三聚氰胺性质及其化学检测方法1.ppt

,按一下以編輯母片標題樣式,按一下以編輯母片,第二層,第三層,第四層,第五層,Company Logo,*,LOGO,按一下以編輯母片標題樣式,按一下以編輯母片,第二層,第三層,第四層,第五層,*,*,雨雾,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,雨雾,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,三聚氰胺检测,性质概述,前处理方法,分析检测方法,C,3,H,6,N,6,概述,三聚氰胺,(Melamine),简称三胺，俗称蜜胺、蛋白精，是一种重要的氮杂环有机化工原料。,三聚氰胺属白色结晶粉末，无味，毒性轻微。动物若长期摄入三聚氰胺则会造成生殖、泌尿系统的损害，膀胱、肾部结石，并可进一步诱发膀胱癌。,三聚氰胺是一种用途广泛的基本有机化工中间产品，最主要的用途是作为生产三聚氰胺甲醛树脂（,MF,）的原料。三聚氰胺还可以作阻燃剂、减水剂、甲醛清洁剂等。,装饰,面板,涂料,模塑粉,纸张,主要用途,收治婴儿中有,90%,以上经过化验结果显示是尿酸胺结石，这种情况在结石中非常少见，只占到各种结石的,6%-10%,。经过进一步检测，推测这些婴儿是由于摄入的脂肪和蛋白含量比例失调，引起体内嘌呤碱代谢异常，继而产生尿酸和尿酸盐结晶，在上尿路梗阻后形成肾结石，导致肾衰竭。,样品前处理方法,固相萃取,(SPE),柱的选择：,混合型的阳离子交换柱,(PCX),样品前处理步骤,标准样品配制,提取,净化,(PCX,小柱，,60mg/3mL),样品前处理步骤,标准样品配制,：,取,50mg,三聚氰胺标准品，以,20%,甲醇溶解定容至,50mL,得到,1000ppm,的标准溶液，使用时，以提取液,(0.1%,三氯乙酸,),稀释至所要的浓度。,提取,：,称取样品,5g,，加入,50ml 0.1%,三氯乙酸提取液，充分混匀，加入,2mL 2%,乙酸铅溶液，超声,20min,。然后取部分溶液转移至,10mL,离心管中，,8000rpm/min,离心,10min,，取上液,3mL,过混合型阳离子交换小柱,(PCX),。,净化,(PCX,小柱，,60mg/3mL),：,活化及平衡：,3mL,甲醇，,3mL,水,上样：加入提取液,3mL,淋洗：,3mL,水；,3mL,甲醇；弃去淋洗液并将小柱抽干。,洗脱：,5mL 5%,氨化甲醇,(v/v),洗脱。,(5%,氨化甲醇的配置：,5mL,氨水,+95mL,甲醇,),。,浓缩：,50,，氮气吹干，,20%,甲醇,/,水定容至,2mL,，,HPLC,分析或衍生化后,GC-MS,分析。,固相萃取操作,离心机处理,固相萃取分离,酶联免疫法,重量法,升华法,高效液相色谱法,气质联用法,电位滴定法,检测方法,高效液相色谱法,液相色谱条件,色谱柱：,Venusil ASB-C18 4.6250mm,缓冲液：,10mM,柠檬酸,10mM,庚烷磺酸钠,流动相：缓冲溶液,:,乙腈,=92:8,进样量：样品用流动相溶解，进,20L,流 速：,1.0mL/min,柱 温：,40,波 长：,240nm,实际样品测定,为了缩短运行时间，我们将抽取不同样品检测动相流中乙腈比例由,8%,调为,8.5%,，使得,RT=8.889min,，主峰与前杂峰的分离度,R=1.893,，已达到基线分离，主峰,TF=1.240,，满足分析要求，故调整流动相中乙腈比例至,8.5%,，进行下一步研究。,酶联免疫吸附法简称,ELISA,，是在免疫酶技术基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术。,基本原理是,:,使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。,使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。,在测定时,把受检标本,(,测定其中的抗体或抗原,),和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。,酶联免疫吸附法,用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。,样品,萃取,样品萃取液,三聚氰胺,HRP,酶耦合物,标准品,微孔,包备有三聚氰胺抗体,培养,样品中的三聚氰胺和三聚氰胺,HRP,酶耦合物与三聚氰胺抗体竞争性结合，也就是受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体发生特异性结合反应，形成酶标记的免疫复合物,培养物,底物,洗涤,加入显色酶,结合的酶耦合物,使液体现蓝色,没有结合的三聚氰胺和三聚氰胺,HRP,酶耦合物将被冲洗掉,酶标仪读数,将未知样品的读数和标准品的读数比较就能得出样品中的三聚氰胺浓度,由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。,酶联免疫吸附法也存在着局限性，如检测三聚氰胺的精确度有限，同时还不排除其他类似化合物出现同样的检测结果。因此，这种试剂盒可以用于对可能含有三聚氰胺这种物质的产品的初步筛查。如果出现颜色三聚氰胺的检测，必须选择精确度更高的方法，才能更好地确保结果的真实性,结论,分析化学只是一个检测手段,即使有最方便最准确最可靠的方法来分析三聚氰胺,也只能保证老百姓不消费含有三聚氰胺的奶制品。三聚氰胺本不应该在奶制品中存在,可是如果在奶制品中含有另外一种对蛋白质含量检测产生正误差的物质,这个方法同样不可行。要保证食品安全、保证老百姓的生活质量,还得从生产原料的源头和生产过程的质量控制做起。,食品安全齐监督，健康生活同构筑,谢谢！,