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单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,目 录,手性药物分离的重要性,1,测定与获得单一对映体的方法,2,手性分离原理,3,在药物研发中解决的问题,4,镜平面,对映体,A,对映体,B,手性分子,手性药物分离的重要性,1,Chirality&Its Consequence,Building blocks of life,-amino acids,sugars,enzyme.(origin of life),Mirror Image,Mirror Image,Drugs,agrochemicals,food additives,fragrances,archeology,ecophysiology,etc.,Consequence:,服用,过,镇静药物肽胺哌啶酮的孕妇产下,了,四肢呈海豚状的畸形儿。随后的研究表明,肽胺哌啶酮的两个对映体中只有(,R,),-,对映体具有镇静作用,而(,S,),-,对映体是一种强力致畸剂,会导致胎儿畸形,。,LOGO,表 一些具有不同手性的药物的药效差别,有效异构体,不良异构体,多巴(,Dopa,),(,S,),-,异构体,治疗帕金森症,(,R,),-,异构体,严重副作用,氯胺酮(,Ketamina,),(,S,),-,异构体,麻醉剂,(,R,),-,异构体,致幻剂,青霉素胺(,Pexicillamine,),(,S,),-,异构体,治疗关节炎,(,R,),-,异构体,突变剂,心得安(,Propranol,),(,S,),-,异构体,治疗心脏病,(,R,),-,异构体,致性欲下降,巴比妥类化合物,(,S,),-,异构体,,镇静药,对中枢神经系统有抑制作用,(,R,),-,异构体,惊厥剂,具有中枢神经系统兴奋作用,乙胺丁醇(,Ethambutol,),(,S,),-,异构体,治疗结核病,(,R,),-,异构体致盲,测定与获得单一对映体的方法,不对称合成法,外消旋体拆分法,手性源合成法,色谱拆分法,化学拆分法,酶或生物法,高效毛细管电泳,气相色谱,(GC),薄层色谱法,超临界流体色谱,(SFC),高效液相色谱法,测定与获得单一对映体的方法,2,高效液相色谱,高效液相色谱具有四个特点,:,(1),分离效能高,(2),选择性高,(3),检测灵敏度高,(4),分析速度快,高效液相色谱法在手性药物的分离中应用广泛,目前常用的方法有,手性衍生化试剂法、手性流动相添加剂法、,手性固定相法,。,Introduction of chromatography,The most widely used analytical separations technique,Utilizes a liquid mobile phase to separate components of mixture,Uses high pressure to push solvent through the column,The developer of chromatography,Russian scientist,:,M.S.,Tswett,(1906),Chromatography basically involves the separation of mixtures due to,differences in the distribution coefficient,(equilibrium distribution)of sample components between two different phases.,One of these phases is a,mobile phase,and the other is a,stationary phase,.,High performance liquid chromatography,Higher resolution and speed of analysis,HPLC columns can be reused without repacking or regeneration,Greater reproducibility due to close control of the parameters affecting the efficiency of separation,Easy automation of instrument operation and data analysis,Adaptability to large-scale,preparative procedures,HPLC,的仪器配置及流程,溶剂,色谱泵,自动进样器,HPLC,色谱柱,检测器,废液,数据处理系统,色谱图:,HPLC,图形,结果(,Chromatogram,),色谱图即色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的曲线图,其纵坐标为信号强度,横坐标为保留时间。,色谱峰,保留时间(分),基线,峰高,峰宽,响应值,按分离原理分类,(,1,)吸附色谱:,利用吸附剂表面对被分离的各组分吸附能力不同进行分离。,(,2,)分配色谱:,利用不同组分在两相分配系数或溶解度不同进行分离。,(,3,)离子交换色谱:,利用不同组分对离子交换剂亲和力不同进行分离。,(,4,)凝胶色谱:,利用凝胶对分子的大小和形状不同的组分所产生的阻碍作用不同而进行分离的色谱法。,色谱分析法分类,通用,LC,固定相,1),基质材料,细粒度(,3,,,5,,,10,m,)、均匀、球型、高纯度的,SiO,2,I,硅酸钠(水玻璃),-,制,SiO,2,凝胶,II,四乙氧基硅烷,Sol-gel,技术制超纯硅胶,1.,通用,HPLC,固定相填料,通用,LC,固定相,Packing column and monolithic columns,Packed column,A porous particle,Stationary phase,Polymer,monolith,Silica,monolith,液相色谱原理 基本概念及方法开发,液相色谱实验所需的基本参数,流动相:种类及配比,等度或梯度,固定相:色谱柱类型及内径、长短,流动相输送系统参数:流速,检测器参数:紫外检测波长,灵敏度等,温度控制,进样量,以上参数即构成一个具体的,HPLC,方法;亦称色谱条件,环糊精及其衍生物,3m,(,Kromasil,)扫描电镜图,5m,(,Kromasil,)扫描电镜图,为修饰过的环糊精衍生物,作为手性选择剂,键合在硅胶上,硅,胶,外,消,旋,体,8000 psi,高压填装,研创,SCDP102520,型手性制备柱,HPLC,色谱图,分子印迹聚合物(,MIP,)概述,分子识别,设 想,首次合成,发 展,酶,/,底物 抗原,/,抗体 激素,/,受体,Pauling,抗原为模板合成抗体,,1940,Wulff,MIP,1972,Mosbach,Nature,1993,What are MIPs?,Synthetic polymers with well-defined surface cavities created by template,MIP can,recognise,the template in presence of similar molecules,Shape selectivity,Binding groups on cavity surface,Applications in separation science,catalysis,organic chemistry,immunoassays,sensors,分子印迹技术的基本原理,Pre,arrangement,Polymerization,Extraction,Molecular imprinting technology,Mosbach,(,The first user of non-covalent methodology),Pauling,(,The first developer of MIP),Characteristics of MIP:,Predetermination,Specific recognition,Practicability,MIP,的制备,模板分子、功能单体、交联剂、聚合反应,Nature Biotechnology,2002,20,884,通过非共价键将印迹分子固定。,洗脱后留下的空腔有特定选择性。,Common monomers and crosslinkers in MIP,聚,合,方,式,本体聚合,悬浮聚合,乳液聚合,溶涨聚合,原位聚合,表面聚合,最简单,的制备方法,制备球形,MIP,产率最高适合,作为色谱介质,制备成本高,球形,MIP,均匀性好,在硅胶,基质上,Preparation of imprinted polymer,Preparation of imprinted polymer,MIP-for what purpose?,MIP,application,sensor,Membrane,separation,SPE,Chiral,separation,Pharmic,analysis,Chromatographic,separation,artificial,antibodies,Enzyme,catalysis,药物手性拆分分离应用实例,
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