恶性淋巴瘤免疫组化讲课资料培训课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿。文档如有不当之处，请联系本人或网站删除。,一、常用抗体,（一）白细胞,1.CD45，CD45RB（LCA）,出现于白细胞表面的四、五种高分子量糖蛋白家族（180，190，205，220kD）,DAKO产抗体由二种单抗组成：,2B11(180，190，205，220kD)-CD45抗体,PD7/26(190，205，220kD)-CD45RB抗体,正常组织：,标记淋巴细胞。细胞膜表面阳性最强，胞浆内弱阳性也可见。,巨噬细胞和组织细胞不同程度表达。,多核白细胞弱阳性,浆细胞阴性,非造血细胞阴性,肿瘤：,大部分淋巴瘤（B和T）阳性,浆细胞及大细胞淋巴瘤常阴性,毛细胞阳性,粒细胞性或红细胞源性肿瘤细胞阴性,非造血组织肿瘤，如癌，恶性黑色素瘤，尤文氏肉瘤阴性,可用于脱钙骨髓活检组织，鉴别骨肿瘤,2.CD11A/18（LFA-1 和）,表达于大部分淋巴瘤和白血病,很多中等和高度恶性B细胞淋巴瘤LFA-1的和/或 链可缺失。,3.TdT,属核酶，参与T细胞受体产生和抗体分化过程。,正常组织：,见于小群成人骨髓淋巴细胞和大部分皮质胸腺细胞。,偶见于反应性淋巴结和脾,髓质胸腺细胞和正常外周血细胞不表达,肿瘤：表达于非成熟淋巴细胞来源肿瘤。,高,TdT,活性见于,:,淋巴母细胞性淋巴瘤,慢性粒细胞性白血病淋巴母细胞危象,大部分急性淋巴母细胞性白血病,4.CD30,120kD跨膜糖蛋白,CD30基因位于第1号染色体短臂36区，早先称为Ki-1，又名Ber-H2,冰冻切片：,霍奇金细胞（单核）和R-S细胞（多核）,结节型淋巴细胞为主型,：,弱阳性或阴性,其它,HL,：,强阳性,大部分间变性大细胞淋巴瘤和所有的淋巴样丘疹强阳性,一些外周多形T细胞淋巴瘤（HTLV-1,+/-,），包括血管免疫母细胞型，Lennert型和极少数B免疫母细胞淋巴瘤阳性。其他淋巴瘤阴性。,正常淋巴组织中，小群位于B细胞滤泡和生发中心边缘的大细胞阳性,正常淋巴细胞经菜豆凝集素，HTLV-I/II或EB病毒刺激后，可与CD30抗体反应。,淋巴组织外，胰腺腺泡细胞（+），胰腺癌偶（+）。胚胎型癌（+）。,其他类型或其他部位的癌，恶性黑色素瘤，横纹肌肉瘤和平滑肌肉瘤，尤文氏肉瘤（）,石蜡切片：,与冰冻切片不同，浆细胞（+）,余同冰冻切片,（二）B细胞,1.免疫球蛋白（Ig）,（1）,免疫球蛋白轻链,（2）,免疫球蛋白轻链,2.全B抗原（1）CD20（L26）,33kD非糖基化蛋白,外周血和淋巴组织中大多数B细胞阳性,在淋巴组织，生发中心母细胞和B免疫母细胞强阳性。,其他造血细胞阴性。,非淋巴组织阴性。,大多数B细胞淋巴瘤阳性,极少数T细胞淋巴瘤阳性,结节型淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤的R-S细胞可阳性。,（2）CD19,95kD多肽,B细胞阳性。表达于B细胞成熟早期，可能早于前B细胞期，持续见于整个B细胞成熟期，直至终末浆细胞期前不久消失。,其他造血细胞和非造血细胞阴性。,只能用于冰冻切片。,（3）CD22,B细胞分化早期表达于胞浆，后与Ig几乎同时到达细胞表面,B细胞淋巴瘤和白血病阳性,大多数浆细胞肿瘤阴性,（4）CD,W,75（LN-1）,表达于SIg,B细胞,正常细胞：,淋巴结和脾白髓的生发中心B细胞强（+）,套区B细胞，巨噬细胞，脾红髓红细胞阳性更弱,滤泡外B细胞散在阳性,浆细胞阴性,外周血B淋巴细胞阳性,阳性上皮细胞：腺上皮（子宫内膜、前列腺、胃），乳腺导管上皮，肾远曲小管，胰腺导管，结肠表面上皮，支气管呼吸道纤毛柱状上皮,肝细胞，甲状腺滤泡，平滑肌和唾腺腺泡细胞弱阳性。,肿瘤细胞：,B细胞性白血病（+）：B细胞慢性淋巴细胞性白血病，毛细胞白血病,B细胞淋巴瘤：,滤泡中心细胞淋巴瘤，特别是大裂和大无裂强（+）,免疫母细胞型也（+）,T细胞淋巴瘤（）,上皮性肿瘤：,乳腺、卵巢和结肠腺癌（+）,喉鳞癌和睾丸生殖细胞癌局灶（+）,膀胱移行细胞癌和胃腺癌弱（+）,间叶性肿瘤：,粘液脂肪肉瘤（+）,未分化肉瘤（+）,（5）CD79(mb-1),与CD79(B29)共同组成B细胞抗原受体,出现于B细胞成熟早期，从前B细胞期到浆细胞期，为细胞间成分。,用于识别B细胞种系。,前B细胞性急性白血病，B细胞株，B细胞淋巴瘤以及一些骨髓瘤阳性。,粒细胞或T细胞株以及T细胞瘤阴性。,（6）BLA36,36kD糖蛋白,正常细胞：,见于早期和活化B细胞，但静止和周围B细胞阴性。,大多数小无裂和大无裂细胞及免疫母细胞膜强阳性。,少数小裂细胞阳性，,巨噬细胞阴性。,30%套区淋巴细胞膜弱阳性。,滤泡间区散在中等到大淋巴细胞和免疫母细胞膜强阳性。,T细胞、粒细胞和巨噬细胞阴性，但正常肝的枯否氏细胞不同程度阳性。,肿瘤细胞：,霍奇金淋巴瘤的R-S细胞和霍奇金细胞阳性。,一些反应性和恶性B淋巴细胞阳性。,3.B细胞亚型抗原（1）CD10（CALLA，急性淋巴母细胞性白血病共同抗原）,100kD糖蛋白,主要用于儿童白血病和B细胞淋巴瘤：,表达于淋巴母细胞性，Burkitt和滤泡型淋巴瘤及慢性粒细胞型白血病,也见于肾小球上皮细胞、近端肾小管刷状缘、乳腺肌上皮细胞、胆小管、中性粒细胞、小群骨髓细胞、胚胎小肠上皮和正常纤维母细胞。,（2）CD21,C3d受体，145kD糖蛋白,也具有Epstein-Barr病毒受体的功能,冰冻切片：,B细胞中等（）,滤泡树突状细胞（FDC）强（）,石蜡切片：,B细胞弱（）（）,FDC强（）,正常和增生淋巴结及扁桃体：,生发中心可见FDC,网状结构，致密，清晰。,滤泡套区FDC,网状结构疏松，不清晰。,非霍奇金淋巴瘤：,滤泡型淋巴瘤（cb/cc淋巴瘤）：FDC,网状结构呈结节型，致密，清晰。,一些弥漫型淋巴瘤（中心细胞性淋巴瘤）：FDC,网状结构大小不一，疏松，不清晰。,前B细胞淋巴瘤（淋巴母 细胞性淋巴瘤），Burkitt淋巴瘤，浆细胞瘤和毛细胞白血病FDC,。,T细胞淋巴瘤FDC,限于外周T细胞淋巴瘤的血管免疫母细胞性淋巴结病（AILD）型和一些多形T细胞淋巴瘤。与B细胞淋巴瘤不同，T细胞淋巴瘤和AILD的FDC网仅含少量B细胞。,T淋巴母细胞性淋巴瘤、T-CLL和蕈样霉菌病FDC,。,霍奇金淋巴瘤：仅结节型淋巴细胞为主型FDC,。FDC,网状结构致密，清晰，几乎占据整个增大的滤泡。,（3）CD23,正常细胞：,套区B细胞（）,滤泡树突状细胞亚型（）,肿瘤：,小淋巴细胞性淋巴瘤/白血病（）,套细胞淋巴瘤（）,（4）CD35,C3b受体，单链糖蛋白，220kD,正常组织：,冰冻切片：,人,B,细胞滤泡中大部分强阳性细胞为滤泡树突状细胞（,FDC,），,套细胞阳性较弱。,肾小球上皮细胞,C3b,受体强阳性,巨噬细胞和组织细胞不同程度阳性,石蜡切片（蛋白酶消化后）：,FDC强阳性，滤泡中心和套区的FDC网状结构明显，前者致密，清晰；后者疏松，不清晰。,肿瘤细胞：,滤泡型淋巴瘤（cb/cc）：FDC,网状结构呈结节状，致密，清晰,弥漫型淋巴瘤（多数为cc）：FDC,网状结构疏松，不清晰,前B细胞淋巴瘤（淋母），Burkitt淋巴瘤，浆细胞瘤和毛细胞性白血病FDC,非霍奇金淋巴瘤，FDC主要限于血管免疫母细胞性淋巴结病型T细胞淋巴瘤,（5）CD38,45kD糖蛋白,正常细胞：,浆细胞、单核细胞、早期淋巴样细胞、和活化的T细胞（）。,肿瘤：,浆细胞肿瘤（）,有些B和T细胞淋巴瘤（），特别前驱细胞来源者。,（6）VS38c（浆细胞单抗）,64kD胞浆内抗原。,表达于正常和肿瘤性浆细胞。,上皮细胞（尤其鳞状上皮）弱阳性,（三）T细胞,1.全T抗原,（1）CD2,正常细胞：,T细胞（）,NK细胞（）,肿瘤：,大多数T细胞淋巴瘤和白血病（）,少数粒细胞白血病（）,（2）CD3,16-28kD,5条多肽链组成,抗体与T细胞表达的CD3抗原的胞浆内部分反应。,最早见于早期胸腺细胞,在皮质胸腺细胞明显存在于胞浆,至髓质胸腺细胞出现于T细胞表面,为高度特异T细胞标记，除T细胞外，仅表达于小脑蒲肯野细胞。,正常组织：,表达于胸腺皮质、髓质和周围淋巴组织的T细胞。,肿瘤：,表达于大多数T细胞肿瘤，但高度恶性T细胞淋巴瘤，如大细胞间变性淋巴瘤偶见（）。,部分恶性组织细胞增生症阳性,有些霍奇金淋巴瘤阳性,（3）CD5,表达于多数T细胞淋巴瘤和白血病。,也可表达于一些肿瘤性B细胞，如B-CLL，B-小淋巴细胞性淋巴瘤和套细胞淋巴瘤。,粒细胞和单核细胞阴性。,（4）CD7,正常细胞：,大部分T细胞（）,NK细胞（）,肿瘤：,很多T细胞淋巴瘤和白血病（）,一些粒细胞白血病（）,淋巴母细胞性肿瘤最佳T细胞标记之一,胸腺后T细胞恶性肿瘤，尤其在MF中常缺失,（5）CD43（Leu22）,T细胞和髓系细胞表达的膜/浆抗原,正常和肿瘤性T细胞阳性,正常扁桃体和淋巴结的滤泡间区T细胞强阳性,少数B细胞白血病和淋巴瘤也可表达,通常为小细胞性，如中心细胞性淋巴瘤,（6）OPD4,200kD，表达于辅助/诱导T细胞,强阳性：,淋巴结T区淋巴细胞（膜）,扁桃体,*分布同,CD4,阳性细胞,结节病和结核的类上皮细胞弱阳性,抑制,/,细胞毒,T,细胞极少阳性,阴性：,非造血细胞,B细胞,单核细胞,粒细胞,肿瘤：,见于50%T细胞淋巴瘤辅助/诱导表型的外周T细胞淋巴瘤,少数B细胞淋巴瘤阳性,（7）CD45RO（UCHL-1）,180kD，出现于T细胞分化早期。,正常细胞：,大多数胸腺细胞（）,成熟活化T细胞（）,少量静止T细胞（CD4/CD8亚型）（）,粒单核细胞系，如粒细胞和单核细胞（）,多数正常B细胞和NK细胞（）,肿瘤细胞：,T细胞淋巴瘤（）,极少B细胞淋巴瘤：部分中心母细胞性和免疫母细胞性淋巴瘤胞浆弱（）,组织细胞性淋巴瘤弱（）,鉴别naive T细胞和记忆T细胞,CD45RO：记忆T细胞,CD45RA：naive T细胞,2.T细胞亚型抗原（1）CD1A,正常细胞：,皮质胸腺细胞（）,郎罕氏细胞（）,肿瘤：,很多胸腺T淋巴瘤和白血病（）,郎罕氏细胞组织细胞增生症（）,（2）CD4,55kD，出现于大部分T辅助/诱导细胞。,胸腺皮质：,胸腺细胞复合表达CD4，CD8，T6,胸腺髓质：,胸腺细胞丢失T6，分别表达CD4，CD8。,也见于单核/巨噬细胞,表达T4抗原的肿瘤：,多数皮肤T细胞淋巴瘤，包括蕈样霉菌病,HTLV-I相关成人T细胞白血病/淋巴瘤,部分T细胞急性淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤,*在淋巴母细胞性淋巴瘤中，,T8,抗原也可存在于肿瘤细胞。,（3）CD8,33kD，表达于人抑制/细胞毒T细胞,周围淋巴组织中CD8,T细胞（滤泡间区域）仅占T细胞15-20%,骨髓和胃肠道上皮80%T细胞是CD8,大部分皮质胸腺细胞和约30%髓质胸腺细胞CD8,（四）NK细胞,1.CD56（NCAM-1）,神经细胞粘附分子（NCAM）表达于：,大部分神经外胚层源性细胞株，组织和肿瘤（视神经母细胞瘤、髓母细胞瘤、星形胶质细胞瘤和神经母细胞瘤）,中胚层源性肿瘤：横纹肌肉瘤,NK细胞,2.CD57,110kD,表达于7-35%正常外周血淋巴细胞：,NK细胞,CD8外周血抑制/细胞毒T细胞,也表达于部分神经组织,粒细胞、血小板、红细胞和胸腺细胞阴性。,3.CD16（Leu-11）,正常细胞：,NK细胞,粒细胞,表达于许多NK细胞增生性疾病,（五）粒细胞和单核吞噬细胞,1.CD11c（Leu-M5）,正常细胞：,表达于粒单核细胞,肿瘤：,毛细胞白血病（）,单核细胞样B细胞淋巴瘤（）,少数B-SLL/CLL（）,少数T细胞淋巴瘤（）,一些粒细胞白血病，特别是M4和M5（）,郎罕氏细胞组织细胞增生症（）,2.CD15（Leu-M1）,寡糖,外周血：,中性粒细胞阳性,单核细胞弱阳性,淋巴细胞和血小板阴性,树突网状细胞阳性,单核/巨噬细胞阴性,霍奇金淋巴瘤R-S细胞强表达（除外淋巴细胞为主型，仅小部分阳性）,大部分非霍奇金淋巴瘤阴性。,3.,1,-AT，,1,-ACT，lysozyme,单核细胞/巨噬细胞（+）,粒细胞（+）,4.CD68,跨膜糖蛋白，110kD,多种巨噬细胞阳性：包括枯否氏细胞，脾红髓、胃肠道固有层、肺腺泡和骨髓的巨噬细胞。,抗原呈递细胞，如郎罕氏细胞（）或弱（）。,浆细胞样T细胞阳性（见于反应性淋巴结，被认为是单核/巨噬细胞源性）,慢性和急性粒细胞性白血病：胞浆阳性。,少数真性组织细胞性肿瘤阳性。,正常和肿瘤性肥大细胞阳性。,恶性黑色素瘤：不同数量细胞阳性。,淋巴细胞源性肿瘤阴性，但一些B细胞淋巴瘤（小淋巴细胞性淋巴瘤和毛细胞白血病）胞浆弱阳性。,5.S-100蛋白,正常细胞：,郎罕氏细胞（+）,交指（IDRC）和有些滤泡树突状细胞（+）,造血组织疾病：,郎罕氏细胞组织细胞增生症（+）,IDRC肿瘤（+）,少数T细胞淋巴瘤（+）,6.MAC387,（12kD）和（14kD）亚单位组成,胞浆抗原，表达于：,粒细胞,血单核细胞,各组织的组织细胞：如浸润性或反应性组织细胞，腺泡巨噬细胞，肿瘤浸润巨噬细胞，窦组织细胞，上皮样巨细胞和组织细胞增生症X和皮病性淋巴结病的组织细胞。,生发中心巨噬细胞（）,很多皮肤和扁桃体活检的鳞状上皮（），但其他上皮（），包括各类腺上皮。,7.MPO,用于鉴别淋巴细胞性和粒细胞性白血病,（六）其 他,1.EMA,浆细胞阳性,造血组织肿瘤：表达于,霍奇金淋巴瘤（主要为NLPHL）,浆细胞肿瘤,很多间变性大细胞淋巴瘤,一些其他B和T大细胞淋巴瘤,2.BNH9,人红细胞相关抗原H（1，2，4型）和Y（2型）,正常组织：,上皮组织：腺上皮和鳞状上皮，包括外、中、内胚层来源。,非上皮组织：红细胞、红母细胞、巨核细胞和内皮细胞,肿瘤细胞：,50%间变性大细胞淋巴瘤,且多数EMA(+),5%霍奇金淋巴瘤(除外淋巴细胞为主型，21%),6%其他类型非霍奇金淋巴瘤（B、T，低度和高度恶性）,50%癌,软组织肿瘤：血管肉瘤（包括卡波西肉瘤）和滑膜肉瘤,3.LMP,60kD膜蛋白，由EBV的BNLF,1,基因编码。,强阳性：,EBV（+）的淋巴母细胞样细胞株,传染性单核细胞增多症中EBV感染的B免疫母细胞,不典型淋巴细胞增生,免疫缺陷患者发生的多形性B细胞感染,其他阳性病变,25-50%EBV相关的鼻咽未分化癌,90%EBV相关的霍奇金淋巴瘤,20-30%CD30,间变性大细胞淋巴瘤,急性传染性单核细胞增多症,多种类型外周T细胞淋巴瘤,阴性：,EBV（+）的Burkitt淋巴瘤,弱阳性,平滑肌，包括血管,4.CD99（p30/32,mic2,）,MIC2基因产物。该基因位于染色体X和Y的短臂上。,正常细胞：,一些淋巴细胞（骨髓、淋巴结和脾）,皮质胸腺细胞,卵巢颗粒细胞,大多数Langerhan胰岛细胞,CNS室管膜细胞,睾丸Sertoli细胞,部分血管内皮细胞,肿瘤细胞：,淋巴母细胞性淋巴瘤和粒细胞肉瘤（+）,ES/PNET瘤细胞表面强表达，用于和其他小圆细胞肿瘤鉴别。,CNS胶质母细胞瘤和室管膜瘤阳性。,胰岛细胞肿瘤阳性。,5.ALK-1,间变性大细胞淋巴瘤可见若干种染色体易位，几乎都累及定位于2号染色体的一种酪氨酸激酶ALK（ALCL kinase）。,t(2；5)(p23；q35)易位最常见，涉及的partner gene为NPM（nucleophosmin gene）。该易位产生融合基因NPM-ALK。,正常ALK蛋白，表达限于中枢神经系统（散在神经元，胶质细胞和内皮细胞）；正常淋巴细胞不表达。,单抗ALK-1可识别正常ALK蛋白(200kD）和易位产生的不同融合蛋白，如NPM-ALK蛋白（80kD）。由此用于诊断ALCL。,各种易位导致ALK阳性分布不同,易位,Partner Gene,发生率,ALK阳性分布,t(2;5),Nucleophosmin,75%,胞浆/核,t(1;2),Tropomyosin 3,10-20%,胞浆,t(2;3),TRK fused gene(TRG),2-5%,胞浆,Inv 2,ATIC(pur H gene),2-5%,胞浆,t(2;22),Clathrin heavy chain,2-5%,胞浆/颗粒,目前RT-PCR法所用引物为NPM-ALK特异，故不能检测其它易位。因而免疫组化方法检测ALK诊断ALCL更具优势。,ALCL好发于儿童和青年。年长的ALCL病例t（2；5）和ALK常常阴性。,ALK阳性的ALCL，预后佳。,存在问题：,有报道，t（2；5）NPM/ALK可能无ALCL特异性，阳性可见于周围T细胞淋巴瘤和T免疫母细胞性淋巴瘤（RT-PCR法）,15-20%T/null ALCL见ALK阴性。有人认为这些病例更宜归类为“周围T细胞淋巴瘤，非特殊性，间变变异型（anaplastic variant）”,6.TIA-1（T细胞胞内抗原-1）,17kD，一种胞浆颗粒相关蛋白，表达于有溶细胞潜能的细胞（CTL和NK细胞），,又称GMP-17。,和perforin、granzyme B同属细胞毒颗粒蛋白。,与FAS（CD95）调节的凋亡有关,造血细胞：,90%CD16,，50-80%CD8,，10%CD4,正常外周血淋巴细胞（+）,几乎所有单核细胞和粒细胞（+）,CD4,活化T细胞株（,）,活化NK细胞株（）,Con A,活化的胸腺细胞（）,B淋巴细胞和B细胞株（）,肿瘤：表达于细胞毒相关T细胞肿瘤和NK细胞肿瘤,皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤（）,肠病型肠道T细胞淋巴瘤（）,肝脾T细胞淋巴瘤（）,很多周围T细胞肿瘤和NK细胞肿瘤都表达细胞毒颗粒蛋白TIA-1、perforin、和granzyme B，但肝脾T细胞淋巴瘤仅有TIA-1（）。,间变性大细胞淋巴瘤（）,有助于同霍奇金淋巴瘤的鉴别,鼻及鼻型NK/T细胞淋巴瘤也有表达,7.Perforin（穿孔素）,66kD或70kD，产生于溶细胞性淋巴细胞，并储存于这些细胞的胞浆颗粒中。,在靶细胞膜上形成跨膜孔道，导致膜完整性丧失，细胞裂解。其释放过程和裂解功能依赖Ca,2,。,参与细胞毒T细胞诱导凋亡机制。,人和鼠perforin基因定位于10号染色体。,表达具杀伤细胞特异性。,大多数NK细胞株，CD8,CTL株（）,人CD3,，CD56,的NK细胞，CD3,的大颗粒淋巴细胞和T细胞（）,肿瘤,皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤（）,肝脾T细胞淋巴瘤（）,表明瘤细胞功能上属非成熟性T细胞，不能诱导凋亡和坏死，不能释放细胞毒蛋白。,间变性大细胞淋巴瘤（）,有助于同霍奇金淋巴瘤的鉴别,鼻及鼻型NK/T细胞淋巴瘤可有表达,8.HLA-DR,人组织相容性复合物ClassII基因至少有四个区域：HLA-DP，-DO，-DR,一条链，一条链,主要标记B细胞，指状突网状细胞，郎罕氏细胞和巨噬细胞。,少数上皮细胞，活化T细胞和纤维母细胞样细胞（可能相当于树状突细胞）也有反应。,胸腺：整个皮质的上皮细胞网（）,B和T非霍奇金淋巴瘤（）,周围血：,B细胞和大部分单核细胞（）,正常T细胞（）,活化T细胞（）,9.bcl-2,正常细胞：表达于,非生发中心B细胞,大多数T细胞,浆细胞,肿瘤：,过度表达于大多数滤泡性淋巴瘤和一些弥漫性大B细胞淋巴瘤,也表达于很多其他淋巴瘤和白血病,10.Ki-67,表达于细胞周期G0期外的细胞,与淋巴瘤分级有关,11.CyclinD1,分D,1,、D,2,和D,3,亚型，有组织特异性，相互间同源性达53.1-63.5%,编码基因,定位,氨基酸数,CyclinD,1,CCND,1,11q,13,295,CyclinD,2,CCND,2,12q,13,290,CyclinD,3,CCND,3,6p,21,292,绝大多数套细胞淋巴瘤发生t（11；14）（q13；q32）易位，导致CCND1（bcl-1或PRAD1）基因过度表达，从而使cyclinD1蛋白表达过度。故套细胞淋巴瘤cyclinD1（），并可同阴性的滤泡性淋巴瘤和小淋巴细胞性淋巴瘤/白血病鉴别。,12.CD25,T细胞生长因子受体或IL-2，单多肽链，分子量55kD，有时也称为Tac抗原。,该受体在活化的T细胞，HTLV-1,和HTLV-2,T细胞株强表达，活化B细胞弱表达。,周围淋巴组织T区和生发中心亮区淋巴细胞不同程度阳性。,生发中心巨噬细胞弱阳性，窦区巨噬细胞强阳性。,胸腺：仅在髓质见散在阳性细胞，皮质阴性。,正常周围血CD25,细胞5%。,13.CD34,正常细胞：,Progenitor cell,内皮细胞,肿瘤：,一些粒细胞白血病,一些淋巴母细胞性白血病,Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用-RED,标记,公司,产品名,稀释度,CD8,Dako(m),M7103,Clone C8/144B,1:100,CD15,Ventana,Cat#250-2604,预稀释,CD19,BD,347540,4G7,1:25,CD20,Dako(m),M0755,Clone L26,1:400,CD30,Dako(m),M0751,BerH2,1:50,CD42b,Novocastra(m),GP1b,nn2/174,1:100,Lambda,Ventana(R),250-2515(50),-Lambda(Poly),预稀释,S-100,Dako(R),Z311,1:2000,Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用-DAB(1),标记,公司,产品名,稀释度,CD1a,Immunotech,Cat#IM1590,预稀释,CD3,Dako(R),A0452,1:100,CD4,Ventana(m),Cat#250-2712,预稀释,CD5,Cell Marque(m),CNC016,Clone 4C7,1:50,CD8,Dako(m),M7103,Clone C8/144B,1:100,CD10,Cell Marque(m),CMC041,Clone 270,1:25,CD15,Ventana(m),Cat#250-2504,1:25,CD19,BD(m),Cat#347540,Clone 4G7,1:25,Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用-DAB(2),标记,公司,产品名,稀释度,CD20,Dako(m),M0755,Clone1.26,1:400,CD23,Ventana(m),Cat#250-2717,预稀释,CD25,Neomarkers(m),Cat#MS-203-P,1:200,CD30,Dako(m),M0751,BerH2,1:50,CD31,Dako(m),M0823,Clone,JC/70A,1:40,CD34,Immunotech(m),786,QBEND10,1:50,CD42b,Novocastra(m),GP1b,nn2/174,1:100,Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用-DAB(3),标记,公司,产品名,稀释度,CD43,Dako(m),M0786,DF-T1,1:40,CD45,Dako(m),M701,2B11&PD7/26,1:100,CD45RA,Ventana(m),250-2510,Clone 148,预稀释,CD45RO,Ventana(m),250-2563,Clone A6,预稀释,CD56,Coulter,NKH1,1:20,CD57,Bec/Dick(m),347390,Leu7,1:10,CD68,Dako(m),M3601,1:200,Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用-DAB(4),标记,公司,产品名,稀释度,CD79,Dako(m),M7051,1:20,CD99,Dako(m),M3601,Clone MIC2,1:50,CD117,Dako(R),A4502,Clone MIC2,1:400,ALK蛋白,Dako(m),M7195,1:20,抗-胰酶,Vital(m),12025,Clone G1996,1:20,bcl-2,Dako(m),M887,Clone 124,1:10,bcl-6,Dako(m),M7221,Clone PG-B6p,1:10,Cathepsin D,Ciba-Corning(m),Cath-D,1:20,Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用-DAB(5),标记,公司,产品名,稀释度,Cyclin-D1,Dako(m),M7155,1:40,DBA-44,Immunotech(m),Cat#1069,Clone DBA-44,预稀释,颗粒酶,Chemicon,MAB3070,1:40,血型糖蛋白-A,Dako(m),M0819,1:200,HLA-DR,Dako(m),M775,CR3/43,1:50,IgA,Signet(R),410-13,预稀释,IgG,Signet(R),411-13,预稀释,IgM,Signet(R),414-13,预稀释,Ventana自动染色系统在淋巴瘤诊断中的应用-DAB(6),标记,公司,产品名,稀释度,Kappa,Ventana(R),250-2514(50),-kappa(Poly),预稀释,Lambda,Ventana(R),250-2515(50),-kappa(Poly),预稀释,Macrophage,Dako(m),M814,1:200,MIB-1,Immunotech(m),.0515,Clone MIB-1,1:50,MPO,Dako(R),A-398,1:500,MPO,Dako(m),M748,1:100,p-53,BioGenex(m),D07,1:200,Tdt,Dako(R),A3524,1:10,Antibodies Used In The JCML Lab(1),抗体,制备,特异性,CD1a,石蜡,皮质胸腺细胞,CD1a,冰冻，涂片，Cytopreps,皮质胸腺细胞,CD2,冰冻，涂片，Cytopreps,T细胞,CD3（UCHT1）,冰冻，涂片，Cytopreps,T细胞,CD3,石蜡,T细胞,CD4（OPD4）,石蜡,T细胞，辅助/诱导,CD4,冰冻，涂片，Cytopreps,T细胞，辅助/诱导,Antibodies Used In The JCML Lab(2),抗体,制备,特异性,CD5（4C7）,石蜡,T&B亚型,CD5,冰冻，涂片，Cytopreps,T细胞,CD7,冰冻，涂片，Cytopreps,T、NK细胞,CD8（C8/144B）,石蜡,T细胞，抑制/细胞毒,CD8,冰冻，涂片，Cytopreps,T细胞,CD10（calla）,冰冻，涂片，Cytopreps,淋巴母细胞,CD11c,冰冻，涂片，Cytopreps,巨噬细胞、毛细胞,Antibodies Used In The JCML Lab(3),抗体,制备,特异性,CD13,冰冻，涂片，Cytopreps,髓样细胞,CD14,冰冻，涂片，Cytopreps,单核细胞,CD15（Leu M-1）,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,中性粒细胞，粒细胞相关,CD19,冰冻，涂片，Cytopreps,B细胞,CD20（B-Ly1）,冰冻，涂片，Cytopreps,B细胞,CD22,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,B细胞,Antibodies Used In The JCML Lab(4),抗体,制备,特异性,CD23,冰冻，涂片，Cytopreps,B细胞,CD25,冰冻，涂片，Cytopreps,白介素-2受体,CD30（Ki-1）,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,活化T&B细胞,CD31,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,内皮细胞,CD33,冰冻，涂片，Cytopreps,单核细胞，髓样细胞,CD34（Q bend 10）,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,髓样和淋巴细胞progenitor,Antibodies Used In The JCML Lab(5),抗体,制备,特异性,CD35（DRCI）,冰冻，涂片，Cytopreps,树突网状细胞,CD38,冰冻，涂片，Cytopreps,T细胞,CD42b,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,血小板糖蛋白,CD43,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,T细胞,CD45（LCA）,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,白细胞共同抗原,CD45R0（UCHL-1）,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,T，B细胞亚型,Antibodies Used In The JCML Lab(6),抗体,制备,特异性,CD45RA（4KB5）,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,B、M、T细胞亚型,CD45RA（MT2）,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,B，T细胞亚型,CD56（123c3）,石蜡，冰冻,小细胞肺癌/N CAM,CD56（NKH-1）,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,NK细胞,CD57,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,NK细胞,CD61,冰冻，涂片，Cytopreps,血小板糖蛋白IIIa,Antibodies Used In The JCML Lab(7),抗体,制备,特异性,CD71,冰冻，涂片，Cytopreps,转铁蛋白受体,CD74,石蜡，冰冻,B细胞,CD79,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,B细胞,CD99,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,尤因肉瘤/细胞膜,CD103,冰冻,上皮内淋巴细胞亚型,抗-胰酶,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,肥大细胞,ALK-1,石蜡,ALCL,Antibodies Used In The JCML Lab(8),抗体,制备,特异性,BerEP4,石蜡,胞浆,血型糖蛋白A,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,红细胞内的血型糖蛋白A,HLA-DR（CR3/43）,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,人组织相容性基因,Kappa,石蜡，IF,细胞膜-胞浆,KBA-62,石蜡，冰冻,细胞膜/恶黑,Lambda,石蜡，IF,细胞膜-胞浆,MDRM（JSB-1）,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,膜糖蛋白,Antibodies Used In The JCML Lab(9),抗体,制备,特异性,MPO,多抗,单抗,石蜡,涂片，Cytopreps,血中性粒细胞和单核细胞，骨髓粒细胞前体,TdT,石蜡，IF,核,SV 40T（Ab-2）,石蜡,大T细胞抗原,bcl-2,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,滤泡性淋巴瘤,DBA-44,石蜡，冰冻，涂片，Cytopreps,B细胞，毛细胞,二、淋巴瘤与反应性增生的鉴别诊断及淋巴瘤的分类,（一）淋巴瘤与反应性增生的鉴别诊断,淋巴组织增生是良性还是恶性，可以非常容易也可以非常困难,通过免疫组化发现不成熟的免疫表型、失常的免疫表型或异常的免疫结构可以帮助我们区分,1 滤泡性淋巴瘤和反应性滤泡增生,免疫球蛋白轻链的多克隆型或单克隆型表达,bcl-2为最有用的免疫染色，正常除滤泡中心细胞外，T和B细胞均阴性，在滤泡中心过表达则支持淋巴瘤的诊断。,注意的是：,有些反应性增生滤泡内有许多反应性小 T细胞表达bcl-2,但可用CD3免疫染色对比；,bcl-2阴性并不能完全排除滤泡性淋巴瘤（仅8085%阳性）,Ki-67,低Ki-67指数常倾向于滤泡性淋巴瘤的诊断，但高Ki-67指数则不能做结论。,2 套细胞淋巴瘤和套区增生,CD5和CD43 增生套区CD20阳性外，同时表达CD5和CD43常提示为套细胞淋巴瘤,滤泡间大量CD20+B细胞提示滤泡间侵犯,CyclinD1支持套细胞淋巴瘤最有价值的标记,3 边缘区B细胞淋巴瘤和单核样B细胞增生,CD20/CD3,聚合或弥漫成片的B细胞倾向于淋巴瘤诊断,bcl-2蛋白,反应性单核样B细胞常呈bcl阴性，而边缘区B细胞淋巴瘤呈阳性,免疫球蛋白轻链,多克隆型（增生）或单克隆型（淋巴瘤）,4 副皮质区增生性质,CD20/CD3,如果副皮质区有非常显著的B细胞成分，则应怀疑B细胞淋巴瘤,如怀疑霍奇金淋巴瘤和间变性大细胞淋巴瘤，可加用CD30、CD15和ALK,（二）淋巴瘤分类,淋巴瘤中只有少数类型，包括滤泡性淋巴瘤、边缘区B细胞淋巴瘤、粘膜相关淋巴组织型、小细胞性淋巴瘤，可单根据形态即可诊断，而大多数其它类型淋巴瘤需要免疫组化才能正确诊断。,1 需用一组抗体,对鉴定正常细胞类型及其相关肿瘤最常用的抗体：,B系 CD20,T系 CD3，CD45RO，CD4，CD8,NK系 CD56,髓系 MPO,滤泡中心细胞 CD10，bcl-6,套区细胞 IgD,不成熟前体细胞 Tdt,浆细胞 CD138,组织细胞 CD68,滤泡性树突状细胞 CD21,CD35,朗罕氏细胞 S-100，CD1a,2 淋巴瘤分类的重要标记,前体淋巴母细胞性淋巴瘤 Tdt,B慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞淋巴瘤 CD5,CD23,套细胞淋巴瘤 CyclinD1，CD5,滤泡性淋巴瘤 CD10,bcl-6,伯基特淋巴瘤 Ki-67（100%）,血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤 CD23，CD35,间变性大细胞淋巴瘤 CD30，CD15,霍奇金淋巴瘤 CD30，CD15,谢谢！,