医学微生物学-细菌生理消毒.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,一、细菌的理化性状,细菌的化学组成,：水、无机盐、蛋白质、糖类、脂质和核酸等。,细菌的物理性状,：,光学性质细菌为半透明体。,带电现象均带负电。其带电现象与染色反应、,凝集反应、抑菌和杀菌作用等密切相关。,半透性细菌的细胞壁和细胞膜都有半透性。,渗透压菌体内为高渗透压。,二、细菌的生长繁殖,根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型,自养菌,和,异养菌,。,自养菌(,autotroph,)：,以简单的无机物为原料，合成菌体成分。,异养菌(,heterotroph,)：,以多种有机物为原料，合成菌体成分并获得能量。所有的病原菌都是异养菌。,营养物质,水、碳源、氮源、无机盐、生长因子,酸碱度(,pH),温度,气体环境,专性需氧菌：,兼性厌氧菌：大多数病原菌属于此。,专性厌氧菌：,细菌生长繁殖的条件,细菌的生长,细菌个体的生长,细菌以简单的二分裂方式进行繁殖。,繁殖一代所需时间约20-30,min。,但少数细菌时间较长，如结核分枝杆菌一代为18小时。,细菌群体的生长,迟缓期(,lag phase),对数期(,logarithmic phase),稳定期(,stationary phase),衰亡期(,decline phase),细菌的生长曲线,分解代谢产物和细菌的生化反应,糖发酵试验,VP,试验,甲基红试验,枸橼酸盐利用试验,吲哚试验,硫化氢试验,三、细菌的新陈代谢,糖发酵试验,不同的细菌分解糖的能力和代谢产物不同，可以鉴别细菌。,VP,试,验,大肠杆菌,产气杆菌,分解葡萄糖产酸产气,丙酮酸,乙酰甲基甲醇,甲酸、乙酸,二乙酰,碱性环境氧化,胍基,红色化合物（,VP,试验阳性）,产气杆菌,大肠杆菌,阴性,阳性,大肠杆菌：,产气杆菌：,甲基红试验,大肠杆菌：,产气杆菌：,产气杆菌使丙酮酸脱羧，形成中间产物，培养液,pH5.4，,指示剂呈黄色（阴性）；大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，培养液,pH5.4，,指示剂红色（阳性）。,阳性,阴性,对照,枸橼酸利用试验,大肠杆菌：,产气杆菌：,有些细菌能分解培养基中的枸橼酸盐，作为唯一的碳源生成碳酸盐，使培养基变碱性，由绿色变深蓝色。,阳性,吲哚试验,大肠杆菌：,产气杆菌：,大肠杆菌，变形杆菌等含有色氨酸酶，分解培养基中的色氨酸产生靛基质（吲哚无色,）,。加入对二甲基氨基苯甲醛生成玫瑰色吲哚。,H,2,S,试验,变形杆菌等能分解胱氨酸，产生硫化氢与培养基中的醋酸铅或硫酸亚铁作用，生成硫化铅或硫化铁（黑色）,。,热原质(,pyrogen,),：,产生热原质的细菌大多是革兰阴性菌，热原质即细胞壁的脂多糖。,二、合成代谢产物,毒素与侵袭性酶：,革兰阴性菌细胞壁的脂多糖，其毒性存在于类脂,A,的部分，当菌体裂解后释放出来，故称,内毒素,。,革兰阳性和少数革兰阴性菌在代谢过程当中，可以分泌有毒的蛋白质，称为,外毒素,。,某些细菌还能产生,侵袭性的酶,，损伤机体组织，促进细菌侵袭扩散，如透明质酸酶。,色素：,水溶性色素和,脂溶性色素,。,抗生素：,某些微生物代谢过程中产生的能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。,细菌素：,某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。,维生素：,细菌能合成某些维生素除供自身需要外，还能分泌到周围环境中。,四、细菌的人工培养,根据不同标本及不同培养目的，可选用不同的接种和培养方法。常用的有,分离培养,和,纯培养,两种方法。,病原菌的人工培养一般采用35-37，培养时间多数为18-24,h，,但有时需根据菌种及培养目的作最佳选择。,1.,培养细菌的方法,2.,培养基(,culture medium),培养基：,是专供微生物生长繁殖使用的混合营养物,制品，由人工方法配制而成。,按其营养组成和用途分类：,基础培养基、营养培,养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养。,按其物理状态分类：,固体培养基、液体培养基、,半固体培养基。,厌氧罐,3.,细菌在固体培养基中的生长情况,光滑型菌落,粗糙型菌落,粘液型菌落,4.,细菌在液体培养基中的生长情况,菌膜,菌沉淀,均匀浑浊,对照,5.,细菌在半固体培养基中的生长情况,1：有动力,2：无动力,3,：对照管,细菌的分类层次,：,界、门、纲、目、科、属、种。,细菌的命名：,采用拉丁双名法，每个菌名由两个拉丁字组成。前一字为属名，用名词，大写；后一字为种名，用形容词，小写。中文的命名次序与拉丁相反，种名在前，属名在后。,Staphylococcus aureus,金黄色葡萄球菌,五、细菌的分类,第三章 消毒灭菌与微生物实验室生物安全,消毒灭菌常用术语,灭菌,（,sterilization,）,：,杀灭物体上所有微生物,的方法。,消毒,（,disinfection,）,：,杀死物体上或环境中的,病原微生物的方法。,防腐（,antisepsis,）,：,防止或抑制皮肤表面细菌,生长繁殖的方法。,清洁（,cleaning,）,：,是指通过除去尘埃和一切污,秽以减少微生物数量的过程。,无菌（,asepsis,）,和,无菌操作,：,无菌是,无,活菌的,意思，多是灭菌的结果。防止细菌进入人体,或其它物品的操作技术，称为无菌操作。,物理消毒灭菌法,热力灭菌法,干热灭菌法,焚烧,烧灼,干烤（,160170/2h,）,红外线,湿热灭菌法,巴氏消毒法,pasteurization,煮沸法,流动蒸气消毒法,间歇蒸气灭菌法,高压蒸气灭菌法,121,15,个大气压,20,分钟,同一温度下,湿热比干热效果好,用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，而仍保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法。,6230,或,72 30,辐射杀菌法,紫外线,265266nm,杀菌原理,用途与缺陷,电离辐射,、,射线,滤过除菌法,0.22um,不耐热血清等,空气,超声波杀菌法,干燥与低温抑菌法,冷冻真空干燥保存菌种,化学消毒灭菌法,(,外用,),常用消毒剂的杀菌机制,使菌体蛋白变性或凝固,干扰微生物酶系统和影响其代谢,损伤细胞膜,选择原则,效果好,毒力低,便宜,消毒剂的主要种类,类别,作用机制,常用种类,酚类,蛋白变性，细胞膜损伤,石炭酸,醇类,蛋白变性,乙醇,氧化剂,氧化、蛋白沉淀,高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒,重金属盐,氧化、蛋白酶变性,红汞、硫柳汞,表面活性剂,蛋白变性，细胞膜损伤,新洁而灭,染料,干扰氧化、抑制繁殖,龙胆紫,酸碱类,破坏膜、壁，蛋白凝固,醋酸、生石灰,烷化剂,蛋白质、核酸烷基化,环氧乙烷,高效消毒剂,（,high-level disinfectants,）,1,.,含氯消毒剂,；,2,.,过氧化物消毒剂,；,3,.,醛类消毒剂,；,4,.,环氧乙烷,中效消毒剂,（,intermediate-level disinfectants,）,1,.,含碘消毒剂,；,2,.,醇类消毒剂,低效消毒剂,（,low-level disinfectants,）,1,.,季铵盐类,；,2,.,氯已定,；,3,.,高锰酸钾,消毒灭菌的应用,影响消毒灭菌效果的因素,微生物的种类、数量与物理状态,消毒剂的性质、浓度与作用时间,温度,酸碱度,有机物,病原,微生物实验室,生物安全,对病原微生物的分类管理 对实验室的分级管理,