有机分析中的样品制备方法简介.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,有机分析中的样品制备方法简介,理化中心室,张 潜,1,概 述,一个完整的分析过程，通常包括样品采集、样品处理、分析测定、数据处理和报告结果五大步骤。统计结果表明,2,，上述各步所需分析时间的百分率大致为：样品采集6.0%；样品处理61.0%；分析测试6.0%数据处理和报告结果27.0%。,其中样品处理所需时间占去整个分析时间的60%以上。,2,许春向等。现代卫生化学 人民卫生出版社 2000年2月.,2,样品制备的目的,1.分离把被测组分从样品基体中分离出来,2.富集把微量或痕量的被测组分富集,3.去干扰把基体中的干扰的物质除去,4.衍生化把方法无法测定的组分转化成可以测定的衍生物,3,样品制备的必要性,1.分析样品满足方法的要求,2 欲测组分含量要求,3.结果的再现和准确要求,4.分析时间的要求,5 分析自动化的要求,4,样品制备的现状,由于：1 样品数量多,2 待测组分含量越来越低,3 基体越来越复杂,4 要求高通量、高选择性、高效率的在线样品前处理技术。,所以样品制备是目前分析化学的瓶颈。,5,有机组分的样品制备方法,1.,各种萃取方法,2.各种分离方法,3.溶解方法,4.热裂解方法,6,不同领域样品制备的,多少,制药,环境,农业-食品,有机化学品,9,无溶剂样品制备,方法,气相萃取,吸附剂萃取,顶空,膜萃取,超临界萃取,固相萃取,固相微萃取,10,样品预处理,中的各种萃,取技术,11,萃取是将样品中欲测组分提取到,另一相,中，使其与干扰组分分离，并可同时进行富集。可分为：,液相萃取将固体、液体或气体样品中欲测组分提取到溶剂中。,萃取的类型,12,萃取的类型,固相萃取将液体或气体样品中欲测组分吸附在固体上；,气相萃取（顶空技术）将固体或液体样品中欲测组分提取到气体中；,超临界流体萃取将固体样品中欲测组分提取到超临界流体中。,13,萃取的各种模式,溶剂萃取,快速溶剂萃取,超临界流体萃取,微波溶剂萃取,超声波溶剂萃取,气相萃取,固相萃取,固相微萃取,14,溶剂萃取,15,目前,在分离和浓缩各种固体和液体样品中的痕量半挥发性和不挥发性有机物方面，溶剂萃取仍然是一种强有力的、其他无溶剂萃取技术不能完全替代的色谱分析样品前处理技术,主要有液-液萃取,液-固萃取和液-气萃取(溶液吸收)等,它们都属于两相间的传质过程,即物质从一相转入另一相的过程。,16,液-液溶剂萃取,17,连续液-液溶剂萃取,18,芯片上的液-液萃取,水相,有机相,Fe-络合物,放空,毛细管,毛细管,注射泵,19,经典索氏萃取器,A被萃取的样品,B萃取浸泡管,C萃取溶剂,D冷凝器,E溶剂蒸发管,F溶剂回流管,20,全自动索氏萃取器,北京市海淀区上地四街一号中西集团公司,21,快速（加压高温）,溶剂萃取,22,快速溶剂萃取的原理,快速溶剂萃取（ASE）的原理是利用,提高温度,和,增加压力,来提高萃取的效率，使用常规的溶剂对固体或半固体样品进行萃取。其结果大大加快了萃取的时间并明显降低萃取溶剂的使用量。,23,提高温度和压力的作用,提高温度可降低样品基质对被分析物的作用或减弱基质与被分析物间的作用力，加快被分析物从基质中解析并快速进入溶剂，同时，降低溶剂粘度有利于溶剂分子向基质中扩散;,增加压力则使溶剂的沸点升高，确保溶剂在萃取过程中一直保持液态。,24,ASE 的流程示意图,25,带有溶剂控制器的快速溶剂萃取仪,26,几种萃取方法的对比,样品量大，用溶剂少,27,利用快速溶剂萃取ASE)法,检测水果和蔬菜中有机氯农药残留,常春艳 口岸卫生控制 第九卷第六期,28,29,萃取程,序,温度 100,压力 10 Mpa(1 500 psi),加热时间 5 min,静态萃取时间 5 min,冲洗体积 60%,吹扫时间 180s,循环次数 1-2,30,微波辅助萃取、超声辅助萃取,利用微波、超声波提供的能量可以加快溶剂萃取速度、提高萃取效率，常与SPE、SMPE技术联用。,31,气体萃取,(顶空进样技术),32,顶空气相色谱,顶空气相色谱(GC headspace Analysis，GC-HS analysis)是对液体或固体中的挥发性成分进行气相色谱分析的一种间接测定法，它是在热力学平衡的蒸气相与被分析样品同时存在于一个密闭系统中进行的。,33,顶空色谱分析的起源,Ettre 首次用原始的顶空技术分析马铃薯中的发酵,气体,用注射器针刺穿马铃薯片袋子吸取其中的0.51 mL 气体，注射到气相色谱仪中,34,静态和动态顶空气相色谱,一般顶空气相色谱分为静态和动态顶空气相色谱，所谓静态顶空气相色谱是在一个密闭恒温体系中，液汽或固汽达到平衡时用气相色谱法分析蒸气相中的被测组分,35,静态顶空的装置,1注射器；2密封隔垫；3螺帽；,4容器；,5样品；,6恒温浴；,7温度计。,36,自动化的顶空气相色谱系统,顶空气相色谱进样必须从密闭的样品瓶的顶空取样到气相色谱仪中，要控制取样的重复性是至关重要的，使用惰性气体往恒温的密闭样品瓶中加压，然后让受压的顶空气体在一定的时间里膨胀到色谱柱中。依靠控制压力和时间可以很精确地从样品瓶中吸取一定容积的顶空气体样品。这一方法叫做,“平衡压力进样”,37,加压顶空进样系统示意图,恒温样品瓶 进样针,通入气体加压,顶空中的气体膨胀到色谱柱中,38,第一台 F-40 顶空进样系统,P-E 公司,39,成都科林分析技术有限公司AutoHS型动态静态双模式自动顶空进样器,40,动态顶空气相色谱,也叫做吹扫-捕集(Purge-Tramp)分析法，,实质上是一种连续气体萃取技术，吹扫气（一般使用氮气）通过液体或固体样品，将样品中的可挥发组分（其中包括欲测组分）带出，然后用冷冻或固体吸附剂吸附的方法，将欲测组分捕集下来，再通过热解吸的方法，将欲测组分解吸下来，进行分析。,41,动态顶空装置,1捕集管；,2冷却水；,3样品管；,4水浴；,5洗气瓶,42,吹扫捕集法的特点,吹扫捕集法作为样品的前处理方式，以其取样量少、富集效率高、受基体干扰小、容易实现在线检测等优点，自1974年首次发表有关吹扫捕集色谱法测定水中挥发性有机物论文以来，一直受到环境科学与分析化学界的重视。美国 EPA601，602，603，624，501.1与524.2 等标准方法均采用吹扫捕集技术。,43,吹扫捕集仪器,美国OI公司的仪器,4660型吹扫捕集样品浓缩器的设计符合美国EPA的方法标准，它将水、空气、土壤/固体/软泥中易挥发的有机物吹扫并浓缩到一个富集管中，然后热脱附与GC或GC/MS联机分析。,44,超临界萃取技术,45,超临界流体 的概念,所谓超临界流体是指在高于临界压力和临界温度时的一种物质的状态，如下图所示，它既不是气体，也不是液体，但是它兼有气体和液体的某些性质，即兼有气体的,低黏度,、液体的,高密度,以及介于气、液之间,较高的扩散系数,等特征,。,46,超临界流体相图,47,超临界流体和气体某些物理性质的比较,物质的相态,密度/（g/cm）,扩散系数/（cm2/s）,黏度/（g/cms）,在21和0.1MPa下的气体,10,-3,10,-1,10,-4,超临界流体,0.3-0.8,10,-3,-10,-4,10,-4,-10,-3,液体,1,10,-5,10,-2,48,SFE 流程示意图,49,超临界流体的选择,必须稳定、安全、易于操作，对欲萃取溶质有足够大的溶解能力，同时又有良好的选择性，通常以临界条件较低的物质优先考虑。,实际应用中最常见的是CO,2,，由于极性很低，对低极性和非极性化合物萃取效果好，对极性化合物的溶解能力很低，可以通过加入极性改性剂，如甲醇，来增加对极性化合物的溶解能力。,50,CO,2,作为超临界流体的优点,1、SFE可以在接近室温及CO2气氛中进行提取，有效地防止了热敏性物质的氧化。,2、SFE是最干净的提取方法，由于全过程不用有机溶剂，因此萃取物绝无残留的溶剂物质。,3、萃取和分离合二为一，当饱和的溶解物的CO2流体进入分离器时，使得CO2与萃取物迅速成为两相而立即分开,51,4、CO2是一种不活泼的气体，萃取过程中不发生化学反应，且属于不燃性气体，无味、无臭、无毒、安全性非常好。5、CO2气体价格便宜，纯度高，容易制取，且在生产中可以重复循环使用，从而有效地降低了成本；6、压力和温度都可以成为调节萃取过程的参数，通过改变温度和压力达到萃取的目的，因此工艺简单容易掌握，而且萃取的速度快。,52,SFE-GC 应用举例,超临界流体萃取气相色谱法测定鱼肉中的毒死蜱残留,徐敦明等，分析化学，2005,33(4):451,53,超临界流体萃取条件,利用离线超临界流体萃取气相色谱测定鱼肌肉中毒死蜱残留量的分析方法。超临界流体萃取鱼肌肉中毒死蜱的适宜条件为：温度 100,，压力 41.370 MPa,流量为 1 mL/min，动态萃取 30 min,静态萃取时间 15 min，调节剂甲醇（添加量0.5 mL），收集液丙酮。最小检出量为0.01ng,54,SFE 调节剂的选择,55,固相萃取技术,56,固相萃取法(SPE)作为样品前处理的手段,57,什么是SPE？,固体Solid(S)，状态或相Phase(P)，萃取Extraction(E),样品在分析前的预处理,基于液相色谱原理将被分析物与杂质分开,浓缩样品,58,HPLC与SPE比较,59,为什么用SPE？,从基质中消除干扰物,保护色谱柱,减少样品与溶剂使用量,缩短处理时间,提高回收率,60,固相萃取技术要点,1。准确了解样品物理及化学特性,2。选择合适的样品净化机理,-保留被分析物，洗脱污染物,-保留污染物，洗脱被分析物,3。选择适当的 SPE 产品,-填料类型、柱容量、配套附件,4。选择活化及洗脱溶剂,61,吸附剂的选择性是SPE的关键，常用的固体吸附剂有：GDX系列、XAD系列和新型化学键合固相吸附剂,化学键合固相吸附剂多以硅胶作为载体,19,。化学键合硅胶中，正相的有氨基、氰基、二醇基等；反相的有C1、C2、C6、C8、C18、环己基、苯基等；离子交换的有季胺、二氨基、苯磺基、羧基等。,19,陈宪华.中国公共卫生，1997，13：562.,62,SPE产品选择指导,63,使用SPE填料类型的比例,64,吸附剂基质硅胶结构,65,AccuBONDII C18 SPE,66,限进性SPE的ODS填料,用作样品预处理的 Shim-packMAYI-ODS 柱，在硅胶细孔内键合十八烷基团，而在硅胶外表面键合甲基纤维素，构成吸附药物小分子，排除生物大分子的限进性填料。,67,限进性SPE的填料,68,限进性SPE的ODS填料,十,十八烷基,甲基纤维素,药物,蛋白质,69,免疫SPE吸附剂,70,SPE 的吸附量,硅胶型填料都具有约 1%的吸附能力，如一个 500mg 的 C18 小柱可以保留 5mg 的 化合物。要注意的是 C18 吸附的并不只是所期望的分析物而是样品中所有的非极性物质。,71,SPE的冲洗剂和洗脱溶剂,一般来说：,反相填料,：以极性溶剂冲洗，用非极性溶剂洗脱,正相填料：,以非极性溶剂冲洗，用极性溶剂洗脱,离子交换填料,：以低离子强度缓冲液冲洗，用高离子强度缓冲液洗脱,72,SPE 溶剂洗脱强度,73,通用SPE萃取程序,反相填料,A。活化,1。用3-5ml甲醇冲洗填料,2。用3-5ml水或缓冲液冲洗，,上样前勿让填料流干,。,B。上样,3。样品加到柱床上，以1-5ml/min.低流速通过填料。若所需样品不会被保留，此时应收集样品作分析。,C。冲洗,4。如果样品被保留，使用约5ml极性溶剂(如水、缓冲液或有机溶剂/水混合液)将弱保留干扰物洗出。,D。用1-2ml非极性溶剂将所需物质洗脱，收集用于分析。,74,Extract-Clean,萃取小柱,20um多孔聚乙烯筛板,多种柱床填料,-50mg,100mg,200mg,500mg,1g,2g,5g,10g,多种容量,聚丙烯管体,-1ml,2.8ml,3ml,6ml,10ml,20ml,60ml,75,SPE萃取小柱配件,串联/针筒连接器、盖、出口堵头、筛板,不锈钢针、聚丙烯针、Teflon针,76,Extract-Clean使用方法,1,77,Extract-Clean使用方法,2,78,真空多头SPE设备,79,真空96孔SPE设备,80,固相微萃取技术,SPME,81,固相微萃取(Solid Phase Microextraction,SPME)是九十年代兴起并迅速发展的新型的、环境友好的样品前处理技术，无需有机溶剂，操作也很简便。该技术使用的是一支携带方便的萃取器，适于室内使用和野外的现场取样分析，也易于进行自动操作。,82,什么是 SPME？,在一根很细的熔融石英纤维上，涂上吸附剂，用来吸附欲测组分，使其与干扰组分和基体分离，并得到富集。对于不同的欲测组分，可选用涂敷不同吸附剂的熔融石英纤维。,83,涂渍吸附剂的熔融石英纤维（称为萃取头）接在一根细的不锈钢钢丝上，外套一根细的不锈钢管（在取样和进样时保护萃取头），萃取头在细的不锈钢管中可自由伸缩进出。在取样和色谱进样时，由细的不锈钢管穿透密封垫，然后再将萃取头伸出。在拔出细的不锈钢管前，将萃取头缩进。,SPME的萃取头,84,SPME 萃取头和萃取杆,85,装配好的SPME-萃取器,86,隔垫穿孔针头,手柄,外套,活塞固定螺杆,Z-沟槽,连接器观察窗口,可调节针头导轨/深度标记,纤维固定管,敷涂层的石英纤维,弹簧,密封垫,固相微萃取装置示意图,87,SPME的原理,SPME方法包括吸附和解吸两步。吸附过程中待测物在样品及石英萃取头外涂渍的固定相中平衡分配。这一步主要是物理吸附过程，可快速达到平衡。,88,SPME 解吸过程,解吸过程随 SPME 后续分离手段的不同而不同。对于气相色谱（GC），萃取纤维插入进样口后进行热解吸，而对于液相色谱（LC），则是通过溶剂进行洗脱。,89,SPME的第一种萃取方式,SPME有三种萃取方式，一种是将萃取纤维直接暴露在样品中的直接萃取法，适于分析气体样品和洁净水样中的有机化合物。,90,第二种方式,第二种是将纤维暴露于样品顶空中的顶空萃取法，广泛适用于废水、油脂、高分子量腐殖酸及固体样品中挥发、半挥发性的有机化合物的分析。,91,92,第三种方式,第三种是将纤维置于萃取膜和样品之间，吸附或溶解透过萃取膜的被测样品。,93,根据欲测组分性质和样品情况选用不同萃取方式,熔融石英纤维,膜,样品,涂层,样品,涂层,(a)直接萃取 (b)顶空萃取 (c)膜保护萃取,94,SPME 进样过程,95,装在GC上的SPME,96,萃取头基质,萃取头涂层中，技术较为成熟并得到广泛应用的主要是Supelco公司生产的商品化石英纤维萃取头。但是由于石英纤维易折断，操作时需非常地小心，从而其使用寿命及范围得到了很大的限制。,97,萃取头涂层类型,涂层包括聚二甲基硅氧烷，聚丙烯酸酯，聚二甲基硅氧烷-二乙烯基苯，聚乙二醇-二乙烯基苯，聚乙二醇-聚二甲基硅氧烷，石墨，活性炭，分子印记聚合物等等。,98,SPME主要品种和用途,涂层类型,极性,适用试样,PDMS(聚二甲基硅氧烷),非极性,有机氯、有机磷、有机氮农药；药品和麻醉品；,食品中香味；挥发物；食品中咖啡因、卤化物。,PA(聚丙烯酸酯),极性,有机氮农药；脂肪酸；药物；食品中香味、酚。,聚乙二醇/二乙烯基苯,极性,体液中乙醇,99,管内涂层固相微萃取,100,管内涂层SPME示意图,萃取用毛细管柱,5 m x 0.53mm 熔融石英柱,涂渍 OV-1 1.2 m,101,管内微萃取-气相色谱在线联用,微萃取毛细管,样品转移管,保留间隙管,分析柱,要萃取的样品,六通阀,LCGC NORTH AMERICA，2004，22（1）：16,102,管内萃取和萃取丝的,比较,管内,萃取丝,103,毛细管柱固相微萃取,AMERICANLABORATORY,2002,(1):30,104,固相萃取棒,105,微型固态吸附棒,微型固态吸附棒萃取,（,Stir Bar Sorptive Extraction，SBSE）,方法的原理是受SPME（固相微萃取）的启发，它的萃取固定相用量比SPME方法多10-50倍，萃取棒直径1.5-2.0mm，长10-30mm，外型如小磁力搅拌棒，直接放入样品中在恒温下磁力搅拌，固定相在棒的外层，直接与样品接触并萃取。之后将棒从样品中取出，用蒸馏水快速冲洗一下，放入专用热解吸装置中脱附并传输给GC进样分析。,106,中科院大化所研制的萃取棒,搅拌吸附棒的棒体是由玻璃管或石英管制成，管内封装铁芯。棒体的直径为1.53mm，长为1050mm,107,吸附和热解,108,脱附和分析,Det,进样器,内衬管,萃取棒,予柱,分析柱,109,GERSTEL 公司脱附单元,110,SBSE技术广泛应用于芳香烃、多环芳烃、多氯联苯、农药、香味物质、酚类等挥发性半挥发性物质的分析，如采用该技术与液相色谱联用，还可以实现对非挥发性物质的分析检测。此方法分析的样品基质已从环境样品扩展到生物和食品类样品。当与GC-MS联用检测限可达到ng/L甚至更低。因此该技术适于对痕量分析检测。,111,液相微萃取,112,一滴溶剂微萃取,用悬在注射针头下的一滴溶剂（如十二烷）（浸入或顶空）做萃取剂的方法,113,顶空一滴溶剂微萃取,一滴溶剂,114,可使用的溶剂,液-液一滴溶剂萃取的溶剂,顶空一滴溶剂萃取的溶剂,正己烷,正辛烷,正辛烷,正癸烷,异辛烷,正十四烷,环己烷,正十六烷,正十六烷,甲苯,甲苯,o-二甲苯,氯仿,环己烷,乙酸丁酯,1-辛醇，乙二醇,二异丙酯,苄醇，邻苯二甲酸二酯,115,液-液-液微萃取(LLLME)-1,锥形导轨,微液滴接受相,中空纤维,给予相,Journal of Chromatography A,1082(2005)136142,116,液-液-液微萃取(LLLME)-2,色谱，2005，23（4）：358-361,微液滴接受相,有机相,给予相,117,色谱,，2005，23（4）：358-361,液-液-液微萃取 高效液相色谱法测定人血浆中的西地那非和伐地那非,张朝辉，康绍英，许敏洁，马 铭，,陈 波，姚守拙,湖南师范大学化学化工学院,118,基质固相分散,Matrix solid-phase dispersion,119,应用SPE技术需要样品处于无粘性、无颗粒、均匀的液态。许多动物性食品样品不能直接应用SPE。如动物组织是最难弄碎和均质的样品。虽然均质的液体样品如奶样品，但其粘性或它们可能含有颗粒以致影响SPE的应用。再者，常遇到乳化，需要离心、再萃取和复杂的样品处理手续。,120,为了改进上述情况，1989年提出了一种新技术，称为基质固相分散（Matrix solid phase dispersion，MSPD）。这一技术使分析者能同时制备、萃取和净化样品。,121,什么是基质固相分散(MSPD)?,是将试样直接与适量反相填料研磨、混匀得到半干状态的混合物并将其作为填料装柱，然后用不同的溶剂淋洗柱子，将各种待测物洗脱下来。MSPDE 浓缩了传统的样品前处理中所需的样品均化、组织细胞裂解、提取、净化等过程，适用于各种分子结构和极性农药残留的提取净化，在蔬菜、水果的残留农药检测中得到了广泛应。,122,MSPD 的功能,MSPD能大大减少样品处理步骤、溶剂使用量和处置程序并缩短时间。大多数情况下，MSPD比经典样品处理节省95%溶剂和90%时间。它也排除乳化问题，但是共萃取组分的数目和量反过来也影响最后分析的检测限。,123,基质固相分散萃取一气相色谱法检测苹果浓缩汁中5种有机磷农药的残留,李建科 南京农业大学,学报,2005，28(2)：111115,124,基质固相分散方法操作,基质固相分散(MSPD)处理：准确称取200 g C18 填料放人小玻璃研钵内，加入050 g 果汁或经组织匀浆后的苹果，充分研磨，使待测样品均匀分散在C18 中。取 10 mL玻璃注射器，下端放一滤纸片，依次加入04 g无水硫酸钠、上述混合样品及 05 g无水硫酸钠，上端再放一滤纸片，用活塞适度压实样品。,125,取出活塞，加入 10 mL正己烷，淋洗除去色素，弃去，抽干；用 2 号梯度洗脱剂各 3 mL洗脱，用心形瓶接收，在40 旋转蒸发至近干，压缩空气吹干；用05 mL丙酮溶解，经022 m针头过滤器滤至1 mL离心管内，保存于冰箱中，待作 GC 测定。,126,苹果中5种农药的GC色谱,127,凝胶渗透,色谱法,128,凝胶渗透色谱法,凝胶渗透色谱法(Gel permeation chromatography,GPC)是样品制备中常用的净化技术，特别是用于有机污染物的痕量分析。此法又称凝胶过滤法、分子筛色谱法、排阻色谱法、体积排阻色谱法、限进扩散法等。,129,凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术，由于设备简单、操作方便，对高分子物质有很高的分离效果。目前已经被许多有关领域广泛采用。,130,什 么 是 凝 胶?,凝胶是一类多孔性高聚物，每个颗粒的结构如一个筛子，在适宜溶剂中浸泡，使其充分吸液膨胀，然后装柱。加入样品后，再以同一溶剂洗脱。在洗脱过程中，大分子不能进入凝胶内部，被排阻于颗粒之外，小分子可进入凝胶内部。大分子较快地被洗脱出，经过一段距离，大分子与小分子可完全分离。,131,分子筛效 应,含有各种分子的样品溶液流经凝胶色谱柱时，各分子在柱内同时进行着两种不同的运动：垂直向下的移动和无定向的扩散运动。大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布颗粒之间，所以在洗脱时向下移动的速度较快。,132,分子最小的最后流出,小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外，还可以进入凝胶颗粒的微孔中，即进入凝胶相内，在向下移动的过程中，从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒，如此不断地进入和扩散，小分子物质的下移速度落后于大分子物质，从而使样品中分子大的先流出色谱柱，中等分子的后流出，分子最小的最后流出，这种现象叫分子筛效应。,133,凝胶的选择,用于有机污染物分析中净化样品的凝胶，必须至少符合两个条件：,1 可使用有机溶剂洗脱；,2 凝胶孔径较小。,选择凝胶规格主要根据目标物和欲分离的杂质分子大小来决定。,134,农药残留分析的净化,比如要分离农药，分子量较小，在实际应用中采用孔径小的凝胶。如在农药残留分析中主要凝胶种类是,Bio-Beads S-X3,135,全自动GPC净化系统,上海磐和电子科技有限公司,填料,：,Bio-Beads S-X3 200-400目,136,食品中苏丹红测定,食品中苏丹红测定采用 GPC 进行净化，有效的去除了这些样品本身含有的天然色素和其他大分子干扰物，然后采用液相色谱进行检测，可得到很好的效果。,137,食品中苏丹红测定的GPC净化,称取研磨成粉状的样品2.00g于50mL离心管中，加入 10mL 提取液，涡旋 1min 后于4000转/s 的速度下离心 5min，取出离心管，将上清夜转移至10 mL GPC进样瓶，净化。,138,GPC 净化,GPC 吸取5mL样液进行净化，流速5mL/min，弃去前面 1600s 的淋洗液，收集接下来的 400s 淋洗液，最后用 300s 淋洗GPC柱，将收集液转移至100mL浓缩瓶，在45的水浴下旋转蒸干，用2mL乙氰溶解，转移至 2mL 进样瓶，供HPLC测定。,139,苏丹红标准样品的色谱,140,膜 萃 取,141,什么是膜萃取技术？,膜萃取是应用固体膜或液体膜进行萃取的方法。这些技术只需要很少的溶剂却得到显著的净化效力。如载体液膜萃取（Supported liquid membrane extraction，,SLM,）是分析样品最通用的膜萃取技术。,142,膜萃取技术分类,膜萃取技术,缩写,相（给体-膜-受体）,1,载体液膜萃取,SLM,水相-有机物-水相,2,微孔膜液-液萃取,MMLLE,水相-有机物-有机物或,有机物-有机物-水相-,3,聚合物膜萃取,PME,水相-聚合物-水相 或,有机物-聚合物-水相或,水相-聚合物-有机物,4,吸收剂界面膜萃取,MESI,气体-聚合物-气体 或,液体-聚合物-气体,J.Chromatogr.A,2000,902:205225,143,SLM的萃取和反萃取,载体液膜萃取（Supported liquid membrane extraction，,SLM,）,是分析样品最通用的膜萃取技术。从含水试样中萃取目标物通过有机液体再进入水相。有机相保持在多孔、疏水支撑膜内。孔中毛细现象保持着有机液体。因此，有两个不同的平衡，使此体系在化学上,相似于经典的液-液萃取中的萃取和反萃取,。反萃取步骤增加了萃取的选择性。,144,载体液膜萃取,疏水性多孔膜做载体，憎水溶剂吸附在多孔膜的毛细管中，常用溶剂是长链烷烃，如正十一烷，极性溶剂有二己醚，邻苯二甲酸二辛酯。,145,载体液膜萃取装置举例,被萃取供给液,含有胺的样品,有机溶剂膜,酸性缓冲液,J.Chromatogr.A,2000,902:205225,146,膜分离+GC测定血浆中的乙醇,147,膜-气相色谱连接示意图,中空纤维膜,到 GC,样品,吹扫气入口,148,结束语,随着科学技术的发展，一方面分析仪器的性能不断得到提高，分析仪器对所分析样品的要求在降低；而另一方面欲分析测试的样品更加复杂，其中的欲测组分的含量越来越低，对结果的精度和准确度要求越来越高，这些都对样品处理有更高的要求。样品处理技术将会在不断地解决这些矛盾中得到更广阔的发展。新的样品前处理技术不断引入，现有处理技术新组合、新运用，将会使样品前处理技术朝着快速、准确、精确、溶剂用量小、环保、安全，可以实现自动化的方向不断发展。,149,谢 谢！,150,