第二章-血液一般检查-第二节-红细胞检查.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第二节 红细胞检查,主要内容,一,.,红细胞计数,二,.,血红蛋白测定,三、血细胞比容测定,四、红细胞平均值的计算,五,.,红细胞形态检查,六、网织红细胞计数,七、嗜碱性点彩红细胞计数,八、红细胞沉降率侧定,九、红斑狼疮细胞检查,一,.,红细胞计数,（,red blood cell,）,【,概述,】,【,检测原理,】,【,方法学评价,】,【,参考值,】,【,质量控制,】,【,临床意义,】,返回,【,概述,】,红细胞在正常情况下几乎占血容量的,1/2,，平均寿命是,120,天，每天约有,8%,的衰老和退化变性的红细胞经脾破坏，,血红蛋白降解，分解为铁、胆色素、蛋白质代谢和血红蛋,白的重新合成。,红细胞外形,：双凹圆盘形，平均直径,7.2m,，厚约,2m,，,无核,主要成分（除水外）,：主要是血红蛋白，主要是,O,2,和,CO,2,，并协同维持酸碱平衡。,返回,【,检测原理,】,红细胞计数：,即测定单位体积血液中,RBC,的数量。,有显微镜法和仪器法。,1,、红细胞显微镜计数法原理：,用等渗的稀释液将血,液稀释一定倍数后，滴入计数板，在显微镜下计数一定,范围的红细胞数，经过换算即可求得每升血液中的红细,胞数,红细胞稀释液,Hayem,液：,NaCl,：,调节渗透压,Na2SO4,：提高比重防止细胞粘连,HgCl2,：,防腐,缺点：不适宜高球蛋白血症患者。,枸橼酸钠稀释液：,普通生理盐水或加,1%,甲醛的生理盐水：,2,、血细胞分析仪法：,电阻抗和（或）光散射原理,返回,【,方法学评价,】,1,、手工显微镜法：,是传统的红细胞计数法，不需要特殊的设备，但操作复杂、费时，现虽不常用，但仍作为：,血液分析仪的校正,。,与白细胞减少或血小板严重减少时的对照核实,。,血小板受小红细胞干扰时的校正,2,、血细胞分析仪法：,仪器法已成为目前细胞计数的主要方法,仪器法比手工法更精确,且操作简便、快速，,已广泛应用。,返回,【,临床意义,】,1,生理性变化,2,病理性变化,（,1,）病理性增多,（,2,）病理性减少,返回,1,、生理性变化,年龄与性别差异,:,精神因素,:,剧烈体力运动和体力劳动,:,气压降低,:,妊娠中后期,:,血红蛋白,红细胞计数,120,130,140,5.0,4.8,4.6,4.4,4.2,150,10 20 30 40 50 60,返回,（,1,）病理性增多,相对性增多：,暂时性血液浓缩如呕吐、高热、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤等。,绝对性增多：,包括继发性增多的组织缺氧,EPO,代偿性增高，如严重慢性心肺疾病、发绀性先天性心脏病、异常血红蛋白病等；,EPO,非代偿性增高如与某些肿瘤和肾脏有关的疾病如肾癌、肝细胞癌、子宫肌瘤、卵巢癌、肾胚胎瘤、肾积水、多囊肾和肾移植后等。原发性如真性红细胞增多症、良性家族性红细胞增多症等。,返回,（,2,）病理性减少,1,）红细胞生成减少,骨髓功能衰竭,造血物质缺乏或利用障碍如肾性贫血,2,）红细胞破坏过多,红细胞内在缺陷如膜缺陷 红细胞酶缺陷,血红蛋白异常,不稳定,Hb,和红细胞外在异常等,3,）红细胞丢失,急性、慢性失血性贫血,返回,二、血红蛋白测定,【,概述,】,【,检测原理,】,【,方法学评价,】,【,参考值,】,【,质量控制,】,【,红细胞计数和血红蛋白测定的,临床意义,】,返回,【,概述,】,1.,化学成分：,珠蛋白（含两条,链和两条非,链）,+,亚铁血红素（,Fe,+2,+,原卟啉）,HbFe,2,+,O,2,称氧合血红蛋白（,Hb O2,）。,HbFe,2,+,CO,碳氧血红蛋白,(HBCO),HbFe,2,+,（,99%,）称还原,Hb(Hbred).,HbFe,3,+,（,1%,）高铁血红蛋白,(Hi),或正铁血红蛋白,(MHB),2,空间结构：,四聚体,3,血红蛋白种类：,正常成人：,HbA,（,2,2,）占,9698%,HbA2,（,2,2,）占,2%-3%,HbF,（,2,2,）占,2%,以下 胎儿主要血红蛋白,返回,血红蛋白结构,返回,【,检测原理,】,血红蛋白是一种色素蛋白,可以用比色法测定,.,血液中血红蛋白以各种形式存在,包括氧合血红蛋白、碳氧血红蛋白、高铁血红蛋白或其他衍生物。,1,、氰化高铁血红蛋白（,HiCN,）测定法：,在血液中各种血红蛋白（,HbS,外）均可被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白，再和,CN,-,结合生成稳定的氰化高铁血红蛋白（,HiCN,）,HiCN,在,540,有一吸收波峰,用分光光度计测定该处的吸光度,再换算成每升血液中血红蛋白的浓度,或制备标准曲线计算,:HICN,的最大吸收峰为,540nm,消光系数为,44 Lmmol-1 cm-1,。,下一页,计算公式,可根据下式进行计算：,Hb,（,g/L,）,=A/4464458,（,mg,）,/1000251,=A367.7=Hb,（,g/l,）,A,：为测定管吸光度,44,：为毫摩尔消光系数,64458/1000,：为,1mmol/LHb,溶液中所含,Hb,251,：为稀释倍数,下一页,2,、其他方法,1,、十二烷基月桂酰硫酸钠血红蛋白测定法（,SLS,Hb,）,2,、碱羟血红蛋白（,AHD575,）,3,、叠氮高铁血红蛋白（,Hi,）,返回,【,方法学评价,】,1,、氰化高铁血红蛋白测定法（,HiCN,）,是国际血液血标准化委员会推荐的血红蛋白国际标准参考方,法。,HiCN,法操作简单，显色快且结果可靠，可检测除硫化血红,蛋白（,SHb,）外的各种血红蛋白，但强调仪器的标准化，在实际,工作中，往往使用,HiCN,参考液，通过绘制标准曲线求出,K,值来教,正结果，,HiCN,法在国内已经普及但并非理想的方法，其致命的,弱点是试剂氰化钾有巨毒。,2,、十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（,SLSHb,）,突出优点是试剂无毒，多用此法代替,HiCN,，但其摩尔消光系,数还未最后测定，故其用,HiCN,法间接出结果。破坏白细胞，不,能用此稀释液做白细胞计数。,返回,【,参考值,】,成年男性：,120160g/L,成年女性,：,110150g/L,新生儿：,170200g/L,返回,【,质量控制,】,1,技术误差：,稀释倍数、分光光度计、比色杯,2,HICN,转化液：,置于棕色玻璃瓶,3,HICN,参考液：,部级质量参考标准,4.,质控物：,（,1,）,ACD,抗凝的全血,（,2,）进口的全血质控物,（,3,）醛化半固定的红细胞,（,4,）溶血液,（,5,）冻干全血,返回,下一页,【,红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义,】,1,红细胞和血红蛋白增高,标准：成年男性,RBC,6.0 10,12,/L,Hb,170g/L,成年女性,RBC,5.5 10,12,/L,Hb,160g/L,(1),生理性变化：年龄与性别差异,:,精神因素,:,剧烈体力运动和体力劳动,:,气压降低,:,妊娠中后期,:,（,2),病理性增多：,相对增多,：,如呕吐、大面积烧伤、,严重腹泻、大量出汗等。,绝对增多：,慢性心肺疾病、真性红,细胞增多症。,血红蛋白,红细胞计数,120,130,140,5.0,4.8,4.6,4.4,4.2,150,10 20 30 40 50 60,2,红细胞和血红蛋白减低,生理性贫血,:,如妊娠中晚期、,6,个月至,2,岁、老年人。,病理性贫血：,1,、骨髓造血功能低下：如再障、白血病、,2,、造血原料不足：缺铁性贫血、巨幼性贫,3,、红细胞破坏增加：,4,、红细胞的丢失过多,贫血的分度,轻度贫血：成年男性,120g/L,，成年女性,110g/L,中度贫血：,Hb,90g/L,重度贫血：,Hb,60g/L,极度贫血：,Hb,30g/L,返回,三,.,血细胞比容测定,【,概述,】,【,检测原理,】,【,测定方法及方法学评价,】,【,质量控制,】,【,参考值,】,【,临床意义,】,返回,【,概述,】,红细胞比积：,（,hematocrit,Hct,Ht,HCT,或,packed cell,volume,PCV,）,以前称为红细胞压积,指在一定条件下经离心,沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值,。,其高低与,红细胞数量及大小有关。,ISCH,建议的缩写符号是,PCV,表示。,HCT,常用于,血细胞分析仪上的测定,结果。,PCV,测定的常规方,法分为：,常量法,（,wintrobe,法）,微量法,（,microhematocrit,）,返回,【,检测原理,】,1,、,wintrobe,法和微量法：,均属于,离心法,。将抗凝的血液（全血）置于孔径统一的温氏,管或标准毛细管中，以一定转速离心一定时间后，计算,红细,胞层占全血的体积比。,2,、血液分析仪法：,由,红细胞平均体积和红细胞计数两项指标导出,。,HCT=,红细,胞计数,红细胞平均体积,返回,【,测定方法及方法学评价,】,（一）手工法：,1,、,wintrobe,法：,方法：,将,EDTAK2,抗凝血灌注于,Wintrobe,管，在一定条件下,离心（,2264g,、,min,）得到红细胞在全血中所占体积的百分,比，称为血细胞比容。离心后血细胞分五层：,分别为血浆层,（淡黄色）、血小板层（白色乳糜）、白细胞层（灰红色）、,有核红细胞层（灰红色）、还原红细胞层（黑色）及带氧红细,胞层,，读数,红细胞层,（还原红细胞层及带氧红细胞层）,方法学评价：,该法无法完全排除血细胞之间的残存留的血,浆，因此要比真实值要高（,3,），标本量多，耗时长，目,前已被微量法代替,下一页,2,微量法,方法：,微量法采用一次性的使用的毛细玻璃管（长：,75mm,内径：,0.81.0mm,厚,:0.200.25mm,),离心力为,10000g5min,方法学评价,:,该法标本用,血量小,、,简便,、,快捷,、,血细胞间残留血浆量,较温氏法低，被,WHO,作为首推方法。,下一页,（二）血细胞分析仪法：,1,电阻抗微量比容法,原理,:,利用血浆是电的良导体,而相对血细胞是电的不良导体的原理,方法学评价,:,自动化程度高、快速,(15s,30s,),、操作简便、便于推广，但血样中白细胞和血小板明显增加或有异常蛋白质时会引起测量误差,。,2,血细胞分析仪法,MCV,和,RBC,导出,由于仪器测定数万个血细胞体积产生的脉冲叠加后换算而来的,避免了血浆的残留引起的误差。,返回,【,质量控制,】,1,、手工法：,注意避免以下因数：,抗凝剂量不准确，混匀不充分，离心速度不够均会产生误差。,红细胞形态异常时可是血浆的残留增加,6%,，红细胞增多症时，血细胞比容明显增高是血浆残留也会增高,2,、血液细胞分析仪法：,返回,【,参考值,】,温氏法：,男：,0.40-0.50,女：,0.37-0.47,微量法：,男：,0.470.04;,女：,0.420.05,返回,【,临床意义,】,1,、红细胞比积增高：,生理性增高：高原生活、剧烈运动、新生儿,病理性增高：原发性和继发性红细胞增多症、脱水、烧伤,2,、红细胞比积减低：各种贫血，心衰，输血,3,、可用作真性红细胞增多症、临床输血及输液疗效观察的一项指标,4,、,Hct,是计算,MCV,、,MCHC,的基础数据之一,5,、,Hct,是影响全血粘度的决定性因素之一,返回,四、,红细胞,平均值计算,（一）平均红细胞体积,(MCV),（二）平均红细胞血红蛋白含量,(MCH),（三）平均红细胞血红蛋白浓度,(MCHC),（四）临床意义,返回,（一）平均红细胞体积,平均红细胞体积（,mean corpuscular volume,MCV,）：,指红细胞群体中各个红细胞体积的平均值,单位：,fl,（,10,-15,L,）,MCV=,每升血液中红细胞比积,/,每升血液中红细胞个数,MCV=HCT/RBC,参考值,手工法,：,80-92fl,1mL=10,12,fl,返回,（二）平均红细胞血红蛋白含量,(MCH),平均红细胞血红蛋白含量,（,mean corpuscular hemoglobin,MCH,）指红细胞群体中各个红细胞血红蛋白含量的平均值,单位：,pg,（,10,-12,g,）,MCH=,每升血液中血红蛋白含量,/,每升血液中红细胞个数,Hb1012/RBC/L,（皮克）,参考值,手工法,：,27-31pg,1g=10,12,pg,返回,（三）平均红细胞血红蛋白浓度,平均红细胞血红蛋白浓度,.,(concentration mean corpuscular hemoglobin,MCHC),：指测,Hct,时被压紧的,RBC,的血红蛋白浓度（,g/L,）,MCHC=,每升血液中血红蛋白含量,/,每升血液中红细胞比积,MCHC=Hb/(g/L)/Hct,参考值,320-360g/L,返回,（四）临床意义,类型,M,CV(fl),MCH(pg),MCHC,常见疾病,正常细胞,80,94 26,32 310,350,AA,、多数,HA,等,性贫血,大细胞,94,32 310,350,MA,性贫血,单纯小细,80,26 310,350,胞性贫血,小细胞低,80,26,310 IDA,色素性贫血,返回,五、红细胞形态检查,（一）概述,（二）正常红细胞形态,（三）异常红细胞形态,1,.,大小异常,2.,形态异常,3.,染色异常,4.,结构异常,返回,（一）概述,贫血不仅与红细胞数量有关，而且与红细胞形态变化密切相关。各种病因作用于红细胞生理进程的不同阶段引起相应的病理变化，可从染色血涂片上红细胞的大小、形态、染色等方面反映出来。此种形态学改变与血红蛋白测定、红细胞计数结果相结合可粗略地推断贫血原因，对贫血的诊断和鉴别诊断有很重要的临床意义。,返回,（二）正常红细胞形态,(,图,),经瑞氏染色后，血膜片中正常的红细胞大小形态较为一致，,直径为,6.7,7.7m,呈淡红色圆盘状，中央着色较边缘淡。,见于健康人、再障、急性失血、白血病等。,返回,1,.,大小异常（,图,）,（,1,）小红细胞,直径,小于,6m,者称为小红细胞,.,。见于缺铁性贫血、地中海贫血，慢性炎症引起的继发性贫血、遗传性球形红细胞增多症。,（,2,）大红细胞,直径,大于,10m,。见于溶血性贫血及巨幼细胞贫血。,（,3,）巨红细胞,直径,大于,15m,。最常见于巨幼细胞性贫血。,（,4,）红细胞大小不均,是指红细胞之间直径,相差一倍以上,而言。常见于严重的增生性贫血血涂片中。而巨幼细胞性贫血时尤为明显。,返回,2.,形态异常（,图,）,（,1,）球形红细胞,（,2,）椭圆形红细胞,（,3,）靶形红细胞,（,4,）镰形红细胞,（,5,）口形红细胞,（,6,）棘细胞,（,7,）裂片红细胞,（,8,）红细胞形态不齐,返回,3.,染色异常（,图,）,1),低色素性：,红细胞的生理性中心浅染色区扩大，甚至成为环圈形红细胞，提示其血红蛋白含量明显减少，常见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铁幼粒细胞性贫血，某些血红蛋白病时也常见到。,2),高色素性：,指红细胞内生下性中心浅染区消失，整个红细胞均染成红色，而且胞体也大。最常见于巨幼细胞性贫血。,3),嗜多色性：,属于尚未完全成熟的红细胞，故细胞较大，由于胞质中含人多少不等的嗜碱性物策,RNA,而被染成灰色蓝色。嗜多色性红细胞增多提示骨髓造红细胞功能活跃。在增生性贫血时增多，溶血性贫血时最为多见。,返回,4.,结构异常（,图,）,1),染色质小体,：位于成熟或幼红细胞的胞质中,紫红色小体,，呈圆形，有,1-2m,大小，染紫红色，可,1,至数个，已证实为核残余物，常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血及脾切除术后。,2),碱性点彩红细胞：,在瑞氏染色条件下，红细胞内出现大小不一、多少不等的,嗜碱紫黑色粒颗,、正常人血涂片中很少见到，仅为万分之一。有铅、铋、汞中毒时增多，常作为各种铅中毒的诊断的筛选指标。,返回,3),卡波环：,在嗜多色性或碱性点彩红细胞的胞质中出现的,紫红色细线圈状结构,，有时绕成,8,字形。现认为可能是胞质中脂蛋白变性所致常与染色质小体同时存在。见于巨细胞性贫血和铅中毒患者。,4),有核红细胞：,正常成人外周血液中不能见到。,1,周之内婴儿的血涂片可见到少量。最常见于各种溶血性贫血，急、慢性白血病及红白血病。,正常红细胞形态,返回,大小异常和染色异常,小红细胞,大红细胞,大红细胞,巨红细胞,返回,形态异常,球形红细胞,椭圆形红细胞,口形红细胞,棘形红细胞,下一页,形态异常,下一页,异常红细胞（泪滴状）,泪滴状,红细胞,下一页,5,、镰形红细胞,返回,染色和结构异常,染色质小体,有核红细胞 染色质小体,嗜碱性点彩红细胞,卡波环,下一页,嗜碱性点彩红细胞,嗜碱性点彩红细胞,下一页,14,、豪,周小体,Howell-Jolly body,返回,主要内容,一,.,网织红细胞计数,二,.,血细胞比容测定,三,.,红细胞,平均值计算,四,.,红细胞平均直径和直径曲线测定（了解）,五,.,嗜碱性点彩红细胞计数,六,.,嗜酸性粒细胞直接计数,七,.,红细胞沉降率测定,八,.,红斑狼疮细胞检查,下一页,返回,六、网织红细胞计数,【,概述,】,【,检测原理,】,【,方法学评价,】,【,质量控制,】,【,参考值,】,【,临床意义,】,计算练习,返回,【,概述,】,网织红细胞（,reticulocyte,RET,）：,是介于晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞之间的过渡型的尚未完全成熟的红细胞。,其胞浆内还残存多少不等的,嗜碱性物质,（,RNA,），经灿烂甲酚蓝、新亚甲蓝等活体染色法染色，嗜碱物质凝成颗粒，其颗粒又联缀成线，而构成浅蓝或深蓝的网织状结构，称,网织红细胞,。,分型,：,O,型（花冠型）、,型（丝球型）、,型（网 型）、,型,(,破网型,),型（点粒型），,型占外周血网织红细胞的,60%,以上,O,型为有核红细胞。（,演变图,）（,图,）,返回,网织红细胞演变模型图,返回,网织红细胞,网型,破网型,点粒型,返回,【,检测原理,】,1,、普通光学显微镜法：,用活体染色（新亚甲或黄焦油蓝等染料）方法显示红细胞内网状结构，并在显微镜下计数,1000,个红细胞中所占的网织红细胞数，,以百分比或分数表示,。,2,、网织细胞计数仪法：,用,荧光染料使含,RNA,的网织红细胞着色,，用流式细胞术（,FCM,）计算出网织红细胞的百分比。,3,、血液分析仪法：,和网织细胞计数仪相似。,返回,【,方法学评价,】,一、显微镜计数法：,1.,新亚甲蓝染色液,（,WHO,推荐使用首选方法）,特点：染色力强、稳定。,2.,灿烂甲酚蓝染色法,特点：历史长、范围广，但易产生沉淀。,制片方法,:,玻片法：,容易使混合血液中的水分蒸发，染色时间偏短，,因此结果偏低。,试管法：,容易掌握，重复性效好，必要时还可以从混合血,液中再取标本重新涂片复查，避免再次给被检者穿刺造成不,必要的痛苦，被列为手工法网织红细胞计数的推荐方法。,使用米勒窥盘进行计数：,规范了计算区域，减少了实验误,差，使结果准确性有所提高。（,图,）,下一页,米勒窥盘,返回,网织红细胞百分数,100,小方格内需要计数红细胞数,（达到,CV=10%,）,所计数目达到相当于总的红细胞数,1,2,1 000,9 000,3,5,500,4 500,6,10,200,1 800,11,20,100,900,2,流式细胞仪测定法,流式细胞仪的应用，为网织红细胞计数提供了更先进的测试手段。这类仪器采用荧光染色和激光测量的原理，不但能客观地测量大量网织红细胞，而且还能将其分为,高,荧光强度、中荧光强度、低荧光强度,三类，这种分类法对估计化疗后骨髓造血功能的恢复及骨髓移植效果有较重要的意义。具有测量多、避免主观因素、方法易于标准化等特点，国外广泛应用。,返回,【,质量控制,】,1.,用煌焦油蓝乙醇染液时，应待乙醇完全挥发干后方能加入血液，否则血液可使血液凝固。染色时间一定要充足。,2.,染色温度控制在,37,0,C,为宜。,3.,试管法测网织红细胞染液与血液的比例以,1,：,1,为宜，严重贫血时，可适量增加血液的比例，制片不宜太薄太厚。,返回,【,参考值,】,相对值：,成 人,：,0.8%,2.0%,新生儿,：,2%,6%,绝对值：,成 人,：,（,25,75,）,10,9,/L,返回,【,临床意义,】,1.,反映骨髓的造血功能的一个诊断指标,。对贫血的鉴别诊断和鉴别诊断有重要参考价值。,（,1,）网织红细胞增加：,如溶血性贫血。急性失血后,5-10,天网织红细胞达高峰，,2,周后恢复。网织红细胞持续升高提示慢性失血。,（,2,）网织红细胞减少：,如再障。临床将贫血病人网织红细胞绝对值低于,1510,9,/L,，作为急性再障的诊断指标。,2,评价疗效,（,1,）观察贫血疗效：,IDA,或,MA,经有效治疗后，,2,3d,后,Ret,开始上升，,7,10d,达到最高峰（约,10%,），,2,周后逐渐降至正常水平。,（,2,）骨髓移植后监测骨髓造血恢复：,移植后第,21,天，如,Ret,大于,15,10,9,/L,，常表示无并发症；若骨髓开始恢复造血功能，首先表现为,HFR,和,MFR,的上升，其次为网织红细胞计数值上升，,3,放疗和化疗的监测,返回,计算练习,1.,网织红细胞计数时,使用,Miller,氏窥盘,小方格数红细,胞,111,个时计数网织红,细胞数,8,个,则此病人的网织,红细胞数百分比为多少,?,返回,七、嗜碱性点彩红细胞计数,【,概述,】,【,参考值,】,【,临床意义,】,返回,【,概述,】,是某些,重金属中毒,时，胞质中残存的嗜碱性物质,RNA,变性沉淀而形成的，用瑞氏染色，可见红细胞的粉红胞质中含有粗细不等的,蓝黑色颗粒,；如用,碱性美蓝染色,，则点彩红细胞的胞质呈淡蓝绿色，而颗粒为深蓝色，色泽鲜明，易于识别。操作时用油镜按网织红细胞计数法，计数,1000,个红细胞中，所见点彩红细胞数，然后除以,1000,，即为碱性点彩红细胞的百分率。（,图,）,返回,【,参考值,】,0.03%,返回,【,临床意义,】,点彩红细胞明显增多可见于,铅、汞、硝基苯、苯胺等中毒病人。,此外，溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、白血病、恶性肿瘤等也可见增多。,返回,嗜碱性点彩红细胞,嗜碱性点彩红细胞,返回,八、红细胞沉降率测定,【,概述,】,【,测定方法及评价,】,【,质量控制,】,【,参考值,】,【,临床意义,】,返回,【,概述,】,红细胞沉降率,(erythrocyte sedimentation rate,ESR,）,是指红细胞在一定条件下沉降的速度而言，简称,血沉,。在健,康人血沉数值波动于一个较狭窄范围内，在许多病理情况下,血沉明显增快。红细胞沉降是多种因素互相作用的结果，是,反映红细胞聚集性的一个常用指标,血沉过程分为三期：,1,、缗钱状红细胞形成期（,图,），,10min,2,、快速沉降期，,40min,3,、细胞堆积期,返回,红细胞緡钱状,返回,【,测定方法及评价,】,1,、魏氏（,Westergren,）法：,将一定量的抗凝血置于特制的血沉管中,垂直于血沉架上,观察红细胞在一定时间内沉降的距离,以,mm/h,报告,.,此法为,ICSH,推荐的血沉测定方法,.,下一页,影响血沉增快或减慢的主要因素：,(1),血浆因素：,在正常情况下，红细胞膜表现的唾液酸带有负电荷形成,zeta,电位，使红细胞互相排斥而保持悬浮稳定性，沉降很慢。但病理情况下，血浆,纤维蛋白原,或,球蛋白,增多，致使红细胞,zeta,电位降低，彼此易于形成缗钱状，此种聚集的红细胞团块与血液接触的总面积缩小，受到血浆的阻力减弱而使血沉加快，而,白蛋白、糖蛋白等可使血沉减慢,。此外血脂与血沉有关，胆固醇可使血沉加快，而卵磷脂可使血沉减慢。,下一页,（,2,）红细胞因素：,红细胞的数量：,数量血沉，数量血沉,红细胞的形态：,红细胞的聚集状态,（,3,）其它因素：,血沉管的位置：,当血沉管垂直而立时，红细胞所受,阻逆力最大。当血沉管倾斜时，红细胞多沿一侧下,降，而血浆在另一侧上升，致使血沉加快,。,温度：,下一页,2,血沉仪法：,一种是魏氏法自动血沉测定仪,或类似仪器,自动记录后转换成魏氏法测定值；,另一种是,zeta,红细胞比值测定,，前者其取血,、抗凝、装入血沉管等步骤均与常规操作相同，只,是将血沉管垂直立于具有自动计时装置的血沉架之,后，可于,30,，,60,，,120,分钟时分别自动记录其结果。,仪器按照传统魏氏法的原理，将计算机和光电技术,巧妙地结合在一起，动态地分析血细胞沉降的过程。,快速、重复性好、不受环境温度的影响。,返回,【,质量控制,】,1.,抗凝剂：,使用分析纯枸椽酸钠抗凝剂，配制时浓度应准确，配成后液体不得出现浑浊或沉淀，保存期为,2,周。抗凝剂与血液比例为,1:4,，控制在,5%,以内。,2.,血沉装置：,血沉管清洁、干燥，内径要标准，放置要垂直，不得倾斜。,3.,血液标本：,不得有溶血和凝血，采血应在,30s,内完成，标本采血后在,2h,内完成。,4.,测定环境：,温度为,18-25,，室温过高时加以校正。避免阳光直,射，试验台稳固、避免振动。,返回,【,参考值,】,成年男性：,0,15mm/h,成年女性：,0,20mm/h,返回,【,临床意义,】,1,ESR,增高：,（,1,）生理性增快：,妇女月经血沉略增快，可能与子宫内膜破伤及出血有关，妊娠,3,年月以上血沉逐渐增快，可达,30mm/h,或更多，直到分娩后,3,周，如无关发症则逐渐如无关发症则逐渐恢复正常。其增快可能与生理性贫血、纤维蛋白原量逐渐增高、胎盘剥离、产伤等有关。,60,岁以上的高龄者因血浆纤维原蛋白量逐渐增高等，也常见血沉增快。,下一页,（,2,）病理性增快：,各种炎症：,风湿热、结核病时，临床上最常用血沉来,观察结核病及风湿热有无活动性及其动态变化,。,组织损伤及坏死：,较大的手术创伤、心肌梗塞,、,恶性肿瘤：,恶性和良性肿瘤的鉴别,各种原因导致的高球蛋白血症、,亚急性感染性心,内膜炎、黑热病、系统性红斑狼疮等,贫血：,轻度贫血对血沉尚无影响，若血红蛋白低于,90g/L,时，血沉可因而增快，贫血越严重，血沉增快越,明显，故明显贫血病人作血沉检 查。时应进行贫血因,素的校正。,高胆固醇血症：,特别是动脉粥样硬化血胆固醇明,显增高者，血沉明显增快。,下一页,2.,血沉减慢,血沉减慢意义较小，可因,红细胞数量明显增多,及,纤维蛋白,原含量严重减低,所致见于各种原因所致的脱水血浓缩、真,性红细胞增多症和弥漫性血管内凝血等。,返回,九、红斑狼疮细胞检查,【,概述,】,【,方法学评价,】,【,质量控制,】,【,临床意义,】,返回,【,概述,】,系统性红斑狼疮（,SLE,）多见于青壮年女性，是自身免,疫性结缔组织病。临床表现复杂，缺乏特异性诊断，,LE,细,胞检查成为一种重要辅助诊断。,返回,【,方法学评价,】,1,LE,细胞检查,：,红斑狼疮因子（,LE,因子）是一种,IgG,型自身抗体,(,抗核抗体,),在体外可使白细胞退化，核染色质失出正常结构 游离均匀体。,LE,细胞形成（,3,个条件）,(1),患者血清存在,LE,因子（,IgG,型抗核蛋白抗体）,(2),受累或退变的细胞核,(3),具有吞噬能力的细胞,下一页,LE,细胞的形态特征,(,图,),(1),前期：,白细胞在,LE,因子作用下肿胀，溶解成前期,LE,细胞，胞质崩解，核成云雾状游离均匀体,。,(2),花簇期：,有吞噬功能的中性粒细胞围绕于均匀体，形成花形细胞簇。,(3),吞噬期：,中性粒细胞完全吞噬均匀体,。,2,.,免疫学检查：,核抗体抗、抗双链,DNA,抗体、抗,Sm,抗体检查,返回,【,质量控制,】,1.,采血后立即检查,2.,孵育时间,2h,、温度,370C,。,3.,镜检时注意事项,返回,【,临床意义,】,发现,LE,细胞,还要结合临床表现及,抗核抗体,的检,查，才能确诊。,类风湿性关节炎、活动性肝炎等可呈阳性,。,返回,LE,细胞,返回,