吸光光度法-.ppt

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,吸光光度法,第一页，共78页。,吸光光度法(Absorption Photometry)是基于物质对光的选择性吸收而建立(jinl)起来的分析方法,1、定义(dngy),2、范畴(fnchu),3,、特点,比色法、紫外,-,可见吸光光度法和红外光谱法等,应用范围广,准确度较高,仪器设备简单、操作简单、快速,灵敏度高,可见吸光光度法（分光光度法、光度法）主要测定对象为金属离子,第二页，共78页。,第一节 物质(wzh)对光的选择性吸收,一、光的基本(jbn)性质,可见光是电磁波的一种(y zhn)，具有波粒二象性,波长与能量成反比；与频率成正比关系,单色光：,是指单一波长的光，通常意义的单色光是指某一波长范围的光,复合光：,由不同单色光组成的光,第三页，共78页。,波谱名称,波长范围,分析方法,跃迁能级类型,g,射线,0.005,0.17nm,中子活化分析等,核能级,X,射线,0.110nm,X,射线光谱分析,内层电子能级,远紫外,10200nm,真空紫外光谱法,近紫外,200400nm,紫外光谱法,原子及分子价电子或成键电子能级,可见光,400750nm,比色、可见吸光光谱法,(,光度法,),近红外,0.752.5,m,m,红外光谱法,分子振动能级,中红外,2.550,m,m,红外光谱法,远红外,501000,m,m,红外光谱法,分子转动能级,微波,11000mm,微波光谱法,射频,11000m,核磁共振光谱法,电子、核自旋,电 磁 波 谱,第四页，共78页。,第五页，共78页。,绿,500,580,白光,紫,400,450,青蓝,480,490,橙,600,650,青,490,500,红,650,750,黄,580,600,蓝,450,480,光的互补色示意图,第六页，共78页。,第七页，共78页。,二、物质对光(du gung)的选择性吸收,（一）物质对光产生选,择性吸收(xshu)的原因,S,2,分子能级示意图,E,e,v,3,v,2,v,1,r,3,r,2,r,1,S,1,S,0,E,v,E,r,（二）物质的颜色(yns)与,光吸收的关系,物质对可见光的选择性吸收是不同的物质具有不同颜色的原因,第八页，共78页。,第九页，共78页。,（1）转动能级间的能量差Er：0.0050.050eV，跃迁产生吸收光谱位于远红外区。远红外光谱或分子转动光谱；,（2）振动(zhndng)能级的能量差Ev约为：0.05eV，跃迁产生的吸收光谱位于红外区，红外光谱或分子振动(zhndng)光谱；,（3）电子能级的能量差Ee较大120eV。电子跃迁产生的吸收光谱在紫外可见光区，紫外可见光谱或分子的电子光谱,讨 论,第十页，共78页。,（4）吸收光谱的波长分布是由产生谱带的跃迁能级间的能量差所决定，反映(fnyng)了分子内部能级分布状况，是物质定性的依据。,（5）吸收谱带强度与分子偶极矩变化、跃迁几率有关，也提供分子结构的信息。通常将在最大吸收波长处测得的摩尔吸光系数max也作为定性的依据。不同物质的max有时可能相同，但max不一定相同；,（6）吸收谱带强度与该物质分子吸收的光子数成正比，定量分析的依据。,讨 论,第十一页，共78页。,（三）吸收(xshu)曲线（吸收(xshu)光谱）,吸收光谱能准确地描述物质(wzh)对光的选择性吸收的情况,最大吸收(xshu)波长,定性依据：,不同物质因分子结构不同而具有不同的特征吸收曲线,定量依据：,同波长下吸光度随浓度增大而增大,一般情况下选择最大吸收波长处测定,动画,第十二页，共78页。,（1）同一种(y zhn)物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长max,（2）不同浓度的同一种(y zhn)物质，其吸收曲线形状相似max不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和max则不同。,（3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。,（4）不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度 A 有差异，在max处吸光度A 的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。,（5）在max处吸光度随浓度变化(binhu)的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。,吸收(xshu)曲线讨论：,第十三页，共78页。,第二节 光吸收的基本定律,一、朗伯比尔定律(dngl),布格(Bouguer)朗伯(Lambert),（朗伯定律(dngl)）,比尔(Beer)（比尔定律(dngl)）,朗伯比尔定律,动画,第十四页，共78页。,（一）朗伯比尔定律(dngl)的推导,动画,第十五页，共78页。,朗伯比尔定律的物理意义：当一束平行(pngxng)光垂直通过某一非散射的吸光物质时，其吸光度（A）与吸光物质的浓度（c）及光程长度（b）成正比关系,朗伯比尔定律是光的吸收(xshu)的基本定律，适用于所有的电磁辐射和所有的吸光物质,第十六页，共78页。,朗伯比尔定律(dngl)成立的前提：,入射光为平行(pngxng)单色光且垂直入射,吸光物质(wzh)对光的吸收具有加和性,辐射与吸光物质间的作用仅限于光的吸收过程，无荧光和光化学现象发生,吸光物质间无相互作用,吸光物质为均匀非散射体系,第十七页，共78页。,（二）吸收系数和桑德尔灵敏度,1,、吸收系数,（,1,）吸收系数,（,2,）摩尔吸收系数,常用于化合物组成不明，,M,尚不清楚的情况,应用更为广泛,第十八页，共78页。,当吸光物质的浓度为1mol/L,吸收(xshu)层厚度为1cm时，吸光物质对某波长光的吸光度,摩尔吸光系数的大小与入射光的波长、吸光物质的性质、溶剂、温度(wnd)等因素有关，实际上还受溶液的组成、仪器灵敏度的影响,摩尔(m r)吸光系数的物理意义,第十九页，共78页。,2、对于同一种物质，其它条件一定时，摩尔(m r)吸光系数取决于入射光的波长。,1、测试条件一定时，,摩尔吸光系数(xsh)的大小,取决于物质的性质，,它是物质对某一波长光吸收的能力的量度,丁二铜肟镍,酒石酸铁,第二十页，共78页。,2、桑德尔Sandell系数(xsh)（S）,当光度仪器的检测极限为A0.001时，单位(dnwi)截面积光程内所能检测出的吸光物质的最低质量，其单位(dnwi)为mgcm-2,对于比较灵敏的显色反应(fnyng)，桑德尔系数一般为：0.010.001 mgcm-2,第二十一页，共78页。,例：10-1用邻二氮菲分光光度法测铁。已知溶液,种Fe2+的浓度为500 mgL-1，液层厚度(hud)为2cm，在,508nm处测得的透射比为0.645。计算吸光系数、,摩尔吸光系数、桑德尔灵敏度（MFe=55.85g/mol）,第二十二页，共78页。,负偏离(pinl),0 1.0 2.0 3.0 4.0,c,(mmol/L),A,0.80,0.60,0.40,0.20,0.00,A,x,c,x,（三）标准曲线(qxin)的绘制及其应用,标准(biozhn)曲线校准曲线工作曲线,在实际操作中，应注意调整,c,x,的大小，使其对应的,A,x,处于标准曲线的范围之内,正偏离,第二十三页，共78页。,二、引起朗伯比尔定律(dngl)偏离的因素,（一）物理(wl)因素,1、非单色光引起(ynq)的偏离,第二十四页，共78页。,2、选择适当(shdng)的入射波长：一般为最大吸收波长处,1、在光度分析(fnx)中，应采用性能较好的单色器以获得波长范围较窄的入射光,第二十五页，共78页。,2、非平行(pngxng)入射光引起的偏离,3、介质不均匀引起(ynq)的偏离,（二）化学(huxu)因素,1,、溶液浓度过高引起的偏离,导致光程长度增加，实际吸光度大于理论,吸光度，引起正偏离,介质不均匀（混浊或胶体）将产生散射现象，,使透射比较小，实测的吸光度偏高，产生正偏离,浓度过高，吸光质点间的平均距离减小，由于,相互作用而使吸光物质的电荷分布发生变化，从而,改变物质的吸光能力，即改变物质的摩尔吸光系数,第二十六页，共78页。,2、化学反应(huxu fnyng)引起的偏离,高浓度的电解质溶液对低浓度的吸光物质,有时也会产生类似(li s)影响，应尽量避免,要消除解离度不同引起(ynq)的偏离，就必须控制解,离度不变，一般解决方法为：加入过量的显色剂并,保持溶液中游离显色剂的浓度恒定。,M,c,1,c,2,c,3,c,4,第二十七页，共78页。,另外，控制溶液为强酸性，抑制平衡右移(yu y)，也可以,使吸光度于浓度服从朗伯比尔定律,第二十八页，共78页。,1、物质(wzh)对光的选择性吸收,吸光光度法的特点；物质对光(du gung)的选择性吸收产生的原因；吸收曲线；定性、定量分析分析的依据,2,、光吸收的基本定律,3、标准曲线的绘制(huzh)与应用,4,、偏离朗伯比尔定律的原因,本节学习重点,第二十九页，共78页。,1、物质(wzh)对光的选择性吸收,吸光光度法的特点、物质对光的选择性吸收产生的原因、吸收曲线(qxin)、定量分析定性分析的依据,2,、光吸收的基本定律,3、标准曲线(qxin)的绘制与应用,4,、偏离朗伯比尔定律的原因,复 习 与 回 顾,第三十页，共78页。,第三节 吸光光度法的仪器(yq),特点：设备(shbi)简单、操作方便、灵敏度高，准确度差,1.目视(m sh)比色法,观察方向,空白,c,1,c,2,c,3,c,4,第三十一页，共78页。,2.,光电比色法,光电比色计结构(jigu)示意图,通过(tnggu)滤光片得一窄范围的光(2050nm),第三十二页，共78页。,一、分光(fn un)光度计的基本部件,（一）光源(gungyun),分光光度计一般(ybn)由光源、单色器（分光系,统）、吸收池、检测系统和信号显示系统五部分组成,光源应能提供足够发射强度、稳定且波长连续变,化的复合光，同时反射光的强度还应不随波长的变化,而明显改变,氙灯,氢灯,钨灯,钨灯：,400,2500nm,氢灯：,185,375nm,氙灯：,200,800nm,动画,第三十三页，共78页。,（二）单色器（分光(fn un)系统）,作用(zuyng)：从光源发出的复合光中分出所需要的单色光,组成：入射狭缝、准直(zhn zh)镜、色散元件（棱镜或光栅）、聚焦镜、出射狭缝,入射狭缝,准直透镜,棱镜,聚焦透镜,出射狭缝,白光,红,紫,1,2,800,600,500,400,第三十四页，共78页。,第三十五页，共78页。,棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同。,玻璃(b l)3603200nm,石英2004000 nm,光栅：利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光 在镀铝的玻璃表面刻有数,量很大的等宽度(kund)等间距条,痕(600、1200、2400/mm),特点：波长(bchng)范围宽,色散均,匀,分辨性能好,使用方便,光栅衍射示意图,出射狭缝,光屏,透镜,平面透射光栅,平面透射光栅,反射光栅（广泛使用）,第三十六页，共78页。,（三）吸收(xshu)池,（四）检测(jin c)系统,可见光区：光学玻璃(gungxub l)池；紫外区：石英池,用于盛待测及参比溶液（,0.5,、,1,、,2,、,3cm,）,利用光电效应，将光能转换成电流讯号,硒光电池，光电管，光电倍增管,适用于,300-800 nm,在,500-600 nm,范围最灵敏。较长时间连续使用会产生“疲劳”现象,第三十七页，共78页。,红敏管（阴极(ynj)：银和氧化铯）,625-1000 nm,蓝敏管（阴极(ynj)：锑铯）,200-625 nm,使用波长(bchng)范围：160-700 nm,1个光子可产生(chnshng)106107个电子,第三十八页，共78页。,（五）信号(xnho)显示系统,早期(zoq)的分光光度计：指针式系统,如：检流计（72型）、微安表（721型）、电位计（751型）,现代的分光(fn un)光度计：数字电压表、函数记录仪、示波器及数字处理台等,0,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,1.0,1.5,第三十九页，共78页。,二、吸光度(gungd)的检测原理,分光光度计实际上测得的是光电流或电压，通过转换器将测得的电流或电压转换为对应(duyng)的吸光度A,调节检测器零点，即仪器的机械(jxi)零点：A=,应用不含待测组分的参比溶液调节吸光零点：A=0,待测组分吸光度的测定：Ax,测定步骤：,第四十页，共78页。,三、分光(fn un)光度计的类型,根据波长(bchng)分：可见分光光度计、紫外可见分光光度计、红外分光光度计,根据结构分：单光束(gungsh)分光光度计、双光束(gungsh)分光光度计、双波长分光光度计,第四十一页，共78页。,优点：结构(jigu)简单、价格低廉、适用于固定波长下的定量分析,缺定：由于光源和检测系统的不稳定会产生误差(wch)；无法进行吸收光谱的自动扫描；不适用于经常变更测量波长的定性分析,单光束(gungsh),单色器,吸收池,R,S,光源,检测器,第四十二页，共78页。,光源(gungyun),单色器,S,R,检测器,双光束,优点(yudin)：参比和试液的测量几乎同时进行，补偿了因光源和检测系统的不稳定而造成的影响；具有较高的测量精密度和准确度；测量便捷；自动扫描吸收光谱,缺点：价格(jig)较昂贵,第四十三页，共78页。,第四十四页，共78页。,双波长(bchng),光源(gungyun),单色器,单色器,吸收(xshu)池,检测器,第四十五页，共78页。,第四十六页，共78页。,第四十七页，共78页。,纤维(xinwi)光度计,第四十八页，共78页。,第四节 吸光光度法分析(fnx)条件的选择,一、显色反应及其条件(tiojin)的选择,（一）显色(xin s)反应和显色(xin s)剂,显色反应：,在分光光度分析中，将试样中被测组分转变成有色化合物的反应,显色剂：,与被测组分反应使之生成有色物质的试剂,显色反应可分为：,络合反应,和氧化还原反应,1,、,显色反应,第四十九页，共78页。,选择显色反应(fnyng)的一般标准,选择性要好：一种显色剂最好只与一种被测组分起显色反应，这样干扰就少。或者干扰离子容易(rngy)被消除、或者显色剂与被测组分和干扰离子生成的有色化合物的吸收峰相隔较远,灵敏度要高：灵敏度高的显色反应对于微量组分的测定(cdng)尤为重要。但应注意：灵敏度高的显色反应，并不一定选择性就好；对于高含量的组分不一定要选用灵敏度高的显色反应,对比度要大：,即如果显色剂有颜色，则有色化合物与显色剂的最大吸收波长的差别要大，一般要求在,60nm,以上,第五十页，共78页。,2,、,显色剂,缺点：多数(dush)无机显色剂与金属离子形成的络合物的稳定性差、灵敏度和选择性都不高,（1）无机(wj)显色剂,硫氰酸盐（测铁、钼、钨、铌）,钼酸铵（测硅、磷、钒）,氨水(n shu)（测铜、钴、镍）,过氧化氢（测钛、钒、铌）,显色反应的条件要易于控制,有色化合物的组成要恒定,化学性质要稳定,第五十一页，共78页。,优点：有机显色剂与金属(jnsh)离子形成稳定的、具有特征颜色的鳌合物，灵敏度和选择性都较高,（2）有机(yuj)显色剂,提高灵敏度的方法：增大有机显色分子(fnz)的共轭体系和在显色分子(fnz)中引入取代基,生色团,助色团,常用的有机显色剂：邻二氮菲、双硫腙、二甲酚,橙、偶氮胂,III,、铬天青,S,等,第五十二页，共78页。,（二）显色反应条件(tiojin)的选择,1,、,显色剂的用量,第五十三页，共78页。,2、溶液(rngy)的酸度,（1）对被测物质存在状态(zhungti)的影响,（2）对显色剂浓度(nngd)和颜色的影响,（,3,）对络合物组成和颜色的影响,（吡啶偶氮,+,氨基甲苯）,第五十四页，共78页。,25,100,t,/min,A,3、时间(shjin)和温度,100,硅钼酸法测硅,时间(shjin)包括显色时间(shjin)和稳定时间(shjin)，温度对二者均产生影响,第五十五页，共78页。,4、有机溶剂和表面(biomin)活性剂,表面活性剂的加入可以提高显色反应的灵敏度，增加(zngji)有色化合物的稳定性。其作用原理一方面是胶束增溶，另一方面是可形成含有表面活性剂的多元络合物。,有机溶剂可以降低有色络合物的解离度，,从而提高显色反应(fnyng)的灵敏度；此外，有机溶剂还可以影响反应(fnyng)速率，络合物的颜色、溶解度及组成等,合适的有机溶解和表面活性剂及其用量均通过实验来确定,第五十六页，共78页。,5、共存离子(lz)的干扰及消除,显色条件下，共存离子发生水解、析出沉淀，导致溶液混浊无法(wf)测定,共存离子本身有颜色或与显色剂反应生成有色(yu s)化合物，并在测量条件下有吸收，导致结果偏高,K,NR,K,MR,，,MR,NR,R,第五十七页，共78页。,控制(kngzh)溶液的酸度,加入(jir)掩蔽剂,将二元络合体系改为三元络合体系；选择适当的波长和参比溶液来消除干扰；干扰组分(zfn)分离,掩蔽剂的颜色,(R),以及它与干扰离子反应产物,的颜色,(NR),不应干扰被测组分,(MR),的测定,第五十八页，共78页。,二、吸光光度法的测量误差及测量条件(tiojin)的选择,（一）仪器(yq)测量误差,第五十九页，共78页。,10,8,6,4,2,0,20,40,60,80,0.7,0.4,0.2,0.1,A,T,/,%,|E,r,|%,(36.8),0.434,仪器度数(d shu)范围：,仪器(yq)最小误差：,第六十页，共78页。,（二）测量条件(tiojin)的选择,1、测量(cling)波长的选择,原则：吸收(xshu)最大、干扰最小,钍,-,偶氮砷,III,络合物,试剂,钴,-,亚硝基红盐,试,剂,络合物,第六十一页，共78页。,b、如果溶液已显色，则可通过改变比色皿的厚度来调节吸光度大小(dxio)（光程长度b）,2、吸光度(gungd)范围的控制,A,：,0.15,0.80,；,T,：,15%,70%,a、计算(j sun)而且控制试样的称出量，含量高时，少取样，或稀释试液；含量低时，可多取样，或萃取富集（浓度c）,c,、,选择适当的参比溶液,（示差分光光度法）,第六十二页，共78页。,3、参比溶液(rngy)的选择,参比溶液用来调节工作零点，以消除由于吸收池和溶液中某些(mu xi)共存物质对光的吸收、反射或散射所造成的误差,R,R,MR,R,MR,0.22,0.48,0.00,0.22,+0.48,0.70,R,MR,第六十三页，共78页。,测定条件下干扰物质,参比溶液组成,1,无,蒸馏水,2,R,或其它试剂,R,或其他试剂,3,R,和其它试剂；,NR,试样,+ML+R+,其它试剂,参比溶液组成：在测量条件下对吸光度有影响的物质(wzh)（除了被测组分MR外）,KIO3氧化法显色(xin s)法测 Mn2+(Co2+粉红),1、做标准(biozhn)曲线时：,蒸馏水参比,2,、测样时：,试液参比（不加显色剂）,铬天氰,S,测,Al,3+,(Ni,2+,Cr,3+,),试样,+(AlF,6,3-,)+,铬天氰,S+,其它试剂,第六十四页，共78页。,2、吸光光度法分析条件(tiojin)的选择,a、显色反应(fnyng)条件的选择：显色剂的用量、酸度、显色时间和温度、溶剂和表面活性剂,b、测量条件(tiojin)的选择：测量波长、吸光范围的控制、参比溶液的选择,1,、吸光光度法的仪器基本构造、各部分的作用,及测量原理,点,学,习,本,重,节,第六十五页，共78页。,缺点：多数(dush)无机显色剂与金属离子形成的络合物的稳定性差、灵敏度和选择性都不高,一、显色反应及其条件(tiojin)的选择,21，24，25,标尺(bioch)扩展10倍,（二）多组分的测定(cdng),1个光子可产生(chnshng)106107个电子,显色剂：与被测组分反应使之生成有色物质的试剂,比色法、紫外-可见吸光光度法和红外光谱法等,可见光是电磁波的一种(y zhn)，具有波粒二象性,吸光物质为均匀非散射体系,例：10-1用邻二氮菲分光光度法测铁。,摩尔(m r)吸光系数的物理意义,b、如果溶液已显色，则可通过改变比色皿的厚度来调节吸光度大小(dxio)（光程长度b）,表面活性剂的加入可以提高显色反应的灵敏度，增加(zngji)有色化合物的稳定性。,1、在光度分析(fnx)中，应采用性能较好的单色器以获得波长范围较窄的入射光,从而提高显色反应(fnyng)的灵敏度；,复 习 与 回 顾,2、吸光光度法分析(fnx)条件的选择,a、显色反应条件的选择：显色剂的用量、酸度、显色时间(shjin)和温度、溶剂和表面活性剂,b、测量(cling)条件的选择：测量(cling)波长、吸光范围的控制、参比溶液的选择,1,、吸光光度法的仪器基本构造、各部分的作用及测量原理,第六十六页，共78页。,第五节 吸光光度法的应用(yngyng),一、定量分析(dnglingfnx),（一）单组分的测定(cdng),1,、,一般方法,吸光光度法可应用于定性分析、,定量分析,和物质的某些物理化学常数的测量。,0 1.0 2.0 3.0 4.0,c,(mmol/L),A,0.80,0.60,0.40,0.20,0.00,A,x,c,x,M,c,1,c,2,c,3,c,4,c,x,第六十七页，共78页。,2、示差分(ch fn)光光度法,1.00,1.30,0.00,0.30,第六十八页，共78页。,普通法：cs的T=10%；cx的T=5%,示差法：cs 做参比，调T=100%,则：cx的T=50%；标尺(bioch)扩展10倍,差示法标尺(bioch)扩展原理：,第六十九页，共78页。,（二）多组分的测定(cdng),Y,X,Y,X,第七十页，共78页。,二、络合物组成和酸碱解离(ji l)常数的测定,（一）络合物的组成(z chn)的测定,1、摩尔(m r)比法,适用于解离度小、络合比较高的络合物组成的测定,思考：络合物的形成常数,(,或解离常数,),如何求解？,第七十一页，共78页。,2、等摩尔连续(linx)变化法（等摩尔系列法）,第七十二页，共78页。,（二）酸碱解离常数(chngsh)的测定,配制浓度相同(xin tn)，pH不同一系列溶液,pH,3.00,4.00,5.00,6.00,7.00,8.00,9.00,A,0.18,0.18,0.25,0.58,0.78,0.78,0.78,第七十三页，共78页。,三、双波长(bchng)分光光度法,光源,单色器,单色器,吸收池,检测器,（一）,基本原理,第七十四页，共78页。,等吸收(xshu)点法：选择测量波长与参比波长,（二）波长(bchng)组合的选择,1、干扰组分在所选的两波长(bchng)处具有相同的吸光度,2,、被测组分在此二波长处具有较大的吸光度差。,若是浑浊溶液，参比波长应选择何处？,苯酚,三氯苯酚,第七十五页，共78页。,双波长(bchng)法的特点：,双波长法可以消除浑浊溶液背景和吸收光谱(x shu un p)重叠的干扰,双波长分光光度法中只有(zhyu)参比波长，无参比溶液,双波长光高频率交替通过试液，可以减少因光源、检测器等的不稳定性而引入的误差，提高准确度,可以避免单波长法中因被测试液和参比溶液在组成、均匀性上的差异以及两个吸收池的差异而引入的误差,第七十六页，共78页。,吸光光度法的应用(yngyng),单组分测定、多组分测定,络合物的组成的测定,酸碱解离(ji l)常数的测定,点,学,习,本,重,节,第七十七页，共78页。,P.301,，,15,，,17,，,P.302,，,18,，,19,，,21,，,24,，,25,P.303,，,28,，,29.,作业(zuy)与思考,第七十八页，共78页。,