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2025年高职（生物制药技术）生物药物制备试题及答案

（考试时间：90分钟 满分100分）
班级______ 姓名______

第I卷（选择题 共40分）
（总共20题，每题2分，每题只有一个选项符合题意，请将正确答案填在括号内）
1. 生物药物制备过程中，以下哪种技术常用于细胞破碎？（ ）
A. 过滤 B. 离心 C. 超声破碎 D. 蒸馏
2. 从动物组织中提取生物药物时，首先要进行的步骤是（ ）
A. 分离纯化 B. 细胞破碎 C. 原材料预处理 D. 浓缩
3. 蛋白质类生物药物常用的分离纯化方法是（ ）
A. 离子交换色谱 B. 气相色谱 C. 酸碱滴定 D. 重结晶
4. 生物药物制备中，用于去除热源的方法是（ ）
A. 高温灭菌 B. 超滤 C. 活性炭吸附 D. 冷冻干燥
5. 以下哪种酶在基因工程药物制备中用于切割DNA？（ ）
A. 淀粉酶 B. 限制性内切酶 C. 蛋白酶 D. 脂肪酶
6. 细胞培养过程中，培养基的pH值一般维持在（ ）
A. 4.0 - 5.0 B. 5.5 - 6.5 C. 7.2 - 7.4 D. 8.0 - 9.0
7. 生物药物制备中，超滤的主要作用是（ ）
A. 分离大分子和小分子 B. 去除色素 C. 调节pH值 D. 浓缩溶液
8. 用于蛋白质复性的常用方法是（ ）
A. 透析 B. 盐析 C. 电泳 D. 层析
9. 从血液中提取凝血因子的主要方法是（ ）
A. 沉淀法 B. 亲和色谱 C. 离子交换色谱 D. 凝胶过滤色谱
10. 生物药物制备中，发酵工程常用的微生物是（ ）
A. 大肠杆菌 B. 酵母菌 C. 霉菌 D. 以上都是
11. 基因工程药物表达载体构建时，需要的元件不包括（ ）
A. 启动子 B. 终止子 C. 核糖体 D. 多克隆位点
12. 蛋白质的一级结构决定于（ ）
A. 基因 B. 二级结构 C. 三级结构 D. 四级结构
13. 生物药物制备中，凝胶过滤色谱分离蛋白质的原理是（ ）
A. 根据蛋白质的电荷 B. 根据蛋白质的分子量大小 C. 根据蛋白质的亲和力 D. 根据蛋白质的疏水性
14. 用于细胞固定化的材料不包括（ ）
A. 海藻酸钠 B. 明胶 C. 硅胶 D. 纤维素
15. 生物药物制备过程中，以下哪种操作可以提高产物的纯度？（ ）
A. 增加反应时间 B. 降低反应温度 C. 多次纯化步骤 D. 减少反应物浓度
16. 蛋白质的等电点是指（ ）
A. 蛋白质带正电荷时的pH值 B. 蛋白质带负电荷时的pH值 C. 蛋白质净电荷为零时的pH值 D. 蛋白质变性时的pH值
17. 生物药物制备中，离子交换树脂的再生方法通常是（ ）
A. 用酸或碱处理 B. 加热 C. 过滤 D. 透析
18. 从植物中提取生物碱常用的方法是（ ）
A. 水提取法 B. 醇提取法 C. 酸碱提取法 D. 以上都可以
19. 生物药物制备中，用于检测蛋白质含量的方法是（ ）
A. 双缩脲法 B. 碘量法 C. 酸碱滴定法 D. 重量法
20. 基因工程药物生产中，常用的宿主细胞是（ ）
A. 动物细胞 B. 植物细胞 C. 微生物细胞 D. 以上都可以

第II卷（非选择题 共60分）
21. （10分）简述生物药物制备的一般工艺流程。
22. （10分）请说明蛋白质分离纯化的主要方法及其原理。
23. （10分）在基因工程药物制备中，如何构建高效表达载体？
24. （15分）阅读材料：在生物药物制备过程中，某研究小组从动物肝脏中提取一种酶。首先对肝脏进行匀浆处理，然后通过离心分离出细胞碎片和上清液。接着采用硫酸铵沉淀法初步分离酶蛋白，再用离子交换色谱进一步纯化。
问题：请分析该过程中每个步骤的目的及原理。
25. （15分）阅读材料二：某生物制药公司计划生产一种新型的基因工程疫苗。他们首先构建了含有目标基因的表达载体，然后将其导入合适的宿主细胞中进行表达。在表达过程中，遇到了蛋白质表达量低且活性不高的问题。
问题：请针对该公司遇到的问题提出可能的解决方案，并说明理由。

答案：1. C 2. C 3. A 4. C 5. B 6. C  7. A 8. A 9. B 10. D 11. C 12. A 13. B 14. C 15. C 16. C 17. A 18. D 19. A 20. C
21. 生物药物制备一般工艺流程：首先是原材料预处理，对采集的生物样本进行清洗、粉碎等处理。接着进行细胞破碎，使细胞内物质释放出来。然后通过分离纯化方法，如离心、过滤、色谱等，去除杂质，得到目标产物。再对产物进行浓缩、干燥等处理，最后进行质量检测和制剂成型。
22. 蛋白质分离纯化主要方法及原理：盐析，利用不同蛋白质在不同盐浓度下溶解度不同进行分离；离子交换色谱，根据蛋白质所带电荷与离子交换树脂结合能力不同分离；凝胶过滤色谱，依据蛋白质分子量大小在凝胶颗粒中扩散速度不同分离；亲和色谱，利用蛋白质与特定配体的亲和力进行分离。
23. 构建高效表达载体：选择合适的启动子，确保基因高效转录；添加增强子，提高转录效率；设计合适的多克隆位点，便于插入目标基因；含有终止子，使转录准确终止；还需考虑载体的复制原点、筛选标记等元件，以保证载体在宿主细胞中稳定存在和筛选阳性克隆。
24. 肝脏匀浆处理目的是使细胞破碎释放酶，原理是通过机械剪切力破坏细胞结构。离心分离细胞碎片和上清液，目的是去除细胞碎片获得含酶的上清液，原理是利用细胞碎片和上清液密度不同实现分离。硫酸铵沉淀法初步分离酶蛋白，原理是不同蛋白质在不同硫酸铵浓度下溶解度不同。离子交换色谱进一步纯化，原理是根据酶蛋白与离子交换树脂上离子基团亲和力不同进行分离。
25. 对于蛋白质表达量低的问题，可能解决方案：优化表达载体，调整启动子、增强子等元件，提高转录效率；优化培养条件，如调整温度、pH值、培养基成分等，为蛋白质表达提供适宜环境。对于蛋白质活性不高的问题，可能解决方案：采用合适的复性方法，如透析等，使变性的蛋白质恢复活性；添加分子伴侣等辅助因子，帮助蛋白质正确折叠形成活性构象。