课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,专题,2,微生物的培养和应用,课题,2,土壤中分解尿素的细菌的分离与计数,CO,（,NH,2,）,2,+H,2,O,CO,2,+2NH,3,脲酶,1,、筛选菌株,无机盐,碳源,氮源,凝固剂,尿素是唯一氮源，只有能利用尿素的,微生物才能生长。,计数板是一块特制的载玻片，上面有一个特定的面积（,1 mm,2,）和高（,0.1 mm,）的计数室，,1 mm,2,的面积,=25,个（或,16,）中格*,16,个（或,25,）小格（即,400,个小格组成。）,（三）设置对照,判断培养基中是否有杂菌污染：,将未接种的培养基同时进行培养。,判断选择培养基是否具有筛选作用：,完全培养基（营养成分齐全）接种后培养,观察菌落数目。,主要目的是排除实验组中非测试因素对实验,结果的影响，提高实验结果的可信度。,二,.,实验的具体操作,.,土壤取样,从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土,3cm,左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。,.,制备培养基：,制备以尿素为唯一氮源的,选择培养基,。,二 实验设计,（,2,）样品的稀释,分离不同微生物采用不同的稀释度原因,：土壤中各类微生物数量不同。,(,保持获得菌落数在,30-300,个的平板,),注意,：第一次做实验，稀释范围要放宽。,将待测样品经一系列,10,倍稀释，然后选择,三个稀释度,的菌液，分别取,0.1 mL,接种到已制备好的平板上，为使结果接近真实值，,可将同一稀释度分别加到三个平板上,然后用无菌涂布棒将菌液涂布整个平板表面，放在适宜的温度下培养，计算出同一稀释度菌落,平均数,。,注意事项,为了保证结果准确，一般选择菌落数在,30300,的平板上进行计数。,为使结果接近真实值可将同一稀释度加到,三个或三个以上,的平皿中，经涂布，培养计算出菌落,平均数,。,计算公式,每克样品中的菌落数,（,CV,）,M,，其中,C,代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，,V,代表涂布平板时所用的稀释液的体积（,mL,），,M,代表稀释倍数。,某同学在稀释倍数为,10,6,的培养基中测得,平板上菌落数的平均数为,234,，那么每克样,品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液,的体积为,0.1ml,）,(),A.2.3410,8,B.2.3410,9,C.234,D.23.4,B,四、操作提示,无菌操作,做好标记,规划时间,结果：,酚红指示剂变,_,，,初步鉴定该细菌能够分解尿素,分析：,细菌能分解尿素产生,_,，使培养基呈碱性，氨增加,pH,升高，酚红由无色变为红色。,操作：,在以,_,为唯一氮源的培养基中加入,酚红指示剂,尿素,（鉴别培养基）,红色,氨,5,、实验结果的鉴定,测定饮水中,大肠杆菌,数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到,伊红美蓝,培养基上培养，大肠杆菌,菌落呈现黑色,，通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。（鉴别培养基）,