第四章生物反应调节剂的种类及在肿瘤临床的应用.ppt

*,*,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第四章,生物反应调节剂的种类及在肿瘤临床的应用,生物技术学院生物治疗研究所,李妍,Email.:,Liyan_nys,Tel:[phone],史蒂,夫,保罗,乔布斯,（,Steven Paul,Jobs,）,肿瘤的治疗现状,治疗现状,常规：手术、放疗、化疗,缺点：,手术不能完全摘除或彻底消除肿瘤细胞，难以控制转移和复发,并且使病人肢体、器官残缺。,放疗造成造血系统的损害、皮肤损害、乏力、脱发。,化疗特异性差，产生严重的毒副反应，肿瘤对药物产生耐受,生物治疗（,Biotherapy,）,应用现代,生物技术及其产品,进行肿瘤防治的新疗法。,肿瘤生物治疗,(biotherapy,或,biological therapy),定义：通过调动宿主天然防卫机制或外源给予机体某些生物活性物质来取得抗肿瘤的效应。,意义：从细胞毒性药物的“旧”时代向非细胞毒性药物（即细胞稳定性、靶向性）的新时代转变。,主要手段,：,生物反应调节剂,(Biological Response Modifiers,，,BRMs,),WHO,在肿瘤工作的四项工作重点,注：,-,无效，,+,有效，,+,明显有效,肿 瘤,肺癌胃癌,乳腺癌大肠癌子宫颈癌口腔,/,咽癌食管癌肝癌,预防,+-+,早期诊断,-+-,根治治疗,-+-,姑息处理,+,第一节,BMRs,的,定义和分类,定义：一类具有广泛,生物学活性和抗肿瘤活性,的生物制剂。,具备条件,1.,刺激提过免疫效应细胞的数量或活性，,直接,增加机体抗肿瘤作用,;,2.,降低对免疫系统的抑制作用，,间接,增强机体对肿瘤的免疫反应,;,3.,增强,宿主的,防御,功能；,4.,增强,宿主,耐受,细胞毒性损害的能力，如增强骨髓的白细胞前体,;,5.,增强,肿瘤细胞的,免疫原性,使之更易于被免疫机制或细胞毒性药物杀伤；,6.,防治或逆转,肿瘤的,恶性,倾向，促进肿瘤细胞的分化与成熟。,一,.,细胞因子,(cytokines),二,.,细菌类及微生态,BRMs,（,Biological Response Modifiers,）,三,.,肿瘤增殖病毒（,tumor specific replicating virus,）,四,.,胸腺肽,(,Thymosin,),分类,二,.,细菌类及微生态,BRMs,定义：指含活菌和死菌，包括组分和产物或仅含活菌体和死菌体的微生物制剂。,途径：供口服或经由其它途径进入人体。,目的：主要是,刺激特异性和非特异性免疫机制,，并在一定程度上在粘膜表面改善微生物和酶的平衡。,（一）卡介苗（,BCG,，,Bacillus,Calmette-Gu,）,最早，法国科学家卡尔梅特,(,Calmette,),和介朗,(,Gurin,),研制成功的疫苗。,将,有毒力的牛型结核分枝杆菌,在甘油胆汁马铃薯培养基上长期培养传代，得到,减毒菌株,，用于预防结核菌感染。,60,年代,Mathe,用于治疗小儿急性白血病获得良好疗效。,膀胱癌,BCG,抗肿瘤机理,胸腺,是,BCG,作用的基础：,BCG,治疗裸鼠膀胱癌无作用。,调动免疫系统,识别（增强淋巴细胞活性、中性粒细胞的吞噬能力及,T,淋巴细胞的功能，调整内源性抑制因子的活性，使之正常化，提高机体内抗体的产生）并消灭携带,BCG,抗原的细胞。,通过对,T,淋巴细胞亚群研究表明，,Th1,细胞是通过,IL-2,和,IFN-,发挥作用的。,BCG,治疗膀胱癌的机理,起始阶段,：,BCG,通过纤维连接素与膀胱上皮细胞和肿瘤细胞接触，继之被上皮细胞和组织中的巨噬细胞吞噬；,免疫诱导阶段,：巨噬细胞和膀胱上皮细胞产生细胞因子（如,TNF,、,IL-1,、,IL-8,等），诱导白细胞粘附分子及,MHC,表达。,T,淋巴细胞和其它非特异性免疫效应细胞也被诱导增加，产生细胞因子,TNF-,、,IL-12,等以活化,T,淋巴细胞。,BCG,治疗膀胱癌的机理,效应阶段,：重复使用的,BCG,诱导产生大量,BCG,特异性,T,细胞和高水平量的,IL-2,和,IFN-,，后者进一步活化巨噬细胞产生更多的,IL-12,及,IFN-,。,、,类,MHC,抗原也被,TNF-,和,IFN-,诱导表达，以便使,BCG,感染的细胞更易于被,CD4+,或,CD8+,细胞毒,T,细胞识别杀伤。另外，由高浓度细胞因子诱导活化的巨噬细胞和非特异性免疫效应细胞,也可能是杀伤肿瘤细胞的因素；,作用消退阶段,：随着,BCG,抗原负荷减少，肿瘤进入消退期，巨噬细胞产生,IL-10,等下调性细胞因子，阻断,IFN-,和,IL-12,的产生，长期存活于膀胱组织中的,BCG,特异性记忆,T,淋巴细胞可以对,BCG,再治疗时重新起动免疫反应。,湖南九芝堂斯奇生物制药有限公司,【,适应症,】,本品系免疫调节剂，主要用于预防和治疗慢性支气管炎、感冒及哮喘,（二）,OK-432,（,picibanil,）,商品名叫“,沙培林,”,从,溶血性链球菌,(,Streptococcus,hemolyticus,)A,组,型低毒变异株,Su,开发而来。,细菌类,非特异性,免疫调节剂：多种细胞因子诱生剂。,OK-432,抗肿瘤作用,直接,杀瘤作用,:,通过菌体与肿瘤细胞的直接接触，阻碍细胞合成核糖核酸、脱氧核糖核酸及蛋白质。,增强机体,特异性,免疫应答：杀瘤作用暴露肿瘤细胞“隐藏”着的某些抗原决定簇,(determinant),，从而增强肿瘤的抗原性。,非特异性,提高机体的免疫力：免疫反应调节剂，增强荷瘤机体抗瘤能力。,分子水平：单核细胞通过,Fas,配基,/,Fas,系统。,（三）高聚金葡素,(,Highly agglutinative,staphylococcin,HASL,),商品名叫“,高聚生,”,从灭活的,金黄色葡萄球菌,(Staphylococcus,aureus,),变异株的代谢产物中提取。,主要有效成分：,C,型金葡菌肠毒素,（,enterotoxin,）,作用：,对,T,淋巴细胞、,NK,、,LAK,、,CIK,等免疫效应细胞具有较强刺激功效的,超级抗原,。,通过对,T,淋巴细胞的激活诱导产生,细胞因子和细胞毒素,，达到杀伤肿瘤细胞的作用。,除抗肿瘤外，在动物实验中显示了显著,升高外周血白细胞,的作用。,LAK,（,lymphokine,activated killer cells,LAK,）,CIK(cytokines induced killers),（四）力尔凡,从,-,溶血性链球菌,ZA-1,提取,高溶血性链球菌素,(SLS),与,-,甘露聚糖肽。,空间面积大、接触位点多，增强溶血型链球菌菌体中脂壁磷酸核膜蛋白等多种活性蛋白,对免疫效应细胞的粘附,，引发一系列的抗肿瘤反应。,所粘附的,-,甘露聚糖肽增强对,免疫效应细胞的调理作用，,起到了协同抗肿瘤作用。,（五）双歧杆菌,(,Bifidobacterium,),和乳酸杆菌,(Lactobacillus),益生菌（,probiotics,）维持肠道内的微生物平衡。,在儿童，双歧杆菌与免疫系统的成熟有关。,对于老年人，双歧杆菌的减少与其免疫功能降低有关。,我们研究：,Lactobacillus,乳酸杆菌菌,Lactobacillus acidophilus,嗜酸乳,(,酸,),杆菌,Lactobacillus,bulgaricus,保加利亚乳,(,酸,),杆菌,Lactobacillus,casei,干酪乳,(,酸,),杆菌,干酪乳杆菌,Lactobacillus,rhamnosus,鼠李糖乳酸桿菌,Lactobacillus,plantarum,胚芽乳,(,酸,),杆菌,植物乳杆菌,Bifidobacterium,双歧杆菌属,Bifidobacterium,breve,短双歧杆菌,Bifidobacterium,infantis,婴儿双岐杆菌,Bifidobacterium,longum,长双歧杆菌,结论：与正常人相比，糖尿病人乳酸杆菌增加，双歧杆菌减少，并与脂类代谢有关。,抗肿瘤研究,婴儿双歧杆菌、分叉双歧杆菌、动物双歧杆菌、乳酪乳杆菌对,MCF7,乳腺癌,细胞的生长,抑制,作用。,流行病学调查，食用双歧杆菌发酵的牛奶制品的妇女，其患乳腺癌的可能性大为降低,。,用长双歧杆菌制剂抑制,IQ,诱导的,344,大鼠结肠癌的抑制率为,100%,，小肠肿瘤为,80%,，肝癌为,38%,。,促使,癌细胞进入,分化,成熟的阶段：肠道内肿瘤细胞分化的特异性标志的二肽酶,IV,、转化酶、氨基肽酶,N,、碱磷酶，在双歧杆菌、乳酸杆菌的作用下活性增强。,抗肿瘤研究,婴儿双歧杆菌（,Bifidobacterium,infantis,）与,ConA,连接的瘤苗可协同提高荷瘤小鼠的生存时间及治愈率。,肠内双歧杆菌与结肠癌细胞的相互作用能抑制癌细胞增生，,降低,ODC,（鸟氨酸脱羧酶）的活性及癌细胞,ras-P21,蛋白的表达。,抗,T,淋巴细胞抗血清及补体的存在，能使抑制活性丧失,-,细胞免疫,。,抗肿瘤研究,乳杆菌制剂可调节肠道内微生物群的代谢及,7,脱羟基酶的活性，,降低次级胆酸的水平,（结肠癌促进剂）。,乳酪乳酸杆菌（,Lactobacillus case,）抗瘤作用可被,anti-CD3,McAb,或,anti-CD8,McAb,抑制，且对裸鼠无作用,表明,CD8,+,T,参与抗肿瘤。,在胸膜腔内注射乳杆菌的,BALB/C,小鼠胸膜腔渗出液中,IFN-,、,IL-6,等,细胞因子,含量显著提高，细胞因子又可活化胸膜腔内巨噬细胞及诱导,T,淋巴细胞成为,CTL,细胞。,乳酸杆菌细胞壁制剂能增强,IL-2,诱导的,LAK,细胞的杀伤活性。,(,六,),真菌多糖类,BRMs,主要药用真菌：,灵芝、香菇、云芝、金针菇、茯苓、银耳、猪苓、猴头菇、冬虫夏草、蜜环菌、裂褶菌、鸡土从菌、竹荪、天麻等。,真菌多糖抗肿瘤作用机理,目前尚未定论，主要是通过增强和恢复患者的免疫功能来体现,促进抗体形成,激活巨噬细胞,诱生干扰素,(IFN),增加细胞中,cAMP,浓度,刺激或协助恢复,T,淋巴细胞，提高淋巴细胞转化率,刺激网状内皮系统的吞噬功能,提高血清或血浆蛋白含量,升高白细胞,具有清除活性氧的作用,产生抗肿瘤抗生素,三,.,肿瘤增殖病毒,Can you fight fire with fire,肿瘤细胞特异性增殖病毒,，,简称肿瘤增殖病毒、溶瘤增殖病毒。,病毒经过修饰、加工后，在肿瘤细胞内进行选择性复制。,近年，腺病毒（,adnovirus,）、单纯疱疹病毒,(herpes simplex virus),、呼吸道肠道过滤性病毒、新城鸡瘟病毒,(,newcastle,disease virus),等,10,种病毒已经进入临床试验,adnovirus,进入,临床,。,目前，已研制成功并在肿瘤临床研究中应用的增殖病毒包括,ONYX-015,、,CN7-06,、,CV787,、,G207,以及一些,RNA,病毒等。,肿瘤细胞内病毒特异性增殖的机制,某些病毒具有组织亲和性,利用肿瘤组织特异性启动子或增强子,正常细胞与肿瘤细胞存在某些基因表达上的差异。,例：,ONYX-015,（,EIB,区,55KD,缺失的腺病毒）只能在,p53,信号转录途径异常的 肿瘤细胞内复制及增殖。,腺病毒,EIA,突变可使其在抑癌基因,Rb,突变的肿瘤细胞内复制及增殖。,利用细胞内信号转导途径异常,呼吸道肠道过滤性病毒,(,reovirus,),感染后其早期病毒基因转录可激活蛋白激酶受体,(PKR),，而该酶激活可抑制病毒其它基因的转录，从而使病毒不能有效复制。而很多肿瘤细胞中,ras,处于激活状态时，通过,ras,信号转导途径使,PKR,去磷酸化，抑制该,PKR,的活性，使该呼吸道肠道过滤性病毒复制、增殖，从而特异性杀灭,ras,高表达的肿瘤细胞。,(,一,)ONYX-015,现称,CI1042,、美国,ONYX,生化制药公司、腺病毒,E1B55KD,蛋白缺失,正常细胞中，不能抑制,p53,基因的激活，细胞凋亡。,肿瘤细胞中,P53,失活或突变，可复制及增殖。,Attenuating viral replication in normal cells but not,tumor,cells via gene mutation.,Chu R L et al.,Clin,Cancer Res 2004;10:5299-5312,瘤内注射,ONYX-015,治疗头颈部癌,I,期,临床试验,22,例复发或难治性头颈部鳞癌患者入选,I,期临床试验,观察,单次,瘤内注射,ONYX-015,的安全性和治疗效果。,通过核磁共振方法检测有,5,例提示肿瘤中心部位坏死,其中,3,例部分缓解,(PR),2,例轻微缓解,(MR),有效的,5,例中,4,例肿瘤组织均有,p53,突变。,主要不良反应：为轻度,(1,2,级,),流感样症状,以发热为主,发生率为,32%(7/22),。,I,期临床试验结果表明,ONYX-015,局部肿瘤内注射,患者耐受性好,无明显不良反应,具有依赖,p53,的选择性增殖和溶瘤作用。,瘤内注射,ONYX-015,治疗头颈部癌,II,期,临床试验,40,例复发或难治性头颈部鳞癌患者入选,II,期临床试验,多次,瘤内注射,ONYX-015,的安全性和治疗效果,连续给药,5,6,天后,41%,的患者血清阳性,在第,10,天则只有,9%,的患者血清阳性,而在第,22,天则全部患者均无病毒基因组存在,病毒血症只是一过性的。,疗效在标准组,30,例中,PR+,完全缓解,(CR)14%,疾病稳定,(SD)41%,肿块进展,(PD)45%,ONYX-015,的,临床试验,经瘤内、腹膜内以及动静脉注射,ONYX-015,，患者具有良好的耐受性，剂量可达,(210,12,),(210,13,),剂量单位的病毒颗粒。,ONYX-015,正在进行的其它临床研究,直结肠肝转移癌,胰腺癌,期临床试验,口腔黏膜白斑,神经胶质瘤,宫颈癌,膀胱癌,期临床试验,其他溶瘤病毒,CN706,腺病毒：美国,Henderson,研究中心,前列腺特异性启动子,(PSE),启动,Ad5E1A,基因：仅在前列腺特异性抗原（,PSA,prosland,specific antigen,）的细胞中增殖。,PSE,Use of cellular promoters to direct,lytic,viral replication to,tumor,cells.,Chu R L et al.,Clin,Cancer Res 2004;10:5299-5312,CV787,插入鼠的腺血管舒缓素启动子,(,probasin,),以启动,Ad5E1B,基因、插入人前列腺特异性抗原启动子和增强子驱动,Ad5E1B,基因，同时,保留了,E3,区,。,以前认为,E3,区,为病毒繁殖的,非必需区,，缺少大部分或全部,3,区，病毒仍能繁殖。在腺病毒的基因治疗中，通常去除该结构。,最近发现,Ad5 E3,区,编码蛋白在病毒释放、侵袭和减弱宿主针对病毒的免疫反应方面占有重要地位。,CV787,与,CN706,相比对前列腺癌的杀伤力及特异性均明显提高，,CV787,可以杀伤远处转移的前列腺癌细胞。,1999,年,10,月，,Calydon,用,CV787,对前列腺癌患者进行,/,期临床治疗。,目前，该研究中心正在针对晚期前列腺,转移癌患者,，对静脉注射,CV787,的安全性、耐受力和,CV787,的抗癌效率进行研究,.,（三）,G207,-,单纯疱疹病毒,(HSV),突变株,编码核苷酸还原酶,该病毒缺失导致脑炎的病毒双拷贝基因,ICP34.5,将报告基因,Lac Z,插入编码核苷酸还原酶的基因,ICP6,，使,ICP6,基因失活。,病毒只能在含有上述酶丰富的、如分裂迅速的癌细胞内复制，而不能在正常细胞中复制,（四）,RNA,病毒,-,呼吸道肠道过滤性病毒,(,Reovirus,),以激活,RAS,信号途径为基础的,RNA,病毒。,感染后，早期病毒激活蛋白激酶,(PKR),，抑制其它基因的转录，阻断病毒蛋白质合成，病毒不能复制,。,通过,ras,信号转导途径,去磷酸化,PKR,，抑制,PKR,活性，使病毒复制、增殖，特异性杀灭,ras,高表达的肿瘤细胞。,In vitro,对,RAS,高表达的乳腺癌、前列腺癌及胰腺癌有相同的疗效,.,in vivo,治疗,RAS,高表达的人胶质瘤,SCID,小鼠，,65%,80%,的小鼠肿瘤明显缩小或消退。,目前正在进行,期,临床试验治疗各种实体瘤。,The schematic illustrates the molecular basis of how the,reovirus,kills cancer cells.,增殖病毒的疗效和毒性受多种因素的影响,肿瘤,本身,的生长力和病毒,抗感染力,肿瘤所在的,位置,；,病毒的用药,途径,；,病毒在肿瘤细胞中的,扩散,能力；,靶细胞表面病毒,受体,的表达量；,经血管注射病毒之后，网状上皮细胞、免疫反应对血流中病毒,清除,力的大小,尝试增强病毒的抗癌能力,在增殖病毒上携带多种,治疗基因,调控病毒的肿瘤特异性,启动子或增强子,，使病毒的表达仅限于肿瘤细胞内；,修饰病毒的,外壳蛋白,使其与特定的肿瘤结合，并增加病毒对肿瘤的亲和力。,四胸腺肽,(,Thymosin,),从小牛、猪等动物胸腺中提取的一类,多肽激素,有生物活性的单肽为,1,、,5,、,7,、,3,和,4,1,不仅可人工合成，而且可利用基因工程通过,E.coli,生产,structure of the bovine 9-thymosin polypeptide,胸腺肽的免疫药理作用,诱导和促进,T,细胞,分化、成熟；,调节,T,细胞亚群比例,，使,CD4,/CD8,趋于正常；,刺激,NK,增殖、分化，并增强其活性；,提高,IL-2,的产生水平与,受体,表达水平；,增强外周血单核细胞,IFN-,的产生；,增强,巨噬细胞,的吞噬功能；,增强,红细胞免疫,功能；,增强血清中,超氧化物岐化酶,(SOD),活性。,第二节 特殊类型的,BRMs,一,小剂量化疗药物,烷化剂,：小剂量环磷酰胺,(CTX,cyclophosvnamide,),直接,细胞毒作用：在肝微粒体酶催化下分解释出烷化作用很强的氯乙基磷酰胺,(,或称磷酰胺氮芥,),。,免疫调节,作用：,抑制,Treg,cells,活性和修饰肿瘤细胞表面，使免疫效应更易识别并杀伤肿瘤细胞。,提高,CD4,+,辅助性,T,淋巴细胞的数量及功能。,增加,CD4,+,/CD8,+,比值，全面调动机体的免疫功能。,其他,常用化疗药：,6-,巯基嘌呤（,6-mercaptopurine,），氨甲喋呤（,MTX,，,Amethopterin,）,第二节 特殊类型的,BRMs,二、,H2,受体拮抗剂及“质子泵”拮抗剂,H2,受体拮抗剂,西咪替丁（甲氰咪胍）、盐酸雷尼替丁等，主要用于减少胃酸分泌、抗溃疡病。,作用：,与组胺,2,（,H2,）受体结合，竞争性地抑制组胺的作用。,通过与免疫抑制细胞（,T,S,）,细胞的,H,2,受体结合，可以阻止组胺对,T,S,细胞的活化作用，从而增强机体的免疫功能，从而阻止肿瘤转移和延长存活期。,第五章 细胞因子疗法,研究简史,1957,年，发现干扰素（,IFN,）,1969,年，提出淋巴因子（,lymphokine,）的概念,1974,年，定名细胞因子（,cytokine,）,定义：是由免疫细胞如淋巴细胞、单核巨噬细胞及其相关细胞产生的，调节其他免疫细胞或靶细胞功能的可溶性蛋白,Mj,macrophage,IL-1,Activated,Th1 cell,a,A,D,P56,B,C58,B,C,NH,2,COOH,IL-2,第一节 细胞因子的概念和作用特点,（一）根据产生细胞因子的,细胞种类不同,分类,淋巴因子,(,lymphokine,),：,lymphocytes(T cells,B cells,NK cells etc.),including IL-2,、,IL-3,、,IL-4,、,IL-5,、,IL-6,、,IL-9,、,IL-10,、,IL-12,、,IL-13,、,IL-14,、,IFN-,、,TNF-,、,GM-CSF etc.,单核因子,(,monokine,),：,monocytes,and macrophages,including IL-1,、,IL-6,、,IL-8,、,TNF-,、,G-CSF,、,M-CSF etc.,其它细胞产生的细胞因子,：主要由上皮细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞、骨髓和胸腺中的基质细胞等细胞产生，如,EPO,、,IL-7,、,IL-11,、,SCF,、,IL-8,和,IFN-,等。,IL-2,第一节 细胞因子的概念和作用特点,（二）根据细胞因子主要的,功能不同,分类,白细胞介素,(interleukin,，,IL),集落刺激因子（,colony stimulating factor,CSF),干扰素,(interferon,，,IFN),肿瘤坏死因子,(tumor necrosis factor,，,TNF),趋化因子家族,(,chemokine,family),转化生长因子,-,（,transforming growth factor-,，,TGF-,）,其它细胞因子,：表皮生长因子,(EGF),、血小板衍生生长因子,(PDGF),、血管内皮细胞生长因子,(VEGF),等。,二细胞因子的生物学作用特点,高亲和性和高效性,CK-receptor,高亲和力，是,Ag-,Ab,亲和力的,100,1000,倍，,比,MHC-peptides,亲和力大,10,000,倍以上,一般在,pg(10,-12,g),水平即有明显生物学作用,多效性和重叠性,一种细胞因子可作用于多种靶细胞，产生不同功能,不同细胞因子可作用于同一靶细胞，产生相同或相似的功能,多样性和网络性,相互诱生,细胞因子间相互调节受体的表达,生物活性之间相互影响,与激素、神经肽、神经递质共同组成细胞间信息分子系统,非特异性,对靶细胞发挥功能不受,MHC,限制,Cytokine,gene,Inducing stimulus,Cytokine-producing cell,Cytokine,Gene activation,Receptor,signal,Biological effects,Overview of the induction and function of Cytokine,肥大细胞,胸腺细胞,B,IL-4,多效性,pleiotropy,活化、增殖、分化,增殖,增殖,IL-2,、,IL-4,、,IL-5,IL-4 +IL-5,B,细胞,IL-4,IFN-,g,拮抗性,antagonism,重叠性,redundancy,协同性,synergy,均有刺激,B,细胞增殖的功能,更有效地诱导,IgE,类别转换,IFN-,g,阻断,IL-4,诱导,类别转化的作用，,IL-4,抑制,IFN-,g,B,B,B,网络性,NK1,+,T,TH1,M,IL-4,骨髓基质细胞,IL-1 IL-6 IL-7 SCF,造血干细胞,IL-1 IL-6 IL-11 TNF-,a,GM-CSF G-CMF M-CSF,单核细胞,TH2,B,中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,IL-1 IL-8 TNF-,a,IL-1 TNF-,a,IL-10 IL-4,IL-4 IL-6,IL-10 IL-13 IL-4 TGF-,b,IL-4 IL-5 IL-6 IL-13 IL-10 TGF-,b,IL-4,IL-4,内皮细胞,IL-4,Tc,IL-4,IL-2 IFN-,g,IL-10 IL-13 IL-4,NK,细胞,IFN-,g,IL-2,IL-2 IFN-,g,IL-2,IL-2 IL-12,G-CMF IFN-,g,GM-CSF,IL-12,IL-1 TNF-,a,TGF-,b,PDGF FGF,M-CSF GM-CSF,内皮细胞,纤维母细胞,下 丘 脑,IL-1 TNF-,a,M-CSF GM-CSF,IL-1 IL-6 TNF-,a,IL-4,IL-6,IL-4,自分泌,autocrine,内分泌,endocrine,血液循环,远距离作用,旁分泌,paracrine,作用于比邻细胞,1,.,细胞因子发挥作用的三种方式,作用于分泌细胞自身,三、细胞因子的抗肿瘤机制,对肿瘤细胞的,直接,毒性作用（,direct,cytotoxic,）；,控制,癌细胞的,生长,和,促进分化,(control),；,调节,宿主的,免疫应答,(regulate),；,破坏,肿瘤细胞,血管,和,营养供应,(anti-angiogenesis),；,促进骨髓,恢复造血,功能的作用,(recover),。,64,1.,白细胞介素（,IL,）,2.,干扰素（,IFN,）,3.,肿瘤坏死因子超家族（,TNF,）,4.,集落刺激因子（,CSF),5.,趋化因子（,chemokine,）,6.,生长因子（,GF,）,第二节,CKs,的主要特性与临床,一,.,白细胞介素,(,Interleukin,IL,),介导白细胞间相互作用的细胞因子，包括,IL-1IL-29,IL-13,IL-2,IL-4,IL-2,1976,年，,Morgan,等发现小鼠脾细胞培养上清中含有一种刺激,胸腺细胞,生长的因子，由于这种因子能促进和维持,T,细胞长期培养，称为,T,细胞生长因子（,T cell growth,factor,TCGF,）；,1979,年，统一命名为,IL-2,IL-2,活化 的,Th1,细胞,a,A,D,P56,B,C58,B,C,NH,2,COOH,105,133,个氨基酸，分子量,15KDa,活化,Th1,细胞,NK,细胞,IL-2,促进细胞增,殖，分化，,与,Ig,合成,促进增殖、产生淋巴因子,活化（,LAK,）,并诱导杀伤细胞产生,IFN-,、,TNF-,等细胞因子,T,细胞,B,细胞,巨噬,细胞,NK,细胞,与,IFN-,等细胞因子一起激活单核巨噬细胞的功能,IL-2,的 免 疫 生 物 学 效 应,IL-2,的临床应用,(1),IL-2,的抗肿瘤作用,直接或联合化疗药物胸腔内注射，可控制癌性胸腺水。,调动免疫系统，,IL-2,低剂量连续给药加,IFN-,、化疗等。,在体外诱导,PBMC,或,TIL,成为,LAK,、,CIK,、,DC/CTL,对肾细胞癌、黑素瘤、非何杰金氏淋巴瘤等有不同程度的疗效。,用于手术、放疗及化疗后，增强机体免疫功能。,(2),治疗感染性疾病,（,3,）作为佐剂与免疫原性弱的亚单位疫苗联合应用,（,4,）治疗自身免疫型疾病,针对,IL-2R,的治疗,伤害表达,Tac,的细胞,在骨髓移植中如,除去,Tac,阳性供体细胞,可以降低移植物抗宿主反应,(GVHR),，现已进入,期临床验证。,用,抗,IL-2R,McAb,选择性地封闭、消除活化的效应细胞，治疗同种异体移植物排斥反应及某些自身免疫性疾病。,阻断功能性,IL-2,信号传导,，主要是针对,IL-2R,链。,应用抗,IL-2R,抗体或,IL-2,与抗肿瘤抗体或化疗药物等耦联,，将增加肿瘤对抗体和化疗药物的摄取，,靶向性治疗高表达,IL-2R,的疾病。,二,.,集落刺激因子,(Colony stimulating factor,CSF),刺激不同发育阶段的造血干细胞和祖细胞增殖、分化，在半固体培养基中形成相应细胞集落，,GM-CSF,G-CSF,M-,CSF,Epo,Tpo,G-CSF,GM-CSF,CSF(colony,-stimulating factor),GM-,CSF(granulocyte,-macrophage-CSF),G-CSF(granulocyte-CSF),M-CSF(macrophage-CSF),SCF(stem cell factor),EPO(Erythropoietin):,红细胞生成素,TPO(,thrombopietin,),：血小板生成素,集落刺激因子的作用,CFU-GEMM,：,CFU-granulocyte/,erythroid,/macrophage/,megakaryocyte,粒,/,红,/,巨噬,/,巨核集落形成单位,造血因子的使用,GM-CSF,：,Granulocyte-macrophage colony stimulating factor,粒,巨噬细胞集落刺激因子,G-CSF,：,Granulocyte,colony,-,stimulating,factor,粒,巨噬细胞集落刺激因子,SCF,：,stem cell factor,干细胞因子,IL-3,：,interlukin-3,白介素,-3,IL-11,：,interlukin-11,白介素,-11,IL-8,：,interlukin-8,白介素,-8,IL-1,：,interlukin-8,白介素,-1,MIP-1,：,Macrophage,Inflammatory Proteins,巨噬细胞炎症蛋白,1,PIXY321,：,重组人,GM-CSF/IL-3,融合蛋白,洁欣,重组人粒细胞集落刺激因子,国家,类新药,广东省科技进步二等奖,转让：江苏吴中实业股份有限公司,三,.,干扰素,(,Interferon,IFN,),抵抗病毒的感染,干扰病毒的复制，包括,IFN-,IFN-(I,型,);,IFN-,(II,型,),。,IFN,IFN,IFN-,a,的抗病毒作用,病毒,病毒复制,抑制病毒复制,信号转导,IFN-,a,IFN-,诱导蛋白,诱导刺激,胞核,胞核,干扰素并不能直接杀伤病毒，而是诱导宿主细胞产生数种酶，干扰病毒的基因转录或病毒蛋白组分的翻译,II,型干扰素,（,Type II interferon,）,IFN-,g,CD8,+,T,细胞、,CD4,+,T,细胞、,NK,细胞产生,18KDa,IFN-,免疫生物学效应,促进,MHC-II,表达，抗微生物活性，抗肿瘤活性,TNF-,合成，,Fc,表达,巨噬,细胞,B,细胞,病毒感染细胞,T,细胞,促进,IL-2,产生，,IL-2R,表达增强,IV,型超敏反应,移植物排斥反应,细胞毒性,IFN-,促进,IgG3,和,IgG2a,的产生，,抑制,CD23,表达,IgE,产生,促进活化,杀伤,NK,细胞,抑制病毒复制、扩增,应,用,IFN-,:,毛细胞白血病、,Kaposi,肉瘤、,T,细胞白血病、各种慢性肝炎,IFN-,b,:,治疗多发性硬化,IFN-,g,：治疗类风湿关节炎、慢性肉芽肿,四、肿瘤坏死因子,(Tumor necrosis factor,TNF),可直接诱导肿瘤细胞,凋亡,包括,TNF-,TNF-,(,Lymphotoxin,T,）,TNF-a,TNF-,TNF,-,a 157,aa,活化的,T,细胞,(tumor necrosis,factor,TNF,),分为,:,TNF,-,a,TNF,-,b,淋巴毒素,(,lymphotoxin,-,a,LT-,a),TNF,-,b,=,LT,a,171,aa,活化的巨噬细胞,同源性,28%,相同的受体,相同的生物学效应,IL-2 IL-4,g,-IFN,上调细胞因子产生水平（,IL-2,，,IL-4,，,g,-IFN,，,CSF,）,上调,IL-2,受体的表达,TNF-,a,诱导分化 上调抗体 产生数量,上调前列腺素产生水平，上 调细胞因子产生水平（,IL-1,，,IL-6,，,IL-8,，,GM-CSF,）,趋化并活化中性粒细胞,杀伤或抑制肿瘤细胞,TNF,-,a,的生物学活性,B,细胞,中性粒细胞,Mj,巨噬细胞,T,细胞,TNF,生物学功能,TNF,杀伤肿瘤组织细胞机理,直接,杀伤或抑制作用：,TNF,与相应受体结合后向细胞内移，被靶细胞溶酶体摄取导致溶酶体稳定性降低，各种酶外泄，引起细胞溶解；,通过,TNF,对机体,免疫功能的调节作用,，促进,T,淋巴细胞及其它杀伤细胞对肿瘤细胞的杀伤；,TNF,作用于血管内皮细胞，损伤内皮细胞或导致血管功能紊乱，使血管损伤和血栓形成，造成肿瘤组织的,局部血流阻断,而发生出血、缺氧坏死。,转化生长因子,-,（,transforming growth factor-,TGF-,）,新近发现的调节细胞生长和分化的,TGF-,超家族。,还有抑制素,(,inhibins,),、活化素,(,activins,),、缪勒氏管抑制物质,(,Mullerian,inhibitor substance,，,MIS),和骨形成蛋白,(bone morphogenetic proteins,，,BMPs,),TGF-,的生物学活性,对细胞表型的调节,抑制免疫活性细胞的增殖,抑制淋巴细胞的分化,抑制细胞因子产生,其它调节作用,其他细胞因子,血管生成素（,angiogenin,ANG,）,表皮生长因子（,epidermal growth factor,EGF),转化生长因子,-,（,transforming growth factor.TGF-,）,肝素结合,EGF,样生长因子（,heparin-binding EGF-like growth factor,HB-EGF,）,成纤维细胞生长因子（,fibroblast growth factor,FGF,）,肝细胞生长因子（,hepatocyte,growth factor,HGF,）,胰岛素样生长因子（,insulin-like growth factor,IGF,）,神经生长因子（,nerver,growth factor,NGF,）,血小板衍生的生长因子（,platelet derived factor,PDGF,）,血管内皮细胞生长因子,vascular endothelial growth factor,VFGF,）,多效素（,pleiotrophin,PTN,）,the severe systemic toxicity,at doses far below those required mediating anti-,neoplastic,or adjuvant effects,limited its clinical use to,locoregional,treatment,Schematic,isolated limb perfusion,for large soft tissue sarcoma in the upper leg,Efficacy of TIM-ILP on bulky melanoma metastases.,The patient,a 70-year old woman with bulky in-transit melanoma metastases on a lower limb,had been considered for hip,exarticulation,in other hospitals.She received one TIM-ILP through the iliac vessels.From left to right:presentation on the day of TIM-ILP;on day 14,extensive necrosis,and,on day 44,complete response.The patient enjoyed CR for 9 months and thereafter developed extensive visceral metastases and died from disease.,思考题,BRMs,、,cytokin,、肿瘤增殖病毒,生物反应调节剂（,BRMs,）的种类,生物反应调节剂（,BRMs,）的抗肿瘤作用机制,增强病毒的抗癌能力的策略,细胞因子的生物学作用特点,细胞因子的抗肿瘤机制,