食品中其他化学污染物的检验_104页.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第九章 食品中其他化学污染物的检验,9.1,食品中有害金属铅、砷、汞、镉的检验,9.2,食品中,N-,亚硝基类化合物的检验,9.3,食品中苯并（,a,）芘的检验,9.4,食品中多氯联苯的检验,9.5,食品中氯丙稀的检验,9.6,食品中丙烯酰胺的检验,第一节 食品中有害金属铅、砷、汞、镉的检验,一、食品中铅的检验,食品中铅的来源主要由三个方面：,1,、植物通过根部直接吸收土壤中溶解状态的铅；,2,、食品在生产、加工、包装、运输过程中接触到的设备、工具、容器及包装材料可能含有铅，一定条件下铅逐渐进入食品中；,3,、工业“三废”污染环境，从而污染食品。,0.05mg/kg,2.0mg/kg,卫生标准,食品中铅的测定,我国国家标准食品卫生检验方法（,GB/T 5009.122003),规定了五种测定食品中铅的方法。,（一）石墨炉原子吸收法,（二）氢化物发生原子荧光光谱法,（三）火焰原子吸收法,（四）分光光度法,（五）示波极谱法,（一）石墨炉原子吸收法,样品经灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中，高温原子化后吸收,283.3nm,共振线，在一定浓度范围，其吸收值与铅含量成正比，标准曲线法定量。,1.,原理,2.,样品处理,（,1,）压力消解罐消解法,（,2,）干法灰化,（,3,）过硫酸铵灰化法,（,4,）湿式消解法,（,1,）压力消解罐消解法,压力消解罐,恒温干燥箱,（,2,）干法灰化,先小火在可调式电热板上炭化至无烟,再移入马弗炉,500,灰化,6,8h,（,4,）湿消化法,（,3,）过硫酸铵灰化法,3.,测定,（,1,）仪器条件,（,2,）取铅标准应用液、待测样品溶液和试剂空白液各,10L,，分别注入石墨炉，得出样品中铅含量。,4.,注意事项,成分复杂、基体干扰严重的样品：适量的,基体改进剂磷酸铵溶液,管长方向无温度梯度,所需原子化温度低,石墨管寿命长,步骤,目的,温度,(),时间,(s),干燥,除去溶剂,溶剂沸点,10,30,灰化,除去基体,条件实验,10,30,原子化,生成基态原子,手册,3,5,净化,消除记忆,原子化温度,2,3,通过控制石墨炉电源电流输出的大小，达到干燥、灰化、原子化、净化,4,个步骤。,（二）氢化物发生原子荧光光谱法,样品经硝酸,-,高氯酸消化，在酸性介质中，二价铅离子与硼氢化钠反应生成铅化氢，由载气（氩气）带入石英原子化器原子化，在铅空心阴极灯照射下，基态铅原子被激发，当激发态铅原子回到基态时，发出特征波长的荧光，荧光强度与铅含量成正比，标准曲线法定量。,1.,原理,2.,样品处理,取适量样品，加入硝酸,-,高氯酸混合酸，放置过夜。加热消化至消化液呈淡黄色或无色。稍冷后加水，,继续加热,至消化液剩下,0.5,1.0ml,为止。加入,盐酸,和,草酸,，摇匀，加入,铁氰化钾,，用水定容。混匀，放,30,分钟后测定。同时做试剂空白。,3.,测定,（,1,）仪器条件,（,2,）测定,（三）火焰原子吸收法,样品经处理后，铅离子在弱碱性条件下与二乙基二硫代氨基甲酸钠,(DDTC),形成络合物，经,4-,甲基,-2-,戊酮（,MIBK,）萃取分离，导入原子吸收光谱仪中，火焰原子化后，吸收,283.3nm,共振线，其吸光度值与铅含量成正比，用标准曲线法定量。,1.,原理,（四）二硫腙比色法,样品经消化后，在,pH8.5,9.0,时，铅离子与二硫腙生成红色络合物，经三氯甲烷萃取后，,510nm,测定吸光度值，标准曲线法定量。,1.,原理,二、食品中砷的检验,砷的理化特性,食品中砷的主要来源,含砷农药的使用；,食品加工时使用含砷化学物质作原料，,食用色素和其他添加剂；,工矿企业排放的“三废”含有大量的砷,食品中砷的测定,化学分析法,重量法、容量法,仪器分析法,阳极溶出伏安法、极谱法、原子吸收光谱法、原子荧光光谱法、分光光度法、色谱法等。,我国国家标准食品卫生检验方法,(,GB/T5009.11,2003),规定了三种方法,：氢化物发生原子荧光光谱法、银盐法、硼氢化物还原光度法。,（一）氢化物发生原子荧光光谱法,样品经湿消解或干灰化后，加入硫脲使五价砷还原成三价砷，再加入硼氢化钠（或硼氢化钾）使三价砷还原成砷化氢，由氩气带入石英原子化器中，高温下分解为原子态砷，在砷空心阴极灯发射光激发下产生原子荧光，在一定条件下荧光强度与被测液中砷浓度成正比，标准曲线法定量。,1.,原理,2.,样品处理,（,1,）湿消化法,取适量样品，加入硝酸、硫酸，放置过夜，次日加热消化至完全，除尽氮氧化物，冷却，加入硫脲，用水定容。,（,2,）干灰化法,取适量样品，加入硝酸镁溶液混匀，低热蒸干。将,MgO,盖于其上，先炭化再,550,灰化,4h,。冷却加稀盐酸中和,MgO,并溶液灰分。移入容量瓶中，加硫脲，用稀硫酸分次洗涤坩埚后合并定容。,3.,测定,4.,说明,样品湿消化时应防止炭化，因碳可能把 砷还原为元素态造成损失。,干灰化时，加入,硝酸镁,加热分解产生氧，可促进灰化作用。,氧化镁,除保湿传热外，还起防止砷挥发损失的作用。因此灰化前应将氧化镁粉末仔细覆盖在全部样品的表面。,（二）银盐法,(,实验课）,（三）硼氢化物还原光度法,样品经消化后，当溶液中氢离子浓度大于,1.0mol/L,时，加入碘化钾,-,硫脲并加热，将,五价砷还原成三价砷，用硼氢化钾将三价砷还原成砷化氢，用,硝酸,-,硝酸银,-,聚乙烯醇,-,乙醇,为吸收液，砷化氢将银离子还原为单质银，时溶液呈黄色，在,400nm,波长下测定吸光度值，用标准曲线法定量。,最低检出限为,0.05mg/kg,。,吸收液中,聚乙烯醇,对胶态银有良好分散作用，但通气时会产生大量气泡，加,乙醇,作消泡剂，乙醇太多会出现浑浊，,50,为宜。中性条件下，银离子不稳定，生产的胶态颗粒大，故在吸收液中加入适量的,硝酸,。,三、食品中汞的检验,食品汞主要来自环境污染,。,用含汞废水灌溉或不合理使用含汞农药，使农作物含汞量增高。含汞废水可污染水体，水体中汞通过食物链富集在水生生物中，鱼、虾、贝类食品含汞量远高于其他食品。,我国食品中汞的卫生标准,，鱼及水产品,0.3mg/kg,肉、蛋、油,0.5mg/kg,，成品粮,0.002mg/kg,，乳制品、蔬菜、水果,0.01mg/kg,。,食品中汞的测定方法,分光光度法（二硫腙法、碘化亚铜法）,常用,原子荧光光谱法和冷原子吸收光谱法,，选择性好，灵敏度高，为国家标准,(GB/T5009.112003),方法。,甲基汞的测定可用气相色谱法或冷原子吸收光谱法。,（一）原子荧光光谱法,样品经消化后，在酸性介质中，汞离子被硼氢化钾还原成原子汞，,由载气带入原子化器中，在汞空心阴极灯照射下，基态汞原子被激发至激发态，激发态不稳定，回到基态时，发射出具有特征波长的荧光，在一定条件下荧光强度与测液中汞离子浓度成正比，标准曲线法定量。,1.,原理,2.,样品处理,（,1,）高压消解法,称取适量样品置于聚四氯乙烯内灌中，加硝酸浸泡过夜。加过氧化氢，密封后置干燥箱中，,120,恒温,3h,，至消化完全，稀硝酸定容。,高压消解罐,微波消解罐,（,2,）微波消化法,称取适量样品于消化灌中，加硝酸和过氧化氢，盖好安全阀，放入微波炉中，根据样品种类，设置最佳消化条件，至消化完全。冷却后稀硝酸定容。,（二）冷原子吸收光谱法,样品经消化后，在酸性介质中，汞离子被氯化亚锡还原成原子汞，原子汞在载气带动下，进入测汞仪，吸收,253.7nm,波长的共振线，在一定浓度范围内，吸光度与溶液中汞浓度成正比，标准曲线法定量。,1.,原理,2.,样品处理,称取适量样品，加五氧化二钒粉末、硝酸，振摇后放置,4h,。加浓硫酸，混匀，在,140,砂浴上加热消化。冷却后加高锰酸钾溶液，放置,4h,，滴加盐酸羟胺使紫色退去，用水稀释定容。,3.,测定,取,10.00ml,样品消化液于汞蒸气发生器内，加氯化亚锡，通净化载气（氮气或空气）,1.0L/min,，使汞蒸气经过装有氯化钙的干燥器后，再进入测汞仪，读取最大读数。,取汞标准应用液和试剂空白按样品消化液的步骤测定，绘制标准曲线，计算出样品中汞含量。,四、食品中镉的检验,镉的理化特性,食品中镉的主要来源为工业污染，以及含镉农药和化肥的使用。,食品中镉的卫生标准：大米,0.2mg/kg,；面粉、肉类、鱼类,0.1mg/kg,；其他谷类、豆类、薯类、蔬菜,0.5mg/kg,；水果,0.3mg/kg,。,食品中镉的测定方法,国家标准,(GB/T5009.112003),分析方法：,石墨炉原子吸收光谱法、火焰原子吸收法、分光光度法和原子荧光法。,极谱法、等离子体发射光谱法、,X,射线荧光法等。,（一）石墨炉原子吸收光谱法,样品经灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中，镉离子经电热高温原子化后吸收,228.8nm,共振线，在一定浓度范围，其吸光度值与镉含量成正比，标准曲线法定量。,（二）火焰原子吸收法,样品经处理后，在一定,pH,值条件下，镉离子与配位剂生成配合物。经萃取，导入原子吸收仪中，原子化后，吸收,228.8nm,共振线，其吸光度值与镉含量成正比，标准曲线法定量。,1.,原理,火焰原子化,去溶,蒸发,原子化,燃烧头,雾化器,雾化室,试样,2.,样品处理,由于使用的配位剂不同，样品处理方法，配位反应的,pH,条件，及萃取的试剂各不相同，样品处理有两种方法：一种是碘化钾,-4-,甲基,-2-,戊酮（,MIBK,）法，另一种是二硫腙,-,乙酸丁酯法。,（,1,）,KI-MIBK,法,称取适量均匀样品于坩埚中，先低温灰化，再在,50025,灰化约,8h,，残渣用硝酸,-,高氯酸混合液反复处理到无黑色碳粒，再用稀盐酸定容。同时做试剂空白。,吸取适量样品和设计空白消化液，加稀硫酸和水混匀，然后加碘化钾溶液，混匀、静置。用,MIBK,萃取。将,MIBK,层经脱脂棉脱水过滤，待测。标准系列在萃取时，需另加盐酸（,1+11,）与样品消化液相同的体积，其他操作同样品消化液。,（,2,）二硫腙,-,乙酸丁酯法,称取适量样品，用硝酸,-,高氯酸消化。冷却，用水将内容物定量洗入分液漏斗中。同时做试剂空白。,取镉标准应用液于分液漏斗中，加盐酸（,1+11,）至样品消化液相同的体积，加入柠檬酸钠缓冲液，以氨水调溶液,pH,值,5.0,6.4,，加水混匀。再分别加入二硫腙,-,乙酸丁酯溶液，振摇，静置分层，取出有机相，待分析测定。,第二节 食品中,N-,亚硝基类化合物的检验,N-,亚硝基类化合物又称亚硝胺，通式：,一、概述,（一）理化性质,R1,R2,N,N=O,低分子的亚硝胺在常温下为黄色液体，可溶于水，其余亚硝胺不溶于水，易溶于醇、醚和二氯甲烷。,亚硝胺在中性和碱性条件下稳定，不易水解，在酸性和紫外光照射下可水解，分解成仲胺和亚硝酸。,R1,R2,N,N=O+H,2,O,UV,R1,R2,NH+HNO,2,（二）污染来源,食品中广泛存在硝酸盐和亚硝酸盐。主要来源：,一是农业上大量使用氮肥和含氮除草剂，使蔬菜含有大量硝酸盐。,二是在加工肉制品时，往往加入硝酸盐或亚硝酸盐作为发色剂。,三是高蛋白食品在高温、烹饪、烧烤等过程中，蛋白质分解，产生中间产物，食品中仲胺含量增加。,四是未加热的咸猪肉含有脯氨酸亚硝酸，油煎后转变为致癌物亚硝基吡咯烷。,从食物进入人体的亚硝酸盐和仲胺在胃中合成亚硝胺。,（三）毒性与危害,N-,亚硝基类化合物有较强的毒性和致癌性。,为预防亚硝胺的致癌作用，首先应,减少亚硝酸盐和仲胺的射入,，其次是,阻断亚硝胺在体内的合成,。,（四）卫生标准,品种,N-,亚硝基二甲胺,N-,亚硝基二乙胺,海产品（,ug,/kg),4,7,肉制品（,ug,/kg),3,5,啤酒（,ug,/kg),3,0,我国食品中亚硝胺的卫生标准：,（五）检验方法,一类测总的亚硝胺,:,分光光度法,一类分别测各种亚硝胺,:,薄层色谱法，气相色谱,-,质谱法和热能分析法。,我国的食品卫生标准,(GB/T5009.112003),分析方法是,气相色谱,-,质谱法和气相色谱,-,热能分析法（,GT-TEA),。,二、气相色谱,-,热能分析法,样品经处理后，经气相色谱分离，分离后的亚硝胺在热解室中经特异性催化裂解产生,NO,基团，后者与臭氧反应生成激发态,NO,2,*,。当激发态,NO,2,*,返回基态时发射出近红外区光线（,600nm,2800nm,）。产生的近红外区光线被光电倍增管检测（,600nm,800nm,）。以保留时间定性，峰高或峰面积定量。,1.,原理,2.,样品处理,（,1,）提取,硅藻土吸附法,真空低温蒸馏法：在双颈蒸馏瓶中加入适量预先除去二氧化碳的样品、玻璃珠和氢氧化钠，先在,53.3kPa,低温蒸馏，待样品剩余约,10ml,时，在真空,93.3,下,kPa,蒸至进干为止。蒸馏液中加稀盐酸，用二氯甲烷提取三次，提取液用无水硫酸钠脱水。,（,2,）浓缩,将二氯甲烷提取液移入,K-D,浓缩器中，在,55,水浴上浓缩至,10ml,，再以缓慢的氮气吹至,0.4ml,1.0ml,供测定。,3.,测定,4.,说明,热能分析仪时检验亚硝胺的较好仪器，具有较高的灵敏度和选择性，最低检出量为,0.1ng,。,二氯甲烷提取液在,K-D,浓缩器中浓缩时，水浴温度不宜过高，水泵减压不宜太猛，以免损失亚硝胺。,三、气相色谱,-,质谱法,样品中的,N-,亚硝基类化合物经水蒸气蒸馏和有机溶剂萃取后，浓缩至一定量，采用气相色谱,-,质谱联用仪的高分辨匹配法进行定性和定量。,1.,原理,2.,样品处理,（,1,）水蒸气蒸馏,称取一定量粉碎的样品，加入适量水和氯化钠，进行水蒸气蒸馏。蒸馏液收集在加有二氯甲烷和冰块的接收瓶中。利用亚硝胺的挥发性与干扰组分分离。,（,2,）萃取,在蒸馏液中加入氯化钠和少量硫酸，使待测物转移至二氯甲烷层，再用二氯甲烷萃取三次，合并萃取液。,（,3,）浓缩,将二氯甲烷萃取液用无水硫酸钠脱水后，转移到,K-D,浓缩器中，在,50,水浴上浓缩至,1.0ml,，备用。,3.,测定,（,1,）仪器条件,（,2,）测定 样品和标准经气相色谱柱分离后进入质谱仪，采用电子轰击源高分辨峰匹配法，用全氟煤油的碎片离子，分别检视,N-,亚硝基二甲胺、,N-,亚硝基二乙胺、,N-,亚硝基二丙胺、,N-,亚硝基吡咯烷的分子、离子，结合它们的保留时间定性，以该分子、离子的峰高定量。,4.,说明,（,1,）本法适用于酒类、肉制品、蔬菜、豆制品、调味品、茶叶等食品中,N-,亚硝基化合物的检验。,（,2,）在待蒸馏的样品中加入氯化钠使其饱和，是为了减低,N-,亚硝胺在水中的溶解度，使其易挥发。在接收瓶中加入二氯甲烷和冰块，有利于,N-,亚硝胺的冷凝收集，提高回收率。,（,3,）萃取时，在水相中加入硫酸（,1+3,），可避免样品中碱性杂质进入有机相。萃取时加入氯化钠的目的是促使分层。如果样品中含有较高浓度的乙醇，如蒸馏酒、配制酒等，须用氢氧化钠溶液洗涤有机相。,（,4,）浓缩时，如果温度过高（超过,60,），会使亚硝胺明显损失。,四、分光光度法,原理,根据亚硝胺的性质，采用夹层水蒸气蒸馏纯化挥发性亚硝胺，经紫外线照射后，分解出亚硝酸根，再通过强碱性离子交换树脂浓缩，再,pH1.4,条件下与对氨基苯磺酸形成重氮盐，后者与盐酸萘乙二胺反应生成紫红色偶氮燃料，比色定量。,本法是测定挥发性亚硝胺类化合物总量的方法。,第三节 食品中苯并（,a,）芘的检验,（一）理化性质,苯并,a,芘,Benzo(a)pyrene,苯并（,a,）芘,【,B(a)P,】,分子式,C,20,H,12,常温下为黄色结晶。,在水中溶解度小，但易溶于环己烷、甲苯、己烷和丙酮。,B(a)P,在碱性介质中稳定，酸性介质中不稳定。,在众多的多环芳烃化合物中，,B(a)P,的致癌性和致突变性是最强的。,（二）污染来源,食品中苯并,(a),芘的主要来源有环境污染和食品加热烹饪。在加热烹饪过程中，烘烤、烟熏可使食品中,B(a)P,的含量增加。,（三）毒性及危害,B(a)P,的毒性，主要表现为致癌性。,大量的动物试验表明，,B(a)P,可引起皮肤、肺、乳腺及肝的癌肿，还具有致畸形和生殖毒性。,（四）卫生标准,我国食品卫生标准规定肉制品、粮食中,B(a)P5ug/kg,。,（五）检验方法,分离提取的方法有皂化法、索式提取法、超声波萃取法和直接溶解法。,净化富集一般要经过液,-,液分配、吸附柱色谱等步骤。,我国的食品卫生标准,(GB/T5009.112003),分析方法是荧光分光光度法和目测比色法。,二、荧光分光光度法,样品用有机溶剂提取，皂化后，经液液分配或色谱柱净化，然后在乙酰化滤纸上分离苯并,(a),芘，因苯并,(a),芘在紫外光照射下呈蓝紫色荧光斑点，将分离后有苯并,(a),芘的滤纸部分剪下，用溶剂浸出后，用荧光分光光度计测荧光强度，与标准比较定量。,（一）,原理,（二）样品处理,（,1,）植物油样：,取适量混匀油样，用环己烷分次洗入分液漏斗中，以环己烷饱和过的二甲基甲酰胺提取三次，合并二甲基甲酰胺提取液，用经二甲基甲酰胺饱和过的环己烷提取一次，弃去环己烷液层。将二甲基甲酰胺提取液合并于预先装有硫酸钠溶液的分液漏斗中，混匀，静置数分钟后，用环己烷提取二次，合并环己烷提取液，用,40,50,温水洗涤环己烷提取液二次，收集环己烷层，于,50,60,水浴上减压浓缩至一定体积。加适量无水硫酸钠脱水。,1.,提取,（,2),粮食及糕点等水分少的食品,称取适量粉碎过筛的样品，装入脂肪提取器的滤纸筒内，接收瓶内装一定量的氢氧化钾、乙醇,(95%),及环己烷，于,90,水浴上回流提取,6,8h,。,趁热将皂化液和滤纸筒中的环己烷倒入分液漏斗中，用乙醇,(95%),洗涤接收瓶，将洗液合并于分液漏斗。加水，振摇提取，静置分层，下层水相再用环己烷振摇提取一次，合并环己烷提取液。,用水洗涤合并后的环己烷提取液三次，水洗液再用环己烷提取二次，分层后弃去水相，收集环己烷提取液于,50,60,水浴上，减压浓缩至一定体积，加适量无水硫酸钠脱水。,2.,净化,将样品环己烷提取液转入装有硅镁吸附剂的层析柱中，调节流速为,1ml/min,，用苯洗脱，此时应在紫外光灯下观察，以蓝紫色荧光物质完全从氧化铝层洗下为止，收集苯液于,50,60,水浴上减压浓缩至,0.1,0.5mL,可根据样品中苯并,(a),芘含量而定，应注意不可蒸干,。,3.,分离,将一定量净化后的浓缩液和,20ul,的,B(a)P,标准应用液，点于乙酰化滤纸条上。用乙醇,-,二氯甲烷（,2:1,）展开剂展开，取出晾干。,在波长,365nm,或,254nm,紫外光灯下观察，剪下标准,B(a)P,及与其同一位置的样品的蓝紫色斑点，加入苯，在,50,60,水浴中振荡、浸泡,15min,。,（三）测定,将样品及标准斑点的苯浸出液移入荧光分光光度计的石英杯中，以,365nm,为激发光波长，以,365,460nm,波长进行荧光扫描，所得荧光光谱与标准苯并,(a),芘的荧光光谱比较定性。,与样品分析的同时做试剂空白，分别读取样品、标准及试剂空白于波长,406,、,406,5,、,406,5 nm,处的荧光强度，按基线法计算荧光强度。,F=F,406,-(F,401,+F,411,),1/2,（四）结果计算,X=,S,F,（,F,1,-F,2,)1000,m,V1,V2,（五）方法说明,1.,实验所用有机溶剂，需重蒸馏，以除去可能存在的荧光物质，脱脂棉要用二氯甲烷回流,4h,以上。,B(a)P,标准应用液用重蒸水配制。,2.,皂化液一定要趁热倒入分液漏斗，放冷后液面会凝结一层脂肪，可能将,B(a)P,凝结，不易洗净，造成损失。,3.,乙酰化滤纸的要求：乙酰化滤纸的质量直接影响,B(a)P,的分离效果，对结果影响很大。,应该用洁白、无皱褶的中速层析滤纸，丙剪成方条状，否则展开时易变形或展开速度太慢。,用乙酰化试剂浸泡均匀，结合酸不低于,26,，浸泡不均匀会影响分析效果和灵敏度。,制好后将,B(a)P,标准点在纸上，展开后,R,f,值应在,0.1,以下较好。,三、目测比色法,样品经提取、净化后于乙酰化滤纸上层析分离,B(a)P,斑点，在波长,365nm,的紫外灯下观察，与标准斑点进行目测比较概略定量。,第四节 食品中多氯联苯的检验,多氯联苯（,PCBs,）是由氯原子置换联苯分子中的氢原子形成的化合物。,多氯联苯（,PCBs,）,结构式,一、概述,（一）理化性质,PCBs,稳定性随氯原子数目的增加而提高。,PCBs,分类：按,氯原子数,或氯百分含量,PCBs,具有抗酸、抗碱、耐腐蚀、不易被生物降解等特性。有广泛的工业用途：作热载体、绝缘油、润滑油等。,PCBs,的脂溶性强，进入机体后可贮存于各组织器官，尤其是,脂肪组织,中含量最高,。,（二）污染来源,PCBs,在生物体内很难降解。,食品中的,PCBs,主要来源是由已发生的环境污染造成的。其次是固体废弃物焚烧污染空气，进而污染食品。,各类食品中海产品的,PCBs,含量最高。,（三）毒性及危害,PCBs,可引起动物和人体一系列的急、慢性毒性反应。,试验证明,PCBs,氯原子数愈少其毒性愈强,。,PCBs,中毒症状,（四）卫生标准,目前，我国只制定了海产品中,PCBs,的卫生标准，海产鱼、贝、虾及藻类食品,0.2mg/kg.,（五）检验方法,气相色谱法,(GB/T5009.112003,),高效液相色谱法,红外光谱法,联用技术,二、海产品中多氯联苯的气相色谱测定法,样品中多氯联苯残留物用已烷（或石油醚）提取。提取液经过净化、硅胶柱分离、浓缩处理后，用电子捕获检测器的气相色谱仪测定其总含量。,（一）原理,（二）样品处理,1.,样品制备和提取,取适量捣匀样品，加无水硫酸钠研磨成沙状，加入正己烷，振摇,0.5h,或浸泡过夜。过滤，残渣再用己烷淋洗两次，合并己烷浓缩至一定体积，加浓硫酸，振摇，离心。,2.,提取液的净化,取,1ml,已烷提取液，置于硅胶柱中，,用,正已烷淋洗，流速以逐滴（约,30,滴,/min,）为宜，淋洗液浓缩至,1.0ml,，供色谱测定。,硅胶：层析用，,60100,目硅胶，于,360,加热处理,1012h,，冷却后加,3.0%,水，振摇,2h,以后，干燥器中贮存。,三、测定,1.,仪器条件,2.,测定,取相同体积的样品提取液和多氯联苯标准应用液，在同一色谱操作条件下进入色谱仪，,采用,PCB3,和,PCB5,主要峰的峰高之和进行定量,。,第五节,食品中氯丙稀的检验,氯丙醇是丙三醇上的羟基被氯取代所产生的一类化合物，有四种同系物或异构体：,单氯取代的氯代丙二醇,双氯取代的二氯丙醇,一、概述,（一）理化性质,常温下氯丙醇为无色、有甜味的液体。,比水重，沸点高于,100,。,可溶于水、丙酮、苯、甘油、乙醇、乙醚和四氯化碳。,性质不稳定，放置后，渐变为稻黄色，易潮解。,（二）污染来源,3-MCPD,是酸水解植物蛋白（,HVP,）的重要污染物，,HVP,常被用作调味食品的重要成分而引起这类食品的污染。,单氯取代的化合物可以作为二氯丙醇的前体进一步形成二氯丙醇。,包装材料中的环氧树脂水解产生,3-MCPD,造成食品污染。,（三）毒性与危害,我国卫生标准规定“植物水解蛋白调味液”中三氯丙醇,1mg/kg,。,（四）卫生标准,氯丙醇具有致癌、抑止男性精子的形成和肾脏毒性。,（五）检验方法,样品处理主要采用硅藻土吸附、正己烷,-,乙醚（,9+1,）除去脂肪，乙醚洗脱提取净化。,公认的测定方法是,气相色谱,-,质谱法,【,卫生标准,(GB/T5009.1912003,）,】,三氯乙酰衍生化结合气相色谱,-,电子捕获检测器也可作为筛选方法。,二、气相色谱,-,质谱法,采用同位素稀释技术，在样品中加入,d,5,-3-MCPD,内标溶液，以硅藻土为吸附剂，采用柱色谱分离，用正己烷,-,乙醚（,9+1,）洗脱样品中非极性的脂质组分，用乙醚洗脱样品中的,3-MCPD,，用七氟丁酰胺基咪唑（,HFBI,）溶液为衍生化试剂。采用选择离子监测（,SIM,）质谱扫描模式进行定量分析，内标法定量。,（一）原理,（二）样品处理,1.,样品制备,取适量样品，加,d,5,-3-MCPD,内标溶液，加,2,3,倍的氯化钠饱和溶液，超声,15min,或放置过夜，离心，取上层清液提取。,2.,提取,将一袋硅藻土分成两份，取其中一份加到样品溶液中，混匀；将另一份装入层析柱中（下端填玻璃棉）。,将样品与吸附剂的混合物装入层析柱中，上层加,1CM,高度的无水硫酸钠。,放置,15min,后，用正己烷,-,乙醚洗脱非极性组分，用乙醚,250ml,洗脱样品中的,3-MCPD,（,8ml/min,）。,在洗脱液中加无水硫酸钠，放置后过滤。滤液在,35,下浓缩至约,2ml,。乙醚定容。,3.,衍生化,取样品溶液,1ml,，在室温下用氮气吹至近干，立即加入,2,2,4-,三甲基戊烷,1ml,，七氟丁酰胺基咪唑,0.05ml,，立即密塞混合，于,70,保温,20min,。,在室温下，加饱和氯化钠溶液,3ml,，混匀，待两相分离后，取有机相加无水硫酸钠干燥。供,GC-MS,测定同时做试剂空白。,(,三）测定,1.,标准系列溶液的配制,取标准系列溶液（,0,6mg/L,）各,0.10ml,，加,d,5,-3-MCPD,内标溶液和,2,2,4-,三甲基戊烷、七氟丁酰胺基咪唑，立即密塞。以下操作同衍生化。,2.,仪器条件,色谱条件和质谱条件,3.,测定,取样品溶液,1ul,进样。,3-MCPD,和,d,5,-3-MCPD,的保留时间大约为,16min,。记录,3-MCPD,和,d,5,-3-MCPD,的峰面积。计算,3-MCPD,和（,m/z,253,）和,d,5,-3-MCPD,（,m/z,257,）的峰面积比，以各标准系列的进样量（,ng,）与对应的,3-MCPD,和（,m/z,253,）和,d,5,-3-MCPD,（,m/z,257,）的峰面积比绘制标准曲线。,4.,说明,试剂空白,：取饱和氯化钠溶液,10ml,，加,d,5,-3-MCPD,内标溶液,50ul,，超声,15min,。后面的步骤和样品提取及衍生化方法相同。,同位素稀释技术,：是用同位素氘标记标准物质，加入到样品和标准系列中，作为内标物，以内标法定量。,第六节 食品中丙烯酰胺的检验,丙烯酰胺,分子式,CH2,=,CH-,CO,NH2,，,是制造聚丙烯酰胺的单体，白色粉末，无臭。溶于水、甲醇、乙醇、丙酮。,固态时在室温下稳定，热溶或与氧化剂接触可发生聚合反应。,一、概述,（一）理化性质,（二）污染来源,热加工食品,含聚丙烯酰胺包装材料,（三）毒性及危害,丙烯酰胺具有神经、生殖、内分泌、遗传毒性，并被列为可能致癌物质。,急性中毒：中枢神经系统失调和脑出血。,慢性中毒：嗜睡、情绪和记忆改变、幻觉、震颤，并伴有末梢神经炎。,（四）研究现状,2002,年,4,月,，首次发现一些高温烹饪的淀粉类食品中含有丙烯酰胺。,食品中,丙烯酰胺的无水标准及检测方法被列为“十五”国家重大科技专项“食品安全关键技术课题”，正处于研究阶段。,气相色谱,-,质谱法和高效液相色谱,-,质谱法。,二、检验方法,采样要求,：采样前将整个食品进行充分粉碎或均质，保证获得的样品具有,代表性,。,样品的处理,：取一定量粉碎或均质样品，加水或甲醇漩涡振荡,20min,，离心，取上层清液经,0.45um,滤膜过滤，滤液再用,C18,固相小柱净化后测定。,GC-MS,法,：经分离的样品可以直接用,GC-MS,测定，也可将丙烯酰胺溴化后再测定。溴化后产生的衍生物能改善,GC,的分离性能，用衍生物的保留时间和,MS,的特征性碎片离子的比值来定性，检测限,5ug/kg,10ug/kg,。,LC-MS,法,：经分离的样品不经过衍生化直接用,LC-MS,测定，用保留时间和相对丰度来定性，检测限,20ug/kg,50ug/kg,。,