流式细胞术在白血病和淋巴瘤中的应用课件.ppt

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,流式细胞术在白血病、淋巴瘤免疫分型中的应用,免疫分型的作用,区分淋系、髓系白血病,区分淋系白血病中的T、B-ALL,鉴定混合细胞性白血病的类型：,T-M、B-M、T-B、T-B-M,于治疗过程中监测MRD，评价疗效,提示某些遗传学异常：,CD56+APL-t（11；17）？,CD19+AML-t（8；21）（q22；q21）？,提示预后：,CD7、CD11b、CD56等阳性的AML患者预后不良,CD15阳性的AML患者CR率高,免疫分型的原理,正常造血细胞 白血病细胞,抗原表达遵循系列保守性 出现抗原跨系表达,髓系:CD33+,T系:CD7+髓系:CD33+CD7+,抗原表达有一定的时序性 出现抗原时序混乱表达,原始细胞:CD34+CD11B-原始细胞:CD34+CD11B+,各阶段细胞按一定的比例分布 出现分化阻滞,原幼细胞20%,正常B系细胞分化图,源于王建中等编著的临床流式细胞分析,正常T系细胞分化图,源于王建中等编著的临床流式细胞分析,正常粒细胞分化图,源于王建中等编著的临床流式细胞分析,正常单核细胞分化图,源于王建中等编著的临床流式细胞分析,免疫分型常用的抗体,AML,CD34、CD117、CD33、CD13、HLA-DR、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、,MPO,怀疑M6加做CD71、GPA,怀疑M7加做CD61、CD41,B-ALL,CD34、CD10、CD19、CD20、CD22、c/mIg、TDT、,cCD22/CD79a,T-ALL,CD34、CD10、,CD3,、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7、HLA-DR、CD1a、TDT、,cCD3,NK细胞,CD16、,CD56,、CD57,浆细胞,CD38、,CD138,、c、c、CD19、CD56,免疫分型的步骤二,第二步：确诊，进一步确定白血病类型，并且将某一系别的白血病根据分化程度的不同再分为不同亚型,根据初筛结果加做其他系别特异性标记,T-ALL:CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD1a、TDT、cCD3,B-ALL:CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79a,AML:CD13、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO,怀疑M6加做CD71、GPA,怀疑M7加做CD61、CD41,T-ALL免疫亚型,分型,CD7,CD2,TdT,CD3c/m,CD1a,FAB分型,急性早期T前体细胞白血病,early T-precursor ALL,+,+,/+,-,L1、L2,胸腺皮质T-ALL,+,+,+,+,+,L1、L2,急性T细胞白血病,T-ALL,+,+,+,-,L1、L2,示例：T-ALL,初筛,CD7+,CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-,示例：AML伴CD7+,初筛,CD7+,CD19-CD33+HLA-DR+CD117+,示例：B-ALL,初筛,CD19+,CD7-CD33-CD10+/-CD117-,示例：BALL+CD33,初筛,CD19+CD7-CD33+CD10+CD117-,示例：AML,初筛,CD33+,CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+,示例：AML-M3,初筛,CD33+,CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-,混合细胞性白血病的免疫分型,双表型：一种白血病细胞同时表达两个或两个以上系列标志。,双克隆型：同时存在两种或两种以上异常细胞，分别表达各自的系列特异性标志。,类型：T-M、B-M、T-B、T-B-M,白血病中各种抗原的积分情况,Points,B-lymphoid,T-lymphoid,Myeloid,2,CD79a,cCD22,cIgM,CD3,TCR a/b,TCR g/d,MPO,1,CD19,CD10,CD20,CD2,CD5,CD8,CD10,CD117,CD65,CD13,CD33,0.5,TdT,CD24,TdT,CD7,CD1a,CD14,CD15,CD64,混合细胞性白血病判断标准：每个系列积分或=2.5分,示例：T-M型AL,示例：T-B-M型AL,免疫表型的预后价值,免疫分型在慢淋、淋巴瘤中的应用简介,肿瘤性B细胞鉴别关键：,、轻链出现单克隆表达或双阴性或表达强度明显异常。,肿瘤性T细胞鉴别关键：,CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7中出现抗原表达缺失或抗原表达强度的改变；CD45RA、CD45RO的表达情况出现异常；表达TDT、CD10等幼稚抗原；TCRV系列抗原出现单克隆表达。,浆细胞肿瘤鉴别关键：,CD138+细胞表达CD56，不表达CD19，出现cy、cy轻链的单克隆表达。,NK细胞肿瘤鉴别关键：,出现CD16、CD56、CD7、CD2等抗原的缺失，CD45表达强度的改变,每种类型都必须关注异常细胞CD45表达强度、SSC、FSC的变化。,示例：正常淋巴细胞,正常T细胞,正常B细胞,正常NK细胞,示例：B-CLL/SLL,示例：MCL,示例：HCL,示例：Burkkit淋巴瘤,示例：FL,示例：脾边缘区淋巴瘤,示例：NK-T淋巴瘤,示例：T-NHL,82.5%,15.6%,示例：细针穿刺 B-NHL,示例：脑脊液标本 B-NHL,示例：正常浆细胞,示例：MM,示例：浆样淋巴瘤,流式细胞术检测BCR-ABL融合蛋白,Thanks！,