毒理学专题2.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第一节 DNA的损伤,一、基因的结构与功能,1、DNA的结构,DNA的一级、二级、三级结构,DNA的双螺旋结构,DNA的超螺旋结构,DNA的三股螺旋结构,第一节 DNA的损伤,一、基因的结构与功能,2、基因的调控,转录前调控,转录后调控,翻译的调控,翻译后的调控,第一节 DNA的损伤,二、DNA的化学损伤,DNA损伤：是指在某些因素的作用下，DNA的结构和功能发生改变，阻碍DNA的复制与转录。包括：,基因突变染色体畸变DNA链断裂DNA-DNA交联和DNA-蛋白质交联,第一节 DNA的损伤,点突变和移码突变,同义突变、错义突变和无义突变,同义突变：如UUA、UUG、CUU、CUC、CUA、CUG均代表亮氨酸，如UUA中的A被G置换，遗传信息的含义未改变，这就叫同义突变,二、DNA的化学损伤,1、基因突变,第一节 DNA的损伤,错义突变：指碱基的突变使密码子的碱基组成发生改变，且导致遗传信息的含义改变，如CUA中的C被G转换，则原代表亮氨酸的变成了颉氨酸,无义突变：指碱基的突变使代表氨基酸的密码子变为肽链合成的终止密码子，如赖氨酸AAG中的C被G转换，则原代表亮氨酸的变成了颉氨酸,第一节 DNA的损伤,二、DNA的化学损伤,1、基因突变,正向突变和回复突变,正向突变,野生型 突变型,回复突变,第一节 DNA的损伤,二、DNA的化学损伤,2、染色体畸变,染色体数目的异常,染色体结构的异常,第一节 DNA的损伤,二、DNA的化学损伤,3、DNA链断裂,单链断裂（single strand breakage,SSB),双链断裂（double strand breakage,DSB),第一节 DNA的损伤,二、DNA的化学损伤,、DNA-DNA交联和DNA-蛋白质交联,DPC（DNA-protein crosslinks）,第二节 DNA的修复,一、直接修复,1、光复活修复,光修复酶-嘧啶二聚体-吸收蓝光光子-电子转移-二聚体环断开,2、烷基转移,O,6,-烷基G-烷基转移酶-活性中心-烷基半光氨酸 自杀性酶或修复蛋白,第二节 DNA的修复,二、碱基切除修复,尿嘧啶或烷化的碱基-N-糖基化酶-排除异常碱基-去嘌啉或嘧啶的位点-核酸内切酶-磷酸二酯键断裂-核酸外切酶-DNA修复合成,三、核苷酸切除修复,核酸内切酶-断裂-核酸外切酶-切除损伤部位-DNA修复合成-DNA连接酶连接,第二节 DNA的修复,四、复制后DNA修复,应急修复或SOS修复,五、损伤的DNA复制,六、错配修复,5-甲基胞嘧啶残基脱氨基形成胸腺嘧啶,第三节 诱变试验,一、试验项目的选择,1、遗传学终点类型,Genetic end point,DNA,完整性改变,DNA,重排或交换,DNA,碱基序列改变,染色体完整性改变,染色体分离改变,第三节 诱变试验,2、成套试验设计的原因,化学毒物的种类和结构不同,化学毒物的致突变作用机制不同,化学毒物的致突变性有强弱之分,第三节 诱变试验,3、成套试验的选择原则,包括每一类型的遗传学终点,应尽量包括多种进化程度不同的物种,体内试验与体外试验结合,生殖细胞与体细胞结合,第三节 诱变试验,4、观察方法的新进展,转基因小鼠致突变系统,Big Blue Mouse,Muta Mouse,微核自动化检测技术,荧光原位杂交技术,第三节 诱变试验,二、诱变试验中的一些问题,1、阴性和阳性对照的设立,阴性对照,阳性对照,第三节 诱变试验,二、诱变试验中的一些问题,2、体外试验的活化系统,哺乳动物细胞介导,肝S9,纯化酶和基因工程,第三节 诱变试验,3、诱变试验与致癌试验的关系,意义：,大多数致癌物具有致突变作用,接触致癌物和DNA加合物与特异碱基突变有关,致癌试验花费大、周期长、不适用于快速筛选,二、诱变试验中的一些问题,第三节 诱变试验,致癌物：,遗传毒性致癌物,非遗传毒性致癌物,遗传毒性非致癌物,非遗传毒性非致癌物,二、诱变试验中的一些问题,第三节 诱变试验,4、试验结果在毒理学安全性评价中的作用,致突变试验的质量控制：,设立阴性与阳性对照组,盲法观察,资料的统计分析,结果的重现性,二、诱变试验中的一些问题,第三节 诱变试验,阴性结果判断条件：,最高剂量应为最大剂量,组间差距不应过大,二、诱变试验中的一些问题,4、试验结果在毒理学安全性评价中的作用,第三节 诱变试验,阳性结果判断条件：,有剂量-反应关系,与阴性对照比照有显著差异,并具有重复性,二、诱变试验中的一些问题,4、试验结果在毒理学安全性评价中的作用,