食用菌生产技术食用菌菌种退化、复壮及保藏.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第七节,菌种的退化、复壮和保藏,(104-106,页）,食用菌菌种是一类重要的自然资源。,优良的菌种被分离选育出来后，就必须采,用适当的保藏方法尽可能地保持其原来的性,状。防止菌种退化，以便随时为科研和生产提,供菌种服务。,1,、退化的现象,菌落和细胞形态改变,生产能力的下降,对生长环境的适应能力减弱,2,、退化的原因,基因的自发突变,育种后未经很好的分离纯化,培养条件改变,污染杂菌,一、菌种的退化,3,、防止退化的措施,控制传代次数,（一般在,DNA,的复制过程中，碱基的错配率是,5,10,-4,，自发突变的频率为,10,-8,10,-9,，采用良好的菌种保藏方法，可以减少移种和传代的次数）,创造良好的培养条件,利用不同类型的细胞进行移种传代。,对丝状微生物而言，通常采用稳定的单核孢子进行接种。,采用有效的菌种保藏方法,3,、防止菌种退化的措施,复壮,狭义的复壮,是指在菌种已发生衰退的情况下，通过纯种分离和生产性能测定等方法，从衰退的群体中找出未衰退的个体，以达到恢复该菌原有典型性状的措施；,广义的复壮,是指在菌种的生产性能未衰退前就有意识的经常、进行纯种的分离和生产性能测定工作，以期菌种的生产性能逐步提高。实际上是利用自发突变（正变）不断地从生产中选种。,二、菌种的复壮,菌种的复壮措施,1,、纯种分离,菌落纯的分离方法,（平板表面涂布法，平板划线分离法，琼脂培养基浇注法）,细胞纯的分离方法,（分离小室进行单细胞分离，显微操纵器进行单细胞分离，菌丝尖端切割法进行单细胞分离）,2,、通过宿主体内生长进行复壮,(,即寄主复壮，如段木接种,),3,、淘汰已衰退的个体,(,即遗传育种,),以退化菌株作为出发菌株,重新进行遗传育种,从中选出高产菌株,;,采用比较激烈的理化条件进行处理，以杀死生命力较差的已衰退个体,菌种保藏机构的任务,：广泛收集实验室和生产菌种、菌株（包括病毒株以及动、植物细胞株和质粒等）的基础上，使之达到不死、不衰、不乱以及便于研究、交换和使用的目的。,常用的菌种保藏机构,：,中国微生物菌种保藏委员会,(CCCCM),美国的典型菌种保藏中心,(ATCC),三、菌种的保藏,近处的菌种保藏机构,河南农科院,河南农大农学院,华中农大真菌所,山东金乡食用菌厂,山东莱阳食用菌厂,当地的农科所,挑选典型菌种的优良纯种,一般采用微生物的休眠体（如孢子、芽孢）,创造适于微生物长时期休眠的环境条件,如干燥、低温、缺氧、避光、缺乏营养以及 添加保护剂或酸碱中和剂等,（一）、菌种保藏的原理,菌,连续在培养基上（内）移种,种,生活态 传代培养保藏法,连续在活宿主上（内）移种,保,固体斜面,藏,湿法 半固体琼脂柱,方,休眠态 液体介质（蒸馏水、糖液、其它溶液）,法,干法 藏在玻璃管内,吸附在合适的载体上,（三）、菌种保藏的操作,干法保藏菌种的方法,滴入小试管（在放入大试管干燥器中）,藏在玻璃管内 封入安培瓶,菌液直接真空干燥法（,L-,干燥,法,）,冷冻真空干燥法,细粒状载体（土壤、沙粒、土壤,+,沙粒）,球块状载体（硅胶、瓷球）,合适的载体 有机基质（曲料、麦粒）,滤纸片,薄片状载体 明胶小片,（滴在蜡纸板上干燥而成）,血清蛋白小片（,乙烯薄膜,）,四、菌种保藏的注意事项,（,1,）挑选优良性状,（,2,）控制保藏条件,（,3,）控制转代次数,（,4,）用同一培养基进行活化,（,5,）严格无菌操作,再见！,