环境微生物学第二章.ppt

环境微生物学,（,Environmental Microbiology,）李先磊,化学化工学院,环境微生物学,（,Environmental Microbiology,）李先磊,化学化工学院,*,1.,无菌技术,2.,用固体培养基分离纯培养,3.,用液体培养基分离纯培养,4.,单细胞（孢子）分离,5.,选择培养分离,6.,微生物的保藏技术,微生物的分离和纯培养,无菌技术,微生物是无处不在的，因此，在进行微生物操作的时候必须保证无菌操作。,在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染，其自身也不污染操作环境的技术被称作,无菌技术,。,常用器皿的灭菌,接种操作技巧：接种针或接种环分离或将微生物从一个培养器皿转接到另一个。,火焰旁边或无菌箱或无菌室进行,。接种针采用迅速加热和冷却的镍铬合金制备，液体培养物用无菌移液管或移液枪。,无菌操作转接纯培养物,不同微生物菌落形态,涂布平板法,微生物学研究中常用的一种方法。,先将熔化的培养基倒入倒培养皿中，等培养基冷却形成固体平板后，将菌种培养液涂布在培养基表面。,这种方法的优点是：可以有效防止微生物死亡，可以直观的观测不同浓度下微生物的数量；缺点是对于实验材料要求多，相对浪费。,稀释倒平板法,平板划线法,稀释摇管法,对于严格厌氧的细菌，采用稀释摇管法进行培养，是稀释倒平板法的一个形式。,此方法操作时要注意培养基冷却的时间和温度，注意必须进行培养基的密闭。操作难度较大，不易完成。,用液体培养基分离纯培养,对于某些个体较大的微生物或者原生生物及藻类，必须采用液体培养获得纯培养。,通常采用梯度稀释的方法，使每支试管内分配的微生物数量保证不到,1,个微生物，如果大多数试管内均无微生物生长，而有微生物生长的试管内则可能使纯培养物。,单细胞（孢子）分离,采用显微分离法从混杂群体种直接分离单个细胞或者单个个体进行培养以获得纯培养，称为单细胞（孢子）分离法。,一般进行单细胞分离，要借助解剖显微镜才能够进行，普通光学显微镜也可以进行，但是只能够分离个体较大的微生物。,选择培养分离,一般情况下，不同微生物需要的营养条件都不同，所以针对不同微生物，必须采用合适的培养条件。,选择平板培养：根据不同微生物的特殊营养需求，配制特殊的培养平板，进行微生物的培养，经过反复操作后，可以得到纯培养物。,富集培养：利用不同微生物生命活动的特点不同，制定特定的环境条件，使仅仅适宜该条件的微生物旺盛生长，抑制其他微生物的生长，达到纯培养的结果。,微生物的保藏技术,通过分离纯化得到的微生物纯培养物，还必须通过各种保藏技术使其在一定时间内不死亡，不会被其他微生物污染，不会因发生变异而丢失重要的生物学性状。,传代培养保藏,冷冻保藏,干燥保藏,小 结,无菌操作技术和意识,固体培养获得纯培养物的方法,微生物保藏技术,