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高三生物实验复习全.ppt

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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验一 用显微镜观察多种多样的细胞,一、实验目的:,(1),使用高倍显微镜观察几种细胞,,比较不同细胞的异同点,(2)运用制作临时装片的方法,二、实验原理:,利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构,例如:可以看到叶绿体、线粒体等细胞器,从而能够区别不同的细胞。,三、方法步骤:,第一步:转动反光镜使视野明亮,第二步:在低倍镜下观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野中央,第三步:用转换器转过高倍物镜,问(1)是低倍镜还是高倍镜的视野大,视野明亮?为什么?,提示:低倍镜的视野大,通过的光多,放大的倍数小;高倍镜视野小,通过的光少,但放大的倍 数高。,问(2)为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察?,提示:如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。,问(3)用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行?,提示:不行。用高倍镜观察,只需微调即可。转动粗准焦螺旋,容易压坏玻片。,2,脂肪可以被,苏丹,染液染成,橘黄,色,(或被,苏丹,染液染成,红色,),。,3,淀粉遇碘变蓝色。,4蛋白质与,双缩脲试剂,发生作用,产生,紫色,反应,。(,蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu,2+,作用,产生紫色反应。,),三、实验材料,1做可溶性还原性糖鉴定实验,应选,含糖高,,颜色为,白色的,植物组织,如苹果、梨。(因为组织的颜色较浅,易于观察。),2做脂肪的鉴定实验。应选,富含,脂肪,的种子,以花生种子为最好,实验,前一般要浸泡34小时(也可用蓖麻种子)。,3做蛋白质的鉴定实验,可用,富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清,。,四、实验试剂,斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/mL NaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/mL CuSO4溶液)、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/mL NaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/mL CuSO4溶液)、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水。,五、方法步骤:,(一)可溶性糖的鉴定,操,作,方,法,注,意,问,题,解,释,1.,制备组织样液。,(去皮、切块、研磨、过滤),苹果或梨组织液必须临时制备。,因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。,2.,取,1,支试管,向试管内注入,2mL,组织样液。,3.,向试管内注入,1mL,新制的斐林试剂,振荡。,应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;,切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。,斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时,生成的,Cu(OH),2,在,7090,0,C,下分解成黑色,CuO,和水;,甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu(OH),2,生成。,4.,试管放在盛有,50-65,0,C,温水的大烧杯中,,加热,约,2,分钟,观察到溶液颜色:浅蓝色,棕色,砖红色(沉淀),最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。,也可用酒精灯对试管直接加热。,防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤;,缩短实验时间。,(二)脂肪的鉴定,操,作,方,法,注,意,问,题,解,释,1花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。,干种子要浸泡,34,小时,新花生的浸泡时间可缩短。,因为浸泡时间短,不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些,便于观察。,2在子叶薄片上滴,23,滴苏丹或苏丹染液,染色,1,分钟。,染色时间不宜过长。,3用吸水纸吸去薄片周围染液,用,50%,酒精洗去浮色,吸去酒精。,酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。,4用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上,12,滴蒸馏水,盖上盖玻片。,滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。,5低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。,装片不宜久放。,时间一长,油滴会溶解在乙醇中。,(三)、蛋白质的鉴定,操,作,方,法,注,意,问,题,解,释,1制备组织样液。,(浸泡、去皮研磨、过滤。),黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,也可购新鲜豆浆以节约实验时间。,2鉴定。加样液约,2ml,于试管中,加入双缩脲试剂,A,,摇匀;再加入双缩脲试剂,B,液,34,滴,摇匀,溶液变紫色。,A,液和,B,液也要分开配制,储存。鉴定时先加,A,液后加,B,液。,CuSO,4,溶液不能多加。,先加NaOH溶液,为Cu,2+,与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入,会导致Cu,2+,变成Cu(OH),2,沉淀,而失效。,否则CuSO,4,的蓝色会遮盖反应的真实颜色。,3可用蛋清代替豆浆。,蛋,清,要,先,稀,释,如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。,附:淀粉的检测和观察,用试管取,2ml,待测组织样液,向试管内滴加,2,滴碘液,观察颜色变化。,碘,液,不,要,滴,太,多,以免影响颜色观察,实验三 观察DNA、RNA在细胞中的分布(必修一P26),一、实验目的:,初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法,二、实验原理:,1甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,,甲基绿,使DNA呈现绿色,,,吡罗红,使RNA呈现红色,。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。,2,盐酸,能够,改变,细胞膜的通透性,,加速,染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA和蛋白质,分离,,有利于DNA与染色剂结合。,三、方法步骤:,操作步骤,注意问题,解释,1取口腔上皮细胞制片,载玻片要洁净,滴一滴质量分数为,0.9%,的,NaCl,溶液,用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞,将载玻片在酒精灯下烘干,防止污迹干扰观察效果,保持细胞原有形态,消毒为防止感染,漱口避免取材失败,固定装片,2水解,将烘干的载玻片放入质量分数为,8%,的盐酸溶液中,用,30,0,C,水浴保温,5min,改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体的,DNA,与蛋白质分离而被染色,3冲冼涂片,用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片,10S,洗去残留在外的盐酸,4染色,滴,2,滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色,5min,5观察,先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,调节清晰后才换用高倍物镜观察,使观察效果最佳,实验四 用高倍镜观察线粒体和叶绿体P47,一、实验目的:,使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。,二、实验原理:,叶绿体的辨认依据:叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形。,线粒体辨认依据:线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。,健那绿,染液是,专一性染线粒体的活细胞染料,,可以使活细胞中线粒体呈现,蓝绿色,。,三、实验材料,:,观察叶绿体时选用:藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是:叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片,所以作为实验的首选材料。,步骤,操作方法,目的与作用,(,1,)取材,新鲜的藓类的叶,菠菜叶下表皮略带一些叶肉,藓类叶为单层细胞,下表皮容易撕取,要略带些叶肉,(,2,)制片,注意叶片不能太干了,保持有水的状态,以免影响细胞活性,(,3,)观察,叶绿体呈椭圆形,可随细胞质的流动而流动。叶绿体在弱光下以最大面积(长轴)转向光源,在强光下以最小面积(短轴)转向光源。,(,1,)取材,漱口,口腔内侧壁上轻刮几下,(,2,)染色,将口腔细胞放在健那绿液滴上,(,3,)观察,盖上盖玻片,显微镜下观察,线粒体被染成蓝绿色,问题,1,、为什么不用植物细胞来观察线粒体?,植物线粒体相对较少,叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色,2,、如果观察发现染色不足,如何补色?,在盖玻片一侧滴加健那绿液,另一侧用吸水纸吸,实验五 植物细胞的吸水和失水P61,1.原理:成熟(有明显液泡)的植物细胞能够与外界溶液组成一个渗透系统,通过渗透作用的方式吸水或失水。,植物细胞的原生质层相当于一层半透膜,细胞液浓度细胞外溶液浓度时,细胞吸水;,细胞液浓度细胞外溶液浓度时,细胞失水,细胞壁与原生质层的伸缩能力不同。,2条件:细胞液与外界溶液浓度差,原生质层(半透膜),3材料:紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡),质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。,中央液泡大小,原生质层的位置,细胞大小,蔗糖溶液,清水,5记录表:,4步骤:制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片观察盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)盖玻片一侧滴清水,另一侧用吸水纸吸引观察(质壁分离复原),6.注意问题:,(1)细胞发生质壁分离后,细胞壁与细胞膜之间的空隙充满的是0.3mg/mL蔗糖溶液。,(2)动物细胞能发生渗透作用但不会发生质壁分离。,(3)选材:选取紫色洋葱鳞片叶外表皮。其细胞液为紫色,在显微镜下与无色透明的细胞壁容易区分,观察到的质壁分离和复原效果明显。另外,取新鲜水绵、黑藻叶、南瓜表皮也可以做这个实验。,(4)试剂:选用0.3g/ml 蔗糖糖溶液。浓度过高,细胞质壁分离速度虽然很快,但不久就会将细胞杀死,细胞不能进行质壁分离复原;若浓度过低,则不能引起细胞质壁分离或速度太慢。另外,8%食盐溶液、5%的硝酸钾溶液、一定浓度的尿素、甘油也可使用,但后面三者在引起质壁分离后可自动复原。,(5)时间的控制:做好质壁分离的实验后,不久就要做质壁分离复原实验。避免使质壁分离的细胞长时间处于较高浓度的外界溶液中,细胞过度失水而导致死亡。从而观察不到质壁分离复原的现象。,(6)应用:可以用于测定细胞液的浓度 可以用于判断细胞的死活,实验六 探究影响酶活性的条件P83,1、材料:新配制的淀粉酶溶液,新鲜肝脏研磨液,可溶性淀粉溶液,过氧化氢溶液等。,2、内容:,(1)探究温度对酶活性的影响,原理:淀粉遇碘后,形成蓝色的复合物。淀粉酶可以可以使淀粉水解成麦芽糖,麦芽糖遇碘后,不形成蓝色的复合物。,步骤,项目,试管,1,试管,2,试管,3,1,加入可溶性淀粉溶液,2mL,2mL,2mL,2,放置在不同温度环境下,5,分钟,0,100,60,3,加入新配置的淀粉酶溶液,1mL,1mL,1mL,4,滴入碘液,2,滴,2,滴,2,滴,5,观察结果,变蓝,变蓝,不变蓝,在温度对酶活性的影响的实验中,三支试管的条件,除温度外均相同。3号试管处在60的温度条件下,酶活性最大,试管中的淀粉被分解,滴入碘液后不会变蓝。2号试管的温度条件是100,这样高温度条件下,淀粉酶已失去活性,1号试管的温度条件是O,低温抑制淀粉酶的活性。所以2号和1号试管中的淀粉都没有被分解,滴上碘液后都会变蓝,此实验可以证明:酶的催化作用需要适宜的温度条件,温度过高和过低都将影响酶的活性。,(2)探究pH对酶活性的影响,实验1:,原理:过氧化氢(H,2,O,2,)在过氧化氢酶的催化作用下,可以分解成水和氧气,可以放入带火星的木条,看能否复燃来检测是否有氧气产生。,步骤,项目,试管,1,试管,2,试管,3,1,加入过氧化氢溶液,2mL,2mL,2mL,2,加入蒸馏水,1mL,3,加入盐酸溶液,1mL,4,加入,NaOH,溶液,1mL,5,滴加肝脏研磨液,2,滴,2,滴,2,滴,6,37,水浴,5min,5min,5min,7,检,验,放入带火星的木条,复燃,不复燃,不复燃,试管内气泡产生量,有气泡,产生,没有气泡,产生,没有气泡,产生,2号试管内加入了盐酸,溶液的pH较低,3号试管内加入了氢氧化钠,溶液的pH较高,在过低或过高pH环境中,过氧化氢酶失去活性,不能使过氧化氢分解,没有氧气产生而1号试管没有加入酸或碱,溶液近似中性,过氧化氢酶将过氧化氢分解成水和氧气,使木条复燃。,实验2,原理:淀粉在淀粉酶的作用下,被分解成麦芽糖,麦芽糖能与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色沉淀,步骤,项目,试管,1,试管,2,试管,3,1,加入可溶性淀粉溶液,2mL,2mL,2mL,2,加入蒸馏水,1mL,3,加入盐酸溶液,1mL,4,加入,NaOH,溶液,1mL,5,加入新配置的淀粉酶溶液,2,滴,2,滴,2,滴,6,60,水浴,5min,5min,5min,7,加入斐林试剂,2mL,2mL,2mL,8,50,60,水浴,2min,2min,2min,9,观察结果,有砖红色,沉淀,无,无,实验现象记录如下:1号试管有砖红色沉淀生成,2号试管无砖红色沉淀生成,3号试管无砖红色沉淀生成。,2号试管内加入了盐酸,溶液的pH较低,3号试管内加入了氢氧化钠,溶液的pH较高,在这样的pH环境中,淀粉酶失去活性,不能使淀粉分解,所以试管中加入斐林试剂后并无砖红色沉淀生成。1号试管内没有加入酸或碱,溶液近似中性,这样的pH适于淀粉酶发挥催化作用,所以淀粉被分解并与斐林试剂反应,生成砖红色沉淀。以上实验可以证明,酶的催化作用需要适宜的pH,pH偏低或偏高都能影响酶的活性,实验七 探究酵母菌细胞呼吸的方式P91,1.原理:酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水:,C,6,H,12,O,6,6H,2,O 6O,2,6CO,2,12H,2,O 能量,在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳:,C,6,H,12,O,6,2C,2,H,5,OH 2CO,2,少量能量,酶,酶,酵母菌的呼吸方式,1提出问题:,2作出假设:,3设计实验:,4、实验预测:,探究酵母菌细胞呼吸方式,问题交流,怎样控制有氧和无氧条件?,怎样鉴定有无酒精产生?,怎样鉴定有无二氧化碳产生及产生量的多少?,怎样保证酵母菌在整个实验过程中能正常生活?,如何设计对照实验?,实验步骤,1、制备氧气,取一个锥形瓶,在瓶中加入,5%的H,2,O,2,溶液,100ml,,并加入8%的,FeCl,3,溶液,1ml;,并导入到锥形瓶A中。,2、酵母培养液的配制,各取,2.5g,新鲜酵母,各装入锥形瓶A和锥形瓶B,中。分别向瓶中注入,100ml,的5%的,葡萄糖溶液,。,注:锥形瓶B的工作已完成,(已放置一段时间),,,为锥形瓶 A塞上胶塞,与装5%H,2,O,2,溶液相连。,3、,澄清石灰水,的量取,各取,4ml,澄清石灰水,分别注入到两个试管中,有氧呼吸装置,无氧呼吸装置,4、按下面两副图,组装,好,进行观察,比较一定时间内(5分钟内)两支试管的混浊程度。,混浊程度的多少说明什么?(P92),实验步骤,质量分数为10%的NaOH溶液,酵母菌培养液,澄清的石灰水,接橡皮球,(吸气泵),酵母菌培养液,澄清的石灰水,分析:A瓶加入的试剂是NaOH,其目的是:使进入B瓶的空气先经过NaOH处理,排除空气中CO,2,对实验结果的干扰。,C瓶和E瓶加入的试剂是澄清石灰水(或溴麝香草酚蓝水溶液),其作用是:检测CO,2,的产生,D瓶应封口放置一段时间后,再连通E瓶,其原因是:D瓶应封口放置一段时间后,酵母菌会将瓶中的氧气消耗完。再连通E瓶,就可以确保通入澄清石灰水(或溴麝香草酚蓝水溶液)的CO2是酵母菌的无氧呼吸所产生的,5、检测:,(1)检测CO2的产生:,使澄清石灰水变浑浊,或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。,(2)检测酒精的产生:,橙色的重铬酸钾溶液,在酸性,条件下与酒精发生反应,变成灰,绿色。,过滤,重铬酸钾可检测有无酒精的存在,这一原理在日常生活中有什么用处?,思考:,检测司机是否喝了酒,实验八 绿叶中色素的提取和分离P97,1、原理:叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇提取色素,各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同。溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快,反之则慢分离色素,2、步骤:,(1)提取色素:研磨,(2)制备滤纸条:,(3)画滤液细线:均匀,直,细,重复若干次,(4)分离色素:不能让滤液细线触及层析液,(5)观察和记录:结果滤纸条上从上到下依次为:橙黄色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(叶绿素a)、黄绿色(叶绿素b).,实验九 细胞大小与物质运输的关系P110,原理:NaOH和酚酞相遇呈紫红色,当与琼脂相遇时,其中,酚酞,变成,紫红色,,因此,从颜色上的变化就知道NaOH扩散得,有多远。在一定时间内,NaOH在琼脂块的每一侧扩散的距离大致相同。,步骤:,将含酚酞琼脂块切成三块边长分别为3cm、2cm、1cm的正方体,放入烧杯内,加入NaOH溶液,10min后取出,用纸巾吸干,用塑料刀将琼脂块切成两半.观察切面,测量每一块上NaOH扩散的深度.,分析:琼脂块的表面积与体积之比(相对表面积)随着琼脂块的增大而减小,NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体积之比也随着琼脂块的增大而减小.,结论:,细胞,体积,越,大,,其相对,表面积,越,小,,细胞的,物质运输的效率,就越,低,。细胞表面积限制了细胞的长大。,实验:细胞大小与物质运输的关系,原理:当NaOH与含酚酞的琼脂块相遇,其中的酚酞变成红色。根据琼脂块的颜色变化可知NaOH扩散的深度。,特点:相同时间内,NaOH在大小不同的琼脂块着色深度(吸收速率)基本相同。,琼脂块在0.1%NaOH溶液中浸泡,10,分钟,琼脂块在0.1%NaOH溶液中浸泡,15,分钟,琼脂块切成两半观察切面,边长,表面积,体积,比值,表面积/体积,着色深度,比值,着色体积/整个体积,a,6a,2,a,3,6a,2,/a,3,=6/a,0.5,0.5,0.5,0.5,3,54,27,2,19/270.7,2,24,8,3,7/80.9,1,6,1,6,1/1=1,相对,表面积,吸收效率,结论:,a,3,-(a-0.52),3,/a,3,细胞体积越大,相对表面积越小,吸收效率越小,思考:,限制细胞大小的因素有哪些?,细胞的体积不是越小越好吗?,球表面积S=4,r,2,球体积V=(4/3),r,3,相对表面积=S/V=3/r,S/V,1.细胞为什么要分裂?或细胞为什么这么小?(1)增大细胞膜表面积与体积比,有利于物质的运输(营养吸收与废物排出)以保证细胞正常生命代谢需要。(2)保证适宜的核质关系,使细胞质能在细胞核的控制范围内。2卵细胞是一种特殊的细胞,因为它含有许多供胚胎发育的营养物质卵黄,而使细胞体积增大了许多倍。但卵细胞一般与外界交换物质少,故表面积与体积的比例特殊。,实验十 观察细胞的有丝分裂P115,1、材料:洋葱根尖(葱,蒜),2、步骤:,(一)洋葱根尖的培养,(二)装片的制作:,制作流程:解离漂洗染色制片,1.解离:,药液:质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精(1:1混合液)。,时间:35min。,目的:,使组织中的细胞相互分离开来,。,2.漂洗:用清水漂洗约3min。,目的:,洗去药液,防止解离过度,并有利于染色。,3.染色:用质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色35min,目的:使染色体着色,利于观察。,4.制片:将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片,然后用拇指轻轻地按压载玻片。,目的:,使细胞分散开来,有利于观察,。,(三)观察,1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂。,2、换高倍镜下观察:分裂中期分裂前、后、末期分裂间期。(注意各时期细胞内染色,体形态和分布的特点)。其中,处于分裂间期的细胞数目最多。,细胞周期,样本1,样本2,总数,每一时期的细胞数计数细胞的总数,间期,分,裂,期,前期,中期,后期,末期,计数细胞的总数,实验十一 观察蝗虫精母细胞的减数分裂固定装片P21,1、目的要求:,通过观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片,识别减数分裂不同阶段的染色体的形态、位置和数目,加深对减数分裂过程的理解。,2、材料用具:,蝗虫精母细胞减数分裂固定装片,显微镜。,3、方法步骤:,(1)在低倍镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片。识别初级精母细胞、次级精母细胞,和精细胞。,(2)先在低倍镜下依次找到减数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细,胞,再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目。,4、讨论:,(1)如何判断视野中的一个细胞是处于减数第一次分裂还是减数第二次分裂?,(2)减数第一次分裂与减数第二次分裂相比,中期细胞中的染色体的不同点是什么?末期?,实验十二 低温诱导植物染色体数目的变化P88,1、原理:,用,低温,处理植物分生组织细胞,能够,抑制纺锤体的形成,,以致影响染色体被拉向两极,细胞也,不能分裂成,两个,子细胞,,于是,植物细胞染色体数目发生变化。,2、方法步骤:,(1)洋葱长出约1cm左右的不定根时,放入冰箱的低温室内(4),诱导培养36h。,(2)剪取诱导处理的根尖约0.51cm,放入卡诺氏液中浸泡0.51 h,以固定细胞的形态,,然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次。,(3)制作装片:解离漂洗染色制片(过程同观察细胞的有丝分裂的制片方法一样),(4)观察:比较:视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞.,3、讨论:秋水仙素与低温都能诱导染色体数目加倍,这两种方法在原理上有什么相似之处?,实验十三 调查人群中的遗传病P91,一、目的要求:,1.初步学会调查和统计人类遗传病的方法。,2.通过对几种人类遗传病的调查,了解这几种遗传病的发病情况。,二、方法:,1.调查的群体应足够大;,2.选取群体中发病率较高的单基因遗传病。如红绿色盲、白化病、高度近视(600度以上)等。,3.如果调查某病的遗传方式,则要对患病的家族群体进行调查统计。,4.保证调查的群体足够大,分组调查,汇总数据,统一计算。,步骤:组织问题调查小组 确定课题 分头调查研究 撰写调查报告 汇报、交流调查结果。,计算公式:,某种遗传病的发病率 =100%,讨论:所调查的遗传病的遗传方式,发病率是否与有关资料相符,分析原因。,某种遗传病的患病人数,某种遗传病的被调查人数,实验十四 探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度P51,一、实验目的:,1了解植物生长调节剂的作用,2进一步培养进行实验设计的能力,二、实验原理:,植物插条经植物生长调节剂处理后,对植物插条的生根情况有很大的影响,而且用不同浓度、不同时间处理其影响程度亦不同。其影响存在一个最适浓度,在此浓度下植物插条的生根数量最多,生长最快。,三、方法步骤:,1选择生长素类似物:2,4-D或-萘乙酸(NAA)等。,2配制生长素类似物母液:5 mg/mL(用蒸馏水配制,加少许无水乙醇以促进溶解)。,3设置生长素类似物的浓度梯度:用容量瓶将母液分别配成0.2、0.4、0.6、0.8、1、2、3、4、5 mg/mL的溶液,分别放入小磨口瓶,及时贴上相应标签。NAA有毒,配制时最好戴手套和口罩。,剩余的母液应放在4 保存,如果瓶底部长有绿色毛状物,则不能继续使用。,5选择插条:以1年生苗木为最好(1年或2年生枝条形成层细胞分裂能力强、发育快、易成活)实验表明,插条部位以种条中部剪取的插穗为最好,基部较差,梢部插穗仍可利用。实验室用插穗长57 cm,直径11.5 cm为宜。,6处理插条:枝条的形态学上端为平面,下端要削成斜面,这样在扦插后可增加吸收塔水分的面积,促进成活。每一枝条留3-4个芽,所选枝条的芽数尽量一样多。,处理方法:(1)浸泡法:把插条的基部浸泡在配制好的溶液中,深约3cm,处理几小时至一天。(要求的溶液浓度较低,并且最好是在遮阴和空气湿度较高的地方进行处理),(2)沾蘸法:把插条基部在浓度较高的药液中蘸一下(约5s),深约1.5cm即可。,7探究活动:提出问题作出假设设计实验(包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格)实施实验分析与结论表达与交流。,注:1可先设计一组梯度比较大的预实验进行摸索,再在预实验的基础上设计细致的实验。,2.实验材料:可以用杨、加拿大杨、月季等的枝条。,3,实验设计的几项原则:,单一变量原则(只有溶液的浓度不同);,等量原则(控制无关变量,即除溶液的浓度不同外,其他条件都相同);,重复原则(每一浓度处理35段枝条);,对照原则(相互对照、空白对照);科学性原则,4研究实验中出现的问题。,分析不同插条的生根情况。,不能生出不定根:有可能是枝条上没有芽、枝条倒插等。,都能生出不定根:促进扦插枝条生根是指刺激枝条的下端生出不定根,而不是刺激根生长。不同的枝条可能生出的不定根的数目多少不一样,如枝条上芽多,则产生的生长素就多,就容易促使不定根的萌发。,分析与本实验相关的其他因素。,A.温度要一致;,B.设置重复组。即每组不能少于3个枝条;,C.设置对照组。清水空白对照;设置浓度不同的几个实验组之间进行对比,目的是探究2,4-D或-萘乙酸促进扦插枝条生根的最适浓度。,实验十五 探究培养液中酵母菌数量的动态变化P68,一、原理:,酵母菌可以用液体培养基来培养。在含糖的液体培养基中酵母菌繁殖很快,迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群,培养基中酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空气、pH、温度等因素有关。通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线,从而掌握酵母菌的种群数量变化情况。,二、目的:,初步学会酵母菌等微生物的计数以及种群数量变化曲线的绘制。,三、材料:,菌种、无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、血球计数板(2mm2mm方格,培养液厚0.1mm),步骤:(1)将10 mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中。,(2)将酵母菌接种入试管中的培养液。,,(3)将试管放在25条件下培养。,(4)每天取样计数酵母菌数量。,(5)分析数据,画出曲线。,注意:,我们测定的酵母菌种群数量是在恒定容积的培养基中培养测定的,与自然界中的数量变化有差异。,在进行酵母菌计数时,由于酵母菌是单细胞生物,因此必须在显微镜下计数,且我们不能正确计数个数,只能估算。,从试管中吸出培养液进行计数前,需将试管轻轻振荡几次,目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,以保证估算的正确性,减少误差。,每天计数酵母菌数量的时间要固定。,计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌应只计数相邻两边及其顶角的酵母菌,结果的记录最好以计录表来记录,时间/天123456数量/个表达和交流,(1)根据实验数据可得增长曲线。,增长曲线的总趋势是先增加再降低。原因是在开始时培养液的营养充足,空间充裕,条件适宜,因此酵母菌大量繁殖,种群数量剧增,随着酵母菌数量的不断增多,营养消耗,pH变化等,使生存条件恶化,酵母菌死亡率高于出生率,种群数量下降,(3)影响酵母菌种群数量的因素可能有养料、温度、pH空间及有害代谢废物等,(4)讨论:根据7天所统计的酵母菌种群数量画出酵母菌种群数量的增长曲线;推测影响影响,酵母菌种群数量变化的因素。,时间,/,天,1,2,3,4,5,6,数量,/,个,实验十六 土壤中小动物类群丰富度的研究P75,一、实验目的:,1初步学会动物类群丰富度的统计方法,2能对土壤中部分常见的动物进行分类,3学会设计表格进行观察和统计。,二、实验原理:,土壤不仅为植物提供水分和矿质元素,也是一些动物的良好栖息场所。研究土壤中动物类群的丰富度,操作简便,有助于理解群落的基本特征与结构。,三、方法步骤:,1提出问题:如土壤中有哪些小动物?它们的种群密度是多少?,2制定计划,研究计划表,步骤,时 间,地 点,内 容,方 法,备 注,第一步,年月日,环境考察,观察与测量,带温度计、干湿计、记录本,第二步,3实施计划,本研究包括三个操作环节:取样、观察和分类、统计和分析。,(1)准备:(P76),(2)取样:,取样可以在野外用取样器取样的方法进行采集、调查,即:用一定规格的捕捉器(如采集缺罐、吸虫器等进行取样),(不适于用样方法或标志重捕法)在实验室进行观察。,(3)采集小动物:使用诱虫器取样,比较方便,且效果较好,但时间可能要长一些。也可采用简易采集法:将采集到的土壤放在瓷盆内,用放大镜观察,同时用解剖针寻找。发现体形较大的动物,可用包着纱布的镊子取出;体形较小的动物可用吸虫管采集。采集到的小动物可放入酒精中,也可将活着的小动物放入试管中。,(4)观察和分类:“观察和分类”需要借助动物分类的专业知识。(P76),(5)统计和分析:“统计和分析”,要求设计一个数据收集和统计表,并据此进行数据分析。,丰富度的统计方法:记名计算法和目测估计法。,记名计算法是指在一定面积的样地中,直接数出各种群的个体数目,这一般用于个体较大,种群数量有限的群落。,目测估计法是按预先确定的多度等级来估计单位面积上个体数量的多少。等级的划分和表示方法有:“非常多、多、较多、较少、少、很少”等等。,注意:许多土壤动物有较强的活动能力,而且身体微小,因此不适于用样方法或标志重捕法进行调查,目 录,专题要略,(3),主干线索,(4),要点剖析,(8),返回目录,本专题是对实验相关内容的综合复习与训练。高考理科综合能力测试题中,有关实验能力的试题,从所占的比例来看有逐渐增加的趋势;从题目设计的认知层次来看有逐渐提高的趋势;从覆盖的知识范围来分析,有涉及高中课本内的知识,也有不涉及高中所学的内容,所要验证的生物学事实是由题目提供的;从知识内容分析,试题涉及生物学基本原理、概念、实验目的、材料的使用、实验操作、方法步骤、对实验现象的分析、实验设计和结果预测等多个方面。考试大纲有关实验与探究能力所涉及的几条,都具有将所学的实验知识、方法、技能进行综合运用方面的要求。,专题要略,返回目录,主干线索,1.实验与探究能力,(1)能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验,包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合的运用。,(2)具备验证简单生物学事实的能力,并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。,(3)具有对一些生物学问题进行初步探究的能力,包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。,(4)能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订。,返回目录,主干线索,2.实验考查方面的内容及常见题型,返回目录,主干线索,3.教材基础实验的复习要求,(1)明确每个实验的目的要求,即要证明的问题。,(2)理解每个实验的原理。,(3)弄清实验中每种材料、用具和试剂的用途。,(4)站在实验设计的角度来掌握、理解实验步骤。,(5)学会对实验现象、结果进行分析,从而得出实验结论,并能用简练、准确的语言进行表述。,4.实验题的基本思路总结,(1)读题目,找到实验目的和单一变量。,(2)分析材料用具、原理、步骤。,返回目录,主干线索,要点剖析,返回目录,1.生物学实验中常用试剂的成分及用法,(1)斐林试剂:,成分:0.1 g/mL NaOH(甲液)和0.05 g/mL CuSO,4,(乙液)。,用法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。,(2)班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴加热会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。,(3)双缩脲试剂:,成分:0.1 g/mL NaOH(甲液)和0.01 g/mL CuSO,4,(乙液)。,要点剖析,返回目录,用法:向待测液中先加入2 mL甲液,摇匀,再向其中加入34滴乙液,摇匀。如待测液中存在蛋白质,则呈现紫色。,(4)苏丹:取苏丹颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。用于检测脂肪,可将脂肪染成橘黄色(脂肪被苏丹染成红色)。,(5)二苯胺:用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。,(6)甲基绿:用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。,(7)95%的酒精溶液:冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。,要点剖析,返回目录,(8)15%的盐酸和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。,(9)龙胆紫溶液:(浓度为0.01 g/mL或0.02 g/mL)用于染色体着色,可将染色体染成紫色,通常染色35分钟(也可以用醋酸洋红液染色)。,(10)20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe,3,的催化效率(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶)。,(11)3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验(酶的专一性实验)。,要点剖析,返回目录,(12)碘液:用于鉴定淀粉的存在。淀粉遇碘变蓝。,(13)丙酮:用于提取叶绿体中的色素。,(14)层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开。,(15)二氧化硅:在叶绿体中色素的提取与分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。,(16)碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素被破坏。,要点剖析,返回目录,(17)0.3 g/mL的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验。,(18)0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液:与鸡血混合,防凝血。,(19)氯化钠溶液:可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为,2 mol/L、0.015 mol/L时DNA的溶解度较高;在氯化钠浓度为,0.14 mol/L时,DNA溶解度最低。浓度为0.9%时可作为生理盐水。,(20)胰蛋白酶:可用来分解蛋白质。可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散开。,要点剖析,返回目录,(21)秋水仙素:人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗,可使染色体组加倍,原理是可抑制正在分裂的细胞纺锤体的形成。,2.实验题解题思路,(1)审准实验目的和原理。明确验证“生物学事实”是什么,或“生物学事实”的哪一方面;实验所依据的生物学原理是什么。如“探索酶的活性与温度的关系”的实验原理为:淀粉遇碘变蓝,淀粉酶可催化淀粉水解为麦芽糖,麦芽糖遇碘不变蓝。,(2)找自变量和因变量,以及影响本实验的相关变量,然后构,要点剖析,返回目录,思实验变量的控制方法和实验结果的获得手段。如验证“CO,2,是光合作用合成有机物的必需原料”,首先应明确该实验的条件是CO,2,,结果是光合作用(合成有机物),影响结果的条件变化应该是CO,2,的有、无两种情况,那么对照的设计就应该为空白对照。影响实验结果的相关变量有温度、pH、实验用植物的生长状况、饥饿处理的环境、吸收CO,2,的氢氧化钠的量及浓度等因素,这些相关变量中的任何一种因素的不恰当处理都会影响实验结果的准确性和真实性。因此实验中必须严格控制相关变量,做到平衡和消除相关变量对实验结果的影响。常常采用对照的方法,即在相关变量相同的条件下,,要点剖析,返回目录,观察实验变量(实验条件)的不同情况对反应变量(实验结果)的影响。,(3)实验对象。实验所用的生物学材料,如光合作用的叶片,验证质壁分离所用的成熟植物细胞。,(4)实验条件。完成这一项实验所必需的理化条件及生物学处理方法,如光照、温度、pH、酶、缓冲剂、离心等。,(5)设计实验方法和步骤。这一环节要遵循科学性原则、可操作性原则、对照设计原则、单一变量原则,使实验有可信度和说服力。,要点剖析,返回目录,(6)记录分析应有的实验结果,对意料之外的结果乃至失败的情况作出恰当的分析和推论。,3.实验设计的基本方法,(1)了解题目要求:解题首先要明确题意,看清题意是要求设计实验方案、步骤还是分析实验结果。,(2)明确实验目的原理:明确实验到底要解决什么问题,要用到生物学上什么原理。,(3)确定实验思路:根据原理作出假设,并对可能产生的现象作出预期,要充分利用实验材料来设计实验思路。,要点剖析,返回目录,(4)设计实验步骤:根据实验目的、原理和思路,设计出合理的实验装置和操作步骤。要思考题目中所给出的实验材料和试剂分别起什么作用?怎样运用?题目中给出的实验
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