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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,第,37,讲,植物组织培养技术,第1页,考点一植物组织培养与花药离体培养,1,菊花茎组织培养与月季花药离体培养比较,第2页,第3页,第4页,角度植物花药培养过程分析,1,辣椒素作为一个生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素取得路径以下列图。,第5页,(1),图中,和,分别表示辣椒组织培养中细胞,_,和,_,过程。,(2),图中培养外植体培养基中惯用凝固剂是,_,。培养基中生长素和细胞分裂素用量比值,_(,填,“,高,”,或,“,低,”,),时，有利于芽分化。对培养基彻底灭菌时，应采取灭菌方法是,_,。,第6页,(3),图中外植体消毒所需酒精体积分数是,_,。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，惯用酶是,_,和纤维素酶。,(4),提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目标是,_,。,第7页,解析：,(1),由外植体培养成脱毒苗过程为植物组织培养过程,，,需经过脱分化、再分化两个阶段。,(2),植物组织培养惯用固体培养基,，,固体培养基惯用凝固剂是琼脂。植物组织培养时,，,惯用生长素和细胞分裂素开启细胞分裂、脱分化和再分化,，当细胞分裂素较多时，利于芽分化；当生长素较多时，利于根分化。培养基彻底灭菌惯用高压蒸汽灭菌法。,(,3),体积分数为,70%,酒精杀菌效果最强,，,操作者和,第8页,外植体消毒惯用体积分数为,70%,酒精。将愈伤组织分离成单个细胞惯用纤维素酶和果胶酶。,(4),辣椒素提取惯用有机溶剂,，,为预防有机溶剂挥发,，,提取辣椒素过程中,，,在萃取加热时需安装冷凝回流装置。,答案,：,(1),脱分化,(,或去分化,),再分化,(2),琼脂低高压蒸汽灭菌,(3)70%,果胶酶,(4),预防有机溶剂挥发,第9页,2,育种工作者常采取花药培养方法，使花粉粒发育为单倍体植株。下面过程是采取水稻花药进行培养步骤：,选取水稻花药,对花药消毒,接种和培养,植物体,请据此回答下面问题：,(1),诱导花粉植株能否成功及诱导成功率高低，受各种原因影响，其中,_,、,_,是主要影响原因；选择适当,_,也是提升诱导成功率主要原因。,第10页,(2),花粉在发育过程中要经历,_,、,_,、,_,等阶段，选取水稻花药应为,_,期花药，此时细胞核由中央移向细胞一侧，花药培养成功率最高。,(3),在剥离花药时，要尽可能不损伤花药，原因是,_,；同时还要彻底去除花丝，原因是,_,。,第11页,(4),经过花药培养产生单倍体植株普通有两种路径：一个是花粉经过,_,阶段发育为植株；另一个是在诱导培养基上先形成,_,，将其诱导分化成植株。,(5),试管苗形成过程中，必须从培养基中取得无机盐或矿质元素和小分子有机物等营养物质。要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有,_,和,_,两类激素。,第12页,解析：,诱导花粉植株能否成功及诱导成功率高低,，,受各种原因影响,，,其中材料选择与培养基组成是主要影响原因；选择适当花粉发育时期也是提升诱导成功率主要原因。花粉在发育过程中要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段,，,选取水稻花药应为单核期花药；在剥离花药时要尽可能不损伤花药,，不然接种后轻易从受伤部位产生愈伤组织；同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连花药不利于,第13页,愈伤组织或胚状体形成；经过花药培养产生单倍体植株普通有两种路径：一个是经过胚状体阶段发育为植株；一个是先形成愈伤组织再将其诱导分化成植株。,答案：,(1),材料选择培养基组成花粉发育时期,(2),四分体时期单核期双核期单核,(3),假如花药受损，接种后轻易从受损伤部位产生愈伤组织与花丝相连花药不利于愈伤组织或胚状体形成,(4),胚状体愈伤组织,(5),细胞分裂素生长素,第14页,考点二植物组织培养影响原因分析,第15页,第16页,第17页,2,植物组织培养中无菌操作,(1),培养材料消毒,消毒剂：普通可用体积分数为,70%,酒精和质量分数为,0.1%,氯化汞溶液，所使用清洗液是无菌水。,(2),培养基、所用操作器材均要进行灭菌处理。培养基常采取高压蒸汽灭菌，操作器材可采取干热灭菌。,(3),对操作室、工作台要进行消毒，普通使用紫外线或消毒药品消毒。,(4),全部接种、转瓶操作都应在酒精灯火焰旁进行。,第18页,角度植物组织培养影响原因分析,3,如图甲是植物组织培养过程示意图，图乙是植物激素对愈伤组织分化影响示意图。据图回答以下问题。,第19页,(1),植物组织培养原理是植物细胞含有,_,。,(2),在,A,过程中，为了有利于嫩枝组织细胞开启细胞分裂形成愈伤组织，经常需要在配制好培养基中添加,_,。嫩枝组织细胞接种后,2,5d,时，若发觉其边缘局部污染，原因可能是,_,。,第20页,(3),在过程,B,中，若愈伤组织没有形成根，但分化出了芽，其原因可能是,_,；若要取得更多愈伤组织，培养基中两种激素含量应该是,_,。,(4),切取经光照一段时间后幼苗芽尖处组织块，消毒后，接种到诱导再分化培养基中培养，该培养基中两种植物激素浓度相同。从理论上分析，分化结果是,_,；原因是,_,。,第21页,解析：,(1),植物细胞含有全能性,，,这是植物组织培养理论基础。,(2),植物组织培养过程中,，,开启细胞分裂和愈伤组织分化都离不开植物激素,，,植物激素中生长素和细胞分裂素是开启细胞分裂、诱导脱分化和再分化关键性激素。培养嫩枝组织细胞边缘发生局部污染,，,可能是因为嫩枝组织细胞消毒不彻底。,(3),、,(4),从图乙可知,，植物激素种类及其浓度配,比都会影响愈伤组织分化方向,，详细结合图示和题干信息回答即可。,第22页,答案：,(1),全能性,(2),植物激素嫩枝组织细胞消毒不彻底,(3),培养基中生长素较少，细胞分裂素较多细胞分裂素量中等，生长素较少,(4),生根培养基中细胞分裂素与生长素浓度相等，而经光照后幼苗芽尖处组织块含较多生长素，所以组织块处细胞分裂素相对较少，生长素相对较多，故诱导生根,第23页,4,下列图是月季花药离体培养产生花粉植株两种路径，请据图回答相关问题。,第24页,(1),选取材料适当是否是能否成功诱导出花粉植株关键。普通来说，选取,_,期花粉可提升成功率。选择花药时，普通要经过,_,来确定其中花粉是否处于适当发育期，这时需要对花粉细胞核进行染色，惯用染色剂是,_,。,(2),图中花粉经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中,_,。,第25页,(3),胚状体与愈伤组织在结构上主要区分在于愈伤组织细胞排列疏松、无规则，是一个高度,_,薄壁细胞，胚状体与,_,发育形成胚有类似结构，即含有胚芽、胚轴和胚根。,(4),试管苗移栽到土壤前，通常要进行壮苗处理，应怎样壮苗？,_,。,第26页,解析：,(1),单核期花粉对离体刺激较敏感,，,选取该期花粉可提升培养成功率；选择花粉时可用显微镜观察进行筛选；对花粉细胞核进行染色应选择碱性染料,，,惯用醋酸洋红。,(2),花药离体培养成植株两条路径之间没有显著界限,，,主要取决于植物激素种类及百分比。,(3),愈伤组织细胞特点是细胞排列疏松、无规则、高度液泡化；胚状体含有与胚相同胚根、胚轴和胚芽等结构。,(4),壮苗是使试管苗深入适应外界环境做法。,第27页,答案：,(1),单核镜检,(,显微镜观察,),醋酸洋红,(2),激素种类及其浓度配比,(3),液泡化正常受精卵,(,或受精卵,),(4),将试管苗移栽到经过消毒培养基中生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中,第28页,第29页,1,不论是菊花组织培养还是月季花药培养，其理论基础都是植物细胞全能性。,2,植物组织培养包含脱分化和再分化等过程，培养过程除了需要各种营养物质外，还需要植物激素调整。,3,产生花粉植株路径有两条：一个是花粉经过胚状体阶段发育为植株；另一个是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。,第30页,
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