微生物学检验(第3版)微生物检验质控.ppt

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,2009北京医院感染管理学习班Company Logo,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,2009北京医院感染管理学习班Company Logo,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,2009北京医院感染管理学习班Company Logo,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,2009北京医院感染管理学习班Company Logo,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,2009北京医院感染管理学习班Company Logo,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,2009北京医院感染管理学习班Company Logo,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,2009北京医院感染管理学习班Company Logo,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,2009北京医院感染管理学习班Company Logo,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,2009北京医院感染管理学习班Company Logo,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,2009北京医院感染管理学习班Company Logo,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,2009北京医院感染管理学习班Company Logo,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,2009北京医院感染管理学习班Company Logo,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,内 容,检验前质量保证,检验中质量保证,检验后质量保证,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,质量保证,（,quality assurance,，,QA,）,概念：有计划地、系统地评估和监测患者诊疗质量的整个过程，以便及时发现问题，采取有效措施，提高质量和服务。,随着质量管理理念的发展，质量保证的重点由发现问题转变为质量评估和质量改进。,质量控制,室内质控,由实验室内部制定并实施的，是质量保证的核心和基础。,室间质评,是由实验室外部的组织和医疗机构对实验室的质量进行评价,全部检验流程中各分析阶段实验室的比例,理解检验的需求性,检验申请的必要条件,32-75%,病人准备 分析前,标本采集,标本处理,4-32%,标本分析 分析中,报告单的生成,9-55%,报告单修正 分析后,报告判读,分析前质量控制,临床检验科全面质量管理系统,用于临床诊断与治疗,分析测定,参与临床诊断、查房等医疗活动，帮助临床医生合理分析、正确使用检验结果,分析中,分析后,通过实践与文献复习进行方法学研究、临床意义探讨、经济学评估，不断开展循征医学工作,探讨标本采集各环节影响实验因素并制定相应制度与措施,检验科与临床密切的信息交流,临床医生选择最直接最有效的,最合理,最经济的项目用于患者,正确化验单的书写,检验科对临床医生选择项目时,提出自己的建议,对检验科工作人员不断进行专业知识继续教育,不断提高整体素质和学术水平,医护人员能正确进行标本采集与运送,标本采集,检查、监督标本是否符合要求,标本运送,病人准备,建立检验报告解释咨询及建议的机构,临 床 检 验 科,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,标本的采集,原始标本采集手册包括：,患者准备,不同部位标本的采集方法,标本运送要求,延迟运送时标本的贮藏方法,安全运送标本的方法,标本标识,标本采集指南应方便标本采集、运送者取阅,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,标本的运送与接收,标本运送：根据申请检验项目性质；标本采集指南规定运送时间、运送条件、运送培养基；安全运送标本方法以及国家、地区及当地相关法规要求进行监控,标本接受：制定并执行标本接收或拒收标准，包括合适的标本类型、标本量、运送条件、预防拭子干燥、运送培养基等,缺乏正确标识标本：一般不接收或处理；若被检物不稳定，并且标本不可替代或很重要，可以先处理，待申请医师或标本采集者识别并确认后，再发送报告,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,微生物检验中的质量保证,人员,试剂,培养基,设备,检验过程,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,一、人员,1.,经过广泛的基础训练教育，包括微生物学、基础医学临床医学知识的学习，专业化的实验技能培训。,2.,参加医务人员的继续教育。,3.,配有一名经严格训练并长期从事于微生物检验的技术人员，全面负责实验室的工作。,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,4.,操作手册,包括：,各级人员的职责和权限；,实验室安全措施；,标本采集和处理指南；,本室开展的检验项目及最低鉴定要求；,培养基和试剂的配制方法；,质量控制方案；,常用参考数据；,其他制度。,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,二、试剂,标识：名称、浓度、储存条件、配制日期、,失效期，生物危害性,新批号或同一批号不同货次试剂使用前性能,评估。,评估方法：分析质控物质,新旧批号平行试验,常规质控,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,1.,生化反应试纸和试剂的质控,试纸和试剂无论是外购的还是自制的，在使用时一定要注明开启时间和失效期。测定代谢产物的试纸或试剂，要用已知阳性和阴性的菌株进行测试，并作好测试记录。测定代谢产物的试剂，要防止细菌的污染。触酶、氧化酶、凝固酶试剂在开瓶时以及使用中，,每天,至少要分别用一阳性和阴性菌测试,1,次,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,表,3,常用试剂的质量鉴定,试剂名称 阳性对照菌种 阴性对照菌种 监控频率,凝固酶血浆 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 每天,杆菌肽,A,群链球菌,B,群链球菌 每周,Optochin,纸片 肺炎链球菌 每周,10%,去氧胆酸钠 肺炎链球菌 每周,三氯化铁,（马尿酸钠试验）,B,群链球菌,A,群链球菌 每次,过氧化氢,金黄金葡萄球菌,A,群链球菌 每天,氧化酶 铜绿假单胞菌 大肠埃希菌 每天,2.,染色液质控,、,染色液名称、配制日期、配制人的标签。,、,初次使用时必须用革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌标准株作质量鉴定，以证实染色液配制无误。,、,商品化染色液应对品牌、试剂名称、批号、存放条件、失效期。厂家应向客户提供染色液鉴定的质量保证书。,、,过期的染色液应不再使用。,3.,诊断血清的质控,、生产批号、血清效价、透明度与色泽。,、初次使用时应注意：工作浓度并与原用的诊断血清对照比较后再用于病人样品的测试。,、试验中应注意无菌操作，避免细菌污染。要经常检查贮存在,4,冰箱中的各种血清，若发现混浊，出现絮状，应停止使用。,、为保证血清凝集反应结果准确，应每,3,个月对血清进行一次质控。,、不要使用过期的血清。,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,三、培养基,培养基是分离培养微生物的必需品。培养基质量的好坏，直接关系到分离培养的成败。目前大多数实验室都使用干粉培养基配制或使用成品培养基。对来自著名的微生物培养基生产公司的培养基，质量比较稳定。只要按照说明书的要求贮存，在有效期内使用可获得满意效果。,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,1,一般性状,培养基的一般性状包括外观、厚度、,pH,值等。刚配制的液体培养基，其外观应透明、清亮、无混浊、无沉淀，颜色符合要求。,新鲜的固体培养基应具有特定的颜色，表面湿润但无水汽、平整、光洁无凹坑和气泡。整块平板厚薄均匀，一般厚度在,3mm,，但,MH,平板的厚度不得小于,4mm,，当颜色改变，表面干燥，出现裂纹或边缘的琼脂与平板或试管分离时，应不再使用。,斜面的长度不得超过试管长度的,2,3,。应经常观察贮存培养基的质量是否合格。,液体培养基液面降低，表明水分蒸发，培养基浓缩。,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,外观良好：表面平滑、水分适宜、无污染、,适当的颜色和厚度,明确标识：能够获得生产日期、保质期、配方、,质量控制、贮存条件等信息,自制培养基：检测每批号相应的性能，如：无菌试,验、生长试验或与旧批号产品平行试验、,生长抑制试验（适用时）、生化反应（适,用时）等,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,2,无菌试验,新制备的培养基要按批号随机抽取一定数量的样品作无菌试验。对于压力蒸气灭菌后倾注的固体培养基，抽样后放,35 1,温箱培养,24-48h,；灭菌后经无菌操作分装的液体培养基要全部放入,35 1,温箱内培养,24h,；对有些无需高压灭菌只需煮沸消毒的选择性培养基要取部分琼脂，放入无菌肉汤管培养,24h,：上述试验证实无细菌生长时才算合格。若有细菌生长，说明培养基制备过程中已受杂菌污染，除了寻找原因外，应不再使用。,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,3,细菌生长试验,所有的培养基在使用前除了做无菌试验外还必须做细菌生长试验以测定培养基性能是否符合要求。要用已知的标准菌株按照,NCCLS,推荐的方法作质控。质控所需的标准菌株分,2,种：一种是已知的可在某种培养基上生长并产生典型生物学性状的，对培养基中的某种物质产生阳性反应的菌株；另一种是用已知的不能在某种培养基上生长或对培养基中的某种物质产生阴性生化反应的菌株。表,2,列出,10,种常用固体培养基的质量鉴定标准及所需标准菌株。,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,种常用培养基的质量鉴定,培养基名称 质控菌株,ATCC,鉴定标准,血平板 金黄色葡萄球菌,25923,中度到大量生长,化脓性链球菌,19615,生长，,-,溶血 肺炎链球菌,6305,生长，,溶血,大肠埃希菌,25922,生长,巧克力平板,流感嗜血杆菌,10211,生长 脑膜炎奈瑟,13090,生长,淋病奈瑟菌,43096,生长,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,伊红美蓝平板 鼠伤寒沙门菌,14028,生长，无色到琥珀色,大肠埃希菌,25922,生长，蓝黑菌落，,金属光泽,粪肠球菌,29212,部分抑制,麦康凯平板 大肠埃希菌,25922,生长，红色菌落 奇异变形杆菌,12453,迁徒现象部分抑制 鼠伤寒沙门菌,14028,无色菌落 粪肠球菌,29212,部分抑制,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,测定羊血琼脂平板的性能,培养基,质控菌株,判定标准,生长试验,金黄色葡萄球菌,ATCC25923,生长,溶血反应,肺炎链球菌,ATCC19615,生长，,溶血,化脓性链球菌,ATCC6305,生长，,溶血,杆菌肽敏感,（纸片法）,化脓性链球菌,ATCC6305,10mm,，敏感,B,群链球菌,10mm,，耐药,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,购买的培养基注意事项,最好检查并记录每批号和,/,或批次产品的破损、污,染状况，以及外观、冷冻或受热等信息,遵循一定质量保证标准产品：免除质量控制，保存生产者所遵循的质量保证标准，以及每批号产品完成无菌试验、质量控制性能合格证明等文件。当培养基脱水、溶血、破损、被污染或量不足时，仍应进行质量控制。,不能提供所遵循的质量保证标准的产品：进行质量 控制（包括相应的性能检测）。,抗微生物药物敏感试验的质控,方法：,K-B,法、稀释法,M-H,培养基：,4nm,，是影响,K-B,法准确性的重在因素。,抗生素：纸片在取用或贮存的过程中失效,培养条件：平板孵育的时间、温度、气体偏离标准,操作人员的技术不够熟练,0.5,号麦氏浊度标准管,药敏试验质控的方法及步骤,1,1,、药敏质控菌株按标准方法与临床标本分离鉴定同步进行药敏试验,2,、更换培养基的药物时必须用相应的质控菌株测试,3,、所有质控菌株在实行常规监控（一周一次监控）前应连续监测,30,天,4,、对每种菌、每种药物，,30,次试验中失控结果不能超过,3,次。,药敏试验质控的方法及步骤,2,5,、如果,30,天监控结果完全符合上述要求，可转为一周一次的监控方法。,6,、当失控原因不明时，用质控菌株连续做,5 d,质控，每种菌对质控的每种药同时测出,5,个圈，如果结果完全达到可接收范围，可一周一次的监控,7,、只要抑菌圈超出可接收范围都必须校正,药敏中存在问题,不能及时获得新的,NCCLS,标准,纸片保存不标准，,M,H,平板的厚度。,不会做苛养菌的药敏试验：,肺炎链球菌,嗜血杆菌,奈瑟菌,药敏质控系统包括,(1),经过正规培训，掌握药敏试验操作方法的人员；,(2),要有标准操作规程，其中包括药敏试验方法、标准菌株种类及应用、药敏试验的质控方法及允许范围、药物种类选择与判断标准等；,(3),有试验所需的质控菌株；,(4),使用质量合格的消耗性检验材料；,(5),仪器设备运转正常控制标准在允许范围内。,推荐的质控菌株,推荐的质控菌株,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,四、设备,制定并执行标准操作程序,定期实施维护、保养、监测，并记录,新设备或经搬运、维修后的设备：性能评估及功能验证，或确保实验结果的准确性,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,仪器设备的质控,临床微生物实验室最常用的仪器设备是光学显微镜、温箱、二氧化碳培养箱、冰箱与低温冰箱、压力蒸汽灭菌器等。这些仪器设备的质量控制标准见表,1,。,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,表,1,临床微生物实验室常用仪器设备的质量控制,仪器设备名称 控制标准 允许范围 监控方法和频率,光学显微镜 每年,4,次或需要时，,作清洁与调试,培养箱,35 1,每天观察记录温度,二氧化碳培养菌 每天观察记录温度和,温度,35 1,二氧化碳浓度,气体,5%-10%10%,冰箱,每天观察记录温度,冷藏室,4 2,冷冻室,-5 1,低温冰箱,-20 5,每天观察记录温度,压力蒸汽灭菌器,121 121,使用时观察并记录温,度、压力，每周用嗜热芽孢,菌或每次用化学方法测试灭菌效果,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,常用设备,温度依赖检测设备：定时监测温度，使用过程中注,意温度变化；存放试剂和标本的冰箱，亦应监测温,度。确保温度计准确、,量程适宜并,经检定，已保证,设备温度符合要求。,定量移液器、微量滴定管或自动分配器：核查并记,录使用区间内的准确性和重复性,定期监测特殊设备性能：,CO,2,孵育箱内,CO,2,浓度；,厌氧系统厌氧条件；生物安全柜内气流、过滤器,（必要时）；压力灭菌器灭菌效果等。,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,五、检验过程,标本质量评估,检验方法的确认和验证,标准化操作程序,生物参考区间：定期评审,测量准确性,内部质量控制体系,测量系统校准和验证,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,标本质量评估,内容,标本量,标本采集次数,标本的质量,血液、体液、尿标本等的污染率,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,检验方法的选择与确认,公认的、权威的教科书,经同行评议的书刊、杂志,国际、国家、地区法规明确的方法和程序,符合相应用途的内部规程,所有方法和程序检测患者标本之前，评估准确性、精确性、灵敏度、特异性、检出限、可报告范围，与已有方法比对。使用后，需定期评审,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,标准化操作程序,（,Standard Operating Procedure,SOP,）,实验原理、临床意义,标本类型、容器和添加剂,所需设备、性能参数、校准程序,检测试剂、定标试剂、质量控制程序,操作步骤、干扰和交叉反应、结果计算,生物参考区间,结果可报告区间、警告,/,危急值（适用时）、结果,解释、安全性警告及措施、潜在变异来源,分析前、后注意事项，特殊操作模式的处理,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,测量准确性,溯源性：通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性。,方法：测量系统的校准和验证；参比到自 然常数或规定的参考值,能力验证或实验室间比对计划,定期性能评估,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,内部质量控制体系,保证检验结果持续满足预期质量标准,质控物质的检测方法、检测次数、操作者与患者标,本一致。质控频率遵循有关标准，满足仪器和,/,或,检测系统制造商的要求,缺乏合适校准和质控物质的项目：验证结果准确性,及时发现并更正重大的文字错误、实验错误以及可,能影响患者处理的不寻常的检测结果,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,检验后的质量保证,检验后程序：,也称分析后期，指检验后全部过程，包括,检验结果的评审与报告：,制定,“,警告,/,危急,”,范围、标本周转时间；必要时，及,时发送分级报告；危急值及时报告并记录,标本的处置：,感染性废弃物,2009北京医院感染管理学习班Company,Logo,黄帝内经：,上医医未病之病,中医医欲病之病,下医医已病之病,检验质量：,上检检未犯之错,中检检将犯之错,下检检已犯之错,祝10检专的每一位同学,在微生物检验期未考试中,取得最最优异的成绩,祝,同学们微生物检验期考取得优异成绩,