怎样写好读书报告(成教专本班).ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,怎样写好读书报告(成教专本班),一、如何制作,PPT,才美观,口诀：三七二十四,3,，是指一张片中不要超过三种颜色,强心苷的作用机制,NKA,NCE,AP,2K,+,3Na,+,K,+,i,Na,+,i,Ca,2+,i,Na,+,i,Ca,2+,i,NAK=Na+-K+-ATP,酶,AP=,动作电位,NCE=,钠钙双向交换,3,，是指一张片中不要超过三种颜色,强心苷的作用机制,NKA,NCE,AP,2K,+,3Na,+,K,+,i,Na,+,i,Ca,2+,i,Na,+,i,Ca,2+,i,NAK=Na+-K+-ATP,酶,AP=,动作电位,NCE=,钠钙双向交换,7,，是指一张片中不要超过七行字,CO,中毒时，,CO,血红蛋白、肌红蛋白及细胞色素,a1,a3,、结合造成机体广泛缺氧和能量缺乏，使细胞膜的通透性增强或细胞破损，造成细胞外水肿。由于大脑对氧的需求量大，氧储备极少，所以大脑对,CO,中毒影响最为敏感，对缺氧的耐受性差，并首先受累。缺氧引起颅内压增高，同时，缺氧和脑水肿，造成脑血液循环障碍，引起昏迷；而血管吻合支较少和血管水肿、结构不健全的苍白球可出现软化、坏死、或白质广泛性脱髓鞘病变，产生帕金森氏综合征和一系列精神症状。由于脑白质与皮质的血供之比为,1:4,，因而缺氧对白质的损害相对重些。部分重症,CO,中毒患者，在意识障碍恢复后，经过约,2,60,天的假愈期后又出现精神意识障碍、锥体外系神经障碍、锥体系神经损害、大脑皮质局灶性功能障、周围神经炎等，即产生了迟发性脑病的症状。分析原因很多专家考虑髓鞘脱失，经过,2,60,天的发展，由量变到质变以至发展到白质中的上下传导束严重损害，不能维持正常的运动感觉机能和网状上行激活系统的功能。,高压氧能达到常压下不能达到的氧分压，使氧的储藏量、氧的穿透力和物理溶解氧的量发生显著增加，从而对许多疾病的治疗效果起到一个质的飞跃。根据亨利（,Henry,）定律：在某一温度下，气体在液体中的溶解量与该气体分压成正比。即某气体分压越高，则溶解于血浆和组织液中的气体越多。,7,，是指一张片中不要超过七行字,CO,中毒时，,CO,血红蛋白、肌红蛋白及细胞色素,a1,a3,、结合造成机体广泛缺氧和能量缺乏，使细胞膜的通透性增强或细胞破损，造成细胞外水肿。由于大脑对氧的需求量大，氧储备极少，所以大脑对,CO,中毒影响最为敏感，对缺氧的耐受性差，并首先受累。缺氧引起颅内压增高，同时，缺氧和脑水肿，造成脑血液循环障碍，引起昏迷。,24,，是指字体要超过,24,号,CO,中毒时，,CO,血红蛋白、肌红蛋白及细胞色素,a1,a3,、结合造成机体广泛缺氧和能量缺乏，使细胞膜的通透性增强或细胞破损，造成细胞外水肿。由于大脑对氧的需求量大，氧储备极少，所以大脑对,CO,中毒影响最为敏感，对缺氧的耐受性差，并首先受累。缺氧引起颅内压增高，同时，缺氧和脑水肿，造成脑血液循环障碍，引起昏迷；而血管吻合支较少和血管水肿、结构不健全的苍白球可出现软化、坏死、或白质广泛性脱髓鞘病变，产生帕金森氏综合征和一系列精神症状。由于脑白质与皮质的血供之比为,1:4,，因而缺氧对白质的损害相对重些。部分重症,CO,中毒患者，在意识障碍恢复后，经过约,2,60,天的假愈期后又出现精神意识障碍、锥体外系神经障碍、锥体系神经损害、大脑皮质局灶性功能障、周围神经炎等，即产生了迟发性脑病的症状。分析原因很多专家考虑髓鞘脱失，经过,2,60,天的发展，由量变到质变以至发展到白质中的上下传导束严重损害，不能维持正常的运动感觉机能和网状上行激活系统的功能。,高压氧能达到常压下不能达到的氧分压，使氧的储藏量、氧的穿透力和物理溶解氧的量发生显著增加，从而对许多疾病的治疗效果起到一个质的飞跃。根据亨利（,Henry,）定律：在某一温度下，气体在液体中的溶解量与该气体分压成正比。即某气体分压越高，则溶解于血浆和组织液中的气体越多。,CO,中毒时，,CO,血红蛋白、肌红蛋白及细胞色素,a1,a3,、结合造成机体广泛缺氧和能量缺乏，使细胞膜的通透性增强或细胞破损，造成细胞外水肿。由于大脑对氧的需求量大，氧储备极少，所以大脑对,CO,中毒影响最为敏感，对缺氧的耐受性差，并首先受累。缺氧引起颅内压增高，同时，缺氧和脑水肿，造成脑血液循环障碍，引起昏迷；而血管吻合支较少和血管水肿、结构不健全的苍白球可出现软化、坏死、或白质广泛性脱髓鞘病变，产生帕金森氏综合征和一系列精神症状。由于脑白质与皮质的血供之比为,1:4,，因而缺氧对白质的损害相对重些。部分重症,CO,中毒患者，在意识障碍恢复后，经过约,2,60,天的假愈期后又出现精神意识障碍、锥体外系和锥体系神经损害等，即产生了迟发性脑病的症状。,最后，将字体加粗,尽量多用黑体字,最后，将字体加粗,尽量多用黑体字,母板和字体的选择,白底、黑字,蓝底、白字,不要整版整版的展现内容,不要整版整版的展现内容,标题和分标题要断好,行,高压氧治疗一氧化碳中 毒的机理浅析,高压氧治疗一氧化碳中毒的 机理浅析,反应条件为,:94,变性,5 min,，再以,94,变性,50 s,，,55,退火,50 s,，,72,延伸,1 min,，,30,个循环，最后再,72,延伸,5 min,。,内容的展现，不要用“飞入”形式,1,材料与方法,1.1,人新鲜脐带由湖南省妇幼保健院提供。,1.2,药物与试剂略。,1.3,人脐静脉内皮细胞的培养,用,1640,培养基常规培养。,以,因子相关抗原免疫 组化染色阳性，证实为内皮细胞。,1.4,细胞冻融液促凝活性,(PCA),的检测,采用一期凝固法。,1.5,TF,抗原测定,采用双夹心,EL ISA,法,具体过程依为,A D I,试剂盒说明进行。,1.6,TF mRNA,检测,用,PCR,法检测。,反应条件为,:94,变性,5 min,，再以,94,变性,50 s,，,55,退火,50 s,，,72,延伸,1 min,，,30,个循环，最后再,72,延伸,5 min,。,内容的展现，不要用“飞入”形式,1,材料与方法,1.1,人新鲜脐带由湖南省妇幼保健院提供。,1.2,药物与试剂略。,1.3,人脐静脉内皮细胞的培养,用,1640,培养基常规培养。,以,因子相关抗原免疫 组化染色阳性，证实为内皮细胞。,1.4,细胞冻融液促凝活性,(PCA),的检测,采用一期凝固法。,1.5,TF,抗原测定,采用双夹心,EL ISA,法,具体过程依为,A D I,试剂盒说明进行。,1.6,TF mRNA,检测,用,PCR,法检测。,二、怎么查文献,不要用百度,要从专业网站上查,三、读书报告的基本格式,（一）首张,1.,论文标题,2.,报告者姓名,3.,报告者单位,川芎嗪抑制肿瘤坏死因子,诱导人脐静脉血管内皮细胞组织因子 表达的机制研究,20XX级专升本X班,吴卫国,（二）前言,简要介绍,相关背景,研究目的,川芎嗪,(tetramethylpyrazine,TMP),是从中药川芎中分离提纯出来的一种生物碱单体,其化学结构为四甲基吡嗪。近年来,对川芎嗪药理学研究主要集中于抗氧自由基损伤、抗脂质过氧化、钙通道阻滞、改善微循环等,1,。本室前期工作表明川芎嗪可显著阻断,TNF,所诱导的内皮细胞组织因子,(tissue factor,TF),表达。但是,川芎嗪阻断,TNF,所致内皮细胞,TF,表达的机制如何罕见报道。本研究通过体外培养人脐静脉血管内皮细胞,(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),观察川芎嗪抑制,TNF,致,TF,表达的细胞信号转导机制,为临床防治心脑血管血栓性疾病提供理论及实验基础。,川芎嗪,(TMP),是从中药川芎中分离提纯出来的一种生物碱单体，其化学结构为四甲基吡嗪。近年来，对川芎嗪药理学作用进行了大量的研究。本室前期工作表明川芎嗪可显著阻断,TNF,所诱导的内皮细胞组织因子,(TF),表达。但是，川芎嗪阻断,TNF,所致内皮细胞,TF,表达的机制如何罕见报道。本研究通过体外培养人脐静脉血管内皮细胞,(HUVEC),，观察川芎嗪抑制,TNF,致,TF,表达的细胞信号转导机制，为临床防治心脑血管血栓性疾病提供理论及实验基础。,（三）材料与方法,1,材料与方法,1.1,人新鲜脐带由湖南省妇幼保健院提供。,1.2,药物与试剂川芎嗪购自北京第四制药厂,批号,:961048,规格,2 ml:40 mg,。,TNF,为北京邦定公司产品,;,乏,F,血浆和,TF,抗原测定试剂盒购自美国,ADI,公司,;TF,单抗,(T59-SB7),由美国,Morrissey JH,惠赠,;Staurosporine,和,PMA,为,Sigma,公司产品,;NF-B,多抗及,SABC,免疫组化试剂盒购自武汉博士德生物工程公司,;III-S,型组蛋白、,32P-ATP,购自北京亚辉生物医学工程公司。,1.3,人脐静脉内皮细胞的培养用,0125%,的胰蛋白酶灌注消化脐静脉后,离心收集内皮细胞,调整细胞浓度在,3 108,个,/L,接种于,012%,明胶包被的,75 cm2,培养瓶,置于,37,5%CO2,饱和湿度的孵箱中培养,每,2,天换液,1,次,培养液为含,20%,新生牛血清的,RPMI-1640,。待细胞长满,2/3,瓶底后进行传代。倒置相差显微镜观察,HUVECs,为呈铺路石状的单层多角型细胞,因子相关抗原免疫组化染色阳性,证实为内皮细胞。,1.4,细胞冻融液促凝活性,(PCA),的检测采用一期凝固法。细胞培养后,于,37/-80,反复冻融,3,次,以获取细胞冻融液。取冻融液,100 l,加入正常人混合血浆,100 l,37,温育,3 min,然后加入,01025 mol/LCaCl2 100l,计录凝固时间,(PT),。以,56,处理过的兔脑凝血活酶,(,富含,TF,与磷脂,),用生理盐水作不同浓度稀释后,测定,PT,以凝固时间为,36 s,定义为,1 000 mU,以,PT,为横轴,兔脑凝血活酶的活性为纵轴建立标准曲线,待测细胞冻融液,PCA,即可从标准曲线中求得。,1.5,TF,抗原测定采用双夹心,EL ISA,法,其原理是吸附在固体测定板上的多克隆抗体与被测抗原结合,加入酶连接的单克隆抗体与已被多克隆抗体结合的抗原结合,最后加入生色底物,在酶标仪上测定含量。具体过程依为,American Diagnostic Inc,试剂盒说明进行。,1.6,TF mRNA,检测用,Trizol,试剂一步法提总,RNA,紫外分光光度计检测浓度和纯度,合成,cDNA,进行,PCR,反应。,TF,正义链为,5-CTACTGTTTCAGTGT2TCAAGCAGTGA-3;,反义链为,5-CAGTGCAATATAG2CATTTGCAGTAGC-3,扩增产物为,182 bp,片断,以,GAPDH,作为内参照,正义链为,5-GTCAGTGGTGGACCTGACCT-3;,反义链为,5-TGAGGAGGGGAGATTCAGTG-3,扩增产物为,400 bp,。反应条件为,:94,变性,5 min,再以,94,变性,50 s,55,退火,50 s,72,延伸,1 min,30,个循环,最后再,72,延伸,5 min,。,1.7,PKC,活性测定,bufferA,组成,Tris-HCl 20 nmol/L(pH 715),210 mmol/L EDTA,015 mmol/L,乙二醇双,(2-,氨基乙醚,),四乙酸,2 mmol/L,苯甲硫酰氟化物,25g/ml,亮抑蛋白酶肽,0133 mol/L,蔗糖。用磷酸缓冲液,(PBS),和,bufferA,各洗涤细胞两次,洗涤后的细胞加入,5mlbufferA,并从培养瓶上刮下细胞。用玻璃匀浆器于冰浴中制匀浆,离心,30 min(100 000 r/min),上清液作为,PKC,检测的细胞浆部分。沉淀部分用,bufferA,再悬浮和洗涤,离心,60 min(100 000 r/min),弃上清,沉淀部分加入,5 ml,含,012%TritonX-100,的,bufferA,进行悬浮,于,0,摇动孵育,1 h,再离心,60 min(100 000 r/min),上清液作为,PKC,检测的细胞膜部分。以,Bradford,法测定各部分蛋白质含量。以,-S,型组蛋白为底物,在反应体系中加入,32 P-ATP,通过测定底物的磷酸化分别测定胞浆及胞膜,PKC,活性高低。,1.8,NF-B,的免疫组织化学染色培养的细胞以,PBS,洗,2,次后,浸入,95%,乙醇中固定,15 min,PBS,漂洗,2 min 3,次,新配的,3%,过氧化氢灭活内源性过氧化酶,洗片后,10%,山羊血清,37,封闭,20 min,倾去血清,滴加兔抗人,NF-B,多抗,以常规,ABC,方法进行免疫组织化学染色,:,滴加生物素化的羊抗兔,IgG,及生物素辣根过氧化物酶复合物,(ABC),DAB,呈色,封片后,镜检。,1.9,统计学方法采用,Instat,储存和分析数据。组间均数比较用,t,检验,多组间比较用方差分析,行,q,检验。,看你晕不晕！,1,材料与方法,1.1,人新鲜脐带由湖南省妇幼保健院提供。,1.2,药物与试剂略。,1.3,人脐静脉内皮细胞的培养用,1640,培养基常规培养。以,因子相关抗原免疫,组化染色阳性，证实为内皮细胞。,1.4,细胞冻融液促凝活性,(PCA),的检测采用一期凝固法。,1.5,TF,抗原测定采用双夹心,EL ISA,法,具体过程依为,A D I,试剂盒说明进行。,1.6,TF mRNA,检测用,PCR,法检测。,反应条件为,:94,变性,5 min,，再以,94,变性,50 s,，,55,退火,50 s,，,72,延伸,1 min,，,30,个循环，最后再,72,延伸,5 min,。,材料与方法,1.7,PKC,活性测定,以,Bradford,法测定各部分蛋白质含量（通过测定底物的磷酸化分别测定胞浆及胞膜,PKC,活性高低）。,1.8,NF-B,的检测,用免疫组织化学染色（培养的细胞用乙醇中固定和洗片后,10%,山羊血清,37,封闭,滴加兔抗人,NF-B,多抗,以常规,ABC,方法进行免疫组织化学染色,:,滴加生物素化的羊抗兔,IgG,及生物素辣根过氧化物酶复合物,(ABC),DAB,呈色,封片后,镜检）。,1.9,统计学方法,组间均数比较用,t,检验,多组间比较用方差分析,行,q,检验。,（四）实验结果,实验结果,实验结果,2.1,内皮细胞的鉴定,(,原代培养的人脐静脉内皮细胞呈单层生长，互不重叠，细胞呈多角形或短梭形,铺路石状镶嵌排列，边界清楚,),。,(,台盼蓝染色显示,98%,以上实验用细胞为活细胞,),。,F,间接免疫荧光鉴定，阳性率,98%,以上的细胞呈阳性染色，证实其为内皮细胞。,2.2TMP,对,TNF,诱导内皮细胞,TF,表达与,PKC,途径的关系,PKC,阻断剂,Staurosporine,单独对内皮细胞,TF mRNA,、,活性及抗原无影响,(,P,0105),；,PKC,激动剂佛波酯可明显提高,TF mRNA,、,活性及抗原的表达,(,P,0101),；,TMP,预处理后再加入,TNF,作用,2 h,及,6 h,，,与,Staurosporine,预处理相似：,TMP,可明显抑制,TNF,诱导的内皮细胞,mRNA,、,活性及抗原的增加,(,P,0101),（五）讨论和（或）结论,1.,TNF,能诱导,HUVEC TF,的表达；,结论,2.PKC,及,NF-B,的活化在,TNF,诱导,HUVEC TF,的表达中发挥着重要的作用；,3.TMP,通过影响,PKC,途径及,NF-B,的活化,来抑制,TNF,诱导,TF,的表达。,（六）参考文献,1,万敬员,叶笃筠,吴萍,等,.,川芎嗪对脂多糖诱导巨噬细胞环氧化酶,2,表达和心肌细胞凋亡的影响,J.,中国中西医结合杂志,2004,24(10):906 911,2 P ICCH IA,GAO X,BELMADAN I S,et al.Tumor necrosis factor-alpha induces endothelial dysfunction in the p rediabetic metabolic syndrome J.Circ Res,2006,99(1):69 77,3,SHECHTER M,MARA I I,MARA I S,et al.The association of endothelial dysfunction and cardiovascular events in healthy subjects and patients with cardiovascular disease J.IsrMed Assoc J,2007,9(4):271 276,4 STEFFEL J,ARNET C,AKHMEDOV A,et al.Histamine differentially interactswith tumor necrosis factor-alpha and thrombin in endothelial tissue factor induction:the role of c-Jun NH2-terminal kinase J.J Thromb Haemost,2006,4(11):452-460,5 BO IV IN B,ALLEN B G.Regulation of membrane-bound PKC in adult cardiac ventricular myocytes J.Cell Signal,2003,15(2):217 224,谢谢,