实验动物学第三章-实验动物饲养与应用条件的标准化(医学PPT课件).ppt

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第三章,实验动物,饲养与应用条件的标准化,教学目的,：,通过教学，让学生,:,掌握,影响实验动物的环境因素、各等级动物生活的基本设施、饲料营养素对实验结果的影响,;,理解,饲养与应用条件标准化的意义、控制实验动物环境的重要性,;,了解,实验动物环境和饲料质量监测的内容,.,教学重点,：,环境因素对实验动物的影响、实验动物设施的分类及特点、饲料营养素对实验结果的影响,教学难点,：,环境因素对实验动物的影响,教学方法,：,多媒体,第一节 实验动物的环境,第二节 实验动物设施,第五节 实验动物环境监测和,饲料质量的监测,第四节 实验动物的饲料、饮水,及垫料,第三节 实验动物的笼器具,第一节 实验动物的环境,一、实验动物环境的概念,二、控制实验动物环境的重要性,三、环境因素对实验动物的影响,四、我国实验动物环境标准,一、实验动物环境的概念,指围绕该动物的所有外界条件。主要包括自然因素和人为因素。,温度、湿度、气流速度、噪声、粉尘、光照周期及照度、垫料、笼器具等。,空气、饮水、饲料、氨浓度、消毒药品、杀虫 剂、有毒物质等。,物理因素,化学因素,生物因素,同种生物因素（社会地位、势力范围、咬斗、,饲养密度等）和异种生物因素（微生物、病毒、寄生 虫、其他动物品种等）。,自然因素,人为因素,房屋、设施、饲养、调教、管理、,实验处理等。,演出型学说,(Russell,和,Burch 1959,年,),发育环境,developmental,表现型,phenotype,周围环境,proximate,演出型,dramatype,实验结果,实验处理,基因型,genotype,二、控制实验动物环境的重要性,实验动物的性状主要由,遗传,和,环境,因素决定。,20,世纪,50,年代,Russll,和,Burch,提出,演出型学说,，即动物最初是从父母获得遗传因子形成了表型，表型因受到各种环境因素的影响而形成演出型。,动物实验是对演出型进行各种有控制的处理而获得实验结果。,实验动物环境设施是控制实验动物质量和保证动物实验结果科学性的首要条件。,温度,湿度,气流,光照,噪音,笼具,垫料,饲养密度,设 饲 管 调 实验,施 养 理 教 处理,人 为 因 素,饲料,饮水,臭气,杀虫剂,消毒剂,有机,物质,遗传,品 质,控 制,化学因素,动物的咬斗,各种病原体,（细菌 病毒 寄生虫）,生 物 因 素,物理因素,环境因素影响实验动物质量,R=(A+B+C)D,E,E,A,实验动物种的反应,B,动物品种或品系特有的反应,C,R,实验动物总的反应,个体的反应（个体差）,D,环境影响,实验误差,遗传因素决定,动物对实验处理的反应,对决定演出型的遗传和环境条件加以控制，可获得重复性好的实验结果。,可保证实验动物的健康和质量,可保障实验研究获得正确的结果,标准的环境能为实验动物及动物实验工作人员提供舒适的工作环境,严格监控实验动物环境设施的原因,三、环境因素对实验动物的影响,为了控制环境条件，保证实验动物健康以达到实验要求，我国颁布了实验动物环境指标国家标准。,环境因素包括对实验动物个体发育、生长繁殖、生理、生化平衡和有关反应性产生影响的一切外界条件，具 有“有利”和“有害”两方面的作用。,环境因素的重要性,湿度过低,空间狭小,过份拥挤,环境因素的重要性,微生物污染,笼具不合适,寄生虫感染,1,、温度,环境温度偏离动物最适温度过多，动物产生不良反应，从而影响实验结果。,影响演出型。,如冬季户外（,15,）成长的幼兔耳朵比室内（,2027,）成长的幼兔耳朵短。,影响雌性动物的性周期、产仔率、死胎率、泌乳量。,如小鼠在,21,环境下可繁殖,3,代,/,年，而,-3,仅繁殖,2,代。,影响动物的代谢水平。,如,将,9,10,周龄,ICR,小鼠放置在,10,30,环境下，可观察到，随气温的升高，小鼠的脉搏数、呼吸数和发热量都呈直线下降。,影响动物健康和抗感染力。,环境温度过高或过低时，动物机体的抵抗力下降，某些条件致病菌将引发疾病。如在冬季较易暴发流行的小鼠脱脚病、仙台病毒病和小鼠肝炎，与低温条件下动物抵抗力下降有密切关系。,激发实验动物产生应激反应。,通过神经内分泌系统引起肾上腺素分泌增加。长期处于温度过高或过低的环境中，动物脏器可发生实质改变。,影响实验动物对化学物质毒性的反应。,Wistar,大鼠腹腔注射戊巴比妥钠时，如温度低于,18,或高于,30,，则死亡率明显升高。不同气温条件下，同一药品对动物的,LD50,有较大差异。,两种不同温度对药物,LD50,的影响,动物体温调节同时受到湿度、环境温度及气流速度的共同影响。高温高湿情况下，蒸发散热受到抑制，容易引起代谢紊乱及机体抵抗力下降，动物的发病率和死亡率明显增加。,湿度过高，微生物易于繁殖，饲料、垫料易于霉变；湿度过低，易致灰尘飞扬，引起动物呼吸道疾病，影响动物健康。,当温度为,27,、湿度为,20%,时，可致大鼠发生坏尾症，当湿度为,40%,时，此症发生率为,25%30%,，当湿度大于,60%,时则不发生此症。,2,、湿度,合理的气流和风速能调节温度和湿度，降低室内粉尘及有害气体污染。,气流主要影响动物皮肤的体表蒸发和对流散热。当室内气温较高时，气流有利于对流散热，当室温较低时，气流增加动物的散热量，加剧寒冷的影响。,实验动物饲养间的气流值一般为,0.2m/s,。,饲养室内的通风程度，一般以单位时间的换气次数（即旧空气被新风完全置换的次数）为标志，一般为,1020,次,/h,。,3,、气流,4,、光照,包括,强度、波长、光照时间或明暗交替时间,三个因素。,光照过强会导致雌性动物窝性差，甚至出现哺乳不良和食仔现象。雌性动物敏感性较高。,光线波长可影响动物的生殖功能，蓝光比红光更能促进大鼠的性成熟。,光照时间或明暗交替时间对动物肌体有多种调节功能，对其生理活动调节尤其重要。实验动物在采食、排粪活动方面有周期性变化，在血液学、生化学及生理功能上也有相应变化。持续黑暗使大鼠卵巢和子宫的重量减轻，生殖过程受到抑制。持续光照则会过度刺激动物的生殖系统，可连续发情，大鼠、小鼠可出现持久性阴道角化，并阻碍卵细胞成熟。,光照应,符合动物活动和休眠的规律。,5,、噪音,噪音对动物的影响与噪音的性质、动物的种类、体重、习性、年龄、性别等生理和心理状态有关。,噪声影响实验动物的繁育。如：造成大鼠、小鼠生育力减退，妊娠障碍和流产，甚至出现食仔现象。,噪音会引起动物生理异常。如,DBA,小鼠，噪音刺激,5min,，其心跳数、呼吸数和血压数都有明显升高。长时间的噪音可造成动物中枢神经和听觉器官损害以及肾上腺分泌明显增加、白细胞总数增多，摄食量增加而体重减轻。噪音还可造成动物听源性痉挛。,室内噪音一般应控制在,60dB,以下。,6,、空气洁净度,包括,尘埃颗粒、微生物及有害气体,三个方面。,清洁级以上实验动物及设施，空气须过滤，要求屏障环境,空气洁净度,达到,10000,级,，隔离环境达到,100,级,。,落菌数：屏障环境,3,个,/,皿,；隔离环境：,无检出,动物粪、尿等排泄物产生的有害气体主要有,氨、硫化氢、甲基硫醇、硫化甲基,等。,氨,是浓度最高的一种，通常以氨浓度为指标来监测饲养室污染状况。,氨可刺激动物的眼结膜、鼻粘膜和呼吸道粘膜而引起流泪、咳嗽，严重者甚至产生急性肺水肿而致动物死亡。实验动物氨浓度应控制在,14mg/m,3,以下。,我国,的空气洁净度分级,等级 每立方米,(,每升,),空气中 每立方米,(,每升,),空气中,O.5m,尘粒数 ,5m,尘粒数,100,级 ,35,100(3.5),1 000,级 ,35,1 000(35)250(O.25),10 000,级 ,35,10 000(350)2 500(2.5),100 000,级 ,35,100 000(3 500)25 000(25),空气洁净度等级,1,(N),大于或等于表中粒径的最大浓度限值,(pc/m),0.1um,0.2um,0.3um,0.5um,1um,5um,1,10,2,2,100,24,10,4,3,1000,237,102,35,8,4,（十级）,10000,2370,1020,352,83,5,（百级）,100000,23700,10200,3520,832,29,6,（千级）,1000000,237000,102000,35200,8320,293,7,（万级）,352000,83200,2930,8,（十万级）,3520000,832000,29300,9,（一百万级）,35200000,8320000,293000,洁净室及洁净区空气中悬浮粒子洁净度等级,四、我国实验动物环境标准,GB 14922-2010,动物实验设施（设备,3,）环境指标（静态）,回主菜单,第二节 实验动物设施,一、实验动物设施分类,二、实验动物设施的组成,三、实验设施的布局,四、实验动物设施的维护,一、实验动物设施分类,按微生物控制程度,按设施平面布局,按设施功能,开放环境（系统）,屏障环境（系统）,隔离环境（系统）,无走廊式,单走廊式,双走廊式,三走廊式,生产设施,实验设施,特殊设施,1.,开放环境,开放环境（系统）只用于普通级动物的饲养繁殖。开放环境不要求作高效净化，但也需安装送排风（虽不要求压差，但要有不低于,8,次,/h,换气）和防野鼠、防昆虫等装置，基本上与外界不相通，设施内环境，特别是温湿度、氨浓度、噪音、照度等都必需满足国标要求。,动物,人,微生物 （多）,空气,人员动物饲料物品,2.,屏障环境,实验动物生活 在与外界隔离的系统内，所有进入空气都须经过初、中、高三级过滤器的净化处理，洁净度为,1,万级；系统内相邻区域应保持空气压差，不低于,10Pa,，出风口有防止空气倒流的装置，不低于,15,次,/h,换气；空气、人、物流严格按单向移动；凡进入设施的物品（含动物）均须经严格的消毒灭菌处理，经特制的传递装置送入；人员要淋浴，更换无菌衣帽。屏障环境（系统）适用,SPF,动物和清洁级动物饲养繁殖和实验。,动物,人,微生物（少）,人员,排气（防逆）,空气（滤过）,SPF,以上动物物品,动物（剖宫产）,图,12-2,三走廊式屏障环境（引自：钟品仁,哺乳类实验动物,）,洁物储存室,污物走廊,实验操作室,屏障环境的内部结构,风淋室,饲养室,洁净走廊,3.,隔离环境,隔离器为主体及其附属装置组成的饲养系统，用于无菌动物和已知菌动物的饲养和动物实验。送入隔离器的空气须超高效过滤，洁净度达到,100,级，并维持一定压差（不低于,50Pa,）,，不低于,20,次,/h,换气；饲料、饮水、垫料、笼具等，须经过严格灭菌之后经传递窗送入；工作人员不直接接触动物，而是通过手套进行操作。,排气（防逆）,动物（剖宫产）,动物物品饲料（经灭菌）,空气（滤过）,动物,人,O,O,图,13-1,隔离器（引自：邹移海,中医实验动物学,）,图,12-3,感染性动物饲养间、实验室的排气处理（引自方喜业,医学实验动物学,）,特殊动物实验设施,（感染性动物实验屏障设施）,环境空气,污染的空气,HEPA,过滤的空气,負,压的污染空气,二、实验动物设施的组成,主要由,饲育室或动物实验室、检疫室、洗刷消毒室、废弃污物处理设施,四大部分组成，其他为辅助设施。,饲育室或动物实验室,最重要部分，关系到实验动物的生存、健康和质量，有保种室、生产繁殖室、清洁物品存放室等。,检疫室,用于引进实验动物的隔离观察和检疫，实验前动物的观察和适应实验环境等。,废弃物处理设施,有焚化设备，处理污染气体、液体、放射性物质等设施，用于处理动物尸体、固体污物和其他污物。,辅助设施,遗传检测室、微生物检测室、环境检测室、营养检测室等，储存饲料、垫料、药品、笼架具等的库房，办公室、值班室、更衣室等，还包括空气净化与空调机房、自动监控室等。,三、实验设施的布局,1.,设施布局原则,总原则：,有利于防止疾病的传播和避免动物相互干扰、相互感染；方便工作人员操作；人员、动物、空气按单向路线移动。,实验动物繁殖饲养区和动物实验区应分开，各成独立系统，专区（室）专用；,一般将低级别的实验动物放在低楼层，高级别的实验动物安排在高楼层；,不同等级的设施应严格隔离，避免将不同等级实验动物置于同一楼层；,不同品种、品系的实验动物要独立饲养，不可混养。,2.,选址要求,选择自然环境较好，大气含尘及化学污染程度都较低的区域。如不能远离严重空气污染区域时，则应位于其最大频率风向的上风侧，或全年最小频率风向的下风侧建设实验动物设施；,设施要远离有噪音干扰的铁路、机场、交通要道；,水电供应有保障；,交通便利。,开放环境（系统）,可分为三个区：,3,、工艺平面布局,前区,包括办公室、检疫室、一般用品库房；,控制区,包括清洁走廊、清洁物品储存室、繁育室或动物实验室、育成待发室等。,后勤处理区,包括亚清洁走廊、洗刷消毒室、污物处理设施等。,人员、动物、品种原则上按前区控制区后勤处理区方向移动，空气按控制区后勤处理区移动。,清洁区,包括清洁走廊、隔离检疫室、观察室、繁育室或动物实验室、,育成待发室、清洁物品准备室等；,屏障环境（系统）,分为两个区：,非清洁区,包括亚清洁走廊、洗刷消毒室等。,人员、物品必须按清洁区污染区方向移动，空气按压差由清洁走廊饲育室亚清洁走廊室外方向流动。,屏障系统平面布置图 （二走廊式）,4,、房屋设施内结构要求,地面,宜用水磨石表面涂环氧树脂漆或加地板胶，,平而不滑，无渗漏。,墙壁,光滑平整，易于清洁消毒。屏障系统的阴,阳墙角呈弧形。,天花板,应耐水、耐腐蚀，表面平整光滑，高度适,宜。,门窗,有足够的宽度，有利于保持压差，注意气,密性。,走廊,宽不应少于,1.5m,，屏障设施通常设清洁与,亚清洁走廊。,SPF,级 洁净走廊,实 验 室,5.,空调净化设备与送排风系统,空气净化设备,包括空气过滤器、层流架、空气洗涤器、静电除尘器、活性炭过滤器、紫外线灭菌灯。,空气调节设备,系统的工作流程及运行调节 新风初效过滤器温度、湿度调节加压中效过滤器送风管网高效过滤器房间排风管网排风机废气。,空气经过初、中、高效三级过滤后，,0.3um,以上微生物微粒被滤掉,99.7%,以上。,6.,防卫设施及,监控与通讯设备,防卫设施,电力线路防动物咬破。房舍出入口防野鼠进入、防室内动物逃逸。防蚊虫进入室内。,监控系统,电视监控系统。,通讯系统,电话或对讲机。,四、实验动物设施的维护,空气过滤系统的维护,初效过滤器,1-2,周水清洗,1,次；中效过滤器,15-30,天更换滤器,1,次（有的可水清洗）；高效过滤器,1-1.5,年更换单元,1,次（不可水清洗）。,空调系统的维护,清洗热交换部件。,灭菌系统的维护,压力蒸汽灭菌器。,回主菜单,第三节 实验动物笼器具,一、隔离器,二、层流架,三、笼具,四、饮水设备,一、隔离器,呈长方形箱状，由隔离室、过滤器、送风机、传递仓及架体组成，隔离室洁净度高达,100,级，空气压差不低于,50Pa,。隔离器一侧装有橡皮手套，供隔离器内部操作使用，隔离器另一侧有灭菌渡槽，供传入、传出物料及动物使用。,隔离器用于无菌动物饲养繁殖、实验操作和处理后观察、动物剖宫产净化。,图,13-1,隔离器（引自：邹移海,中医实验动物学,）,二、层流架,层流架本身带有空气净化和通风系统，可作实验动物观察专用设备，它由架体、风机、静压箱、过滤器组成，一般为四周封闭、前后开启的柜形构造。,较多情况下，层流架为,正压,层流架，如作感染研究为,负压,层流架。,层流架置于普通房间内，可用作清洁级动物的短时间饲养、实验操作和处理后观察；置于清洁级房间，能直接作,SPF,级设施使用，用于,SPF,级动物饲养和实验观察。,层流架在静态时洁净度应至少达到,10,万级，气流速度为,0.10.2m/s,，噪音低于,60dB,。,三、笼具,动物笼,带金属网罩的塑料盒，不锈钢笼等。,饲料盒,塑料盒，金属盒，瓦罐等。,质量要求：,无毒、耐腐蚀、耐高温、耐磨损、,耐冲击，舒适、安全，操作方便、,经济实用。,IVC,笼,犬笼,恒温恒湿洁净动物饲养间,四、饮水设备,包括饮水瓶、饮水盆和自动饮水装置等。,大鼠、小鼠、兔等小型实验动物多使用不锈钢或无毒塑料制造的饮水瓶，规格有,250mL,和,500mL,两种，不宜用易碎的玻璃瓶。,犬、羊等大型动物则多使用饮水盆。,饮水器应定期清洗、消毒。,无菌水生产设备：如臭氧灭菌水装置。,回主菜单,第四节 饲料、饮水及垫料,一、实验动物的营养需要与饲料标准,二、饲料配合技术,三、饲料营养素对动物实验结果的影响,四、饮水,五、垫料,一、实验动物的营养需要与饲料标准,营养需要：,指实验动物对蛋白质、糖类、脂肪、矿物质、维生素等营养素的日平均需求量。可分为维持营养、生长营养和繁殖营养需要等。,饲料标准：,规定了饲料水分、加工质量、营养成分、卫生指标、检验方法、标签、包装、运输、储存等。,饲养标准：,特定动物的成套的营养定额，主要包括相应动物每日营养需要量、每千克饲粮养分含量、饲料营养成分和营养价值、典型饲粮配方等。,1.,饲料中的营养成分,蛋白质,构建机体组织细胞的主要原料，机体内功能物质的主要成分，组织更新、修补的主要原料，可供能和转化为糖、脂肪。,糖类,主要能量来源，可转化为糖原和脂肪贮存。包括无氮浸出物和粗纤维两大类。,脂肪,由甘油和脂肪酸构成，含能最高的营养素（是蛋白质和碳水化合物的,2.25,倍左右），动物体内主要的能量贮备形式，脂溶性维生素的溶剂。,维生素,动物代谢所必须而需要量极小的低分子有机化合物，以辅酶和催化剂的形式广泛参与体内代谢的多种化学反应。,矿物质,常量元素：,Ca,P,Na,K,Cl,Mg,S,；微量元素：,Fe,Zn,Cu,Mn,Co,Mo,等。,水,机体,主要组成成分（体重,70%,以上）溶剂，化学反应的介质，可调节体温。,饲料营养素功能,供给动物所需能量；,动物机体生命过程的调节物质；,动物产品的原料；,建造和修复动物机体的物质。,2.,饲料的种类和质量要求,饲料的种类,按物理性状分,按 来,源 分,按营养特性分,粉状料、颗粒料、膨化料等。,动物性饲料、植物性饲料等。,粗饲料、青绿饲料、青贮饲料、能量饲料、蛋白质饲料、矿物质饲料、维生素饲料、添加剂等。,兔饲料,鼠饲料,犬膨化饲料,我国和国际饲料分类依据原则,饲料类 别,饲料类名,划分饲料类别依据（,%,）,自然含水量,干物质中纤 维含量,干物质中粗蛋白含量,1,粗饲料,45,18,2,青绿饲料,45,3,青贮饲料,45,4,能量饲料,45,18,20,5,蛋白质饲料,45,18,20,6,矿物质饲料,7,维生素饲料,8,添加剂,质量要求,原料来源要清楚，无虫害、细菌及霉菌污染；,储存仓库需保持通风、干燥及防氧化；,选择新鲜原料加工，注意加工前后的消毒灭菌；,成品料包装要严密；,配方比例要计算准确，加工时要混匀。,二、饲料配合技术,1.,名词概念,饲料：,能被动物利用，且在合理饲喂下不发生有害现象，,有利于动物营养的物质。,日粮：,一只实验动物一昼夜所采食的饲料总量。,日粮配合：,拟定饲料配方的过程。,饲粮：,指按日粮中各种饲料的合理配比制成的混合饲料。,配合饲料：,按一定比例的饲料配方配制的多种饲料混合料。,全价配合饲料：,各种营养素均衡全面，能满足动物营养需要的,配合饲料。,2.,日粮配合的原则,依据动物的饲养标准，满足动物的营养需要。,因地制宜，选用适宜的原料。,注意饲料的体积和饲料的适口性。,尽量降低成本价格。,有利于加工、储藏和运输。,3.,日粮配合方法,查询饲养标准、饲料标准。,选择饲料原料，查询其营养成分和营养价值以及来源与价格。,计算确定配合比例，即配方。,计算方法有试差法、交叉法、联立方程法等，可采用电子计算机进行计算。,加工及饲喂实验。,1.,影响动物采食量而影响实验结果,动物,为能需求而食，饲料的适口性、添加剂、能量含量等，均影响动物的采食量。药物经饲料给予时，给予量随采食量变化而变化。,三、饲料营养素对动物实验结果的影响,2.,影响动物生长发育而影响实验结果,饲料中营养素是否全面、平衡、充足，直接影响动物的生长发育，从而影响以生长发育为指标（如体重、脏器重量等）的动物实验结果。如大鼠日粮蛋白水平低于,14%,时，则显著降低大鼠肝脏重量。,蛋白质缺乏时，可导致生长期大鼠生长缓慢、贫血、低蛋白血，肌肉消瘦；成年大鼠则水肿，发情无规律，新生仔鼠衰弱或死胎，雄性大鼠生殖能力受损。,3.,影响动物生理生化指标而影响实验结果,当饲料中某种营养素含量改变时，将导致动物血液、脏器或组织中该种营养素含量的改变，与之相关的生理生化指标必然受到影响，从而影响实验结果。如低蛋白日粮导致大鼠血红蛋白、血清总蛋白、血清白蛋白值均降低。,4.,影响动物营养而影响实验结果,营养与免疫 营养与癌症 营养与衰老,维生素,A,缺乏将影响动物淋巴组织，导致淋巴细胞分化成,T,和,B,细胞的胸腺发生萎缩，抗体抗原的应答下降，使免疫系统机能减弱，病原体易于入侵。,四、饮水,普通级实验动物饮水：符合城市生活饮用水的卫生标准。,清洁级以上实验动物饮水：灭菌水。,饮水量：小鼠,4-7mL/d,，大鼠,20-45mL/d,。,无须蒸馏、离子交换和反渗透。,五、垫料,种类：锯末、木屑、电刨花、粉粹玉米芯、吸水纸、棉花等。,要求：无毒、无异味、无刺激性、无尘埃、不干扰动物实验。具有一定的柔软性，吸水和吸附臭气性能好，不被动物所吃，且便于清扫。使用方便，容易获得，价格低廉。,作用：接纳动物排泄物、动物保暖与繁殖做窝。,木质垫料,玉米芯垫料,垫料的储藏,未灭菌的垫料在储存过程中均宜用垫板、架子等与地面隔离。垫料要保存在干燥、凉爽、远离污染源的地方，,保存期不应超过一年,。经高压灭菌法灭菌的垫料在消毒桶内储藏可保存,5,7d,。,垫料的更换,垫料的更换次数主要依据饲养动物的种类、大小、笼内动物数量、设施的通风换气次数、设施的清洁卫生状况、氨浓度等。,一般每周更换垫料,1-2,次，垫料使用前要消毒、灭菌、除虫。,饮水瓶漏水造成垫料潮湿时应及时更换,。,回主菜单,第五节 实验动物环境监测和饲料质量的监测,一、实验动物环境监测,1.,温度、湿度的测定,仪器 棒状温度计、热敏电阻温度计、简易干湿球温度计、自动记录温度、湿度计等。,测定点的选择 一般,50m,2,房间,3-5,个测点。,测定方法,测定前空调系统应运转,24h,以上，温湿度的测定一般连续,8h,，每次测定间隔为,15-30min,。,2.,噪音的测定,仪器,:,普通噪音计,积分型噪音计,测定方法 测点一般应选在被测环境的中央区。面积,10m2,的房间，在室内离墙,1.0m,及中心位置，距地面,1.2m,高度布点。,3.,照度的测定,仪器,:,便携式照度计,测定方法,:,开启照明设备,选几个有代表性的点，距地面,0.9m,，离开墙面,1.0m,处测定。,4.,氨浓度的测定,仪器,:,GCK,2,型个体采样器,分光光度计,测定方法,:,纳氏试剂比色法,5.,空气中下落菌的测定,仪器 直径,9cm,的玻璃培养皿,测定方法 每,510m,2,设,1,个测定点，将培养,皿暴露于空气中,30min,，加盖，放,于,37,恒温箱内培养,48h,后计算菌,落数。,二、实验动物饲料质量监测,1.,饲料的监测,感官性状的检测,形态，色泽，气味，颗粒大小，硬度，,成分，混合均匀，新鲜，无杂质，无异味，,无霉变，无虫蛀及鼠咬。,营养成分的检测,饲料卫生指标,2.,饮用水的监测,无异色、异味，,pH,值,:5.5-8.5,，,细菌总数,1000,个,/L,，,氰化物,0.05g,，,As0.04mg,Hg0.01mg,。,3.,垫料的监测,水分,吸湿性,有毒有害物质,微生物、寄生虫,再见,练 习 题,一、名词解释,1.,实验动物的环境,指围绕实验动物的所有外界条件，包括饲养盒,(,笼,),内的对实验动物产生影响的各种物理、化学、生物等因素构成的小环境和饲养室内外的对实验动物产生影响的各种物理、化学、生物等因素构成的大环境。,2.,演出型,一定表型的实验动物受到环境因素的影响而重新表现的性状特征，称为演出型。,3.,实验动物设施,广义的实验动物设施指用于实验动物饲养繁殖和动物实验的建筑物、设备、机构及经营管理。狭义的实验动物设施仅指实验动物建筑物。,4.,开放系统,是一种无空气净化装置的实验动物建筑设施。该设施虽然具备空调、排风和防野鼠、昆虫的装置，但基本上与大自然相通，温度、湿度、空气尘埃等都受外界环境的影响。开放系统只用于普通动物的饲养繁殖。,5.,屏障系统,是一种具备空气净化装置且有隔离屏障的实验动物建筑设施，进入该设施内的空气经过初、中、高效三级过滤，洁净度达,10000,级，设施内各单元保持着一定的空气压差；进入设施的物品均需经严格的消毒灭菌处理；人员进入需经淋浴、更换无菌衣帽；人员、动物、物品、空气均按一定路线流动。这种屏障系统用于无特定病原体动物的饲养繁殖。,6.,隔离系统,是以隔离器为主体及其附属装置组成的实验动物设施，送入隔离器的空气需经高效过滤，并维持一定的压差，洁净度达到,100,级；送入隔离器的饲料、垫料、饮水等均需经非常严格的消毒灭菌处理；人员不直接接触动物，而是通过隔离手套进行操作。隔离系统用于饲养无菌动物和悉生动物。,7.,实验动物的营养需要,指实验动物对蛋白质、糖类、脂肪、矿物质、维生素等营养素的日平均需求量。,8.,饲料,指能被动物利用，且在合理饲喂下不发生有害现象，有利于动物营养的物质。,9.,配合饲料,指按一定饲料配方配制的多种饲料的混合料。,10.,全价配合饲料,指各种营养素均衡全面，能满足动物营养需要的配合饲料。,二、填空题,1.,按实验动物环境及设施国家标准，实验动物饲养室的温度为,18,29,，相对湿度为,40%,70%,，噪声在,60dB,以下，每小时换气次数为,10,20,次，每立方米空气中的氨浓度在,14mg,以下，工作照度为,150,300lx,，无菌动物、无特定病原体动物和清洁动物的饲养环境的空气洁净度分别为,100,级、,10000,级、,100000,级。,2.,实验动物设施按微生物控制程度分为,开放系统,、,屏障系统,和,隔离系统,三种类型，分别用于饲养,普通动物,、,无特定病原体动物或清洁动物,和,无菌动物,。,3.,层流架在静态时的空气洁净度应至少达到,100000,级,，将层流架置于普通动物饲养室内可用来饲养,清洁,动物，置于清洁动物饲养室内可用来饲养,无特定病原体,动物。,4.,当环境温度低于体温时，实验动物主要通过,辐射、对流、蒸发,方式散热；当环境温度接近体温时，实验动物主要通过,蒸发,方式散热。空气湿度过高，实验动物,蒸发,散热受到抑制。气流主要影响实验动物,对流,散热和,蒸发,散热。,5.,大气中的水分含量称之为湿度，在特定温度下，空气中的实际含水量与该温度的饱和含水量的百分比值，称为,相对湿度,。实验动物饲养室常用,相对湿度,作为湿度控制指标。,6.,在饲养室温度为,27,的情况下，当空气相对湿度大于,60%,时，大鼠不发生坏尾症；相对湿度为,20%,时，几乎所有大鼠都发生坏尾症。,7.,按照我国,洁净厂房设计规范,(GBJ73-84),中关于空气洁净度的分级标准，当每立方米空气中大于或等于,0.5m,的尘埃粒子数和大于或等于,5,m,的尘埃粒子数分别少于或等于,350000,和,2500,时，该空气洁净度为,10000,级。,8.,屏障系统设施中，人员、物品必须由清洁区向,污染区,方向移动，空气由,清洁走廊,向饲养室、向,亚清洁走廊,、再向室外方向流动。,9.,实验动物的性状表现受,遗传因素,和,环境因素,共同影响，其中,遗传因素,起决定性作用，在一定条件下,环境因素,起主要作用。,三、判断是非,1.,实验动物有适应环境变化并做出反应的能力，如改变体温、新陈代谢，增加或减少摄食量、活动量等，尽管这种适应是行为性或生理性的，但都会影响动物实验的结果。,(),2.,喜马拉雅兔在,10,的环境里鼻端和四肢末端的毛色为黑色；在,20,的环境里鼻端和四肢末端的毛色为白色。这个例子说明动物性状的表现受环境因素的影响。,(),3.,温度的变化不会影响实验动物的代谢水平。,(,),4.,将,9-10,周龄,ICR,小鼠放置在,10-30,气温环境下观察其生理反应，发现随着气温的升高，小鼠的脉膊数、呼吸数和发热量都呈直线上升。,(,),5.,研究药品毒性反应时，环境温度不同，同一药品对同一实验动物的,LD,50,有较大差异。,(),6.,湿度过高，微生物易于繁殖，易引起实验动物某些传染病发生。,(),7.,光照时间的长短不会影响大、小鼠卵母细胞发育和性周期。,(,),7.,光照时间的长短不会影响大、小鼠卵母细胞发育和性周期。,(,),8.,蓝光比红光更能促进大鼠的性成熟,(),。,9.,噪声能影响实验动物的繁育和生理功能,(),10.,噪声可造成实验小鼠听源性痉挛。,(),11.,长期处于高浓度氨的环境中，实验动物上呼吸道粘膜可出现慢性炎症。,(),12.,悬浮于饲养室空气中的尘埃颗粒除本身对实验动物产生不良影响外，还可成为各种病原微生物的载体。,(,),13.,实验动物设施布局的原则是：有利于防止疾病的传播和避免实验动物相互干扰、相互感染；方便工作人员操作；人员、实验动物、物品、按单向路线移动。,(),14.,从微生物控制和管理方便的角度考虑，实验动物集中于一幢实验动物大楼时，宜将大型实验动物安排在大楼的下层，小型实验动物安排在大楼的上层。,(),15.,从微生物控制和管理方便的角度考虑，宜将高级别实验动物安排在低楼层，低级别的实验动物安排在高楼层。,(,),16.,相同级别但不同品种的实验动物可以饲养在同一房间内。,(,),17.,相同品种但不同级别的实验动物不能饲养在同一房间内。,(),18.,屏障系统内实验动物饲养室的通风应采用顶棚送风、接近地面的四角回风的方式。,(),19.,屏障系统内实验动物饲养室内墙阴阳角均为圆弧形。,(),20.,屏障系统内实验动物饲养室地面必须贴防滑地板砖。,(,),21.,实验动物笼具必须用无毒、耐高温、耐腐蚀、耐磨损、耐冲击的材料制作。,(,),22.,实验动物全价配合饲料的感官指标应达到：新鲜、混合均匀、无杂质、无异味、无霉变、无发酵、无虫蛀鼠咬。,(),23.,饲料营养素是否全面，直接影响实验动物的生长发育，但不会影响动物实验结果。,(,),24.,普通级实验动物饮水的水质要求，一般按城市生活饮用水的卫生标准要求即可。,(),25.,清洁级实验动物饮水的水质要求，一般按城市生活饮用水的卫生标准要求即可,(,),。,26.,无特定病原体实验动物可直接饮用市售矿泉水,(,),。,27.,实验动物标准化管理对实验动物垫料不作要求，只要是柔软性的材料，能使实验动物保温即可。,(,),四、单项选择,1.,将,R,表示实验动物总的反应、,E,表示实验误差，则动物实验中实验动物对实验处理的反应可用,“,R=(A+B+C),E,”,表示，其中,A,表示,(A),A,、实验动物种的反应,B,、实验动物品种或品系特有的反应,C,、实验动物个体的反应,D,、环境因素的影响,2.,将,R,表示实验动物总的反应、,E,表示实验误差，则动物实验中实验动物对实验处理的反应可用,“,R=(A+B+C),E,”,表示，其中,B,表示,(B),A,、实验动物种的反应,B,、实验动物品种或品系特有的反应,C,、实验动物个体的反应,D,、环境因素的影响,3.,将,R,表示实验动物总的反应、,E,表示实验误差，则动物实验中实验动物对实验处理的反应可用,“,R=(A+B+C),E,”,表示，其中,C,表示,(C),A,、实验动物种的反应,B,、实验动物品种或品系特有的反应,C,、实验动物个体的反应,D,、环境因素的影响,4.,将,R,表示实验动物总的反应、,E,表示实验误差，则动物实验中实验动物对实验处理的反应可用,“,R=(A+B+C),E,”,表示，其中,D,表示,(D),A,、实验动物种的反应,B,、实验动物品种或品系特有的反应,C,、实验动物个体的反应,D,、环境因素的影响,5.,一种对实验动物的心跳数、呼吸数、发热量、免疫机能、药物的毒性反应起主要影响作用的环境因素是,(A),A,、温度,B,、湿度,C,、光照,D,、噪声,6.,一种对实验动物姿式、摄食量、饮水量、母性行为有主要影响作用的环境因素是,(A),A,、温度,B,、湿度,C,、光照,D,、噪声,7.,一种对实验动物散热、实验动物传染病发生有主要影响作用的环境因素是,(B),A,、温度,B,、湿度,C,、光照,D,、噪声,8.,一种对实验大鼠坏尾病发生有显著影响的环境因素是,(B),A,、温度,B,、湿度,C,、光照,D,、噪声,9.,一种引起实验动物流泪、咳嗽、呼吸道粘膜炎症、严重者肺水肿的环境因素是,(C),A,、温度,B,、湿度,C,、氨浓度,D,、噪声,10.,一种对实验动物发情、排卵、育仔有主要影响的环境因素是,(D),A,、湿度,B,、空气洁净度,C,、气流,D,、光照,11.,可影响小鼠生殖的环境因素是,(D),A,、温度、湿度,B,、噪声,C,、光照,D,、以上都是,12.,国家标准规定实验动物饲养室的温度为,(D),A,、,22,24 B,、,20,24,C,、,18,26 D,、,18,29,13.,国家标准规定实验动物饲养室的湿度为,(B),A,、,50%,60%B,、,40%,70%C,、,30%,80%D,、,20%,90%,14.,国家标准规定实验动物饲养室的氨气浓度和噪声分别少于或等于,(A),A,、,14mg/m,和,60dB B,、,20ppm,和,70dB,C,、,20ppm,和,60dB D,、,14mg/m,和,70dB,15.,国家标准规定实验动物饲养室的湿度，指,(B),A,、绝对湿度,B,、相对湿度,C,、饱和湿度,D,、不饱和湿度,16.,光照对实验动物的生殖影响很大，其关键在于每日光照的,(D),A,、波长,B,、照度,C,、光通量,D,、明暗交替时间,17.,清洁级实验动物饲养室内空气洁净度应为,(D),A,、,100,级,B,、,1000,级,C,、,10000,级,D,、,100000,级,18.,空气洁净度达,10000,级的实验动物设施是,(C),A,、开放系统,B,、亚屏障系统,C,、屏障系统,D,、隔离系统,19.SPF,动物饲养在,(C),A,、开放系统,B,、亚屏障系统,C,、屏障系统,D,、隔离系统,20.,一种可置于开放系统，配有空气过滤装置和送风设备，空气洁净度达,100,级，适合于无菌小鼠饲养的设备是,(D),A,、悬挂式鼠架,B,、带有空气过滤帽的鼠盒,C,、层流架,D,、隔离器,21.,一种可置于开放系统，配有空气过滤装置和送风设备，空气洁净度达,10000,级，适合于清洁小鼠饲养的设备是,(C),A,、悬挂式鼠架,B,、带有空气过滤帽的鼠盒,C,、层流架,D,、隔离器,22.,下列说法哪一项是错误的,(D),A,、空气按气压差由清洁走廊饲养室亚清洁走廊,B,、物品由洁净物品贮藏室清洁走廊饲养室亚清洁走廊,C,、动物由清洁走廊饲养室亚清洁走廊,D,、人员由风淋室亚清洁走廊饲养室亚清洁走廊,23.,关于屏障系统中饲养员行走路线，下列说法哪一项是错误的,(D),A,、饲养员由一更衣室淋浴室二更衣室清洁走廊饲养室亚清洁走廊一更衣室,B,、饲养员由一更衣室淋浴室二更衣室清洁走廊洁净物品贮藏室清洁走廊饲养室亚清洁走廊一更衣室,C,、饲养员由一更衣室淋浴室二更衣室清洁走廊洁净物品贮藏室清洁走廊一饲养室清洁走廊二饲养室清洁走廊三饲养室亚清洁走廊一更衣室,D,、饲养员由一更衣室淋浴室二更衣室清洁走廊洁净物品贮藏室清洁走廊饲养室亚清洁走廊二饲养室亚清洁走廊二饲养室亚清洁走廊三饲养室亚清洁走廊一更衣室,24.,关于实验动物饲养室温、湿度测定，下列说法哪一项是错误的,(D),A,、测定前空调系统应在连续运转,24h,以上，测定期间