01-油镜的使用和细菌的简单染色法.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实 验 一油镜的使用和细菌的简单染色方法,目的,1、了解油镜的基本原理，掌握油镜的使用方法,2、掌握细菌的简单染色方法及相关无菌操作技术,1.油镜的使用与保护,油镜原理示意图,光线从标本玻片经空气进入镜头时，由于介质密度不同而发生折射现象，因此进入物镜中的光线很少，结果视野很暗，物像不清晰。如在玻片上加上折光率和玻片(n=1.52)相近的香柏油(n1.515)，就可避免光线的分散，加强视野的亮度，获得清晰的物像,1.用油镜时，勿将镜臂弯曲倾斜，以免油滴或菌液流淌外溢，影响观察造成污染。,2.用低倍镜对光，同时调节集光器和光圈以获得最适亮度。染色标本油镜检查时，应将光圈完全打开，集光器上升至载物台相平，使光亮度很强。,3.标本片放在载物台上，用压片夹固定。,油镜的使用方法,4.低倍镜找出标本的范围，然后在待检部位上加一滴香柏油，转动镜头转换器，将油镜头置于工作位置，从侧面观察并缓慢转动粗调节器，使油镜头浸没在油滴内，当油镜头几乎接触玻片时停止转动，然后眼睛移至目镜，缓慢向上移动粗调节器,待看到模糊物象时，再用细调节器转动至物象完全清晰为止;,5.观察完毕，取下标本片，立即用擦镜纸顺一个方向旋转擦拭镜头上的油。若油已干，应先用二甲苯滴在擦镜纸上擦净镜头，再用另一干净擦镜纸拭去镜头上沾有的二甲苯;,6.显微镜擦净后，降低物镜并将其转成八字形，集光器下降，光圈关上，关闭电源，罩上显微镜罩,油镜使用注意事项,油镜的识别：油镜头上都有标记；标有,100,；镜头前端有黑、白或红色的圆圈；刻有,“III”或Oil等,，其入光孔径也较其他物镜小；,油镜头使用后应,立即,用擦镜纸擦净镜头上的油。注意在擦拭时，要求,顺一个方向旋转擦,，不能两个方向来回擦；,取送显微镜时，应右手持镜臂，左手托镜座，平端于胸前。,不用时，将接物镜转开呈“,八”字状,，集光器下降，罩上镜罩。,对号归位,。,原理,细菌简单染色法的原理,细菌的细胞小而透明，在普通的光学显微镜下不易识别，必须对它们进行染色。利用单一染料对细菌进行染色，,使经染色后的菌体与背景形成明显的色差,，从而能更清楚地观察到其形态和结构。此法操作简便，适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。,常用作简单染色的染料有美蓝、结晶紫、石炭酸复红等。,实验步骤,1、用简单染色法制备细菌染色装片,涂片干燥固定染色水洗干燥,2 使用油镜观察细菌染色装片,低倍镜 高倍镜 油镜,实验结果,绘图,问题与思考油镜的使用就注意哪些问题？,普通光学显微镜,显微镜的构造,1.,光学部分,:,接目镜、接物镜、照明装置(聚光镜、虹彩光圈、反光镜等),.它使检视物放大,造成物象.,2.,机械部分,:,镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台转移器、粗调节器、细调节器等部件.它起着支持 调节 固定等作用.,普通光学显微镜,显微镜的放大倍数和分辨率,1.,放大倍数,=接物镜放大倍数接目镜放大倍数,2.,显微镜的分辨率 是表示显微镜辨析物体（两端）两点之间距离的能力，可用公式表示为：,D=,/2nsin(/2),式中D：,物镜分辨出物体两点间的最短距离。,：,可见光的波长（平均0.55,m),n:,物镜和被检标本间介质的折射率。,：,镜口角（即入射角）。,普通光学显微镜,油镜使用的原理,油镜，即油浸接物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（,其折射率与玻片的相近,），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。,