洁净车间员工微生物培训.ppt

,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,洁净厂间员工,卫生及微生物知识培训,1,医疗器械生产质量管理规范,植入性医疗器械实施细则,明,确规定：,生产企业应当确定出产品生产中须避免污染、在相应,级别洁净室（区）内进行生产的过程。,在,洁净室区内的人员数量严格控制的基础上。洁净区内的工作,人员（包括维修、辅助人员）应定期进行,卫生和微生物学,基础,知识、洁净作业等方面的培训及考核；对进入洁净室区的临时,外来人员应进行指导和监督。,法规要求,2,我们所生活的环境中，到处都存在着大量的微生物。在一般空气,中，微生物达,8003500,个,/m3,，在土壤中达,1500108,个,/g,，在严,重污染的水中可达,107,个,/ml,。（饮用水要求细菌总数,100,个,/ml,，,大肠杆菌,3,个,/ml,。,),经水塔或贮水池贮存后，短期内可繁殖至,105106,个,/ml,。人的头皮上有,140,万个,/cm2,，两手上约有,440,万,个，,1g,指甲污垢有,38,亿个，,1g,粪便可达,101000,亿个。可以说微生,物是无处不在，无处不有。,许多以前被人们认为是极端（高温、高压、强酸、强碱、低温等）,甚至是致死的环境，现在已发现生活着各种类型的微生物（称为极,端微生物）。事实说明，微生物有特别顽强的生存、繁殖和变异能,力来适应环境。,前言,3,微生物种类繁多，有的对人有益，有的有,害，有的无益也无害。但在器械生产过程中，不,可能对环境中的各种微生物加以区别对待，为保,证器械的安全有效，需要对其进行控制。空气中,的微生物多数附着在灰尘上，或以芽孢形式悬浮,于空气中，,1m,以下者处于悬浮状态，,10m,以,上者会逐渐沉下来而形成菌尘。所以也要对尘粒,进行控制。,前言,4,人是洁净室最大的污染源，占,90%,左右。一般男,性每人每分钟向周围排放,1000,个以上的含菌粒,子，女性为,750,个以上。穿无菌服时，静止时的,发菌量为,10300,个,/min,，一般活动时发菌量为,1501000,个,/min,，行走时发菌量为,9002500,个,/min,。咳嗽一次发菌量为,70700,个,/min,，喷嚏,一次为,400060000,个,/min,。所以在洁净室中，,人的数量和活动应有特别严格的限制。,前言,5,医药工业洁净室（区）必须以尘粒和微生物为环境控制对象。,二者相比，微生物更难以控制,1,、存在范围广。,2,、生长速度快。,3,、生存能力强。,控制对象,6,微生物是什么？,一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物。,形体微小、单细胞或个体结构简单的多细胞、甚或无细胞结构的低等生物。,是生物的一大类，形体微小、构造简单、繁殖迅速，广泛分布在自然界中，是一群在化学显微镜或电子显微镜下放大几千倍，甚至上万倍才能看得到的微小生物。,7,微生物按其结构、化学组成及生活习性等差异可分成三大类：,1,真核细胞型细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体；胞质内有完整的细胞器（如内质网、核糖体及线粒体等）。真菌属于此类型微生物。,2,原核细胞型细胞核分化程度低，仅有原始核质，没有核膜与核仁；细胞器不很完善。这类微生物种类众多，有细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌。,3,非细胞型没有典型的细胞结构，亦无产生能量的酶系统，只能在活细胞内生长繁殖。体积微小，能通过除菌滤器。病毒属于此类型微生物。,微生物分类三大类,8,微生物五大共性,体积小，面积大；,吸收多，转化快；,生长旺，繁殖快；,适应强，易变异；,分布广，种类多。,9,1,细菌（原核单细胞生物）,细菌按形状可分为：球菌（,0.52m,）、杆菌（长,15m,，宽,0.31m,）和螺形菌（大小与杆菌相似）。,按革兰氏染色法染色的不同，分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。革兰氏阳性菌的细胞壁表面含较多的磷壁酸，会产生外毒素，如金黄色葡萄球菌；革兰氏阴性菌的细胞壁表面多含脂蛋白和脂多糖，会产生内毒素（即热原），如大肠杆菌。,细菌一般有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核，有的还有荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞等特殊结构。,细菌一般为无性繁殖，以二分法繁殖，几十分钟或,12,小时分裂一次。,微生物的形态结构,10,2,霉菌（丝状真菌的通称，真核多细胞生物）,霉菌是真菌的一部分。在培养基上长成绒毛状或棉絮状的菌丝体的真菌统称为霉菌。,霉菌细胞呈狭长的管状，称为菌丝。菌丝直径比细菌、放线菌大，约,210m,。菌丝分枝连接，交错集合在一起的总体称为菌丝体。,霉菌大多数是多细胞微生物，菌丝细胞由细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核和各种细胞器组成。细胞壁很薄，往往在表面产生色素，使菌落出现各种颜色。,霉菌靠孢子繁殖，有无性繁殖和有性繁殖两种方式，以无性繁殖为主。,有些真菌可用酿酒造酱，或用于发酵生产柠檬酸、葡萄糖酸、酶、抗生素（如青霉素、头孢菌素）；少数真菌能引起各种真菌病。真菌产生的真菌毒素（如黄曲霉素）有毒。,微生物的形态结构,11,3,酵母菌（真核单细胞生物，属真菌）,酵母菌以单细胞存在，呈圆形、卵圆形和香肠形，比细菌大，细胞长,530m,，宽,15m,。细胞结构有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核和各种细胞器等。,酵母菌的增殖分无性繁殖和有性繁殖两个阶段，有三种方式：芽殖、裂殖、孢子生殖。,酵母菌是重要的工业微生物，用于酿酒，生产单细胞蛋白、,B,族维生素、核酸、辅酶,A,、细胞色素,C,等。一般对人体无害。,微生物的形态结构,12,4,放线菌（原核单细胞生物）,放线菌有生长发育良好的菌丝体，呈分枝状，菌丝宽为,0.21.2m,，革兰氏阳性。其内部构造与细菌相似，无完整的细胞核。菌落常呈幅射状，因此称放线菌。,繁殖方式为无性孢子繁殖。最适,pH6.77.5,，温度,2530,。,放线菌可用于生产抗生素、维生素和酶类，少数可引起人畜放线菌病。,微生物的形态结构,13,5,病毒,病毒是一类体积十分微小，结构简单，只含一种核酸（,DNA,或,RNA,），没有产生能量的酶系统，只能在活细胞内以复制方式增殖的非细胞型微生物。病毒在自然界分布非常广泛，在所有其它生物中都有病毒寄居。病毒是最常见的致病微生物，人类传染病中大约,75%,是由病毒引起的。,病毒体主要由核酸和蛋白质组成。病毒体积微小，最大直径,300nm,（如牛痘病毒），最小直径,20nm,（如口蹄疫病毒），绝大多数在,150nm,以下，能通过细菌滤器，用普通光学显微镜看不见，必须用电子显微镜放大数千至数万倍才能看见。形态多呈球形，少数为杆状或砖形。噬菌体（细菌病毒）有呈蝌蚪状的。,微生物的形态结构,14,1,水分：水占细胞浆的,70%,90%,，是细胞的重要组成成分。较普遍的观点认为：只有在含水的环境中微生物才能存活。但也有人发现在无水碳氢化合物中微生物可长期存活。,2,碳源：碳源是构成细胞的重要物质。有些微生物的碳源必须来自有机碳化合物如糖、蛋白质、脂肪、有机酸等（同时利用其化学能），属异养型；有些微生物不需有机碳化合物，以,CO2,为碳源，属自养型（分为光能自养型和化能自养型）。,3,氮源：氮是组成蛋白质和核酸的重要元素。,4,无机盐类：细菌所需无机盐包括磷、硫、镁、铁、钾、钠、钙、氯、锰、锌、钴、铜等。其中磷、硫、镁、钾、钠、铁需要量较多，其他只需微量。,5,生长因子：生长因子是某些微生物生长发育所必需，而其自身又不能合成的一类营养物质。包括维生素、嘌呤和嘧啶等。,微生物的养分,15,1,营养物,2,pH,值：各种微生物都有其最适宜的,pH,值，大多数细菌最适,pH,为,6.87.4,，但一般有较大的容忍度，在,49,也可存活和生长，少数细菌能在极端,pH,值范围内生长。真菌适于,pH,值,36,的微酸性环境，但在,210,也可生长。,微生物生长的影响因素,16,3,温度：微生物适于生长繁殖要有适宜的温度，当超过其最低或最高可耐受的温度时，即停止生长或死亡。一般细菌最适温度为,3040,，真菌为,2030,。,4,氧气：大多数细菌和所有霉菌都是需氧菌（在有氧环境中才能生长），少数细菌是厌氧菌（在无氧环境中才能生长），有些细菌和酵母菌是兼性需氧厌氧的，在有氧或无氧环境中都能生长繁殖。,微生物生长的影响因素,17,5,渗透压：微生物细胞膜和所有生物膜一样是一种半透膜，可让水自由通过，对溶质则有选择性。由于细胞壁的保护，微生物能存活在低渗透压的水中。而在高渗溶液（如高浓度的盐溶液或糖溶液、,40%,甘油）中，细胞会脱水并停止生长繁殖。但也有一些专性耐高盐细菌只有在高盐（,1015%,）条件下才生长。,微生物生长的影响因素,18,6,表面张力：表面活性剂可降低表面张力，它是影响细菌生长的因素之一。很多革兰氏阴性菌，特别是大肠菌群可很好地在表面活性剂包围的介质中生长，而大多数革兰氏阳性菌在表面张力低时（,0.05N/m,）不能很好生长。阳离子表面活性剂对很多有机体有毒性，阴离子表面活性剂毒性很小，非离子表面活性剂几乎没有毒性，并可成为某些微生物的营养物。,微生物生长的影响因素,19,消毒与灭菌是微生物实验技术中最基本的,操作，从事器械生产和检验的人员都应当,了解消毒与灭菌的方法及其意义，严格遵,守操作规程，否则会影响产品质量，危害,患者安全。,消毒与灭菌,20,无菌,不存在活的生物（,GMP,指南）。,“,无菌,”,从定义上来说是一个绝对的概念，但遗憾的是，在科学和技术高度发展的今天，器械的绝对无菌即做不到，也无法加以证实。然而，器械的安全性要求人们设定无菌的相对标准。,FDA,、欧洲制药工业界曾将百万分之一微生物污染率作为灭菌产品,“,无菌,”,的相对标准，它和蒸汽灭菌后产品中微生物存活的概率为,10,-6,这一标准如今已为世界各国普遍接受和采用。,消毒与灭菌,-,慨念,21,灭菌,使达到无菌状态的方法（,GMP,指南）。用物理或化学方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌。通常是指杀灭或除去全部活的微生物（包括繁殖体和芽孢）。,消毒,用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使其达到无害化。通常是指杀死病原微生物的繁殖体，但不能破坏其芽孢。所以消毒是不彻底的，不能代替灭菌。,消毒与灭菌,-,慨念,22,消毒与灭菌,-,常用消毒剂,消毒剂,常用量,用途,乙醇,70%75%,水溶液,0.5%,洗必泰溶于,70%,乙醇，再加入,2%,甘油,用于皮肤、器具等消毒,供洗手用消毒,异丙醇,75%,水溶液,用于皮肤、器具等消毒,甲醛,37%40%,甲醛液,89ml,，再加入,45g,高锰酸钾,每,m,3,熏蒸量，密闭,1224h,。刺激性强,戊二醛,2%,水溶液,用于空气、器具等消毒。广谱、高效、低毒，可杀芽孢和病毒。刺激性较轻。,新洁尔灭（苯扎溴铵）,0.1%,水溶液,用于皮肤、粘膜、器具等消毒，有清洁和消毒双重功效。抗菌谱较窄。,杜灭芬（消毒宁）,0.05%0.1%,水溶液,用于皮肤、器具等消毒,过氧乙酸,0.2%0.5%,水溶液,新配,0.5%,水溶液,1g/m,3,用于器具等消毒抗菌谱广，可,用于皮肤消毒杀灭某些病毒,熏蒸但性质不稳定,乳酸,0.331mol/L,11.5ml/m,3,熏蒸或与等量苯酚合用熏蒸,喷雾，用于空气消毒，有强杀菌作用,熏蒸，密闭,12h,以上,麝香草酚,5%,麝香草酚溶于,50%,乙醇,喷洒墙面、地面，杀霉菌,23,1,）,干热灭菌法,常见的有火焰、烧灼、干烤和红外线灭菌等。,火焰、烧灼：通常用于实验室无菌操作中金属或其它耐火材料制成的器具的灭菌。,干烤和红外线：利用干热空气或热辐射进行灭菌。一般,135145,需,35h,，,160170,需,2h,以上，,170180,需,1h,以上，,180200,需,0.51h,。除热原则需,25030min,，或,20045min,，,1802h,。,空气传热慢，穿透力不强，故干热灭菌时间长。干热灭菌时烤箱内装入物品应留有空隙，以利空气流动，否则使箱内温度不均，部分物品灭菌不彻底。,消毒与灭菌,-,常用灭菌法,24,2,）,湿热灭菌法,通过热蒸汽或沸水使蛋白质变性而杀灭微生物的方法。湿热穿透力强，灭菌效果较干热好。,煮沸或流通蒸汽灭菌：常压下沸水和蒸汽的温度是,100,，一般处理,3060min,可杀死细菌繁殖体，但不能完全杀灭芽孢。此法适用于不能高压蒸汽灭菌的物品。,低温间隙灭菌（巴斯德灭菌法）：将物品先用,6080,加热（或煮沸）,1h,，然后置,2025,保存,24h,（或常温过夜），使其中残存的芽孢萌发成繁殖体，再用以上条件灭菌，如此反复三次。本法适用于不耐高温或高温下易变质的物品，但很费时。,高压蒸汽灭菌（热压灭菌法）：超过一个大气压时，水的沸点高于,100,，反之亦然。高压蒸汽灭菌就是通过加压提高蒸汽温度，灭菌效果最好。它简便、经济、可靠、无毒，是最可靠、应用最广泛的灭菌法。此法适用于耐高温和潮湿的物品。常用条件为：,115.5 30min,121.5 20min,126.5 15min,消毒与灭菌,-,常用灭菌法,25,3,）,化学灭菌法,利用化学试剂形成的气体来杀灭微生物的方法。常用的灭菌剂为环氧乙烷（又称氧化乙烯）。环氧乙烷是广谱杀菌剂，能杀灭细菌、芽孢和多种病毒，还能杀死昆虫及虫卵。但由于环氧乙烷易燃易爆且有毒（有致变异性），用于药品方面极有限，多用于医疗器械、塑料制品等灭菌。（不能用于橡胶和乳胶手套，能将其溶解。）,消毒与灭菌,-,常用灭菌法,26,4,）,辐射灭菌法,辐射有两种类型：一种是电磁波辐射，如紫外线、红外线、微波；一种是电离辐射，如可引起被照射物电离的,X,射线、,射线。,消毒与灭菌,-,常用灭菌法,27,紫外线：紫外光波长在,136390nm,之间，其中,260nm,左右能破坏核酸，杀菌作用最强。另外，空气中的氧受紫外线照射后，可微量转变为臭氧共同起杀菌作用。紫外线消毒的效果与光源的功率、光源与被照射物的距离、照射时间、温度和湿度等因素有关。我国规定紫外灯照射强度在距离,1m,处不低于,70W/cm2,（以紫外线测强仪测定）。在操作面上要求强度,40W/cm2,以上。一般每,10m2,装,30W,灯管,1,支，工作前,3060min,。紫外线的穿透力很弱，不能穿透一般包装材料，如玻璃、塑料薄膜、纸等。因此，它主要用于空气和物体表面消毒，特制的紫外灯装置也可用于水的消毒。,消毒与灭菌,-,常用灭菌法,28,1.,葡萄球菌：可引起局部感染,2.,大肠杆菌：胆道及尿道感染,3.,绿脓杆菌：化脓性感染、中耳炎、肺炎,4.,枯草杆菌：结膜炎,5.,酵母菌：使糖分解，药液产生有机酸,6.,霉菌：使制剂霉坏、酸败变质,常见污染器械的微生物,29,洁净车间内微生物在哪里？,空气,水,人员,器具,30,1.,空气中的微生物,灰尘,“,微生物的飞行器,”,。,微生物不是凭空存在的，,99%,的微生物都附在颗粒上。控制空气中的微粒数，就是控制了微生物数量。,灰尘、微粒具有沉降和粘附的趋势，所以同一区域内，地面是微粒相对集中的地方，也是微生物相对较多的地方，墙壁也容易粘附灰尘。,31,利用过滤技术将每升空气中含有的以十万计甚至百万计的灰尘颗粒,降低到每升空气中只含有几粒,几百,几千粒的不同净化等级,以控制空间的含尘数量,.,洁净室,32,98,版,GMP,洁净度,级别,尘粒最大允许数,/,立方米,微生物最大允许数,0.5m,5m,浮游菌,/,立方米,沉降菌,/,皿,100,级,3,500,0,5,1,10,000,级,350,000,2,000,100,3,100,000,级,3,500,000,20,000,500,10,300,000,级,10,500,000,60,000,1,000,15,33,Air lock,两扇门不能同时打开,Air Lock,外包间,洁净区走廊,Or DISP,高效过滤器,高效过滤器,气流,34,控制空气对流，减少外界脏空气中的微粒、灰尘进入车间。,须保持门的关闭，不得同时开启。,缓冲间,/,传递窗作用,35,空气自净有死角,顶送顶回（洁净走廊），地面,顶送侧回（清洗间，操作间），对面的墙角，,顶棚。,微粒沉降和粘附,不得跑跳、大声喧哗。,不靠在墙上或其他物体上。,空气自净和微粒的沉降与粘附,36,2,水,水是生命之源，有水的地方就有生命,水微生物的乐园,水体是微生物广泛分布的第二个天然环境。,水中的细菌来自土壤、尘埃、污水、人畜排泄物及垃圾等,。,37,医疗器械生产质量管理规范,明确规定：,工艺用水的制备、储存和分配应能防止微生物的滋生和污染,。储罐和输送管道所用材料应无毒、耐腐蚀。管道的设计和安装应避免死角、盲管。储罐和管道要规定清洗、灭菌周期,。,法规,38,水源：城市自来水、井水等达到饮用水标准的水源。,产品容器：,容器清洗：饮用水,容器最终淋洗：净化水,产品：,前道清洗：净化水,最终淋洗：净化水,水质的要求,39,制备纯化水的水源,容器的初洗,应符合卫生部生活饮用水标准,水质类别,-,饮用水,40,制备注射用水的水源,包装材料最后一次洗涤用水,产品最后一次洗涤用水,应符合中国药典标准,水质类别,-,纯化水,41,纯水由于去除了水中的余氯，特别容易滋长微生物。,必须放在干净处保存。,纯水管中不能有积水。,否则再使用时，微生物会污染整根管道。,纯水管的放置,42,3,人,1,、人在代谢过程中会释放和分泌污染物。,2,、人体表面、衣服能沾染、携带污染物。,3,、人在洁净室内的各种动作也会产生微粒和微生物。,洁净室中最大的微生物污染源,43,1,、皮肤：表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、八叠球菌属细菌、类白喉棒杆菌、,金黄色葡萄球菌,等,2,、口腔：唾液链球菌、溶血链球菌、乳酸杆菌、流感杆菌、类白喉棒杆菌等,3,、上呼吸道：包括喉、鼻道和鼻咽。甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等。,4,、下呼吸道：包括气管、支气管和肺,。健康人的下呼吸道是无菌的。,5,、胃肠道：,大肠埃希氏菌,、产气杆菌、变形杆菌、粪产碱杆菌、粪链球菌、梭杆菌属、螺旋体属、乳杆菌属、梭菌属、拟杆菌属中的一些种,6,、泌尿生殖道：常见的有嗜酸乳杆菌、类白喉棒杆菌、葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌,人体内外微生物的分布,44,进入洁净室（区）的人员不得化妆和佩带饰物，不得裸手直接接触器械。,无菌工作服必须包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物。,如何阻断人体污染源,45,一次更鞋：阻断外界粘在鞋底的垃圾、颗粒及微生物。相对而言，脚底是最脏的部分。,脱去外套：阻断外界沉降在外套上的颗粒和微生物。,一更洗手：规范的洗手能消除手部皮肤的污垢和大部分的微生物。,洗手一定要用洗手液和充足的流水,。,二更,带口罩：阻断鼻腔、呼吸道的微生物发散，,洁净区内不能脱下口罩,带发套：阻断头发、头皮表面的微生物发散。,保证发套完整的包裹头发。,穿连体服：阻断体表皮肤的微生物发散。,洁净区内不能解开连体服,手消毒：再次消除手部的细菌和微生物。,75%,的酒精能杀灭,99%,的微生物。,二次更鞋：阻断一更、二更内沉降在地板上的颗粒和微生物。,洁净区工作鞋不能穿出二更的鞋箱外。,我们的更衣流程,46,勤洗澡、洗头，勤换内衣,去除皮屑、头屑等人体脱落物，保持体表洁净。,勤剪头发,工作时，头皮不容易出汗，易被纸发套全部包裹。,勤剪手指甲,指甲内能够藏污纳垢，有很多的致病微生物。,勤换鞋,准备两双鞋每天交替穿着，保证鞋内干燥无异味。,平时的卫生习惯,47,清洗：,最后淋洗用水，纯净水,。,清洗后按要求包装并有清洁标签，注明清洁日期、有效期至和清洗人,储存有效期，,混合器，,7,天,；,部件,，包括不锈钢桶、,Bar,、筛网等，,30,天,4.,器具,48,杀灭物体上病原微生物。,并不一定杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。,用来消毒的药品叫消毒剂。,一般消毒剂在常用浓度下只对细菌的繁殖体有效，对其芽孢则需提高消毒剂的浓度和延长作用时间。,细菌和其他微生物会对消毒剂产生抗药性。消毒剂必须交替使用。,消毒的作用,49,区别？,消毒消灭微生物,大扫除除去垃圾等不用的东西。,厂房消毒的必要性：消灭沉降在地面、附着在墙面、玻璃、门上的微生物。,消毒和大扫除,50,我们在洁净区中如何做到防止：,空气污染,水污染,人员污染,器具污染,Test,51,