第2章药物的鉴别.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第一节 概 述,鉴别试验,：,是根据药物的分子结构、理化性质,采用现有的分析方法来,判断药物的,真伪,。,是药检工作中的,首项任务，,只有在药物鉴别无误的情况下，才能进行药物的杂质检查、含量测定。,注意,：这些鉴别试验用来证实贮藏在,标签,容器中的药物是否为所标示的,药物,，,其方法虽有一定的专属性，但不足以确证其结构，故,不能鉴别未知物,第二节 药物鉴别试验的项目,性状,和,鉴别试验,微溶,系指溶质1,g(ml),能在溶剂100不到1000,ml,中溶解；,极微溶解,系指溶质1,g(ml),能在溶剂1000不到10000,ml,中溶解；,几乎不溶或不溶,系指溶质1,g(ml),在溶剂10000,ml,中不能完全溶解。,如：磺胺嘧啶：“在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎不溶；在氢氧化钠试液中易溶，在稀盐酸中溶解。,3.,物理常数：是鉴定药品质量的重要指标。其测定结果不仅对药品具有鉴别意义，也反映了该药品的纯杂程度。,如：,相对密度,、馏程、,熔点,、凝点、,比旋度,、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、,吸收系数,。,（,1,）、熔点,：,系指一种物质,按规定方法,测定，由,固体,熔化成,液体,的温度、,熔融同时分解,的温度或在熔化时自,初熔至全熔,的一段温度。,如：本品的熔点为204-212,C,（,2,）比旋度,：,在一定波长与,温度,下，偏振光透过1,dm,且每1,ml,中含有旋光性物质1,g,的溶液时测得的旋光度称为比旋度。,例如,Vc,的测定：,取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释使成每1,ml,中约含0.10,g,的溶液，依法测定，比旋度为20.5至21.5,C,。,（,3,）吸收系数,：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度。,常用百分吸收系数,如：取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成1,ml,中约含30,ug,的 溶液，照分光光度法，在290,nm,波长处测定吸收度，吸收系数（,E,1,1cm,),为133141。,二、一般鉴别试验,（,general identification test）,是依据,某一类药物,的,化学结构,和,理化性质,的特征，通过,化学反应,来鉴别药物真伪。,一般鉴别试验,只能证实是某一类药物,而不能证实是哪一种药物。,必须在一般鉴别试验的基础上,再进行专属鉴别试验,方可确认,哪一种药物,2,种以上鉴别方法结合起来共同鉴别一个药物,一般鉴别试验的方法收在,ChP,附录中：,丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟类、无机金属类（,Na,K,Li,Ca,Ba,Fe.,Al,Zn,Cu,Ag,Hg,等）、有机酸盐类（水杨酸盐）、无酸盐类等（氯化物、硫酸盐等）,专属鉴别试验,收在正文中。,1.有机氟化物,有机氟,氧瓶燃烧,无机氟离子,pH4.3,茜素氟蓝,硝酸亚铈,蓝紫色络合物,2.有机酸盐,(1)水杨酸,水杨酸+,FeCl,3,中性条件,弱酸性条件,红色配位化合物,紫色配位化合物,(2)酒石酸盐,供试品溶液（中性）+氨制硝酸银,水浴中,银镜,3.芳香第一胺类,供试品,+,稀盐酸,亚硝酸钠,碱性,-萘酚试液,黄色到猩红色,4.托烷生物碱类（发烟硝酸、氢氧化钾醇溶液）,此类生物碱中具有莨菪酸结构，有,Vitali,反应,显紫色,。,5.无机金属盐（,Na,K,Ca,以及铵盐,),焰色反应：,Na,显鲜黄色；,K,显紫色；,Ca,显砖红色,供试品,+,NaOH,氨臭,使湿润的红色石蕊试纸变蓝,使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色,铵盐：,6.无机酸根,氯化物：,Cl,-,+Ag,+,AgCl,乳白色,硫酸盐：,SO,4,2-,+Ba,2+,BaSO,4,白色,三、专属鉴别试验,(,specific identification test）,证实某一种药物的依据,如巴比妥类药物的母核是丙二酰脲，因此该类药物称为丙二酰脲类，它们共同的反应是银盐反应和铜盐反应，操作方法置于丙二酰脲类的鉴别方法项下，在药典的附录中。,苯巴比妥,巴比妥,司可巴比妥钠,苯巴比妥,（母核 丙二酰脲）,一般鉴别试验,区别不同,类别,的药物。,专属鉴别试验,则是在一般鉴别试验的基础上,区别,同类药物的各个单体,。,第三节 鉴别方法,鉴,别,*,化学鉴别法,X,射线粉末衍射法,生物学法,*,光谱鉴别法,*,色谱鉴别法,(1)利用,呈色或颜色消失的鉴别法,(2)沉淀生成反应鉴别法,(3)荧光反应鉴别法,(4)气体生成鉴别法,(5),测定衍生物的熔点,一、化学鉴别法,一 化学鉴别法,三氯化铁呈色反应(,Ar-OH,Ar-OCOCH,3,),异羟戊酸铁反应(,Ar-COOH;-COOR),1.,显色反应鉴别法,茚三酮呈色反应(脂肪氨基，,氨基酸）,重氮化-偶合呈色反应(,Ar-NH,2,;-NHCOR),氧化还原显色反应及其它颜色反应,与金属离子的沉淀反应,三氯化铁呈色反应,第二章,对乙酰氨基酚,异羟肟酸铁反应,氯贝丁酯,Cl,茚三酮呈色反应,重氮化-偶合呈色反应,第二章,左旋多巴,对乙酰氨基酚,氧化还原呈色反应,第二章,盐酸氯丙嗪,（,1,）与重金属离子的沉淀反应,（,2,）与碘化铋钾的沉淀反应,（,3,）其它沉淀反应,第二章,2,、沉淀生成反应鉴别法,（,1,）,胺类、酰脲类、酰胺类药物经,强碱处理 生成氨气 (,NH,3,；,NH(C,2,H,5,),2,),（,2,）含硫药物经强酸处理后，,加热，生成硫化氢气体,3,、气体生成反应,(,H,2,S+Pb,2+,PbS +2H,+,),鉴别法,（,3,）含碘有机药物，加热。生成紫,色碘蒸汽,（,4,）含醋酸酯和乙酰胺类药物酸水,解 后，加乙醇可产生乙酸乙酯,药物本身在可见光下发射荧光,药物溶液+硫酸,药物溶液+溴,药物溶液+间苯二酚,药物经其它反应后发射荧光,第二章,4,、荧光反应鉴别法,5、测定衍生物的熔点,1.紫外光谱鉴别法,测定最大吸收波长,或同时测定最小吸收波长.,乙胺嘧啶,供试品在0.1,mol/L,盐酸介质,中的紫外吸收在272,nm,处为峰,216,nm,处,为谷.,二、光 谱 鉴 别 法,规定吸收波长和吸收度比值法,两性霉素在362,nm、381nm、405nm,波长处有最大吸收.规定362,nm,与381,nm,处吸收度比值不大于0.6、381,nm,与405,nm,波长比值不大于0.9.,第二章,己稀雌酚注射液用供试品溶液250450,nm,波长吸收光谱与对照品是否一致鉴别.,第二章,与对照品比较,对比吸收光谱,的一致性,经化学处理后,测定其反应产物的吸收光谱特性.,第二章,规定一定浓度供试品在最大吸收,波长处的吸收度.,主要用于组分单一、结构明确的原料药。,ChP,采用标准图谱对照法,BP,采用标准图谱对照法、对照品法,USP,采用对照品法,JP,规定条件下测定一定波数处特征吸,收峰。,第二章,2.红外光谱法,3.,近红外光谱法,近红外谱区,7502500nm,(400012800cm,-1,),4,、原子吸收分光光度法,5,、核磁共振（,NMR,）,6,、质谱（,MS,）,利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱行为(,Rf,值或保留时间,)进行鉴别试验。,用于复杂环境下药物有效成分及杂质鉴别,具有,分离、分析,同时进行的特点.,三、色谱法,（,HPLC GC TLC),1,、高效液相色谱法(,HPLC),供试品和对照品色谱峰,保留时间一致.,2,、气相色谱法,(,GC),同,HPLC,要求,第二章,3,、薄层色谱法(,TLC),对照品比较法,供试品斑点与对照品的,Rf,值及斑点的颜色,应一致。,四、生物学法,利用微生物或试验动物进行鉴别的方法。,五、,x,射线粉末衍射法,具有晶体结构的化合物具有特定的,X,射线衍射图。,六、,指纹图谱,与,特征图谱,鉴别法,中药,有效成分,化学法和仪器法相结合,相互取长补短。,由,2,种以上的方法可以共同鉴别一个药物的真伪。,建立鉴别方法的概念：,方法要有一定的专属性、灵敏 性、且便于推广。,例1.,维生素,C,的鉴别：维生素,C,分子中具有2个手性,C,原子,所以具有旋光性,可以通过测定旋光度来进行鉴别.,（1）,药典中规定：,维生素,C,的比旋度应为+20.5,+21.5,（2）,在维生素,C,的分子中具有烯二醇的结构，这个结构具有很强的还原性,可以和一些氧化剂作用.,（3）红外光谱与对照图谱一致.,第,四节,鉴别试验的条件,鉴别试验是以所采用的化学反应或物,理特性产生的,明显的、易于觉察,的特征变,化为依据。因此，能影响鉴别试验判定结,果的特征变化的,因素,都是应当,精心选择和,严格控制,的。,一、,溶液的浓度,溶液的浓度主要是指被鉴别药物的浓度，加入各种试剂的量一般是过量。,鉴别试验,多采用,观测沉淀,、,颜色或各种光学参数的变化,，来判定结果。药物和有关试剂的浓度直接影响上述的各种变化，必须由实验筛选后作出严格规定。,二、溶液的温度,温度对化学反应的影响很大，一般温度每升高10,，,可使反应速度增加24倍。温度的升高可以促使一些化学反应的发生，颜色发生变化，对观察结果有直接的影响。应该作出规定。,许多鉴别反应都需要,在一定酸碱度的条件下,才能进行。溶液酸碱度的作用在于能使各,反应物,有足够的浓度处于反应状，,又使,反应生成物,处于稳定和易于观测的状态。,三、溶液的酸碱度,四、干扰成分的存在,在鉴别试验中，如,药物结构中的其它部分,或,药物制剂中的其它组分,也可参加鉴别反应，产生干扰鉴别试验结果的现象，就会混淆试验结果。这时必须选择,专属性更高的鉴别方法,或先对共存的干扰组分进行分离，然后进行鉴别。,五、试验时间,有机化合物的化学反应,和无机化合物不同，一般反应速度,较慢,，达到预期试验结果需要较长的时间。这是因为有机化合物是以,共价键,相结合,同时在化学反应过程中，有时存在着许多中间阶段，甚至需加入,催化剂,才能启动反应。要使化学反应完成需一定的时间，要经过实验筛选加以确定，并作出规定。,六、鉴别方法的验证,1,、专属性,2,、耐用性,本章结束,