.,多,杀性巴氏杆菌的形态染色及,培养方面有何特征？,