hpv+TCT培训.ppt

,技术支持：,800-810-0579,技术支持：,800-810-0579,技术支持：,800-810-0579,医学检验项目,宫颈癌,相关检测,子宫颈疾病,一、慢性子宫颈炎,子宫颈糜烂,子宫颈腺体囊肿,子宫颈息肉,二、子宫颈上皮非典型增生和原位癌,CIN,：,级（轻度非典型增生）,级,(,中度非典型增生）,级（重度非典型增生、原位癌）,醋酸涂抹,CIN,病变区呈白色斑片状,碘液试验病变区不着色,子宫颈疾病,三、子宫颈癌,宫颈癌的防治是保障妇女健康和生命的重大课题。是妇产科医生的重要责任。,子宫颈疾病,发病率高,死亡率高,发病趋向年轻化,子宫颈癌在中国,TCT,HPV,脱落宫颈细胞,早期宫颈癌筛查,筛查方法,TCT,：超薄液基细胞学涂片,HPV,：,HPV,病毒杂交捕获法,(HC2),分子杂交,+,化学发光信号放大,TCT,使,TCT,专门的宫颈刷深入宫颈内口，外缘抵住宫颈口，顺时针或逆时针旋转,3-5,周，采集宫颈移行带的脱落细胞。,保存液瓶身上标明患者姓名及送检医院,TCT,样本采集方法及要求,诊断分级,(TBS),不典型鳞状细胞癌（,ASC,）,意义不明的不典型鳞状细胞（,ASC-US,）,不排除上皮内高度瘤变的不典型细胞（,ASC-H,）,非典型腺细胞（,AGC,）,鳞状上皮内病变,(SIL),低度鳞状上皮内病变（,LSIL,）,CIN1,高度鳞状上皮内病变（,HSIL,）,CIN2,、,CIN3,鳞状细胞癌（,SCC,）,TCT,报告单,检测前应停止性行为、停止外用药,1-2,天,取样时禁止用碘酒或者醋酸擦拭宫,颈,怀孕女性不推荐,TCT,TCT,注意事项,HPV,根据其致病性分为,低危型,和,高危型,两种。,2008,年,诺贝尔生理学,/,医学奖,的获奖研究成果表明,HPV,病毒是宫颈癌发病的必要条 件 。,子宫颈癌与,HPV,的关系,CIN,原,位癌,免疫因素,高危,HPV,持续感染,HPV,感染,浸,润癌,细胞分,化失调,30,岁,9,至,25,年,“治病”即“治毒”,子宫颈癌与,HPV,的关系,HPV,检测的种类,HPV 8,种高危混合型检测,HPV 19,种分型检测,HPV-HC2,检测,备注：,HPV,的持续慢性感染被认为是宫颈癌的致病源头因素。因此,HPV,在临床上已成为一种宫颈癌的筛查手段。从,HPV,感染到发展成宫颈癌，需要,9-25,年时间，早期发现,HPV,感染可以帮助预防宫颈癌。,HPV,病毒无特效药物治疗，大部分感染人群可通过免疫力在,1,年左右自动清除。,上述三种,HPV,检测均为,HPV DNA,检测。,各类别的特点,项目,方法学,特点,HPV 8,种高危混合型,PCR,（聚合酶链反应）,检测常见的,8,种高危型别，阳性代表感染了,8,种种的某一种，不具体分出型别,HPV 19,种分型检测,PCR,（聚合酶链反应）,检测,19,种,HPV,亚型，包括,15,种高危和,4,种低危,HPV-HC2,检测,HC2,（第二代分子杂交技术）,具有,SFDA,、,CE,和,FDA,三大机构认证，是目前,HPV DNA,检测领域的金标准，检测,13,种,HPV,混合型感染，阳性代表感染了,13,种中的某一种，不具体分出型别,综合分析：,宫颈病变与,HPV,的病毒载量呈正相关。病毒载量高到一定程度才会引起病变。,PCR,方法在拷贝数很低的情况下即显示阳性，而实际上并不会导致宫颈病变，敏感性过高，达不到宫颈癌的 筛查目的，易造成患者不必要的恐慌，但价格较,HC2,便宜。,HC2,方法是当拷贝数高于,5000,拷贝才判定阳性，与宫颈病变相关性更高，目前指南中均为,HC2,检测。,报告模版,报告模版,报告模版,报告模版,各类别的推广路径,从学术角度应常规推广,HPV HC2,检测,介绍产品的方法学优势：假阳性率低三大权威机构认证,介绍产品的临床符合度：其,cutoff,值更合理，结果判定与临床相关性更高避免过高假阳性给患者带来的恐慌,因当地客户消费水平限制，可推广,HPV8,种或,19,种检测,各类别的推广路径,消费水平很低的客户,HPV8,种高危混合型检测,阴性,常规定期筛查,复查,HPV 19,种分型检测，明确具体阳性型别，半年后再次复查有无持续感染,阳性,消费水平较低的客户,HPV19,种分型检测,阴性,常规定期筛查,阳性,复查,HC2,检测，如为阴性，今后进行常规筛查；如为阳性，可活检或半年后复查,19,种分型检测,中国癌症基金会推荐,随访次,/3-5,年,TCT+HC2,随访次,/1,年,HC2(,),相应治疗,TCT ASCUS,TCT ASCH,HC2(+),HC2(,),HC2(+),阴道镜、病理,（,+,）,筛查方案推荐,TCT,1,、,每年一次,2,、,30岁以后，连续3次正常者，每2,3年一次,HPV,检测,每年与细胞学同时检测,，最久,不超过每3年一次,筛查时间,妇科宫颈取材,在不同部位分别取材,分别装入不同容器,容器上除注明患者基本信息外,必须注明钟点位,宫颈癌,相关检测,Sensitivity,Specificity,and PPV against CIN2+Biopsy not Pap,1,HPV-DNA,现状,1.Szarewski,et al,Comparison of Predictors for High-Grade Cervical Intraepithelial Neoplasia in Women with Abnormal Smears Cancer Epidemiological Biomarkers,November 2008,特异性不高,对于宫颈癌的敏感性也不足,Data compilation of three published Kaiser studies(ObGyn 2010;116:7684,JLGTD 2010;14:287A,GynOnc2011;121:309-313)by Dr.Marshall Austin MD PhD,Professor of Pathology and Director of Cytopathology Magee-Womens Hospital of University of Pittsburgh Medical Center,.,HC2 FALSE NEGATIVES IN CANCER-KAISER STUDIES 2003-2009,PAP Result,CxCa,HC2+,HC2-,Carcinoma,4,n/a,4,HSIL,79,78,1,ASC-H,29,25,4,AGC,30,27,3,AIS,2,n/a,2,LSIL,8,2,6,ASCUS,26,21,5,Endometrial,1,n/a,1,Negative Pap,53,44,9,TOTAL,232,197,35,超过,7,年的追踪中，,15,的癌症被,HC2,漏掉。,30,HPV-DNA,现状,宫颈癌筛查新方案,-E6E7mRNA,宫颈癌的发病机理：,高危,HPV,持续的慢性感染,病毒基因整合,肿瘤抑癌基因的失活、端粒酶活性高表达,免疫监视的逃逸,无论感染哪一种高危型别的,HPV,，,E6/E7mRNA,在宫颈癌中均普遍表达。,E6 E7 mRNA,Transient Infection(80%),Upregulation of E6 and E7 mRNA expression,Cervical Cancer(3-5%),HPV Infection,HPV DNA,Persistent Infection(20%),HPV,特异性频谱,1.Szarewski,et al,Comparison of Predictors for High-Grade Cervical Intraepithelial Neoplasia in Women with Abnormal Smears Cancer Epidemiological Biomarkers,November 2008,3.Voss,et al,Assessment of Fluorescence in Situ Hybridization and Hybridization and Hybrid Capture 2 Analyses of Cervical Cytology Specimens Diagnosed as Low Grade Squamous Intraepithelial Lesion for the Detection of High Grade Cervical Intraepithelial Neoplasia AQCH,June 2010,4.Weiss,et al,Intracellular HPV E6,E7 mRNA Quantification,(HPV,OncoTect)Predicts CIN 2+in,Cervical Biopsies Better than PAP Screening for Women Regardless of Age-Accepted Archives of Pathology and Laboratory Medicine 2011.,各种,HPV,检测导致,CIN2+,（基于组织活检结果）的特异性的临床研究,:,0%,28%,92%,33%,Qiagen,1,Roche,1,p16,1,HPV ONCO TECT,4,3q26,3,48%,69%,Gen-Probe,1,44%,Hologic,2,100%,42%,2.Einstein,et al,Clinical validation of the Cervista HPV HR and 16/18,genotyping tests for use in women with ASC-US cytology.Gyne Onc 2010 Aug 1;118(2):116-22.,33,E6 E7 mRNA,检测,实验方法：流式荧光原位杂交,(Simultaneous Ultrasensitive Signal-amplified Hybridization In Situ-SU SHI),检测目标：,E6 and E7 mRNA,在以下两个阶段中的量化,每个细胞中的,mRNA,过度表达,过度表达细胞所占的比例,E6E7mRNA,临床适应症,临床适应症：,用于宫颈癌筛查,辅助细胞学,-/HPV DNA+,的分流，确定其致癌性,辅助,ASCUS,分流,辅助,LSIL,分流,标本要求,标本取材：,拭去多余的分泌物，宫颈刷抵住宫颈口，同一方向转动,5-7,圈，刷取足量宫颈脱落细胞，放于宫颈细胞液中保存。,标本保存：,冷藏（,2-8,）,送至北京实验室,报告模版,处理方案,LSIL,HPV E.Tect+,HPV E.Tect-,阴道镜,6-12,个月复查细胞学,ASCUS,HPV E.Tect+,HPV E.Tect-,阴道镜,6-12,个月复查细胞学,细胞学,-/HPV,高危混合型PCR,+,HPV 16/18+,HPV 16/18-,阴道镜,HPV E.Tect-,阴道镜,12,个月复查细胞学和,HPV HR,细胞学,-/HPV HR+,HPV E.Tect+,HPV E.Tect-,阴道镜,12,个月复查细胞学和,HPV HR,HPV E.Tect+,处理方案,谢谢,!,