生物选修三：专题一基因工程-1.1DNA重组技术的基本工具--(共21张)一等奖公开课.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,专题一 基因工程,1.1 DNA,重组技术的基本工具,手术刀,缝合针,运输工具,问题探讨,来源,种类,作用,作用结果,阅读课本,4-5,页“限制性核酸内切酶,分子手术刀”的相关内容，填写下表,主要从原核生物中分离纯化而来,已经分离出大约,4000,种,1,、识别双链,DNA,分子的某种特定核苷酸序列,2,、使每一条链中,特定部位,的两个核苷酸之间的,磷酸二酯键,断开。,形成两种末端：黏性末端或平末端,1.,限制性核酸内切酶,分子手术刀,5,限制酶的识别序列有何特点？,EcoRI,限制酶的切割,黏性末端,黏性末端,EcoRI,限制酶的切割,SmaI,只能识别,CCCGGG,序,列，,并在,C,和,G,之间切开。,SmaI,限制酶的切割,平末端平末端,当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的,DNA,两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫,平末端,。,你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗？,原核生物易受自然界外源,DNA,的入侵，但生物,在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机,制，以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细,菌的一种防御性工具，当外源,DNA,侵入时，会,利用限制酶将外源,DNA,切割掉，以保证自身的,安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切,割外源,DNA,、使之失效，从而达到保护自身的,目的。,寻根问底,1.,要想获得某个特定性状的目的基因必须要用限制酶切几刀,？,可产生几个黏性,(,平,),末端,？,要切两,刀,，产生四个黏性(平)末端。,2.,如果把两种来源不同的,DNA,用同种限制酶来切割,，,会怎样,？,会产生相同的黏性,(,平,),末端,3,.,如果把具有相同黏性,(,平,),末端的,DNA,连接起来，又会怎样呢？,得到重组,DNA,讨论,13,类型,来源,功能,相同点,差别,EcoliDNA连接酶,T,4,DNA连接酶,大肠杆菌,T,4,噬菌体,恢复磷,酸二酯,键,只能连接黏性末端,能连接,黏性末端,和,平末端,(,效率较低,),阅读课本第,5,页,“分子缝合针”DNA连接酶,的相关内容，填写下表,2.,DNA连接酶,-,分子缝合针,你能画出经,DNA,连接酶作用形成的,磷酸二酯键吗？,E.coliDNA,连接酶可把黏性末端之间的缝隙,“,缝合,”,起来,T,4,DNA,连接酶还,可把,平末端之间的缝隙“缝合”,起来,讨论：,运载体应该具备什么样的条件？,3.,分子运输车运载体,1.,假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样？,2.,作为载体没有限制酶的切割位点将怎样？,3.,如果载体对受体细胞有害将怎样？,4.,目的基因的是否进入受体细胞，你如何察觉？,质粒：裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。,有标记基因的存在，可用含青霉素的培养基鉴别。,能复制并带着插入的目的基因一起复制,有切割位点,实际上在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。,运载体的种类：质粒、,噬菌体衍生物、动植物病毒,下,面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示一种限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组,DNA,的细胞，应选用的质粒是,C,模拟重组,DNA,的构建过程,感谢同学们的参与和配合！,