一般毒性实验课件.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。,(,二,),一般毒性试验,1,2,3,急性毒性,试验,局部毒性,试验,亚慢性和慢性毒性,试验,(,二,),一般毒性试验,第一节：急性毒性试验,急性毒性参数,危险性评估,慢性毒性试验,毒作用机制,试验目的,(,二,),一般毒性试验,第一节：急性毒性试验,经口急性毒性试验：,LD,50,经呼吸道静式吸入式急性毒性试验：,LC,50,经皮肤急性毒性试验：,LD,50,(,二,),一般毒性试验,最常用的方法是测定,LD,50,这又是为什么呢？,化学品,LD,50,，,mg/kg,乙醇,10000,氯化钠,4000,硫酸亚铁,1500,硫酸吗啡,900,苯巴比妥钠,150,印防己毒素（苦味,素,）,5,硫酸士的宁（番木鳖碱）,2,尼古丁,1,筒箭毒碱,0.5,密胆碱,0.2,河豚毒素,0.1,二噁英,0.001,肉毒杆菌毒素,0.00001,一些常见化学物的急性,LD,50,(,二,),一般毒性试验,死亡率（,%,）,剂量（,mg,）,0,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,0,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,8,单位,20,格,64,单位,20,格,20,格,8,单位,单位,/20,格,决定了,敏感性,(,二,),一般毒性试验,死亡率（,%,）,剂量,0,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,0,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,8,单位,64,单位,8,单位,LD,50,死亡率随剂量变化最敏感的是中段，由此不难理解将半数致死量作为判定化学物毒性指标的原因。,(,二,),一般毒性试验,LD,50,or LC,50,经典急性毒性试验,曲线拟合法,Bliss,法,插值法,累积法、改良寇氏法、霍恩法,(,二,),一般毒性试验,LD,50,的测定,方法,优点,缺点,霍恩法,使用动物数少；,计算简便,95%,可信限范围大，精确度不够,改良寇氏法,计算简便，,准确率高,确定最低和最高,剂量组,序贯法,节省动物,化学物引起动物,快速死亡,Bliss,法,设计要求不太严格,最精确,计算复杂,(,二,),一般毒性试验,死亡率呈正态分布。最小剂量组的死亡率,80%,。,剂量按等比级数分组；,改良寇氏法适用条件,各组动物数应相等；,(,二,),一般毒性试验,观察时间,毒性反应观察,染毒途径与方式,剂量与分组,选择实验动物,某化学物,LD,50,的测定,(,二,),一般毒性试验,种属和品系,：,年龄和体重,：,数量和性别：,啮齿类常用,小鼠,或,大鼠,。非啮齿类常用狗或猴。,变异不应超过该批平均体重的,20,。小鼠：,18,22,克。,大鼠：,180-220,克。,小动物每组,10,只。,雌雄各半。,选择试验动物,(,二,),一般毒性试验,最大耐受量试验。最大耐受剂量，,WHO,规定经口,5g/kg,。不死亡，不做。死亡，继续做。,设定,1mg/kg,为最低剂量组，,4,、,16,、,64,、,128mg/kg,预实验。,无相关资料,有相关资料,了解结构和性质相似化学物的毒性资料，确定预期毒性中值。,以此与其毒性中值作为待测化学物的中间剂量组，并在该剂量的上下各设,2,个剂量组为预试验剂量。,剂量与分组,(,二,),一般毒性试验,灌胃,、喂食、吞咽胶囊,静式吸入、动式吸入,经皮肤染毒,经注射染毒,定性试验、定量试验,注射量的规定,经,口染毒,呼吸道染毒,染毒方式,(,二,),一般毒性试验,中毒症状,死亡情况,病理变化,毒性作用观察,(,二,),一般毒性试验,器官或系统,观察项目,中毒后常见的表现,皮肤和被毛,眼睛,植物神经系统,呼吸系统,泌尿生殖系统,CNS,和,神经肌肉系统,颜色张力,眼睑 眼球 角膜,瞳孔大小,腺体分泌,鼻,呼吸表现,阴户 乳腺,阴茎,行为,运动状态,对刺激反应性,脑脊髓反射,肌肉张力,皮肤充血 紫绀 被毛蓬松 污秽,眼球突出，充血，角膜混浊，血性分泌物,散大或缩小,流涎 流泪,鼻孔溢液 鼻翼扇动,徐缓 过速 困难 衰竭,肿胀 分泌物增多 会阴部污秽,脱出,体位异常 叫声异常 活动异常 呆卧少动 痉挛 抽搐 震颤 强直 麻痹 运动失调,易兴奋 感觉迟钝或过敏 反应低下或过高,减弱或消失,松驰或紧张,(,二,),一般毒性试验,一般为,14,天,观察时间,C57,Kunming,(,二,),一般毒性试验,急性毒性分级,急性分级,大鼠经口,LD,50,(mg/kg),6,只大鼠吸入,4h,，死亡,2-4,只浓度,(ppm),兔经皮,LD,50,(mg/kg,体重,),对人可能致死的估计量,g/kg,体重,g/60kg,体重,剧 毒,1,10,5,15 1000,外源化合物的急性毒性分级,(WHO,，,2003),(,二,),一般毒性试验,第二节：局部毒性试验,皮肤刺激试验,急性眼刺激试验,(,二,),一般毒性试验,2.1.,急性眼刺激试验,观察时间：,7,天，可延长至,21,天,观察指标：结膜、角膜、虹膜,染毒方式：一侧眼结膜囊内,剂量：一次剂量,实验动物：家兔,(,二,),一般毒性试验,2.1.,急性眼刺激试验,(,二,),一般毒性试验,2.2.,皮肤刺激试验,观察时间：不超过,14,天,观察指标：红斑、水肿,染毒方式：涂抹于动物皮肤上,剂量：一次或多次剂量,实验动物：家兔、豚鼠,(,二,),一般毒性试验,2.2.,皮肤刺激试验,(,二,),一般毒性试验,第三节：亚慢性和慢性毒性试验,亚慢性毒性,：,实验动物或人连续较长期（约相当于生命周期的,1/10,）接触外源化学物所产生的中毒效应。,概念,(,二,),一般毒性试验,第三节：亚慢性和慢性毒性试验,慢性毒性,：,实验动物或人长期接触外源化学物所引起的中毒效应。长期对啮齿类动物至少,12,个月，也可终身染毒。,概念,(,二,),一般毒性试验,A,毒性效应谱、毒作用特点、靶器官,B,毒作用机制、毒作用可逆性,C,剂量,-,反应关系,D,毒效应差异，确定安全系数，结果外推至人,亚慢性和慢性毒性试验主要目的,(,二,),一般毒性试验,（一）实验动物选择,亚慢性毒性试验,年龄：大鼠,50100g,狗,46,月,数量,：,小动物,20,大动物,8,性别,：,雌雄各半,慢性毒性试验,年龄：大鼠,5070g,狗,4,月,小鼠 初断乳,数量：小动物,40,大动物,8,性别：雌雄各半,研究方法,(,二,),一般毒性试验,染毒期限,3,6,个月,预期寿命,6,个月,1,年,6,个月,1,年,食品毒理学,环境毒理学,致癌试验,工业毒理学,（二）染毒期限,(,二,),一般毒性试验,经口,:,鼠常用灌胃、喂饲法。犬用胶囊法。,经呼吸道：,持续,4h,。,注射染毒：,腹腔注射。,（三）实验动物染毒方式,(,二,),一般毒性试验,（四）剂量选择和分组,亚慢性毒性的剂量选择,阴性对照组,低剂量组,中剂量组,高剂量组,急性毒性的阈剂量,1/201/5 LD,50,组距：,24,倍,慢性毒性的剂量选择,阴性对照组,低剂量组,中剂量组,高剂量组,亚慢性阈剂量或其,1/51/2,1/10,LD,50,组距：,210,倍,(,二,),一般毒性试验,一般观察：,外观体征、行为活动、体重、摄食,眼部检查,血生化指标,尿常规检查,体温、心电图检查,病理检查：大体解剖、组织病理学,特异性指标,（五）观察指标,(,二,),一般毒性试验,结果评价,剂量依赖性趋势,反应重现性,相关指标变化,性别差异,效应的时间变化趋势,效应差异的大小,历史对照的作用：,差异是否由受试物引起,参考资源,Thank You,！,