分光光度法复习知识点.doc

紫外可见分光光度法：基于物质分子对近紫外至可见光波段(200-800nm) 辐射的选择性吸收而建立的仪器分析方法。一、 吸收曲线将不同波长的光透过某一固定浓度和厚度的有色溶液，测量每一波长下有色溶液对光的吸收程度（即吸光度），然后以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标作图，可得一曲线。这曲线描述了物质对不同波长的吸收能力，称吸收曲线或吸收光谱。图: 邻菲罗啉亚铁溶液的吸收曲线 10.2mg/L；12320.4mg/L；30.6mg/L 同一浓度的有色溶液对不同波长的光有不同的吸光度,对应最大的地方称为最大吸收波长，用lmax来表示。 吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。 对于不同浓度的同一物质，吸收曲线形状相似， lmax不变,而对不同物质，吸收曲线形状和lmax不 同；不同浓度的同一种物质，浓度愈大，吸光度也愈大，此特性可以作为物质定量分析的依据。二、有机化合物的紫外可见吸收光谱 有机化合物中存在三种类型的价电子：s电子（单键）、p电子（双键）和未参与成键的n电子（孤对电子）； 相应的，存在五种分子轨道：成键轨道s、 p；反键轨道s*、 p*；非键轨道n，其能量顺序为：spnp*s* 有机化合物中存在三种类型的价电子：s电子（单键）、p电子（双键）和未参与成键的n电子（孤对电子）； 相应的，存在五种分子轨道：成键轨道s、 p；反键轨道s*、 p*；非键轨道n，其能量顺序为：spnp*0.01mol/L时，吸收粒子可能缔合影响对光的吸收，故比尔定律只使用于稀溶液。另一种影响来自化学平衡,与浓度、pH值和其他条件有关。五、显色反应进行光度分析时，首先要将待测组分转变成有色化合物，然后测定其吸光度。将待测组分转变成有色化合物的反应叫显色反应。与待测组分形成有色化合物的试剂称为显色剂。显色反应的选择应考虑的因素： （1）灵敏度高：生成的有色物质的e较大的显色反应。（2）选择性好：显色剂仅与一个组分或是少数组分反应。（3）显色剂在测定的波长处无明显吸收：两种有色物质最大吸收波长之差称为“对比度”。要求显色剂与有色化合物的对比度在60nm以上。（4）反应生成的有色化合物组成恒定，化学性质稳定显色剂种类：无机显色剂：例如，SCN-；MoO42-；H2O2，一般无机显色剂与金属离子生成的化合物不稳定，灵敏度和选择性也不高，应用不多。 有机显色剂：大多数有机显色剂与金属离子生成极其稳定的配合物，灵敏度和选择性都很高，被广泛的应用于吸光度分析中。 三元（多元）配合物是显色反应时加两种显色剂形成的三个组分的混合配合物。这种方法大大的提高了显色剂的稳定性、灵敏性、选择性。 六、定量分析条件的选择1. 测量条件的选择(1) 入射光波长的选择一般选择lmax,因为在此波长处的摩尔吸收系数e值最大，使测定有较高的灵敏度，同时，此波长处的一个较小的范围内，吸光度变化不大，不会造成对比尔定律的偏离，使得测定有较高准确度。若lmax不在仪器可测波长内,或干扰物质在此处有强烈的吸收，就不能选择lmax ，应尽可能选择e随波长改变而变化不大的区域内的波长。(2)出射狭缝宽度的选择应确保一定入射光强度时，选择小的狭缝宽度。2. 显色条件的选择显色剂用量、酸度、显色温度、显色时间、溶剂等3. 参比溶液的选择原则溶剂参比、试剂参比及试样参比4. 干扰及消除方法（1）加入掩蔽剂（2）选择适当的显色条件（3）分离干扰离子沉淀，离子交换，溶剂萃取等。