实验二福医大红细胞计数.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验二 改良牛鲍计数板使用、红细胞计数,目的要求：,1.,掌握改良牛鲍计数板的结构和使用方法,2.,掌握手工显微镜红细胞计数的方法。,（一）改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法,临指导,P7,1.,改良牛鲍氏计数板的结构（,见图,）,2.,改良牛鲍氏计数板的使用方法,1),准备计数板：,用,绸布,擦拭，“,推压”法,加盖玻片,2),稀释的血液：,准确吸取稀释液和血液，立即混匀。,3),充池,：,充池前充分混匀,稀释液，充池要,一次性完成,，充液不能,过多、过少、有气泡、断续充液、充池后移动盖玻片。,4),静置,2-3min,，,待细胞下沉。,5),显微镜计数,：,小心移动；,手,和,显微镜镜头不能,碰到盖玻片。,6),计数原则,：,逐格计数,；,按一定方向进行计数；,对,压线细胞,遵循,“数上不数下，数,左不数右”,的原则。,（一）改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法,1.,保证所用器材清洁，勿用手触膜。,2.,),充池,：,充池前充分混匀,稀释液，,一次性完成,，充液不能,过多、过少、有气泡、断续充液。,3.,充池后移动盖玻片。,4.,计数池使用后用蒸馏水冲，纱布轻试，切不可用粗糙织物擦试，以免磨损刻度。,3.,改良牛鲍氏计数板使用注意事项,（二）,红细胞计数,P14,1,原理,用红细胞等渗稀释液,(2.0ml),将血液,(10l),稀,释一定倍数，滴入计数池，于高倍镜下计数一定范,围内的红细胞数，再换算成每升血液中的红细胞数。,2.,红细胞稀释液,（,1,）,Hayem,（,赫姆氏液）,即传统的红细胞稀释液,成分及作用：氯化钠：调节渗透压至等渗,硫酸钠：提高比密，防止细胞粘连,氯化高汞：防腐剂,缺点：遇高球蛋白血症患者，球蛋白沉淀使红细胞 容易凝结。,（二）红细胞计数,（二）红细胞计数,-2.,红细胞稀释液,（,2,）甲醛枸橼酸盐,成分及作用：枸橼酸钠：抗凝、保持等渗,甲醛：防腐、固定红细胞,优点：配制简单、红细胞不凝集，可保持红细胞,正常的 圆盘状数小时，目前应用广泛。,(3),不含甲醛的枸橼酸盐,：,成分及作用：,31.3g/L,的枸橼酸钠。,优点：遇自身凝集素增高者，可使凝集的红细胞分散并照常计数。,（,4,）,急诊时可用生理盐水或含,1%,甲醛的生理盐水作为红细胞稀释液。,（二）红细胞计数,-2.,红细胞稀释液,3.,操作步骤,（,1,）准备稀释液：加红细胞稀释液,(,赫姆氏液,),2.0ml,于试管中。,（,2,）采血：,10,l,至稀释液中，立即混匀。,（,3,）准备计数板、混匀稀释液、充池、静置,2-3min,。,（,4,）,显微镜计数：高倍镜下计数,中间大方格,内,四角,及,中央,的,5,个中方格内,的,红细胞,总数。,（二）红细胞计数,4,计算,红细胞数,/L,=N25/51010,6,200=N10,10,=N/10010,12,参考值：,成年男性：,4.05.5*10,12,/L,；,成年女性：,3,.55.0*10,12,/L,；,初生儿,:,6.07.0*10,12,/L,（二）红细胞计数,5,注意事项：,（,1,）同白细胞计数,（,2,）红细胞在计数池中若分布不均，每个中方,格之间相差超过,20,个以上时要重新充池计数。正,常数值范围内，,2,次红细胞计数相差不得超过,5%,。,（二）红细胞计数,