生物安全实验室操作技术规范及个人防护.ppt

生物安全实验室操生物安全实验室操作技术规范及个人防护作技术规范及个人防护生物安全实验室操作技术规范生物安全实验室操作技术规范生物安全（一）实验活动的类型标本采集处理移液操作生物安全柜 锐器的使用离心 匀浆、超声 消毒医疗废物气溶胶实验室：混匀 离心（二）防护要求（二）防护要求 在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。在在在在进进进进行行行行可可可可能能能能接接接接触触触触到到到到血血血血液液液液、体体体体液液液液以以以以及及及及其其其其他他他他具具具具有有有有潜潜潜潜在在在在感感感感染染染染性性性性的的的的材材材材料料料料的的的的操操操操作作作作时时时时，应应应应戴戴戴戴上上上上合合合合适适适适的的的的手手手手套套套套。手手手手套套套套用用用用完完完完后后后后，应应应应先先先先消消消消毒再摘除，随后必须洗手。毒再摘除，随后必须洗手。毒再摘除，随后必须洗手。毒再摘除，随后必须洗手。在在在在处处处处理理理理完完完完感感感感染染染染性性性性实实实实验验验验材材材材料料料料后后后后，以以以以及及及及在在在在离离离离开开开开实实实实验验验验室室室室工工工工作作作作区区区区域域域域前，都必须洗手。前，都必须洗手。前，都必须洗手。前，都必须洗手。为为为为了了了了防防防防止止止止眼眼眼眼睛睛睛睛或或或或面面面面部部部部受受受受到到到到喷喷喷喷溅溅溅溅物物物物的的的的污污污污染染染染、碰碰碰碰撞撞撞撞或或或或人人人人工工工工紫紫紫紫外外外外线线线线辐射的伤害，必须戴合适的防护镜。辐射的伤害，必须戴合适的防护镜。辐射的伤害，必须戴合适的防护镜。辐射的伤害，必须戴合适的防护镜。严禁穿着实验服离开实验室工作区域。严禁穿着实验服离开实验室工作区域。严禁穿着实验服离开实验室工作区域。严禁穿着实验服离开实验室工作区域。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。禁止在实验室工作区域进食、饮水、化妆和处理隐形眼镜。禁止在实验室工作区域进食、饮水、化妆和处理隐形眼镜。禁止在实验室工作区域进食、饮水、化妆和处理隐形眼镜。禁止在实验室工作区域进食、饮水、化妆和处理隐形眼镜。禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。办公室办公室（三）有关操作的指导原则（三）有关操作的指导原则所有的实验操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方所有的实验操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。式来进行。应限制使用注射针头和注射器。应限制使用注射针头和注射器。实验室应制订并执行处理溢出物的标准操作程序。出现溢实验室应制订并执行处理溢出物的标准操作程序。出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时，必须向实出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时，必须向实验室负责人报告。实验室应如实记录有关暴露和处理的情验室负责人报告。实验室应如实记录有关暴露和处理的情况，保存相关记录。况，保存相关记录。污染的液体在排放到生活污水管道以前必须清除污染（采污染的液体在排放到生活污水管道以前必须清除污染（采用化学或物理学方法）。用化学或物理学方法）。只有保证在实验室内没有受到污染的文件纸张才能带出实只有保证在实验室内没有受到污染的文件纸张才能带出实验室验室（四）实验室工作区的管理原则（四）实验室工作区的管理原则实验室应保持清洁整齐，严禁摆放和实验无关的物品。实验室应保持清洁整齐，严禁摆放和实验无关的物品。每每天天工工作作结结束束后后应应清清除除工工作作台台面面的的污污染染。若若发发生生具具有有潜潜在在危害性的材料溢出应立即清除污染。危害性的材料溢出应立即清除污染。所所有有受受到到污污染染的的材材料料、标标本本和和培培养养物物在在废废弃弃或或清清洁洁再再利利用用之前，必须先清除污染。之前，必须先清除污染。感感染染性性材材料料的的包包装装和和运运输输应应遵遵循循国国家家和和或或国国际际的的相相关关规规定。定。如果窗户可以打开，则应安装防止节肢动物进入的纱窗。如果窗户可以打开，则应安装防止节肢动物进入的纱窗。（五）生物安全管理的指导原则（五）生物安全管理的指导原则 实实实实验验验验室室室室负负负负责责责责人人人人负负负负责责责责制制制制订订订订和和和和采采采采用用用用生生生生物物物物安安安安全全全全管管管管理理理理计计计计划划划划以以以以及及及及实实实实验验验验室室室室安安安安全全全全或或或或/和操作手册。和操作手册。和操作手册。和操作手册。实验室应能提供常规的实验室安全培训实验室应能提供常规的实验室安全培训实验室应能提供常规的实验室安全培训实验室应能提供常规的实验室安全培训,并建立制度。并建立制度。并建立制度。并建立制度。实实实实验验验验室室室室负负负负责责责责人人人人（或或或或生生生生物物物物安安安安全全全全负负负负责责责责人人人人）要要要要将将将将生生生生物物物物安安安安全全全全实实实实验验验验室室室室的的的的特特特特殊殊殊殊危危危危害害害害告告告告知知知知实实实实验验验验室室室室人人人人员员员员，同同同同时时时时要要要要求求求求他他他他们们们们阅阅阅阅读读读读生生生生物物物物安安安安全全全全或或或或/和和和和操操操操作作作作手手手手册册册册，并并并并遵遵遵遵循循循循标标标标准准准准的的的的操操操操作作作作程程程程序序序序。实实实实验验验验室室室室内内内内应应应应备备备备有有有有可可可可供供供供取取取取阅阅阅阅的的的的安安安安全全全全或或或或/或或或或操操操操作作作作手手手手册册册册。所所所所有有有有实实实实验验验验室室室室人人人人员员员员必必必必须须须须经经经经过过过过培培培培训训训训，了了了了解解解解所所所所从从从从事事事事工工工工作作作作的的的的危危危危险险险险、掌掌掌掌握握握握有有有有关关关关的的的的管理规定和操作程序，通过考核后方可从事相关实验室工作。管理规定和操作程序，通过考核后方可从事相关实验室工作。管理规定和操作程序，通过考核后方可从事相关实验室工作。管理规定和操作程序，通过考核后方可从事相关实验室工作。应当制订节肢动物和啮齿动物的控制方案。应当制订节肢动物和啮齿动物的控制方案。应当制订节肢动物和啮齿动物的控制方案。应当制订节肢动物和啮齿动物的控制方案。实验室仪器设备的使用实验室仪器设备的使用 生物安全柜的使用生物安全柜的使用 生物安全柜的定义生物安全柜的定义主要的保护屏障，防止生主要的保护屏障，防止生物有害气溶胶逃逸物有害气溶胶逃逸.保护操作人员保护操作人员可以保护样品可以保护样品 Class II 生物安全柜II 级生物安全柜 A A型：型：3030排风排到房间排风排到房间 B3B3型：型：3030排风排到室外排风排到室外 B1B1型：型：7070排风排到室外排风排到室外 B2B2型：型：100100排风排到室外排风排到室外生物安全柜生物安全柜操作步骤操作步骤1.将所需物品装入生物安全柜。2.启动生物安全柜让其运行1015分钟。3.使用一片薄纸检查进入气流。4.直接进入生物安全柜完成工作，工作时动作要慢，要有条不紊。5.工作最后，将所有要拿出生物安全柜的物品消毒。6.对生物安全柜内部消毒。7.让生物安全柜运行1015分钟。8.关机。在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作关掉紫外灯，前窗开至适当高度，打开安全柜的关掉紫外灯，前窗开至适当高度，打开安全柜的灯和风扇灯和风扇.检查出风口是否有障碍物，等待检查出风口是否有障碍物，等待5min5min。.开始在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作在开始工作前应考虑实验中的操作步骤和 所需设备，充分做好准备工作。尽量减少房间内的走动，保证正常气流。准备工作在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作安全柜安全柜只放本次实验所需的物品。只放本次实验所需的物品。出风口不要有障碍物。出风口不要有障碍物。大物体之间要保持一定距离大物体之间要保持一定距离把前窗降至适当高把前窗降至适当高度。度。操作在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作 所有物品离前窗至少所有物品离前窗至少2 2英英寸，寸，干净和被污染的物品分开放干净和被污染的物品分开放置；置；技巧在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作 避免使用明火（可用酒精避免使用明火（可用酒精灯），灯），使用中有遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染处理使用中有遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染处理 注意事项在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作干净的物品干净的物品理想的工作台摆放被污染的区域被污染的区域 废弃物托盘废弃物托盘 垃圾袋垃圾袋生物安全柜内感染性材料溢洒的处理生物安全柜内感染性材料溢洒的处理 当当当当发发发发生生生生少少少少量量量量溢溢溢溢洒洒洒洒时时时时，应应应应用用用用吸吸吸吸收收收收纸纸纸纸巾巾巾巾立立立立即即即即处处处处理理理理，并并并并立立立立即即即即用用用用浸浸浸浸满满满满消消消消毒毒毒毒液液液液的的的的毛毛毛毛巾巾巾巾或或或或纱纱纱纱布布布布对对对对生生生生物物物物安安安安全全全全柜柜柜柜及及及及其其其其内内内内部部部部的的的的所所所所以以以以物物物物品品品品进进进进行行行行擦擦擦擦洗洗洗洗。工工工工作作作作面面面面消消消消毒毒毒毒后后后后应应应应更更更更换换换换手手手手套套套套，不不不不论论论论是是是是摘摘摘摘下下下下手手手手套套套套还还还还是更换手套都要洗手。是更换手套都要洗手。是更换手套都要洗手。是更换手套都要洗手。若若若若发发发发生生生生大大大大量量量量溢溢溢溢洒洒洒洒，液液液液体体体体会会会会通通通通过过过过生生生生物物物物安安安安全全全全柜柜柜柜前前前前面面面面或或或或后后后后面面面面的的的的格格格格栅栅栅栅流流流流到到到到下下下下面面面面去去去去，生生生生物物物物安安安安全全全全柜柜柜柜内内内内所所所所有有有有的的的的物物物物品品品品都都都都应应应应该该该该进进进进行行行行表表表表面面面面消消消消毒毒毒毒并并并并拿拿拿拿出出出出生生生生物物物物安安安安全全全全柜柜柜柜，在在在在确确确确保保保保生生生生物物物物安安安安全全全全柜柜柜柜的的的的排排排排水水水水阀阀阀阀被被被被关关关关闭闭闭闭后后后后，可可可可将将将将消消消消毒毒毒毒液液液液倒倒倒倒在在在在工工工工作作作作台台台台面面面面上上上上，使使使使液液液液体体体体通通通通过过过过格格格格栅栅栅栅流流流流到到到到排排排排水水水水盘盘盘盘上上上上。所所所所有有有有接接接接触触触触溢溢溢溢出出出出物物物物品品品品的的的的材材材材料料料料都都都都要要要要进进进进行行行行消消消消毒毒毒毒和和和和/或或或或高压灭菌处理。高压灭菌处理。高压灭菌处理。高压灭菌处理。个人生物安全防护实验室生物安全防护内容1.强烈强烈的生物安全意识生物安全意识2.强有力的管理体系（软件）强有力的管理体系（软件）3.按标准精心设计、建造的按标准精心设计、建造的实验室、可靠的安全设备实验室、可靠的安全设备（硬件）（硬件）4.4.认真的个人防护（硬件）认真的个人防护（硬件）5.5.训练有素的团队训练有素的团队6.6.科学及时的维护科学及时的维护防护部位手：手：针刺、鼠咬、虫叮、污染等针刺、鼠咬、虫叮、污染等头面眼：喷溅、气溶胶沉降头面眼：喷溅、气溶胶沉降呼吸道：气溶胶吸入呼吸道：气溶胶吸入躯干（包括上下肢）：气溶胶沉降、喷溅、老鼠解剖、菌躯干（包括上下肢）：气溶胶沉降、喷溅、老鼠解剖、菌（毒）液溢洒等（毒）液溢洒等足：足：个人防护装备 是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等有害因子是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等有害因子伤害的器材和用品。伤害的器材和用品。在生物安全实验室中，这些器材和用品主要是保护实验人在生物安全实验室中，这些器材和用品主要是保护实验人员免于暴露于生物危害物质（气溶胶、喷溅物以及意外接员免于暴露于生物危害物质（气溶胶、喷溅物以及意外接种等）危险的一种物理屏障。种等）危险的一种物理屏障。个人防护装备装备包括：装备包括：1 1、帽子、帽子 2 2、眼镜（护目镜）、眼镜（护目镜）3 3、口罩、口罩、4 4、防护衣、防护衣 (实验服、隔离衣实验服、隔离衣)5 5、手套、手套 6 6、鞋套、鞋套 个人防护装置选择原则个人防护装置选择原则1.1.根据生物安全实验室级别，根据生物安全实验室级别，2.2.根据操作性质，根据操作性质，3.3.根据个人情况，根据个人情况，4.4.根据市场供应情况根据市场供应情况.（一）手部防护及其装备 1（手套）手部防护装备手部防护装备手套手套 1、手套应在实验室工作时使用。手套应在实验室工作时使用。2、在接触感染性物质、在接触感染性物质（血液、体液、分泌液、渗出液时）（血液、体液、分泌液、渗出液时），必须使用手套，必须使用手套手套被污染，应该尽可能早的脱下，消毒后丢弃。手臂防护2 对手套要求1.手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、握牢、耐手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并应对所涉及的危险提供足够的磨、耐扎和耐撕的要求，并应对所涉及的危险提供足够的防护。防护。2.对实验室工作人员进行手套选择、使用前及使用后的配对实验室工作人员进行手套选择、使用前及使用后的配戴及摘戴及摘 除等培训。除等培训。3.一次性手套不得重复使用。一次性手套不得重复使用。4.一次性手套必须先消毒后丢弃一次性手套必须先消毒后丢弃.要点3 手套的使用1.一般情况下，佩戴一副手套即可（一般情况下，佩戴一副手套即可（BSL-1实验室）实验室），2.若在生物安全柜中操作感染性物质时（若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-2和和BSL-3实验室）实验室）应该佩戴两副手套。应该佩戴两副手套。3.在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压剂喷洒手套并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手套继续实验。灭菌袋中并立即戴上新手套继续实验。4.戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验盖实验 服袖口。服袖口。要点4 手套的清洗和更换1.使用后立即进行高压灭菌消毒然后丢弃。使用后立即进行高压灭菌消毒然后丢弃。2.不得戴着手套离开实验室区域。不得戴着手套离开实验室区域。3.在脱去手套之前消毒。在脱去手套之前消毒。要点5 手套更换4.工作人员在完成感染性物质实验工作人员在完成感染性物质实验,离开生物安全柜离开生物安全柜之前之前,应应 该脱去该脱去外层手套外层手套丢入生物安全柜内的高压丢入生物安全柜内的高压灭菌袋中。然后用消毒液喷洗灭菌袋中。然后用消毒液喷洗内层手套内层手套，以避免，以避免后来污染门手、电灯开关、电话等（后来污染门手、电灯开关、电话等（BSL-2和和BSL-3实验室）。实验室）。要点6 避免触摸不该触摸物1.戴手套的手避免触摸鼻子、面部和避免触摸或戴手套的手避免触摸鼻子、面部和避免触摸或调整其他个人防护装备（如眼镜等）调整其他个人防护装备（如眼镜等）2.避免触摸不必要的物体表面如灯开关、门或捏避免触摸不必要的物体表面如灯开关、门或捏手等手等3.如果手套撕破应该脱去，在换戴新手套前应清如果手套撕破应该脱去，在换戴新手套前应清洗手部洗手部4.注意尽量不去触摸工作台面和其他物品注意尽量不去触摸工作台面和其他物品 1)在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的手套；正确类型和尺寸的手套；2)将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖口将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖口;要点要点7要点8 脱手套过程及注意要点:用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘,将将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内；手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内；用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内面面；脱下另一只手套。脱下另一只手套。要点要点9 洗手洗手1、应该安装洗手装置。、应该安装洗手装置。2、洗手是一种减少有害物质暴露的有效措施，要经常、洗手是一种减少有害物质暴露的有效措施，要经常 洗手。洗手。a）在处理活体病原材料等生物危害物质后，）在处理活体病原材料等生物危害物质后，b）在脱去手套之后和离开实验室之前，）在脱去手套之后和离开实验室之前，c）在脱卸个人防护装备时发生手部可见的污染时，）在脱卸个人防护装备时发生手部可见的污染时，d）在继续脱卸其他个人防护设备之前。）在继续脱卸其他个人防护设备之前。（二）眼睛防护（装备）（二）眼睛防护（装备）1 安全眼镜和护目镜安全眼镜和护目镜 （物理、化学和生物因素）（物理、化学和生物因素）A A）在所有易发生潜在眼睛损伤的生物安全实）在所有易发生潜在眼睛损伤的生物安全实验室中工作时必须采取眼睛防护措施验室中工作时必须采取眼睛防护措施 B B）所选用的眼睛防护装备的类型取决于外界危）所选用的眼睛防护装备的类型取决于外界危害因子对眼睛危害程度（评估）害因子对眼睛危害程度（评估）眼睛防护2佩戴侧面带有护罩的安全眼镜就可以达到防护的目佩戴侧面带有护罩的安全眼镜就可以达到防护的目的。的。2.2.当进行有可能发生化学和生物污染物质溅出的实当进行有可能发生化学和生物污染物质溅出的实验时验时 必须佩戴护目镜。必须佩戴护目镜。警告：不得戴眼镜防护装备离开实验室区域眼睛防护眼睛防护洗眼装置洗眼装置 如发生腐蚀性液体或生物危害液体喷溅至工作人如发生腐蚀性液体或生物危害液体喷溅至工作人员的眼睛时，应该（或在同事的帮助下）在就近员的眼睛时，应该（或在同事的帮助下）在就近的洗眼台（洗眼装置）用大量缓流清水冲洗眼睛的洗眼台（洗眼装置）用大量缓流清水冲洗眼睛表面至少表面至少1515到到3030分钟。事后必须立即填写事故报分钟。事后必须立即填写事故报告单并立即报告主管领导。告单并立即报告主管领导。（三）头面部防护装备（三）头面部防护装备 1口罩口罩 口罩仅可以保护部分面部受口罩仅可以保护部分面部受生物危害物质如血液、体液生物危害物质如血液、体液分泌液以及排泄物等喷溅物分泌液以及排泄物等喷溅物的污染的污染 头部防护3 防护帽在生物安全实验室中佩戴简易防护帽可以保护工作人员避免化学和生物危害物质飞溅至头部(头发)所造成的污染。一次性简易防护帽 覆盖头发要求：要求：工作人员在微生物实验操作时应佩带防护帽工作人员在微生物实验操作时应佩带防护帽（五）躯体体防护装备（五）躯体体防护装备 1防护服防护服 （实验服、隔离衣）实验服、隔离衣）1、在实验室中工作人员应该一直或持续穿上防护服、在实验室中工作人员应该一直或持续穿上防护服2、清洁的防护服应放置在专用存放处、清洁的防护服应放置在专用存放处3、污染的防护服应放置在有标志的防漏消毒袋中、污染的防护服应放置在有标志的防漏消毒袋中4、当防护服已被危险材料污染后应立即更换、当防护服已被危险材料污染后应立即更换5、离开实验室区域之前应脱去防护服。、离开实验室区域之前应脱去防护服。躯体防护装备躯体防护装备2实验服（实验服（BSL-1 实验室）实验室）-前面应该能完全扣住隔离衣（隔离衣（BSL-2和和BSL-3实验室）实验室）-比实验服将更适合于在微生物实验室以及生物安全柜中的操作工作。禁止在实验室中穿短袖衬衫、短裤或短裙禁止在实验室中穿短袖衬衫、短裤或短裙 个体防护的配备原则BSLBSL2 2实验室实验室在在实实验验室室中中应应穿穿实实验验服服。离离开开实实验验室室时时，实实验验服服必必须须脱脱下下并并留留在在实实验验室室内内。不不得得穿穿着着外外出出。用用过过的工作服应先消毒，然后统一洗涤。的工作服应先消毒，然后统一洗涤。当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。戴手套。个体防护的配备原则当当微微生生物物的的操操作作不不可可能能在在生生物物安安全全柜柜内内进进行行，而而必必须须采采取取外外部部操操作作时时，为为防防止止感感染染性性材材料料溅溅出出或或雾雾化化危危害害，必必须须使使用用面面部部保保护护装装置置（护护目目镜）。镜）。个体防护的配备原则在在使使用用传传染染性性物物质质或或已已被被污污染染的的仪仪器器时时，需需戴戴手手套。套。（九）淋浴装置和应急消毒喷淋装置淋浴装置和应急消毒喷淋装置-应急消毒喷淋装置应急消毒喷淋装置 1、规定：规定：-BSL-2实验室应有应急喷淋装置 2、要求：要求：保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒喷淋 装置的摆放位置、培训其操作方法。