临床微生物项目与样本采集规范.pptx

,#,/173,临床微生物项目,与样本采集规范,汇报提纲,2,02,03,微生物新项目组合,微生物项目采集规范,01,微生物,新技术,3,1,微生物新技术,MALDI-TOF-MS,16S rRNA,和真菌,ITS/D2,（,28S),测序,微生物新技术,4,微生物质谱仪,16S rRNA,6,BLAST,比,对,9,苛养菌、厌氧菌、少见菌,10,杭州艾迪康少见菌分享,11,眼科医院角膜组织,-,链格孢霉,12,纤毛菌,血培养,13,女性,.65,岁，尿液标本,苛养,菌、少见菌,艾迪康微生物实验室,14,伤口分泌物，泥土味很重，咬琼脂，,G+,杆菌。,链霉菌,15,16,2,微生物项目组合,临床标本的分类,17,带菌样本,痰、咽拭子,生殖道分泌物,：,女：,阴道分泌物、宫颈分泌物、后穹窿分泌物；,粪便,相对无菌样本,尿液,血管内导管,肺泡灌洗液,生殖道分泌物：,男：前列腺液、精液、尿道分泌物,脓液、伤口分泌物、眼部分泌物,无菌样本,全血、骨髓,脑脊液,胸腹水,穿刺液：关节腔积液、鞘膜积液、盆腔积液、心包积液等全身各个部位的体液穿刺,胆汁,其它如组织、眼部标本等,组套项目：,痰培养：,包含标本类型：痰、咽拭子、肺泡灌洗液,一般细菌涂片,+,一般细菌培养及鉴定,+,真菌培养及鉴定,+,嗜血杆菌培养及鉴定,+,常规药敏定量试验,(MIC),生殖道分泌物培养（女）：包括,阴道分泌物、宫颈分泌物、后穹窿分泌物,支原体,+,衣原体,+,一般细菌培养及鉴定,+,常规药敏定量试验,(MIC)+,念珠菌培养及鉴定,生殖道分泌物培养（男）：包括,前列腺液、精液、尿道分泌物,一般细菌培养及鉴定,+,常规药敏定量试验,(MIC)+,淋球菌培养及鉴定,+,淋球菌涂片,血培养（成人）：,标本类型：全血,双套血培养（一套为血培养及鉴定（需氧培养）,+,厌氧菌培养及鉴定（厌氧培养）,临床微生物检验项目,18,组套项目,粪便（住院患者）：,包含标本类型：肛拭子、粪便,一般细菌培养及鉴定,+,沙门菌和志贺菌培养及鉴定,+,真菌培养及鉴定,+,常规药敏定量试验,(MIC),穿刺液、胸腹水：,一套血培养（一套为血培养及鉴定（需氧培养）,+,厌氧菌培养及鉴定（厌氧培养）,+,一般细菌涂片,一般细菌培养及鉴定,+,药敏,+,真菌培养及鉴定,+,药敏：,脓液、伤口分泌物、眼部分泌物、尿液等,临床微生物检验项目,19,普通项目,真菌培养及鉴定,+,药敏：皮屑、指甲、趾甲、毛发等,厌氧菌培养及鉴定：深部伤口,检测类项目：衣原体检测，,G/GM,试验，内毒素检测,/,肥达外斐试验,/,TSPOT,：,院感类：空气、物体表面、手卫生、消毒液、消毒器械、内镜、透析液,/,透析用水,临床微生物检验项目,20,若只送,阳性菌株,鉴定的情况，请按,16S,测序,（自主定价）或,微生物质谱,。,21,22,3,微生物项目采集,规范,临床医生最不能接受的微生物报告结果,:,1.,阳性率低！,2.,三种菌以上，疑是标本污染！,23,正确的采取、处理与运送标本,1.,及时,采集微生物标本作病原学检查,2.,在抗菌,药物使用前,采集标本,3.,采样时严格执行,无菌操作，,将污染情形降至最低。,4.,采样后,立即送检（,最好在,2h,内,保存不超过,24h,）,，,甚至床旁接种尤其是厌氧培养，,棉拭子标本宜用,运送培养基,，,尽量不要以棉花拭子收集样本。,5.,标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。,6.,送检标本应,注明来源，检验目的，临床诊断,7.,混有正常菌群的标本如痰、尿、伤口拭子，不可置肉汤培养。,8.,安全：标本收集时，注意安全防护；标本收集后，须避免他人被感染。,24,微生物样本采样基本原则,一、,血培养操作规范,25,26,27,血,培养阳性率统计,28,血培养检出率,29,血培养污染和假阳性,CLSI,建议方针,对于每位需要血培养的患者需采取,2,至,3,套,（一瓶需氧瓶和一瓶厌氧瓶为一套）。婴幼儿则只采集一瓶需氧瓶培养。,对于成年患者的血培养，只采单一的血培养是,不允许,的。因为单一血培养的结果的临床意义很难解释。,采血培养后的,2,至,5,天内，不需要重复采血培养，因为治疗后的,2,至,5,天内血液中的感染细菌不会马上消失。,30,血培养的套数,31,32,血培养假阳性的危害,1,、增加患者抗生素用量，破坏其微生态环境,2,、延长了住院天数,3,、延误病情诊断,4,、增加经济,负担,防止皮肤寄生菌或环境微生物污染,33,关于采血的一些问题,34,血培养送检指征（需,100%,送检率,）,采血培养应该在,使用抗生素之前,进行，如已应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养,间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前,0.5,小时采集血液，不知发热规律应在寒战或发热后半小时后进行。,35,采血时机,36,37,血培养采集流程,38,血培养采集流程,39,血培养采集流程,40,血培养采集流程,41,血培养采集流程,42,血培养采集流程,（除血液、骨髓、脑脊液外）的无菌体液,胸水、腹水、关节腔,积液、鞘膜积液、盆腔积液、心包积液等全身各个部位的体液穿刺,采集方法同血培养；严格无菌操作，抗菌药物使用前采集,二、穿刺液操作规范,43,采集足够的,量（,10ml,），,同时注入需氧和厌氧,瓶；,若标本量,少（,2ml,），可以只注入需氧瓶；若,2ml,，直接床旁接种巧克力平板和血平板；,再留至少,0.5ml,样本于无菌管内用于,标本涂片,。,44,项目组套,一套血培养（一套为血培养及鉴定（需氧培养）,+,厌氧菌培养及鉴定（厌氧培养）,+,一般细菌涂片,45,若标本量少,（,3ml,），注入儿童瓶,；若,3ml,，直接床旁接种巧克力平板和血平板；,再留至少,0.5ml,样本于无菌管内用于,标本涂片,。,三、脑脊液操作规范,46,项目组套,一般细菌涂片,+,一般细菌培养及鉴定,+,真菌培养及,鉴定,+,常规,药敏定量试验,(MIC),47,采集方式：漱口后，用力咳出,采集时间：用药前,送检：置无菌容器或运送培养基内立即送检,48,四、痰液标本采集和运送,49,50,一般,细菌涂片,+,一般细菌培养及,鉴定,+,真菌培养及鉴定,+,嗜血杆菌培养及鉴定,+,常规药敏定量试验,(MIC),呼吸道组套,51,不可避免地受到污染,唾液中口咽部定植菌的浓度可达,10,8,10,9,/ml,。,研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。,52,咳痰途经口咽部,如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于,25,个，白细胞小于,10,个，应不做或仅在特殊要求时做培养。,如做培养，报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污染明显”。,53,咳痰标本不合格，退检吗？,对于普通细菌性肺炎，,痰标本送检每天,1,次，连续,2,3,天。,不建议,24h,内多次采集，除非痰液外观性状出现改变；,怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集,3,天清晨痰液送检；,54,痰培养的送检次数,采集时间：用药前,采集方法：脓血和黏液；对不易获得粪便患者及幼儿，可用直肠拭子,采集后置保存液或输送培养基中送检。,送检：置,无菌容器或运送培养基立即,送检,避免在服用硫酸钡、油、镁或结晶物后立即采集标本；如服用过这些物品，至少在,5d,后再采集标本。,55,五,、大便培养标本采集规范,注意事项,56,一般细菌培养及鉴定,+,沙门菌和志贺菌培养及鉴定,+,真菌培养及鉴定,+,常规药敏定量试验,(MIC,),一般细菌培养及鉴定监测患者肠道菌群失调；,真菌培养及鉴定监测患者有无抗生素用量过渡，有无丝状真菌引起的肠道腹泻；,沙门志,贺培养及鉴定为肠道常见致病菌。,项目组合,57,推荐使用男性或女性专用拭子，置,运送培养基,送检。,男性前列腺：用肥皂和水清洗阴茎头，通过直肠按摩前列腺，用无菌拭子收集液体或使液体进入无菌管内。,男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔,2,4cm,，旋转拭子，至少停留,20s,，而使之容易吸收。,58,六,、生殖道标本采集规范,女性阴道：擦除过多的分泌物和排出液，用,2,支无菌拭子从阴道穹隆部黏膜处获取分泌物。,1,支需要涂片,1,支拭子做培养。,宫颈：用无润滑剂的扩阴器使宫颈可见，用拭子从宫颈上拭去黏液和分泌物，丢掉拭子，用新的无菌拭子紧帖宫颈内道轻轻采样。,后穹窿：送抽吸液。,59,60,生殖道,分泌物培养（女）：包括,阴道分泌物、宫颈分泌物、后穹窿分泌物,支原体,+,衣原体,+,一般细菌培养及鉴定,+,常规药敏定量试验,(MIC,)+,念珠菌培养及,鉴定；,生殖道分泌物培养（男）：包括,前列腺液、精液、尿道分泌物,一般细菌培养及鉴定,+,常规药敏定量试验,(MIC,),一,个项目一个标本,61,因,淋病奈瑟菌对温度相当敏感。应以专用拭子采集的标本，应尽快,送检（或床旁接种），,不可置于冰箱保存。,直接接种,标本于淋球菌专用培养基培养。,62,一般细菌培养及鉴定,+,常规,药敏定量试验,(MIC,)+,真菌培养,63,七,、,泌尿标本采集的规范,1,有典型的尿路感染症状；,2,肉眼脓尿或血尿；,3,尿常规,检查表现为,白细胞和,/,或亚硝酸盐,阳性；,4,不明原因的发热，无其他局部症状；,5,留置导尿管的病人出现发热；,6,膀胱排空功能受损；,7,泌尿系统疾病手术前。,64,尿液培养标本送检指征,正常人尿液是无菌的，而尿液细菌培养最大的问题是杂菌污染。正常人外尿道有大肠杆菌、葡萄球菌等存在。而这些细菌又是尿路感染中常见的病源菌，但,定量培养,时计数不会超过,10,3,CFU/ml,，,泌尿系感染时定量培养在,10,4,10,5,CFU/ml,。,65,您知道吗？,标本采集应力争在未使用抗生素之前注意避免消毒剂污染标本,清洁中段尿,中段尿,（晨尿最佳）约,10,20ml,直接排入专用的无菌容器中，立即送检，,2h,内接种，或,24,小时内冷藏保存,。,留置导尿管,收集尿液：穿刺导尿管吸取尿液，不能从收集袋中采集尿液。长期留置导尿患者，应在更换新尿管时留取尿标本,。,耻骨上膀胱穿刺,：评估膀胱内细菌感染的“金标准”,方法,直接导尿,：,可减污染，准确反映膀胱感染情况。,66,尿培养样本采集方法,采集中段尿时要先用肥皂,清洗,女性的外阴和男性的外生殖器包括包皮内，然后用清水冲洗。,长期留置导尿,管的患者应在,更换新管,时留取尿标本。,做厌氧培养时应膀胱穿刺采集尿。,67,尿培养样本采集规范,申请单上必须,注明,病人症状是否明显，这对于定量培养分析非常重要，尤其只有少量尿液标本。,室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因此若,30min,内不能及时培养尿液则必须冷藏，但也不能超过,24,小时。,68,特别注意,采集方式：用碘酒，酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液,采集时间：用药前,送检：,置,运送培养基,立即,送检,69,八、伤口创面和脓液,封闭性脓肿,项目组合,一般,细菌培养及鉴定,+,药敏,+,真菌培养及鉴定,+,药,敏,深部伤口：请选择,一般细菌培养及鉴定,+,药敏,+,真菌,培养及鉴定,+,厌氧菌培养,70,标本采集要记牢，无菌,采集,是,提前,；若已早用抗生素，停后用前观时候,。发热,要做血培养，双侧双瓶少漏网；何时采血要记清，寒战前后菌量浓,；取,后不能及时送，常温放置忌冰冻。尿液培养要计算，清洁外阴留中段,；培养,长出多种菌，辩清污染需重送。胸水腹水脑脊液，放入儿瓶阳性多,；条件,限制无血瓶，接种平板也可行。无菌体液较简单，迅速送检少麻烦,。最好,不取导管液，鉴定繁琐污染多。伤口脓液取深部，接近新鲜组织处,。特殊,培养要注意，避免冻伤与自溶。痰液培养杂菌多，清晨漱口要深咳；涂片合格继续做，正常致病必掌握。大便要取脓血处。志贺沙门需关注,；弧菌,霍乱和难辨，鉴定培养分阶段。细菌培养鉴定难，标本留取是关键；,医务,人员齐挑担，合理用药百姓赞。,送检口诀,71,