第三讲：消化系统的细胞保护.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,消化系统的细胞保护作用,Cytoprotection,细胞保护概念的由来及其发展,18,世纪法国哲学家若穆（,Rene Antoine Ferchault de Reaumur,）指出胃液能消化肉。,为什么胃不能消化它自己,？,胃液中的氢离子浓度比血液高,300400,万倍。,胃液中含有强烈的分解蛋白质的胃蛋白酶。,说法：,胃黏膜屏障（由胃黏膜表面的上皮细胞和细胞间的紧密连接以及外面的黏液层所构成），可阻止胃腔内的盐酸逆向地向黏膜内弥散。,胃黏膜上皮细胞处在一个脱落和生长的动态平衡中，正常人的胃黏膜细胞以每分钟,50,万个的速度脱落，但很快产生新的细胞来补充，胃黏膜表面每,3,天可以重新改换一次。,细胞保护概念的提出：,1975,年美国密西根州,Upjohn,药厂研究室的,Andre Robert,，利用该厂的产品前列腺素观察到，由非固醇类抗炎药（包括阿司匹林、消炎痛等）引起的实验动物的肠损伤，可由分别注射数种前列腺素（,prosta-glandin,PG,）所阻止，且具有量效关系。,引起他注意的是：,不影响胃酸分泌的,PGF,类，也能阻止消炎痛引起的胃糜烂；而且，完全阻止大鼠胃损伤的,PGE2,的剂量，可以小至,0.5g/kg,，仅是其抗分泌剂量的,1/100,。,Robert,将这些结果展示给当时正在他实验室访问的美国德克萨斯大学生理学家杰考森（,Eugene D Jacobson,），,Jacobson,建议把这个现象称作“细胞保护”（,cytoprotection,）。,近年研究发现，胃黏膜上皮细胞不断地合成和释放的大量内源性,前列腺素,具有强烈的细胞保护作用。,脑肠肽,（,生长抑素、上皮生长因子、胰多肽等,）,一氧化氮（,NO,）,热休克蛋白,一、前列腺素的细胞保护作用,（一）前列腺素的理化特性和代谢,一、前列腺素的细胞保护作用,（二）前列腺素对胃肠黏膜的细胞保护,PG,的防止胃溃疡形成和加速溃疡愈合的作用是由于它的抑制胃酸分泌特性。,但进一步研究发现：,产生对黏膜细胞保护的,PG,剂量，远远小于其抗分泌剂量，通常为抗分泌剂量的,1,；,一些不具有抗胃分泌活性的,PG,，也具有细胞保护作用；,一些其他药物如抗胆碱药和,H,2,受体阻断剂，虽有抗胃分泌作用，但对胃并无细胞保护作用；,在碱性环境的小肠，,PG,对由消炎痛等非类固醇抗炎药所引起的肠黏膜损伤同样具有细胞保护作用。这些事实说明，,PG,的细胞保护作用是它的一个特有的独特的活性。,一、前列腺素的细胞保护作用,（三）前列腺素对胰腺的细胞保护,近年来研究发现，给小鼠以不含胆碱的乙硫氨酸（,choline-deficient ethionine-supplemented,）饮食，造成实验性胰腺炎，如在给予此种饮食前,1h,及其后,4h,给予,PGE,2,，则可降低病鼠的死亡率。若用消炎痛阻断内源性,PG,的生物合成，可使其死亡率增加。说明,PG,对胰腺组织具有细胞保护作用,。,还,有实验发现，,皮下注射四氧嘧啶,，,造成大鼠糖尿病模型。如在制备前,15min,由腹腔注射,PGE,2,，则可使糖尿病发病率由对照的,75,下降到,12.5,；血浆葡萄糖浓度在,3,天后由对照的,498 mg/dl,下降到,142 mg/dl,。,PGE,2,的这种缓解四氧嘧啶的细胞毒性作用具有一定的剂量依存关系。从胰岛机能和结构的观察都表明，这种预防性注射,PGE,2,的确能减轻由四氧嘧啶造成的急性胰岛,B,细胞的损伤。,一、前列腺素的细胞保护作用,（三）前列腺素对胰腺的细胞保护,为了分析其作用机制，还采用新生大鼠胰岛细胞分离及体外单层细胞培养法，在细胞水平进行了进一步观察。结果表明，,PGE,2,的预防和减轻化学药物对胰岛,B,细胞损伤的作用，可能与其增加细胞内,cAMP,含量，维持受损细胞内的,cAMP,cGMP,比值的稳定，防止受损细胞内,Ca,2+,集聚，以及促进胰岛,B,细胞,DNA,的合成等作用机制有关。,一、前列腺素的细胞保护作用,（四）前列腺素对肝脏的细胞保护作用,前列腺素对肝细胞的保护作用具有普遍性。首先，这种保护作用没有种系差异，在人、狗、猫、大鼠及小鼠上均能观察到前列腺素的肝细胞保护作用。其次，前列腺素的肝细胞保护效果与损伤的理化性质无关，对四氯化碳、半乳糖胺、缺血,再灌注、缺氧、高温及免疫反应引起的损伤都有细胞保护作用。,Stachura,等比较详细地研究了前列腺素的肝细胞保护作用。事先给大鼠皮下注射,PGE,2,（,5g/kg,）能明显地减轻由四氯化碳引起的肝细胞损伤，,SGPT,只升高对照组的,1/6,左右。,Araki,等在离体的猫肝的体外灌流的实验中发现，在造成肝细胞缺氧,150,分钟后，在灌流液中乳酸脱氢酶和组蛋白,D,2,的含量明显增加，肝脏巨噬细胞的吞噬能力显著下降。但是向灌流液中加入,PGE,2,后乳酸脱氢酶和蛋白酶,D,2,的释放量明显减少，肝细胞的吞噬能力迅速回升。,一、前列腺素的细胞保护作用,（四）前列腺素对肝脏的细胞保护作用,PGE,的类似物米索前列醇（,misoprostol,）对缺血,-,再灌注引起的肝细胞损伤也有保护作用。当造成大鼠肝脏缺血,90,分钟后再灌注时，血清中谷丙转氨酶及鸟氨酸氨基甲酰转移酶的活性明显升高，肝细胞明显坏死。但是在造成肝脏缺血和再灌注前各,1,分钟用米索前列醇（,25ng/kg,）处理肝脏，则谷丙转氨酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶分别只升高对照组的,1/2,和,1/4,，肝细胞的坏死范围也明显减小。,Noshima,曾报道，把大鼠肝脏放入,Ross,液和,Sacks,液中冷藏时，如果向保护液中加入,PGI,2,的类似物,OP-4183,，使肝细胞的坏死速度明显延缓,延长了肝脏在体外的保存。,Dolugosz,等报道，米索前列醇还能保护乙醇引起的肝细胞损伤。他们观察到，给大鼠连续,5,周喂乙醇（其热量占同期大鼠摄取的总热量的,36%,），便发生肝的脂肪变性和线粒体功能的下降。但是，若事先用米索前列醇（,80 mg/kg,）处理，则线粒体的呼吸功能得到明显的改善，肝脏的脂肪变性明显减轻。,Kurebayashi,和,Houda,发现前列腺素对补体介导的肝细胞坏死也有保护作用。,一、前列腺素的细胞保护作用,（五）前列腺素细胞保护,作用的机制,1.,强固胃黏液,-,碳酸氢盐屏障,向胃局部或由胃肠道外给予外源性,PGE,2,，可刺激大鼠、狗和人胃黏液和,HCO,3,分泌。,PG,的甲基衍生物如,16,16-,二甲基,PGE,、,15-,甲基,PGE,2,等也有类似作用。说明,PG,是加强胃黏液,HCO,3,屏障的有效刺激物。酒精、胆盐和非类固醇抗炎药（如阿司匹林）均可抑制胃黏液和,HCO,3,的分泌，使胃壁结合黏液层的厚度及胃液中糖蛋白的含量降低、标记的单糖或氨基酸掺入黏液的糖蛋白的过程减慢。,N-,乙酰半胱氨酸（,N-acetylcysteine,）和乙酰唑胺（,acetazolamide,）是胃黏液和,HCO,3,分泌的抑制剂，如预先给予可部分地阻断,PGE,2,的细胞保护作用。曾有人报道，,20,酒精和,5mmol/L,牛磺胆酸作为弱刺激提前灌胃，仅引起胃黏膜结合黏液分泌。用胃蛋白酶,150U,溶于生理浓度盐酸中作为弱刺激，可引起胃壁结合黏液分泌明显增加，并呈现明显的量效关系。,2.,防止胃黏膜屏障的破坏,胃黏膜上皮细胞和上皮细胞之间形成的紧密连接以及其外面的黏液层构成所谓的,“,胃黏膜屏障,”,，它具有防止,H,+,由胃腔反流入黏膜本身以及防止,Na,+,从黏膜内迅速向胃腔弥散的特性。,PG,胃黏膜屏障,阿司匹林、无水乙醇和牛磺胆酸,黏膜渗透性增强，,H,+,反流增加，黏膜动作电位降低，黏膜和胃腔间的电化学梯度遭到破坏,黏膜细胞水肿和坏死,3.,促进胃黏膜细胞更新,胃黏膜上皮细胞的迅速更新是维持胃黏膜上皮完整性和产生黏液及,HCO,3,所必需。在生理状态下，黏膜上皮细胞的损耗和更新处于动态平衡，任何增加黏膜上皮细胞损耗和降低其更新的因素，均可导致胃黏膜损伤，而具有抑制上皮细胞损耗和刺激黏膜细胞更新的因素，则对胃黏膜具有保护作用。无水乙醇、盐酸和阿司匹林可引起胃黏膜上皮细胞大量损耗，更新率减慢；如预先给予,PGE,2,，则可防止上述损伤性物质对胃黏膜细胞更新率的抑制作用。,Konturek,等观察到，在口服酸性阿司匹林所致的大鼠胃黏膜损伤，黏膜组织,DNA,合成也明显受到抑制，若预先由皮下或其他途径给予,PGE,2,或,PGI,2,，可防止黏膜,DNA,合成的抑制和溃疡的形成。提示,PG,的促进胃黏膜组织大分子化合物的合成在其细胞保护作用的机制中起着一定的作用。研究还发现，上皮生长因子对应激和酸性阿司匹林所致胃黏膜损伤具有保护作用，其机制是由于上皮生长因子促进胃黏膜上皮细胞的更新。,4.,改善黏膜血流量,当胃黏膜与各种致坏死物质（无水乙醇、阿司匹林、牛磺胆酸等）接触时，可伴有胃黏膜血流的代偿性增加,；,若减少胃黏膜血流量，则使黏膜损伤明显加重，说明黏膜血流量在胃黏膜细胞保护中起着重要作用。,4.,改善黏膜血流量,胃黏膜血流量增加可通过下列两条途径起到保护黏膜的作用：,维持组织细胞适当的氧供给，保证细胞内有氧代谢（尤其是能量代谢）的顺利进行。,帮助清除和缓冲进入黏膜内的,H,+,。,有研究表明，,PGE,和,PGI,具有强烈的扩张全身血管（特别是内脏血管）和增加微循环血流量的作用。给予外源性,PGE,2,和,PGI,2,可显著增加胃黏膜血流量；而用消炎痛阻断,PG,的生物合成，则可引起胃黏膜血流量明显减少。,5.,刺激细胞的主动转运过程和激活腺苷酸环化酶,正常时，,H,+,从胃黏膜分泌至胃腔，是一种逆离子浓度差和电位差的主动转运过程，依赖于细胞内的能量和钠泵的作用；,Shanbour,等观察到，损伤性物质首先抑制胃黏膜的主动转运过程，而黏膜渗透性增高发生在后；无水乙醇、牛磺胆酸和阿司匹林均可抑制胃黏膜对,H,+,、,Na,+,的主动转运过程，但对离子的被动转运则无影响。有这样的报道，在离体培养的青蛙胃黏膜，当在孵育液里加入消炎痛时，可见到黏膜的主动转运过程明显受到抑制。,PG,除可刺激这一主动转运过程外，还可阻断消炎痛的抑制作用。,5.,刺激细胞的主动转运过程和激活腺苷酸环化酶,5.,刺激细胞的主动转运过程和激活腺苷酸环化酶,Simon,等观察到，把人胃黏膜匀浆与各种非类固醇抗炎药（如消炎痛、阿司匹林等）一起孵育，可明显抑制腺苷酸环化酶的活性，但如同时加入,PGE,2,、,PGI,2,、,15,15-,二甲基,PGE,2,或,16,16-,二甲基,PGE,2,，则可激活,cAMP,酶系，使培养液中,cAMP,含量升高。提示,PG,能激活靶细胞的腺苷酸环化酶，使组织内,cAMP,上升，再由后者刺激钠泵的功能，从而起到对胃黏膜的细胞保护作用。,6.,稳定溶酶体膜及维持黏膜巯基化合物含量,溶酶体内含有多种蛋白水解酶，若释放入胞浆内可引起细胞自身溶解，在胃黏膜损伤的发生机制中起一定的作用。研究表明，由,5-HT,诱发的大鼠胃黏膜损伤，其发生机制之一是由于组织溶酶体的破坏和蛋白水解酶的释放所致。预先给予,PGE,2,可通过稳定溶酶体膜，防止蛋白水解酶释放，对,5-HT,所致胃黏膜损伤产生细胞保护作用。,6.,稳定溶酶体膜及维持黏膜巯基化合物含量,在无水乙醇所致胃黏膜损伤，黏膜组织非蛋白巯基化合物含量明显减少。预先给予,PGF,2,或含巯基化合物（如半胱胺）对该损伤具有保护作用。阻断内源性含巯基化合物的生成可使损伤加重。进一步研究发现，阻断内源性巯基化合物生成还可抑制,PGF,2,的细胞保护作用，提示,PG,的细胞保护作用可能是由内源性巯基化合物所介导的。,Miller,等报道，用,8,酒精作为弱刺激或用,PGE,2,在狗的小胃灌流，均可引起胃黏膜组织非蛋白巯基化合物含量明显升高；而用,40,酒精灌流则可降低组织中的非蛋白巯基化合物含量。,7.,刺激胃黏膜表面活性磷脂的分泌,在胃液和胃黏膜表面之间含有一定量的表面活性磷脂，它们在胃黏膜上皮细胞（尤其在泌酸区）构成一疏水层，可防止致坏死物质直接与胃黏膜上皮细胞接触，是胃黏膜的抗损伤因素之一。,研究表明，提前,30min,给大鼠灌入表面活性磷脂（与在肺的浓度相类似）,1ml,，能明显减轻由,0.6N,盐酸所致胃黏膜坏死和出血。这种保护作用与胃内,pH,值和胃内内容物容量的变化无关。还发现，给予消炎痛并不能阻断表面活性磷脂的保护作用，提示其与内源性,PG,无关。,Lichtenberger,等则发现，口服给予外源性,16,16-,二甲基,PGE,2,，可明显增加胃黏膜表面活性磷脂的含量，为对照组的,2-6,倍。表明,PG,细胞保护作用的机制可能部分是由于其刺激胃黏膜分泌表面活性磷脂的结果。,8.,减慢胃动力,实验证明，强酸、强碱和乙醇引起的胃环形肌强烈收缩可导致黏膜皱襞区损伤，当减慢胃动力后，损伤程度减轻。,PG,能抑制胃的强烈收缩，可达到减轻胃黏膜损伤的目的。,二、脑肠肽的细胞保护作用,脑肠肽是指那些既存在于胃肠道也存在于脑中的肽类物质。目前已发现的脑肠肽种类较多，主要有神经降压素（,Neurotensin,）、蛙皮素、降钙素、胰高血糖素、生长抑素、上皮生长因子等。研究表明，脑肠肽对消化器官也有细胞保护作用。,二、脑肠肽的细胞保护作用,（一）脑肠肽对胃肠道的细胞保护,Nemeroff,等观察到，向大鼠的小脑延髓池内注射小剂量的神经降压素（,neurotensin,），可使大鼠因寒冷加束缚引起的应激性胃溃疡发病率降低，这一作用可被事先注射消炎痛所阻断，说明神经降压素的保护作用是通过,PG,实现的。,向大鼠侧脑室注射小剂量蛙皮素（,bombesin,）也可明显地对抗由寒冷加束缚引起的出血性胃损伤。蛙皮素这一中枢作用比静脉注射强,250,倍。实验观察到，向大鼠侧脑室注射蛙皮素，可抑制由消炎痛引起的胃黏膜溃疡，这一作用可能是通过抑制迷走神经的作用而实现的。,二、脑肠肽的细胞保护作用,（一）脑肠肽对胃肠道的细胞保护,降钙素（,calcitonin,）的脑室内注射也能阻止大鼠应激性胃损伤的产生。它所产生的抑制胃酸分泌作用比胃肠外注射强,1000,倍。降钙素基因相关肽（,CCRP,）是一种广泛存在于胃肠道的神经元和神经纤维中的调节肽，在胃和十二指肠尤为丰富，它对狗和大鼠的胃分泌有很强的抑制作用。实验发现，,CCRP,可明显地减轻胃黏膜由于出血性休克再灌注引起的损伤。,二、脑肠肽的细胞保护作用,（一）脑肠肽对胃肠道的细胞保护,胰高血糖素（,glucagon,）可使志愿受试者服用阿司匹林所产生的胃表面上皮损伤显著降低。,Szabo,等报道，给大鼠注射生长抑素可防止由应激或无水乙醇等所引起的胃黏膜损伤，这一作用可被巯基耗竭剂所消除。研究中观察到，在生长抑素抗损伤的同时，还部分地防止了胃黏膜内谷胱甘肽还原酶活性的降低及脂质过氧化分解产物水平的升高，提示,生长抑素可能通过谷胱甘肽还原酶活性以维持黏膜内非蛋白结合巯基含量，从而防止脂质过氧化的发生，以实现其细胞保护作用。,（二）脑肠肽对胰腺的细胞保护,生长抑素对实验性以及临床急性胰腺炎均有良好的疗效，只要给予生长抑素的时间合适，不仅对狗的急性胰腺炎有治疗作用，也有预防作用。,牛胰多肽对大鼠的实验性急性出血性胰腺炎也有极明显的保护作用，它可使病鼠的死亡率明显降低，存活时间大大延长，血清淀粉酶浓度显著降低，减轻胰腺炎的病变程度。,胰多肽除可通过抑制胰蛋白酶分泌和改善胰腺血流量等机制减轻胰损伤外,，细胞及分子水平的分析表明，,胰多肽还能降低损伤因子引起的细胞膜流动性的增加和稳定膜的磷脂组分值,。同时，,胰多肽还能使磷脂酶,A,2,破坏细胞悬浮液中半数细胞的浓度提高,1.6,倍,，也就是说，胰多肽能提高细胞抗磷脂酶,A,2,致损伤的能力。胰多肽是存在于胰腺中的活性肽之一，它能加强胰腺抗损伤能力，可能是抑制胰腺炎发生的一个天然防御因子。,（二）脑肠肽对胰腺的细胞保护,脑肠肽对胰岛,B,细胞也有保护作用。研究发现，皮下注射生长抑素，可减轻由链佐霉素（,streptozotocin,）引起的大鼠和小鼠的实验性高血糖。将生长抑素加入离体单层培养的胰岛细胞中，也可减轻链佐霉素的损伤作用。用半胱胺耗竭或用生长抑素抗血清来中和内源性的生长抑素，都可使链佐霉素所致的损伤加重，,提示生长抑素是胰岛,B,细胞的天然保护因子，有潜在的抗损伤作用。,电镜下细胞超微结构的改变与整体实验观察到的现象一致。,（三）脑肠肽对肝脏的细胞保护作用,有报道外源性上皮生长因子（,EGF,）可使半乳糖胺引起的肝衰竭大鼠死亡率降低，肝功能血清学指标及形态学变化改善，摘除大鼠颌下腺以减少内源性,EGF,则引起肝损伤加重、死亡率增加。,在离体原代培养的肝细胞，提前,1,小时向培养液中加入,EGF,可减轻醋氨酚引起的,GPT,和,GOT,漏出，并呈明显的量效关系，表明,EGF,对肝有直接的保护作用。机制分析表明，,EGF,可增加正常肝细胞还原型谷胱甘肽（,GSH,）含量，同时可在一定程度上逆转醋氨酚引起的,GSH,含量降低,。由于,GSH,在解毒方面具有重要作用，因此，,EGF,增强,GSH,含量的作用可能是其保护机制之一。李继尧等在小鼠在体肝脏和离体培养的肝细胞上还观察到，皮下注射神经降压素能抑制醋氨酚引起的,SGPT,和,SGOT,的升高，,其作用机制可能与促进谷胱甘肽合成、加强清除自由基功能及减少,Ca,2+,内流，缓解胞质,Ca,2+,超载有关,。,三、一氧化氮（,NO,）的细胞保护作用,（一）,NO,对胃肠道的作用,1.,调节胃酸分泌,NO,对基础胃酸分泌无明显作用，而对刺激性胃酸分泌具有调节作用。鼠脑室内注入或静脉注入大肠杆菌内毒素能消除机械性胃扩张所致的酸分泌效应，,NO,合酶抑制剂,L-NAME,能减弱脑室内注入内毒素对胃扩张致酸分泌效应的抑制作用，,NO,前体左旋精氨酸（,L-Arg,）能阻断,L-NAME,的效应，这表明脑组织对内毒素的急性反应涉及到,NO,合成。,NO,在神经反射通路中作为一种神经递质，抑制了胃扩张所致的胃酸分泌。进一步研究表明，应激时胃酸分泌的抑制是中枢系统内,NO,介导的一种保护性反射，尤其存在于迷走神经背侧运动核。胃损伤后的酸分泌变化也涉及到,NO,。,三、一氧化氮（,NO,）的细胞保护作用,（一）,NO,对胃肠道的作用,2.,参与,PGE,2,对壁细胞的保护作用,NO,对壁细胞功能的保护有利于胃酸分泌的调节。适量,Cl,-,的存在是,HCO,3-,与其它离子交换的前提，在壁细胞,pH,值稳定的调节作用中有重要意义。有研究发现,PGE,2,能驱动,Ca,2+,依赖的,NO/cGMP,通路，导致壁细胞基底膜上,Cl,-,通道开放，因而，壁细胞的,Cl,-,通道是,NO/cGMP,通路发挥保护作用的靶目标。,NO,参与,PGE,2,对壁细胞的保护作用。,三、一氧化氮（,NO,）的细胞保护作用,（一）,NO,对胃肠道的作用,3.,调节胃蛋白酶（原）的分泌,NO,供体及,8Br-cGMP,能促使胃蛋白酶（原）的分泌，这提示,Ca,2+,中介的因素通过引起,IP,3,释放、,Ca,2+,流动、,NO,产生及,cGMP,累积来促使胃主细胞释放胃蛋白酶原。,三、一氧化氮（,NO,）的细胞保护作用,（一）,NO,对胃肠道的作用,4.,调节黏液分泌,胃黏液细胞富含,eNOS,，表明,NO,可能调节黏液细胞的功能。大鼠胃腔内滴注二硝酸异梨糖醇（,Isosorbide dinitrate,ISDN,）能剂量依赖性刺激黏液分泌，使胃腔表面黏液凝胶层厚度增加，氧合血红蛋白能阻断此作用，显著增加细胞内,cGMP,含量，,cGMP,磷脂酶抑制剂,M&L22948,同样能刺激黏液分泌，提示,NO,通过,cGMP,介导了胃黏液的释放。,三、一氧化氮（,NO,）的细胞保护作用,（一）,NO,对胃肠道的作用,5.,调节,HCO,3,分泌,胃肠上皮细胞分泌的,HCO,3,是胃肠黏膜防御因子之一，,PGs,及其衍生物通过增加,HCO,3,和黏膜血流而保护胃肠黏膜免遭酸损害，,NO,能与,PGs,一起共同调控胃肠黏膜的,HCO,3,分泌。,三、一氧化氮（,NO,）的细胞保护作用,（一）,NO,对胃肠道的作用,环氧化酶（,Cyclo-oxygenase,COX,）是,PGs,、,TXA2,、,PGI,2,生物合成的限速酶。,NOS,、,COX,在酶水平上存在相互作用，因为,COX,酶活性中心存在铁,-,血红素复合体，,COX,可能是,NO,的靶目标。,LPS,诱导鼠组织,iNOS,表达，致,NO,代谢产物亚硝酸盐增加，且显著增加花生四烯酸代谢而致血浆、尿中,PGs,明显升高。,6.,调节前列腺素的合成,三、一氧化氮（,NO,）的细胞保护作用,（一）,NO,对胃肠道的作用,1.,调节胃酸分泌,2.,参与,PGE,2,对壁细胞的保护作用,3.,调节胃蛋白酶（原）的分泌,4.,调节黏液分泌,5.,调节,HCO,3,分泌,6.,调节前列腺素的合成,（二）,NO,与肝细胞保护,体内及体外试验表明，,NO,在肝细胞凋亡中起重要作用。携带有含,NO,的药物在肝脏代谢后，释放出,NO,使肝脏局部达到高浓度的,NO,，结果这种方法能有效地保护肝细胞免受,TNF,及放线菌素,D,所诱导的凋亡，而几乎不影响体循环血流动力学。最近，还有学者利用携带有,NO,合成酶基因的腺病毒处理体外培养的肝细胞，以便使肝细胞内,NO,合成酶表达增加，以致,NO,的合成增加，结果发现肝细胞能较好地抵抗,TNF,与放线菌素,D,对其诱导的凋亡活动。,四、热休克蛋白的细胞保护作用,用离体原代培养的豚鼠胃黏膜细胞给予,43,热应激,1h,，细胞内热休克蛋白,70kD,（,HSP70,）合成明显增加，,HSP70,编码基因转录显著加速，同时细胞对随后给予的无水酒精的抵抗耐受力明显加强，提示,HSP70,可能是一种由胃黏膜细胞产生的细胞保护因子。,有研究表明肝缺血,60min,后再灌注,2,2.5h HSP70 mRNA,即有高水平表达并持续数小时。在热应激下，,HSP70,也参与肝脏保护。,五、适应性细胞保护作用,1979,年,Robert,等还发现了另一种具有重要意义的细胞保护，即“适应性细胞保护”（,adaptive cytoprotection,）。,它是指先用弱刺激作用于胃黏膜后，可防止随后给予的损伤性刺激所致的胃黏膜坏死的发生。,如口服,10%,20%,乙醇、,5%NaCl,、,5mM,牛磺胆酸盐可以预防由,100%,乙醇、,25%NaCl,、,80mM,牛磺胆酸盐、,0.6NH,4,Cl,、,0.2N NaOH,等致黏膜坏死物质引起的大块胃黏膜损害。,五、适应性细胞保护作用,适应性细胞保护作用可分为同种和交叉的细胞保护，前者指一种类型弱刺激可以预防同型较强刺激的损伤，如,20%,乙醇可以预防,100%,乙醇所致的损伤；而后者是指一种类型弱刺激可以预防异型较强刺激所致的损伤，如,20%,乙醇可以预防,25%NaCl,、强酸或强碱等不同物质所致的损伤，这种适应性，在弱刺激及阿司匹林适应过程中也得到证实，胃黏膜这种交叉适应性说明了适应性细胞保护的非特异性。参与胃黏膜适应性细胞保护的因素很多，各种适应性的产生既有共同的特征和机制，也有各自独特的方面。,五、适应性细胞保护作用,经典的胃黏膜适应性细胞保护是由弱刺激引起短期适应性，具有时间依赖性。业已证实这种作用可能是通过内源性,PG,而发生作用。其依据是：,弱刺激作用后，用生化法、放免法可测得,PG,释放；,消炎痛可阻断,PG,合成，使黏膜适应性细胞保护作用消失；,花生四烯酸可引起类似弱刺激所产生的适应性细胞保护作用使,PG,释放增加，浅表上皮细胞修复过程加快。,还存在非前列腺素机制，如碱性黏液保护层形成，有利于上皮细胞修复。,五、适应性细胞保护作用,阿司匹林（,ASA,）等均可剂量依赖性地导致胃黏膜出血、急性糜烂，亦可致急慢性溃疡形成。,NSAIDS,胃病的形成肯定与,PG,合成抑制有关，但其确切机制尚未完全了解。,上皮生长因子,（,EGF,）,在,ASA,性胃黏膜适应过程中起重要作用，其依据为：,适应中的黏膜表现为细胞显著增殖及,EGF,及其受体表达增强；,胃肠道溃疡区域新生细胞可分泌,EGF,；,ASA,致胃黏膜损伤后局部,EGF,生成增多。故可能是,EGF,增加从而启动细胞增殖及黏膜修复。,