糖类脂质蛋白质的检测.ppt

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,检测生物组织中的,糖类、脂肪和蛋白质,一.实验原理：,某些,化学试剂,能够使生物组织中的有关,有机化合物,产生特定的,颜色反应,。如：,.还原性糖的鉴定：,还原性糖,+,斐林试剂 砖红色沉淀,.脂肪的鉴定：,脂肪,+,苏丹,橘黄色,脂肪,+,苏丹,红色,.蛋白质的鉴定：,蛋白质,+,双缩脲试剂,紫色,.,淀粉,的,鉴定：,淀粉+,碘液,蓝色,二,.,目的要求：,尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质,1、可溶性还原糖的检测和观察：,选材,（1,）,含,糖,量高；,（,2,）颜色为,白色或接近白色,的植物组织,以苹果.梨为最好。,问题,：西瓜可以吗？,制备组织样液：,研磨成浆：取苹果洗净、去皮、切块，取,5g,放入研钵，加石英砂、,5 ml,水研磨、过滤,三,.,实验过程,:,可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀，,说明植物组织样液中含有还原糖。,注入,2mL,苹果组织样液,注入,1mL,刚配制好的斐林试剂,水浴加热约,2min,呈色反应,变成,砖红色,50-65,0,C,的温水,结论：,甲乙液等量混匀,振荡、混合摇匀,呈现蓝色,还原糖有,。,试剂：,.,（甲液：,0.1g/ml,的,乙液：,0.05g/ml,的,.,）,甲乙液必须,后再加入样 液中，,。,必须,。,葡萄糖，果糖，麦芽等所有单糖以及除蔗糖外的二糖,用水浴加热,斐林试剂,NaOH,CuSO,4,等量混合均匀,现配现用,注意事项：,颜色变化：,浅蓝色,棕色,砖红色,2,、脂肪的检测和观察：,圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。,取材：,花生种子,(,浸泡,3,4h,），将子叶削成薄片,制片,取最理想的薄片,在薄片上滴2-3滴苏丹染液（3min）,去浮色（用50酒精）,制成临时装片,观察,低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，,然后用高倍镜观察,结论：,（,3,）注意事项：,试剂：,（,A,液：,0.1g/ml,的,；,B,液：,0.01g/ml,的,）,先加,，再加,。,B,液要求量适中，否则,多余,的,B,液,将会,与,A,液,发生反应生,成,Cu,（,OH,）,2,显色而遮盖原有的颜色。,鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比,双缩脲试剂,A,液,1ml,B,液,4,滴,NaOH,CuSO4,蛋白质的检测结果,用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免,实验后粘住试管壁，不易洗刷,斐林试剂与双缩脲试剂的比较：,A,液,:0.1g/mLNaOH,B,液,:,0.01,g/mLCuSO,4,甲液,:0.1g/mLNaOH,乙液,:,0.05,g/mLCuSO,4,紫色物质生成,砖红色沉淀,先加,A,液,，,再加,B,液,，,不需加热,甲液与乙液,先混再用,，且,现配现用,，需,加热,蛋白质,还原性糖,试剂组成,检验结果,试剂用法,检测对象,双缩脲试剂,斐林试剂,4,、淀粉的检测和观察：,取材：,马铃薯匀浆,检测,组织样液,2mL,碘液,2,滴,结论：,说明组织样液中存在淀粉。,注意：,常用材料：马铃薯,试剂：,。颜色变化：,。,碘液,变蓝,摇匀后变成蓝色,5,、观察,DNA RNA,在细胞中的分布,：,实验原理,甲基绿,+DNA,1.,能改变细胞膜的的通透性，加速染色剂进入细胞。,盐酸的作用,2.,使,DNA,与蛋白质分离，有利于,DNA,与染色剂结合。,吡罗红,+RNA,绿色,红色,5,、观察,DNA RNA,在细胞中的分布,：,步骤,器材与试剂,作用与原理,制片,水解,冲洗,染色,观察,将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上,0.9%,的,NaCl,溶液,载玻片烘干,0.9%,的,NaCl,溶液防止细胞,破裂，维持细胞形态,烘干使细胞固定在载玻片上,8%,盐酸中,30,保温,5,分钟,用蒸馏水缓流冲洗,10s,洗去残留在外的盐酸,2,滴甲基绿、吡罗红混合染色剂染色,5,分钟,甲基绿使,DNA,呈现绿色,吡罗红使,RNA,呈现红色,先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察,改变细胞膜的通透性,使染色体中,DNA,和蛋白质分离,实验步骤,细胞核区域呈现,色,细胞质区域呈现,色,DNA,主要分布在,RNA,主要分布在,绿,红,细胞核,细胞质,DNA,：主要在细胞核,实验结论,线粒体和叶绿体中也含有少量的,DNA,RNA,：主要在细胞质,细胞核中也含有少量,RNA,真核细胞,原核细胞,DNA,：集中在拟核区域,RNA,：分布,在细胞质中,