物质鉴定试验.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,2011-10-8,实验,实验,还原性糖的鉴定,脂质的鉴定,蛋白质的鉴定,Click to add title in here,4,1,2,3,检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,4,淀粉的鉴定,（一）还原糖的鉴定,1,、实验原理,NaOH,+CuSO,4,Cu(OH),2,蓝色沉淀,+,Cu(OH,),2,+,还原糖,Cu,2,O,砖红色沉淀,+,（水浴条件,：,50-65,）,葡萄糖,等还原糖,分子中存在醛基等,还原性基团,能与,斐林试剂,作用生成砖红色沉淀。,斐林试剂：甲液：质量浓度为,0.1g/ml,的,NaOH,溶液,乙液：质量浓度为,0.05g/ml,的,CuSO,4,溶液,材料,Text in,here,Text in,here,Text in,here,材料要含有丰富还原糖,材料颜色,为白色或近于白色,以免造成干扰,选材,原则,富含还原糖,富含蔗糖,含淀粉但还原糖很少,颜色干扰,富含蔗糖,富含还原糖,2,、实验步骤,反应初始,反应结束砖红色,对照,蓝色,棕色,砖红色,3,、注意事项,要选择,含还原糖丰富,，颜色为,白色或近于白色,的植物组织,斐林试剂不稳定，一般配成甲液、乙液来分别配制、储存。,使用时将甲液、乙液等量混合均匀，现配现用,1,、材料选取,2,、斐林试剂,对试管中的溶液进行加热时，试管底部不要触及烧杯底部；试管口不要朝向实验者,3,、水浴加热,实验,还原性糖的鉴定,脂肪的鉴定,蛋白质的鉴定,Click to add title in here,4,1,2,3,检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,4,淀粉的鉴定,（二）淀粉鉴定,1,、实验原理,2,、选材,选择淀粉含量高，颜色近于白色的生物组织，如马铃薯块茎研磨液,淀粉遇碘会变成蓝色,3,、过程及结果,向,2ml,组织样液中加两滴碘液，摇匀后变成蓝色,（三）脂肪的鉴定,1,、实验原理,脂肪可被 苏丹,染成,橘黄色,苏丹,染成,红色,苏丹,材料,选择富含脂肪且比较大的种子，成熟花生种子是最好的选择，实验前,浸泡,3,4,小时,时间过长,：组织太软，切下的薄片，,不易成形,时间过短,：,不容易切片,2,、实验步骤,注意事项,切片要尽可能薄，观察时要找最薄处，最好只有,1,2,层细胞,染色后一定要用体积分数为,50,的酒精溶液,洗去浮色,用苏丹,染色时间不宜过长，否则,脂肪会溶解在苏丹,溶液中的酒精里,3,、注意事项,1,2,3,实验,还原性糖的鉴定,脂肪的鉴定,蛋白质的鉴定,Click to add title in here,4,1,2,3,检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,4,淀粉的鉴定,（四）蛋白质的鉴定,1,、实验原理,蛋白质与双缩脲具有相同的结构,-,肽键,，能在,碱性环境,下与双缩脲试剂中的,Cu,2+,产生,紫色,络合物,双缩脲试剂,A,液：质量浓度为,0.1g/ml,的,NaOH,溶液,B,液：质量浓度为,0.01g/ml,的,CuSO,4,溶液,注：双缩脲与双缩脲试剂不同。,材料：,浸泡,1,2,天的大豆种子（或豆浆）或鸡蛋蛋白，也可用鲜肝提取液,2,、实验步骤,3,、注意事项,实验样液要留出一份作为,对照,（还原糖、淀粉的鉴定也要留出样液进行对照）,使用双缩脲试剂时，应,先加,A,液造成碱性环境，再加,B,液,若使用蛋清，必须按要求,稀释,，如果稀释不够会粘附于试管壁上，不易洗刷,1,2,3,拓展：斐林试剂与双缩脲试剂的对比,斐林试剂,双缩脲试剂,鉴定成分,还原糖,蛋白质,鉴定原理,还原糖中的醛基,在,加热条件,下能将,Cu(OH),2,中的,Cu,2+,还原成,Cu,+,，从而生成砖红色,Cu,2,O,沉淀,双缩脲在碱性溶液中能与,Cu,2+,结合生成紫色络合物，蛋白质分子中含有与双缩脲结构相似的肽键，因而也能与,Cu,2+,作用,试剂浓度,甲液：质量浓度为,0.1g/mol,的,NaOH,溶液，,乙液：质量浓度为,0.05g/mol,的,CuSO4,溶液,A,液：质量浓度为,0.1g/ml,的,NaOH,溶液,B,液：质量浓度为,0.01g/ml,的,CuSO4,溶液,使用方法,甲液、乙液,等量混合均匀,后再加入样液,先加,A,液造成碱性环境后，,再加,B,液,使用条件,水浴加热（,50-65,）,不加热,实验现象,浅蓝色,棕色,砖红色,紫色,唯一用到显微镜的实验,脂质的鉴定,唯一需要加热的实验,还原糖的鉴定,非还原糖中加入斐林试剂现象：不是无色而是蓝色,典型例题分析：,1,、在,“,检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,”,的实验中提供了如下备选实验材料：,苹果、白萝卜、大米、韭菜的叶、核桃、油菜籽、黄豆。,【,分析,】,实验成功的关键之一是科学选择实验材料，具体分析如下：,(1),检测还原糖时，为什么不选取白萝卜或韭菜的叶？,提示：,白萝卜含还原糖很少，不符合选材的要求；韭菜的叶中含有叶绿素，不利于实验现象的观察。,(2),检测脂肪时，为什么不选取核桃？,提示：,核桃的种子虽然含有丰富的脂肪，但核桃的果皮坚硬，种皮又有颜色，不容易去除。,(3),如果把黄豆浸泡萌发成黄豆芽，能利用黄豆芽检测蛋白质吗？,提示：,不能，因为黄豆萌发成黄豆芽，消耗了蛋白质。,2.,鉴定某脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，不需用的化学试剂是,(),A.,斐林试剂,B.,苏丹,染液,C.,双缩脲,D.,甲基绿,【,解析,】,选,D,。甲基绿是对,DNA,染色，染成绿色。,拓展：,健康人体中，能与双缩脲试剂发生紫色反应的是（）,尿素,胃液,汗液,唾液,3.,以花生子叶为材料进行脂肪的检测时，制作临时装片的正确步骤是,(),盖盖玻片 切子叶 苏丹,染液染色,滴加蒸馏水 酒精洗去浮色,A.B.,C.D.,【,解析,】,选,D,。制作临时装片的步骤包括切片、制片，其中制片过程又包括染色、洗去浮色、滴加蒸馏水和盖盖玻片。,4.,生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机化合物的检测实验中，以下操作错误的是,(),A.,只有脂肪的检测需要使用显微镜,B.,用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热,C.,斐林试剂和双缩脲试剂最好是现用现配,D.,可溶性还原糖的检测，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀,【,解析,】,选,D,。斐林试剂包括甲液和乙液，使用时一定要现用现配，双缩脲试剂最好也是现用现配，因为成分中的,Cu,2+,容易沉淀；斐林试剂检测还原糖时一定要,50,65,水浴加热，而使用双缩脲试剂检测蛋白质时则不需要加热；这个实验中只有脂肪的检测需要使用显微镜。,