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,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第一章 培养基制备设备,1-1 培养基的灭菌设备,1,教学目标,1、说出分批灭菌的定义及其优缺点,2、比较分批灭菌与连续灭菌的异同点,3、简述三种连续灭菌的工艺流程及其优、缺点,4、说出常用加热、维持、冷却设备的工作原理,2,灭菌,:用物理或化学方法杀灭或除去物料或设备中一切有生命物质的过程。,3,一、培养基热灭菌动力学,1、,灭菌对象,:细菌的芽胞,2、,无菌标准,:1/1000 失败几率,3、灭菌时采用高温、短时间的,方法,4,二、培养基制备中的常用灭菌设备,1、间歇式灭菌法中的常用灭菌设备,(1),实罐灭菌(间歇灭菌;分批灭菌),:将配置好的培养基放在发酵罐中或其它装置中,,通入蒸汽将培养基和所有设备一起进行灭菌。,(2),优点,:不需专门的灭菌设备,投资少,设备简单,灭菌效果好。,(3),缺点,:在一个设备内完成加热、冷却过程,需时长,罐利用率低,培养基成分破坏较多。,中小型发酵罐、种子罐常采用此种方法。,5,分批灭菌的操作,1、准备,2、预热,3、加热,4、保温,5、降温,8,.连续灭菌(,sterilization),法中的常用设备,、优点:,、分批灭菌与连续灭菌的异同点:,相同点,:,升温、保温、降温,三阶段,不同点,:,分批灭菌:同一设备,时间错开,,连续灭菌:不同设备,空间错开。,全自动洗衣机,双缸洗衣机,9,连续灭菌的特点:,1、升、降温度快,2、营养损失少,3、投资大,空罐灭菌,空罐灭菌也称空消,。无论是种子罐、发酵罐、还是尿素(或液氨)罐、消泡罐,当培养基(或物料)尚未进罐前对罐进行预先灭菌,为空罐灭菌。,为了杀死所有微生物特别是耐热的的芽孢,空罐灭菌要求温度较高,灭菌时间较长,只有这样才能杀死设备中各死角残存的杂菌或芽孢。,10,连续灭菌流程,11,连续灭菌流程,1、,缺点,:,(1)设备体积大,不能先进先出,培养基易受热不均匀,影响灭菌质量,(2)喷淋冷却管道长,如果培养基粘度大、固体微粒多易堵塞,热能利用不经济。,2、,优点,:设备结构简单,操作方便,应用广泛。,12,喷射加热连续灭菌流程,13,喷射加热连续灭菌流程,1、流程,升温,:喷射加热器,加热蒸汽高速喷出,借抽吸作用直接混和,加热至灭菌温度。,保温,:管式维持器保温,降温,:膨胀阀,真空闪急蒸发器,水分急速蒸发,瞬间冷却至70-80,到发酵罐冷却至发酵温度。,14,优点,:,(1)加热、冷却过程短,营养成分破坏少,(2)可先进先出,(3)需设备自动控制装置,缺点,:需出料泵或置于10米的高度(真空系统的密封问题),需设置自动控制装置,确保蒸汽压力、流量,进料流量的稳定。,15,板式换热器连续灭菌流程,16,板式换热器连续灭菌流程,1、,特点,:单位面积具有高传热面积,且可改变面积大小,拆洗维修方便。,2、,优点,:传热系数大,流程热利用合理,省蒸汽、水,同时完成预热、灭菌、冷却过程。,3、,缺点,:,(1)流体通道较狭窄,若稠厚,流动阻力大;,(2)板间叠合要严密。,17,1-1 连续灭菌,1、说出常用加热设备的工作原理,2、说出常用维持设备的工作原理,3、说出常用冷却设备的工作原理,18,一、加热设备,连消塔,分套管式和喷射式,1、套管式加热器(塔式加热器),组成:多孔的蒸汽导入管+外套管,(1),孔径,:5-8mm.,为防止蒸汽喷孔堵塞,孔径不宜太小,(2),孔数,:决定于导管的直径,通常取小孔的总截面积或导入管的截面积,(3),夹角,:,小孔与管壁成45,。,夹角开设,(4),分布,:,小孔的分布上稀下密,以便蒸汽能均匀喷出,19,套管式加热器(塔式加热器),20,操作:,1,、待灭菌的料液从外管下部的侧面用泵打入,(泵的操作压力蒸气压力),经内外两管间的环隙内向上流动,流速为0.1,m/s,左右。蒸汽从塔上部通入蒸汽导入管,经小孔高速喷出,与料液激烈混和进行加热,到灭菌温度(110-130)维持15-20,s,的高温灭菌时间。,21,、塔的,有效高度,2-3,m,,加热时间20-30,s,、,缺点,:小孔加工困难,设备高,有噪音,改用喷射式,、,优点,:管上开孔,气体以鼓泡形式从小孔喷出,接触,传质、传热面积大,22,23,2、喷射式加热塔,1、,结构,:主要由两个圆筒组成,在每个圆筒的下端依次伸入一个套管式喷嘴,与底盖连接,并把两个圆筒连成塔形。喷嘴上方有圆形挡板。,2、,工作原理,:待灭菌的培养基由下端中心物料管导入,加热蒸汽从物料管外的环隙引入,成环形加热料液,使培养基与蒸汽在瞬间均匀混合并加热到灭菌温度,上升的培养液被圆形挡板阻挡,折转向四周后上升进入扩大管,随后经过第二次加热后由筒顶排出。,24,3、,设圆形挡板的原因,:蒸汽以高速(150,m/s),冲出喷嘴与培养基瞬间混合均匀后,向上的速度仍十分大,而扩大管仅1,m,左右,料液很容易直接冲出加热器,影响混合效果。设有挡板后,蒸汽、培养基瞬间混合碰撞挡板后,折流在扩大管内进一步均匀混合。,4、,特点,:结构简单,占地面积小,操作时噪音小,运行平稳。但要求组装时物料管与蒸汽的喷嘴一定要同心,否则蒸汽喷出的速度会产生很大差异而造成喷出的蒸汽偏心旋转,影响培养基加热的均匀性和灭菌质量。,25,气-液混合式连消器,1、,结构,:与气-液混合式连消塔基本相同,只是培养液仅仅经过一次加热。,2、,特点,:结构简单,外形较小,使用效果较好。,26,喷射式加热器,27,28,喷射式加热器,工作原理,:料液压入渐缩喷嘴后高速喷出,由于其静压力较低将蒸汽吸入,在混合喷嘴中混合,进入较长的混合段气-液充分混合。料液灭菌后在扩大管中动能转变为静压能而输出。,29,二、维持设备(保温设备),不需补充加热,在设备外进行良好的保温。,1、,维持罐,长圆筒形,立式密闭容器,高径比1.2-1.5,上下封头为球形,有人孔。,30,维持罐,31,工作原理,:将罐底阀们2关闭,开启阀们1,使料液在罐内自下而上流动,最后从上部侧面出料管流出。当来自加热设备的培养基进料完毕后,在维持罐中剩下的一罐料应继续保温一段时间后,关闭阀们1,开启阀们2,利用蒸汽让培养基由罐底压出。,32,2维持管,u,形管+水平管,优点,:设备简单,阀门少,维持时间短,营养破坏少,缺点,:管道弯头多,流动阻力大,不易清洗。,33,三、冷却器,应选择冷却效率高,无死角,易清洗、易灭菌,结构简单的设备。,喷淋冷却器,套管冷却器,板式换热器,螺旋板换热器,1、,板式换热器,:进行预冷却、预热,流程热利用合理,节省大量的冷却水和蒸汽。,2、,喷淋式,:结构简单,应用广,34,35,36,()分批灭菌与连续灭菌在灭菌过程中都要经历升温、保温、降温三阶段。,37,预习,空气除菌流程、设备,38,
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