抗体筛选试验-常州献血网.ppt

,*,临床配血不合的原因分析及给血方案,常州市中心血站 许飞,2014,年,6,月,主要内容,配血程序及主要注意事项,血型鉴定方法,抗体筛选方法,配血主要方法,给血方案,配血程序及主要注意事项,1,、患者的病史和标本等的检查、核对及处理,2,、受血者、献血者,ABO,和,Rh,血型鉴定,3,、抗体的筛选和鉴定,4,、交叉配合试验,一、患者的病史和标本等的检查、核对及处理,检查前应尽可能了解、核对受血者的有关资料，包括受血者姓名、年龄、性别、床号、种族、临床诊断、输血史、药物史、妊娠史，特别是以往输血反应的记录，等等。这些资料是十分珍贵的信息，有助于解决可能出现的血清学问题。,患者标本一般要求不超过,3,天的期限，反复输血的受血者更应注意抽取新的标本做配血试验。,二、受血者、献血者,ABO,和,Rh,血型鉴定,主要方法,1,、玻片法（操作简单，便于初筛使用）,2,、试管法（比较经典，最可信的方法）,3,、微柱凝胶法（简单易行，可以自动化）,4,、微孔板法（便于大量标本的血型鉴定，,可以自动化）,案例一,某卫生院，一患者由于外伤出血，输注,Rh,阳性,红细胞,600ml,，后再次取血，在本实验室进行交叉配血，检查发现患者,Rh,血型异常，确认为,Rh,阴性,，遂嘱咐该卫生院停止对患者输,Rh,阳性血，对患者输血史进行调查，发现患者此前从未输过血，目的为保障确保患者的生命安全。方法学回顾调查，该院用,玻片法,进行试验，在试验中看到“弱凝集”。,血清学试验,试管法,患者血型鉴定：,正定型：一滴抗,-A,、抗,-B,试剂加,2%,患者,洗涤,红细胞一滴。,反定型：用,A,、,B,、,O,试剂红细胞一滴加患者血清两滴。（,反定型试验不可忽略,）,ABO,亚型的鉴定试剂、方法,抗,-A,、抗,-B,、抗,-A1,抗,H,抗,-AB,A,1,、,A,2,、,B,、,O,型红细胞,主要方法：吸收放散试验,ABO,亚型,A1,：与抗,A,、,抗A1,反应（植物血凝素）,A2,：占,A,型人群,1,8,仅与抗,A,凝集，抗,H,凝集较强,1,2,A,2,；,25,A,2,B,血清中有抗,A,1,抗体。,37,o,C,能发生反应的抗,A1,有临床意义。,A1,与,A2,共同遗传时，表现型,A1,掩盖,A2,案例二,抗,-A,抗,-B,抗,-A1 A,C,B,C,O,C,IS 4+-,-,3+,4,+,-,经分析，确认该患者血型为,A,2,型,A,int,A,int,红细胞,A,抗原强度在,A,1,和,A,2,之间，,同时有增强的,H,抗原。,A,int,亚型在黑人中要比白人中多。,A3,和,B3,与抗,A,或抗,AB,试剂呈混合外观视野,大约,2/3 RBC,是凝集的，故,A3,和,B3,也分别被称为,A,60,和,B,60,。,A,3,通常无抗,A,1,案例三,抗,-A,抗,-B,抗,-D A,C,B,C,O,C,IS 1+mf -,4+-,4+-,经分析，确认该患者血型为,A,3,型,混合视野观察，试管反复离心后观察结果,A,x,表现型,最早由,Fisher,和,Harn,与,1935,年报道,Ax,红细胞与来自,B,型个体的抗,A,产生弱凝集,与来自,O,型个体的抗,A,B,发生增强的凝集,Ax,个体唾液中缺少,A,物质,，,仅有,H,物质,与抗,H,的凝集近似于,O,型，显示出强凝集,Ax,常有抗,A1,某些单克隆抗,A,抗体与多数,Ax,红细胞发生凝集，已被用来诊断,Ax,B,x,特性与,Ax,相似,Am,与抗,A,反应阴性或弱凝集，抗,B,阴性，抗,AB,不增强，抗,H,强凝集,血型物质,A,、,H,血清中无抗,A1,产生,Ay,表型与,Am,相似，所不同的是遗传学上的差异,Bm,特性与,Am,相似,A,end,A,end,红细胞很像,A,3,细胞，与抗,-A,、抗,AB,产生混合视野，,抗,B,阴性，抗,H,强凝集，血型物质,H,血清中,可以有,抗,A1,产生,A,el,A,el,红细胞不与抗,-A,、抗,AB,产生凝集，,抗,B,阴性，抗,H,强凝集，血型物质,H,血清中,大多数带有抗,-A,或者抗,-B,抗体,B,e,l,特性与,A,el,相似,CisAB,顺式,AB,型，,AB,基因位于同一染色体上，在,AB,型中占,0.018%,可能机制：,染色体不等交换,A,或,B,基因血型糖基转移酶发生结构突变产生一个异常的具有双功能活性的酶,案例四,本实验检测出的一例,CisAB,血清学表现型,抗,-A,抗,-B,A,C,B,C,O,C,抗,-AB,抗,-H,IS,4+,1+,S,-4+-4+2+,怀疑,CisAB,+A,型,最后标本送上海血液中心输血研究室，基因鉴定后，证实是,CisAB,+A,型,获得性,B,稀有表现型，发生于,A1,个体。,有些病例为癌症患者，也有正常个体。,分泌型有,A,、,H,物质，无,B,物质。,血清中包含抗,B,，不与自身细胞凝集,类,B,抗原不与有些单抗,B,反应,分泌型病人测,B,物质,酸化抗,B,血清到,PHEcCe,。,除不规则抗体外，有,15,例患者是由直接抗人球蛋白试验阳性导致的交叉配血不合，与红细胞存活期缩短或无关联的阳性结果的直抗试验，在体内与输血有关的可由以下几种现象所引起。,1,、内源性红细胞抗原的自身抗体以免疫球蛋白或补体的形式，或两者皆附着于红细胞；,2,、新近输过血的患者所发生的同种抗体与献血员红细胞上抗原发生反应；,3,、献血员血浆、血浆制品所存在的抗体与患者红细胞上的抗原发生反应,冷凝集素综合症是最常见的溶血性贫血，与冷反应性自身抗体有关，约占所有免疫溶血性病例的,16%-32%,给血方案,1,、自身免疫性溶血性贫血,如果患者在耐受的情况下不建议输注红细胞制品，若有输血必要时，应给予维持足够输氧所需的最少量红细胞。血清学上的相合的血液可能难以获得，而实际上所伴随的同种抗体就可能引起严重溶血性输血反应的危险，临床的判定常是决定输血的因素。如果需要输血则给予,洗涤红细胞,制品输注。,案例八,常州市某医院一血液科患者，年龄,82,岁，血红蛋白,42g/L,，长期处于贫血状态，因交叉配血试验不合，送本站实验室检查，经检查，患者出现自身抗体，直抗试验（,DAT,）,4+,，初步诊断为,自身免疫性溶血性贫血,，由于当时患者精神状况比较差，需要输血治疗，在考虑输血风险和生命安全的情况下，结合患者的实际情况，建议,洗涤红细胞,4U,予以输注，输血速度要慢，可以同时给予吸氧。后血红蛋白提高至,56g/L,，,精神有所好转。,药物引发的免疫溶血性贫血,某些药物诱发形成的抗体，既针对药物本身，又针对体内的红细胞，造成,DAT,阳性，免疫红细胞破坏。研究证实，与药物相联系的,DAT,阳性分成四种机制：药物吸附、形成免疫复合物、非特异性吸附作用和产生自身抗体。,案例九,常州某医院，患者，,35,岁，因急性贫血入院，入院时血红蛋白,25g/L,，请求输血，询问病史，值班医生介绍这名患者入院前，曾在乡镇卫生院输注了,头孢类药物，,感觉身体不适，全身乏力，而且患者主诉,长期处于贫血状态,，结合实验室检查初步诊断为由,药物性抗体,引起急性自身溶血性贫血。,本实验室提供输血方案：,1,、,暂时不给予输血,；,2,、给予停药或者换其他药物进行治疗；,3,、保持静脉畅通，保证进一步治疗的需要；,4,、每隔,2-4,小时进行血常规检测，观察血液各项检测指标，特别是血红蛋白含量。,案例九,予此建议主要考虑：,1,、患者产生自身抗体，此时输血有加重溶血的可能；,2,、停止用药或者换药，可以减少药物抗体继续产生的概率；,3,、患者长期处于贫血状态，短时间的急性溶血性贫血，患者可以耐受；,4,、观察血红蛋白，有助于进一步治疗，如果机体能够清除药物抗体，刺激骨髓造血可有效改善贫血状态；,5,、如果患者血红蛋白经过观察不能升高，在综合患者生命安全与输血风险考虑的情况下，还是可以输注,洗涤红细胞悬液,，前提是静脉必须保持畅通。,值班医生接受了建议，,5,小时后经过血常规检测，患者血红蛋白升到,45g/L,。经过,24,小时患者血红蛋白已升到,65g/L,。,出现特殊抗体、多次输血患者的输血,筛选配血，避开患者抗体相对应的抗原，使用下列制品，可提高输血的安全性。,1,、洗涤红细胞制品,2,、辐照红细胞制品,3,、去白细胞红细胞制品,4,、上述方法联合使用,案例十,常州市某一患者，,女,，,46,岁，再生障碍性贫血，患病,15,年，患病期间多次输血（红细胞、血小板），,2013,年,4,月期间患者由于精神状态差，感觉乏力，入院治疗，血红蛋白,50g/L,，在该院输注辐照去白红细胞,4u,，出现严重的输血反应（交叉配血盐水法、凝聚胺法均为阴性），血红蛋白不升反降。经过本实验室检查，患者血清中检出,IgG,型类抗,-E,、抗,-c,抗体。结合患者情况，本实验室筛选,辐照洗涤红细胞,供其输注（交叉配血盐水法、凝聚胺法、,抗人球蛋白法,均为阴性）。患者情况好转。及时检查出溶血原因，可以改善患者的贫血状况。,案例十一,常州市某医院一血液科患者，男，,38,岁，诊断为骨髓纤维化，申请输血时血红蛋白较低，只有,32g/L,，必须靠输血才能维持生命。该院输血科为其配过血并输注过,3,次红细胞，但每次都有较重的输血反应，同时由于患者还伴有严重的肺部感染，输血前不能考虑使用激素。经过本实验室检测，检出患者血清中出现蛋白样凝集、冷凝集抗体、并伴有自身抗体的情况，由于反复输血出现了,IgG,型抗,-E,、抗,-c,抗体。本实验室经过慎重的考虑，还是给予输血支持，建议使用,辐照洗涤红细胞,，,2013,年,6,月,3,日,-8,月,6,日期间，输血研究室共为患者疑难配血,21,次，,46u,（共计,9200ml,），期间患者未出现输血反应。,ABO,亚型的输血,一般原则：建议选择“,O”,型洗涤红细胞，“,AB”,型血浆。选择此方案是为了保护受血者的安全。,新生儿溶血患者的输血,1,、,ABO,血型不合时，采用“,O”,型红细胞和“,AB”,型血浆的混合血液换血。,2,、,Rh,系血型不合时有两种情况：,2,、,1,单纯,Rh,溶血，可采用,Rh,血型和母亲相同的血型，而,ABO,血型采用与婴儿同型或者“,O”,型血。,2,、,2,合并,ABO,溶血，只能采用与,Rh,血型和母亲相同的“,O”,型血和“,AB”,型血浆的混合血液交换输血。,注意上述血液选择,5,天内的,新鲜,红细胞。,特殊血型患者的输血,一般是指少有血型的输血，我们工作中遇到的主要是,Rh,阴性血。,案例十二,常州市某医院一外科患者，男，,45,岁，由于铲车插入骨盆，造成全身多处组织受损，形成多发伤，经检查患者血型为“,B”,型，,Rh,（,D,）阴性,，急需输血治疗，本单位共为其提供,冰冻解冻去甘油红细胞悬液,“,B”,型,30u,，“,O”,型,15u,，并从外地血站调入“,B”,型,12u,，并电话联系,Rh,阴性献血者献血，采集“,B”,型,3u,，“,O”,型,2u,（经过洗涤后供其输注），并配合血小板、冷沉淀、血浆等一起使用。,关注实验室质量，,保护受血者安全，,科学合理用血！,谢谢！,