实验一：细胞凝集反应和细胞膜的渗透性.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验一 细胞凝集反应实验二细胞膜的渗透性,【,课前预习,】,1,土豆凝集素的本质及其使红细胞凝集的原理？,2,在等渗溶液中细胞一定能维持正常形态吗？,3,预测红细胞在各种溶液中的溶血速度？,一、实验目的,1,了解细胞膜的表面结构；,2,了解细胞糖被的特点和功能，了解植物凝集素的作用,3,了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度,二、实验的原理,1.,细胞凝集反应,细胞膜表面的有分支状糖外被，细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支状糖分子有关。凝集素（,lectin,）是一类含糖并能与糖分子专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞表面间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。,2.,细胞膜的渗透性,在低渗液中，红细胞很快吸水胀裂，称为溶血。在等渗液中，由于有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高,，,细胞也会吸水胀裂，由于各种物质透入细胞的速度不同，溶血的时间不同,三、实验用品,1.,器材,:,显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、烧杯、,10ml,移液管、试管、试管架,2.,材料,:,土豆块茎,3.,试剂,:,鸭血红细胞、抗凝血剂、,PBS,、土豆块茎、,0.85,生理盐水、,2,鸡红细胞、,PBS,缓冲液、,Alsever,溶液、,0.17M,氯化钠、,0.17M,氯化铵、,0.17M,醋酸胺、,0.17M,硝酸钠、,0.17M,草酸铵、,0.17M,硫酸钠、,0.17M,葡萄糖、,0.17M,甘油、,0.17M,乙醇、,0.17M,丙酮,四、实验步骤,(,一,),细胞凝集反应,1.2,鸡血红细胞悬液制备,新鲜鸡血加抗凝剂，生理盐水洗,5,次，每次,2000r/min,，离心,5min,，按红细胞压积用生理盐水配成,2,鸡血红细胞悬液。,2.,土豆凝集素制备,土豆,2,克，加,10ml PBS,，浸泡,2h,。,3.,细胞凝集反应,土豆凝集素,1,滴、,2,鸡血红细胞液,1,滴。,载玻片上混匀，静置,20min,。,4.,对照,PBS1,滴、,2,鸡血红细胞液,1,滴。,（二）细胞膜的渗透性,1.,低渗溶液,试管一支：,鸡血红细胞液,1ml,；,蒸馏水,10ml,；,结果溶血，溶液变透明。,2.,等渗溶液,0.17M,氯化钠、,0.17M,氯化铵、,0.17M,醋酸胺、,0.17M,硝酸钠、,0.17M,草酸铵、,0.17M,硫酸钠、,0.17M,葡萄糖、,0.17M,甘油、,0.17M,乙醇、,0.17M,丙酮,未溶血,溶血,【,实验结果,】,1,土豆凝集素能使鸡红细胞凝集，,PBS,对照液中红细胞分散均匀,未凝血,凝血,2,细胞膜渗透性实验结果比较和分析,【,实验报告,】,1,简图表示凝集素使血细胞凝集原理,2,怎样根据细胞膜渗透性实验结果分析确定物质进入细胞的速度？物质进入细胞的快慢有什么规律？,