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,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,-,*,-,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,目标导航,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,知识梳理,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,重难聚焦,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,典例透析,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,随堂演练,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,随堂演练,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,随堂演练,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,随堂演练,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,随堂演练,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,随堂演练,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,随堂演练,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,随堂演练,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第,2,节动物细胞工程,1/33,1,.,简述动物细胞培养和动物细胞融合技术。,2,.,说出单克隆抗体技术和体细胞核移植技术原理和过程。,3,.,举例说出动物细胞工程应用。,2/33,一,二,一、动物细胞工程主要技术,1,.,动物细胞工程概念,动物细胞工程是应用,细胞学,方法,按照我们人类,需要,和,预定设计,有目标、有计划地,保留,、,改变,动物细胞和,创造,新动物细胞,进而培育成新,物种或者品种,一门科学技术。惯用技术有动物,细胞,培养、动物,细胞,融合、,单克隆,抗体和动物,体细胞,克隆等。,3/33,一,二,2,.,哺乳动物细胞培养技术,(1),动物细胞培养条件,培养基是,液体,培养基。,培养液成份,:,葡萄糖,、氨基酸、无机盐、维生素和,动物血清,等。,适宜,pH:,7.27.4,。,气体环境,:,培养容器中必须有足够,氧气,和一定,二氧化碳,以确保细胞代谢活动进行。进行动物细胞培养时,普通要用,二氧化碳,培养箱来控制,二氧化碳,浓度,以确保培养环境中,pH,稳定。,适宜温度,:,哺乳动物细胞培养环境温度应控制在,36.537.5,;,冷血动物细胞环境温度则应控制在,28,左右。,4/33,一,二,(2),动物细胞培养流程,:,无菌条件下,取动物组织块,(,动物胚胎或幼龄动物组织或器官,),剪碎,用适量,胰蛋白,酶或,胶原纤维,酶处理分散成单个细胞,制成细胞悬液,转入培养瓶中进行,原代,培养,贴满瓶壁细胞重新用胰蛋白酶或胶原纤维酶处理分散成单个细胞继续,传代,培养。,(3),细胞贴壁和接触抑制,:,动物细胞在培养液中悬浮生长一段时间后,大部分细胞会贴附到培养瓶表面,称为细胞贴壁。细胞贴壁后,其数目以指数增加方式增多,当细胞铺满培养瓶表面而形成致密单层细胞层时,细胞,分裂,停顿,这种现象称为细胞接触抑制。,思索：,为何选择动物胚胎或幼龄动物器官或组织进行动物细胞培养,?,提醒,:,动物胚胎或幼龄动物细胞分化程度低,易于培养。,5/33,一,二,二、细胞融合与单克隆抗体技术,1,.,细胞融合,(1),概念,:,细胞融合就是在一些,融合,因子作用下,将,两,个或,两,个以上细胞合并成为一个细胞技术。,(2),动物细胞融合与植物原生质体融合原理基本相同,诱导动物细胞融合惯用诱导原因有,聚乙二醇,、,电流刺激,或,病毒,等。在诱导原因作用下,细胞膜,发生一定程度损伤,从而使细胞实现相互粘连而融合在一起。,(3),动物细胞融合意义,:,克服了远缘杂交不亲和性。,6/33,一,二,2,.,单克隆抗体,(1),概念,:,一个,B,淋巴细胞只产生一个,特异抗体,由一个,B,淋巴细胞增殖形成细胞群所产生,单一型,抗体分子就称为单克隆抗体。,(2),单克隆抗体作用,作为诊疗试剂,:,能够快捷、准确地诊疗和治疗一些疾病。,假如将抗癌药品连接到专门识别某种,肿瘤,细胞单克隆抗体上,单克隆抗体就能够像,“,生物导弹,”,一样携带抗癌药品准确地聚集到肿瘤细胞,专一地杀死肿瘤细胞。,7/33,一,二,(3),单克隆抗体制备过程,8/33,一,二,3,.,动物体细胞克隆技术,克隆羊多莉培育过程主要是利用,细胞核移植,技术,将饥饿处理过羊乳腺上皮细胞与,去核,卵细胞电脉冲融合后,实现体细胞核转移到,无核,卵细胞中。然后,融合细胞借助于卵发育能力,由,体细胞核,主导而发育形成新个体。,4,.,动物细胞工程应用,快速繁殖优良品种,克隆转基因动物,拯救濒临灭绝动物和培育,人造器官,。,9/33,1,.,动物细胞培养,(1),概念,:,从动物体中取出相关组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜培养基中,让这些细胞生长和增殖。,(2),过程,10/33,(3),植物组织培养和动物细胞培养比较,11/33,2,.,动物细胞融合技术,(1),原理,:,细胞膜流动性、细胞增殖。,(3),结果,:,取得杂种细胞。,12/33,(4),动物细胞融合与植物体细胞杂交比较,13/33,3,.,单克隆抗体制备,(1),单克隆抗体制备原理,应用动物细胞融合技术使骨髓瘤细胞与免疫,B,淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。这种杂交瘤细胞继承两种亲代细胞遗传特征,既能像,B,淋巴细胞一样合成专一抗体,也能像骨髓瘤细胞一样在体外培养大量增殖,用这种起源于单个融合细胞培养增殖细胞群,可制备特异单克隆抗体。,14/33,(2),制备过程与操作技术,15/33,4,.,动物体细胞克隆,(1),动物体细胞克隆原理是动物细胞核全能性,而不是动物细胞全能性。因动物体细胞全能性受到限制,所以不能经培养直接发育成完整个体。用体细胞核移植技术能够得到克隆动物,说明动物体细胞细胞核含有全能性。体细胞克隆关键是细胞核移植技术。,16/33,(2),细胞核移植过程,因为控制生物性状遗传物质主要存在于细胞核中,克隆动物性状更靠近于核供体。但因为生物性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制,同时,生物性状还受环境影响,所以克隆动物性状与核供体性状不完全一致。从生殖方式来看,克隆动物属于无性生殖。,(3),克隆技术存在问题,克隆技术存在问题主要是成功率低、健康问题、表现出遗传和生理缺点等。,17/33,题型一,题型二,题型三,题型四,题型五,动物细胞培养,【典例,1,】,以下关于动物细胞培养叙述,正确是,(,),A.,细胞癌变发生于由原代培养向传代培养过渡过程中,B.,动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等,C.,动物细胞培养通常不会出现接触抑制现象,D.,动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶或胶原纤维酶处理,18/33,题型一,题型二,题型三,题型四,题型五,解析,:,在动物细胞培养过程中,最少两次用到胰蛋白酶或胶原纤维酶处理,第一次是使动物细胞分散开,制成细胞悬浮液,;,第二次是使细胞从培养瓶壁上分离下来,便于分瓶传代培养。细胞传代培养,50,代以后,一些细胞不能再传代培养,还有一些细胞核型会发生改变,再继续培养,这些细胞会无限制地传代下去。动物细胞培养液中含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等,通常还需要加入血清、血浆等一些天然成份,不需要生长素而需要维生素。在培养过程中动物细胞会出现接触抑制现象。,答案,:,D,19/33,题型一,题型二,题型三,题型四,题型五,动物细胞融合,【典例,2,】,能使动物细胞融合特有诱导因子是,(,),A.,离心,B.,灭活病毒,C.,电刺激,D.,振动,解析,:,动物细胞融合惯用诱导因子是聚乙二醇和灭活病毒。其中聚乙二醇既可用于诱导植物原生质体融合,又可用于诱导动物细胞融合,而灭活病毒只能用于诱导动物细胞融合。,答案,:,B,20/33,题型一,题型二,题型三,题型四,题型五,单克隆抗体制备,【典例,3,】,单克隆抗体技术在疾病诊疗和治疗以及生命科学研究中含有广泛应用。以下关于单克隆抗体叙述,错误是,(,),A.,特异性强、灵敏度高,B.,与抗癌药品结合可制成,“,生物导弹,”,C.,体外培养,B,淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体,D.,由,B,淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成杂交瘤细胞分泌,解析,:,B,淋巴细胞在体外培养液中不能无限增殖,所以也就不能分泌大量抗体。,答案,:,C,21/33,题型一,题型二,题型三,题型四,题型五,反思领悟,单克隆抗体与常规抗体比较,22/33,题型一,题型二,题型三,题型四,题型五,动物细胞核移植,【典例,4,】,一只羊卵细胞核被另一只羊体细胞核置换后,这个卵细胞发育成早期胚胎后,再移植入第三只羊子宫内发育,结果产下一只羊羔。这种克隆技术含有各种用途,不过不能,(,),A.,有选择地繁殖某一性别家畜,B.,繁殖家畜中优良品种,C.,用于保留物种,D.,改变动物基因,解析,:,该技术完整地将一个细胞核移植入另一个细胞,并未破坏或改变细胞核中遗传基因。,答案,:,D,反思领悟,由核移植技术产生个体具备两个生物遗传物质,但因为细胞核和细胞质作用不一样,遗传物质主要来自细胞核,所以,后代性状基本与提供核生物一致。,23/33,题型一,题型二,题型三,题型四,题型五,动物细胞工程应用,【典例,5,】,某研究小组利用成年猪动脉血管细胞和能够模拟胚胎环境新型生物反应器,成功地在试验室里培育出新动脉血管。这种血管外形和功效都与真血管一样。这一研究结果是动物细胞工程领域重大进展。以下关于以上技术叙述,不正确是,(,),A.,以上技术属于,“,克隆,”,B.,这项技术中可能要利用去核卵细胞,C.,这项技术关键是激发血管细胞全能性,D.,这项技术关键是激发血管细胞发育成血管潜能,24/33,题型一,题型二,题型三,题型四,题型五,解析,:,细胞全能性是指含有某种生物全部遗传信息已经分化细胞,依然含有发育成完整个体潜能。但题干信息显示,只是将动脉血管细胞培养成了新动脉血管,即激发了细胞发育成某种器官潜能。因为高度分化动物细胞全能性受到了严格限制,所以,要表示其全能性,当前惯用方法是借助于去核卵细胞,故这项技术可能要利用去核卵细胞。这项技术是将动脉血管细胞再培育为动脉血管,属于无性生殖范围,所以属于克隆。,答案,:,C,25/33,1,2,3,4,1.,以下相关植物组织培养和动物细胞培养比较,叙述错误是,(,),A.,所用培养基成份基本相同,B.,植物组织培养结果是培育成植株,动物细胞培养结果是培育成很多细胞,C.,植物组织培养目标是快速繁殖和取得无病毒植株,动物细胞培养目标是取得细胞或细胞产物,D.,植物组织培养原理是细胞全能性,动物细胞培养原理是细胞增殖,解析,:,植物组织培养所用培养基成份主要是一些营养物质、激素,而动物细胞培养所用培养基中还需要加入动物血清等。,答案,:,A,26/33,1,2,3,4,2.,以下关于动物细胞融合叙述,不正确是,(,),A.,动物细胞融合时需人工诱导,B.,动物细胞融合时应先用纤维素酶处理,C.,动物细胞融合时存在细胞核融合,D.,动物细胞融合最主要用途是制备单克隆抗体,解析,:,动物细胞融合时需要人工诱导完成,;,在融合过程中,现有细胞膜融合,又有细胞核融合,;,动物细胞融合主要用途是制备单克隆抗体。动物细胞融合时不需用纤维素酶处理,而是用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。,答案,:,B,27/33,1,2,3,4,3.,以下关于动物细胞培养叙述,错误是,(,),A.,用于培养细胞大都取自胚胎或幼龄动物器官或组织,B.,将所取组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞,C.,在培养瓶中要定时用胰蛋白酶等处理使细胞从瓶壁上脱离,制成悬浮液,D.,动物细胞培养只能传至,50,代左右,所培育细胞会衰老死亡,28/33,1,2,3,4,解析,:,进行动物细胞培养时,用于培养细胞取自于胚胎或幼龄动物器官或组织。动物组织细胞间存在着一定量胶原纤维等蛋白质,易被胰蛋白酶等催化分解,从而使细胞分散开来。当贴壁生长细胞分裂生长到表面相互接触时就会停顿分裂增殖,所以需定时用胰蛋白酶等处理使细胞从瓶壁上脱离下来,制成细胞悬浮液,并进行传代培养。动物细胞培养传至,50,代左右时,部分细胞遗传物质可能会发生改变,而且带有癌变特点,能在培养条件下无限地分裂增殖。,答案,:,D,29/33,1,2,3,4,4.,科学家经过转基因技术取得了含有些人生长激素基因奶牛,假如要加速转基因奶牛繁育,能够对此转基因奶牛进行克隆,(,以下列图所表示,),请结合图示回答以下问题。,30/33,1,2,3,4,(1),在进行细胞培养时,要对取自转基因奶牛组织细胞进行分散处理,形成单个细胞,这个过程中需要用,酶处理。,(2),用于核移植供体细胞,普通都选取传代,10,代以内细胞,原因是,。,(3),在进行原代培养时,细胞增殖方式是,。另外,细胞增殖还表现出,和接触抑制等特点。,(4),将进行培养供体细胞注入去核卵细胞中,去除卵细胞细胞核目标是,。,(5),将重组细胞在培养液中培养成重组胚胎移入受体母牛后,该母牛就会生出与供体奶牛核遗传物质相同犊牛,但也不是,100%,复制,原因最可能是,。,(6),上述动物细胞工程中包括技术有,。转基因奶牛克隆成功,说明动物,含有全能性。,31/33,1,2,3,4,解析,:,(1),惯用胰蛋白酶或胶原纤维酶处理动物组织细胞使其分散成单个细胞。,(2),传代,10,代以内细胞代谢旺盛、分裂能力强,遗传物质没有发生改变,适于作核移植供体细胞。,(3),在进行原代培养时,细胞以有丝分裂方式进行增殖,同时表现出贴壁生长和接触抑制现象。,(4),去除卵细胞细胞核目标是使克隆出动物个体核遗传物质全部来自供体细胞。,(5),生物性状是细胞核基因和细胞质基因共同作用结果,同时,生物性状还受环境影响,所以,克隆动物不可能是核供体,100%,复制品。,(6),该克隆动物培育过程中包括体细胞核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术,转基因奶牛克隆成功说明高度分化动物体细胞细胞核含有全能性。,32/33,1,2,3,4,答案,:,(1),胰蛋白,(,或胶原纤维,),(2),该种细胞代谢旺盛、分裂能力强,且遗传物质没有发生改变,(3),有丝分裂贴壁生长,(4),使克隆出动物个体核遗传物质全部来自供体细胞,(5),生物性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制,;,生物性状还受环境原因影响,(6),体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植体细胞细胞核,33/33,
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