第21章-肠道杆菌.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,是一类通过粪,-,口途径传播的细菌,肠道感染细菌,肠杆菌科细菌,幽 门 螺杆 菌,霍 乱 弧 菌,副溶血性弧菌,弯 曲 菌 属,埃 希菌属,志贺菌属,沙 门菌属,致病菌,正常菌群,第二十一章 肠道感染细菌,肠 杆 菌 科,是一大群生物学性状相似的,革兰氏阴性,短小杆菌，有的为致病菌，多为肠道内正常菌群，可引起医院感染。条件致病菌临床可查到四十种以上。,包括,埃希菌属,志贺菌属,沙门菌属,变形杆菌属,克雷伯菌属,摩根菌属,枸橼酸菌属,肠杆菌属,沙雷菌属等,致病菌,肠道正常菌群,条件致病菌,医院感染,肠道杆菌共同特点,一、形态结构,G,小杆菌，钝圆杆菌，无芽胞，多数有鞭毛,（,志贺菌属除外,）及菌毛,大肠杆菌,1000,二、培养特性,需氧或兼性厌氧,营养要求不高,，普通培养基可生长，菌落相似，形成灰白色中等大小,S,型菌落。,肠道选择培养基：,SS,培养基,乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿等抑制剂,选择抑制作用,大肠埃希菌 产酸 桃红色,伤寒沙门菌 无色,胆盐、煌绿：抑制大肠埃希菌及,G,+,菌，提高肠道致病菌检出率,乳糖,发酵,中性红,呈红色,乳糖,不发酵,四、抗原构造复杂,鞭毛抗原（,H）,菌体抗原（,O）,K,或,Vi,抗原,菌毛抗原,肠道菌共同抗原（,ECA,）,第一节 大肠杆菌（埃希菌属）,-,杆菌。有,5,个种，代表菌种：,大肠埃希菌,(,E.coli,),一般不致病，是重要肠道正常菌群,条件致病菌，引起肠道外感染（化脓性感染和泌尿道感染）,致病性大肠埃希菌能导致人类胃肠炎,大肠埃希菌在环境卫生和食品卫生学中，常用作粪便污染的,卫生学检测指标,一、生物学性状,形态染色,G,小杆菌，周毛菌，有菌毛,培养特性,灰白色中等大小,S,型菌落,生化反应,发酵葡萄糖、乳糖，,IMViC（+-）,抗原,O,抗原（,O,1,-O,173,）,H,抗原（,H,1,-H,56,）,K,抗原（,K,1,-K,100,）,血清型表示法：,O：K：H,二、致病性,致病物质,除内毒素、荚膜等肠杆菌科共有的毒力因子外，大肠埃希菌具有独特的毒力因子有：,黏附素具有高度特异性,吸附、定植、致病,外毒素,不耐热肠毒素，耐热肠毒素，志贺毒素，,肠集聚耐热毒素,不耐热肠毒素,LT,加热,6530,分钟失活,耐热肠毒素,ST,加热,100,分钟不失活,肠 毒 素,enterotoxin,LT,化学结构与致病机理,A1,B,亚单位,A2,受体,GM1,细胞膜,腺苷环化酶,ATP,cAMP,H,2,O CI,-,Na,+,大量分泌,腹泻,LT,与霍乱弧菌肠毒素有,75%,同源性,ST,组成及作用机理,STb,STa,毒性中心,鸟苷酸环化酶,cGMP,腹泻,水电解质平衡率乱,ST,与霍乱弧菌肠毒素间无同源性,志贺样毒素（,SLT）,，引起血性腹泻,溶原性噬菌体编码志贺毒素,Stx-,，,Stx-,，破坏肠绒毛结构和肾上皮细胞（灭活核糖体，干扰蛋白质合成）,肠集聚耐热毒素,质粒介导细菌聚集性黏附上皮细胞，阻止液体吸收,所致疾病：,肠道外感染（内源性感染）,化脓性感染定位转移,腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口,感染、肺炎、,败血症、新生儿脑膜炎,等,泌尿道感染来自病人肠道（上行性）,占泌尿道感染首位、女性多见（尿道炎,、膀胱炎、肾盂肾炎等）,肠道感染：（外,源性感染）,胃肠炎，以,人类腹泻,为主,肠,产毒性,大肠埃希菌,(,entero,t,oxigenic,E.coli,ETEC,),肠,侵袭性,大肠埃希菌,(,entero,i,nvasive E.coli,EIEC),肠,致病性,大肠埃希菌,(entero,p,athogenic E.coli,EPEC),肠,出血性,大肠埃希菌,(entero,h,emorrhagic E.coli,EHEC),肠,集聚性,大肠埃希菌,(entero,a,ggregative E.coli,EAEC),根据其致病机理不同，主要分,五种,类型,(,表,11-1),引起胃肠炎的大肠埃希菌,微生物学检查与防治,肠道外感染,标本涂片、染色分离培养鉴定,尿路感染时每,ml,尿含菌10万,，有诊断价值,肠道内感染,用选择性培养基,分离培养+生化反应+血清分型+毒素测定+核酸检测等,肠道菌分离鉴定步骤,标本,肠道鉴别选择培养基,（,SS,、中国兰）,细菌分离、培养,挑选可疑菌落进行生化反应,常用培养基,-,双糖铁试管,血清学鉴定,如疑为致病性大肠杆菌需作血清学鉴定,已知分型,Ab,分离菌,直接法玻片凝集试验,+,在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标,3个大肠菌群/,1,L,饮水,100个,细菌总数,/,1,ml,饮水,5个大肠杆菌,菌群,每100,ml,瓶装汽水、果汁中,卫生学指标,大肠菌群指数,每1000,ml,水中大肠菌群数,我国的卫生标准：,细菌总数,每1,ml,或1,g,样品中细菌总数,四防治,菌毛疫苗,第二节 志贺菌属,(,Shigella,),（痢疾杆菌）,一、生物学性状,形态染色,G,小杆菌，有菌毛，,无鞭毛，无动力,是本菌与其它肠道致病菌主要区别点,培养特性,肠道鉴别培养基上的无色透明菌落,生化反应,葡萄糖（+）、乳糖（-）（宋内志贺菌迟缓发酵乳糖）、,H,2,S-、,尿素（-）、动力（-）,动力,-,动力,+,抗原分类,根据,O,抗原分4群，40余型,A,群痢疾志贺菌（10）,B,群,福氏志贺菌,（13）,C,群鲍氏志贺菌（18）,D,群,宋氏志贺菌,（1）,抵抗力 比其它肠杆菌弱，尤其对酸敏感,菌毛,粘附并穿入回肠未端、,结肠粘膜上皮细胞,粘膜固有层上皮细胞增殖、炎症,菌毛粘附及穿入,是致病的首要,因素！,1.,侵袭力,二、致病性与免疫性,致病物质,.,内毒素,志贺菌仅在肠道内增殖，一般不侵入血流,各菌株均可产生强烈内毒素，引起典型痢疾症状,内毒素,肠粘膜通透性 大量内毒素吸收,全身表现：,内毒素血症、,发烧、神志障碍、,严重者中毒性休克,破坏局部粘膜，加重坏死及溃疡,形成刺激肠壁植物神经,-,肠功能紊乱,典型痢疾症状,脓血粘液便、腹痛、,里急后重等,内毒素是志贺菌致病的主要因素,A,群产生志贺毒素（,STx）,有3种生物活性,（1）肠毒素：类似,EHEC,产生的毒素,（2）细胞毒性：对人肝细胞、肠黏膜细胞有毒性，引起变性坏死,（3）神经毒性：损伤动物神经系统（麻痹、死亡）,.,外毒素,所致疾病,细菌性痢疾,传染源：病人、带菌者,传播途径：粪口,临床类型,急性菌痢,/,中毒性菌痢,慢性菌痢,免疫力,主要是消化道粘膜表面的,SIgA,不牢固，易再感染,微生物学检查与防治,微生物学检查,标本,脓血粘液部分，及时送检,分离鉴定,肠道鉴别培养基,快速诊断,免疫标记技术,（荧光、协同凝集试验）,防治,预防：,口服链霉素依赖株活疫苗（,Sd,）,治疗,：磺胺药、痢特灵等,第三节 沙门菌属,(Salmonella),是肠杆菌科中最复杂的菌属，有2000种以上血清型,对人类有致病性,肠热症伤寒沙门菌，甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌,食物中毒鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌,败血症猪霍乱沙门菌最常见,生物学性状,形态染色,G,小,杆菌，多为周毛菌，有菌毛,伤寒杆菌的周身鞭毛,营养要求不高,平皿：呈无色半透明菌落,培养特性,生化反应：,活泼,菌 名,葡萄糖,乳糖,甘露醇,H,2,S,靛基质,VP,甲基红,枸橼酸盐,动力,甲型副伤寒沙门菌,-,-/+,-,-,+,+,+,肖氏沙门菌,-,+,-,-,+,+,鼠伤寒沙门菌,-,+,-,-,+,+,+,希氏沙门菌,-,+,-,-,+,+,+,猪霍乱沙门菌,-,+/-,-,-,+,+,+,伤寒沙门菌,+,-,+,-/+,-,-,+,-,+,肠炎沙门菌,-,+,-,-,+,-,+,抗原结构,O,抗原特异性低、稳定、分群（组）,H,抗原特异性高，不稳定，分型,Vi,抗原（毒力抗原）不稳定，可阻止“,O”,凝集,抵抗力 不强,致病性与免疫性,致病物质,侵袭力,菌毛吸附,Vi,抗原微荚膜（抗吞噬）,沙门菌侵入细胞及在细胞内存活对细菌的全身扩散及局部炎症形成均十分重要,内毒素,外毒素,个别（鼠伤寒沙门菌）产生，与,ETEC,肠毒素相似,所致疾病,肠热症,食物中毒,败血症,无症状带菌者,菌毛,穿入淋巴液,胸导管,第二次菌血症,迟发型变态反应,肠壁坏死、溃疡,高热、肝脾肿大、玫瑰疹、白细胞等全身中毒症状,肝 脾 肾 淋巴结 胆囊,尿排菌 粪便排菌,发病期,（1-4,W）,潜伏期2,W,肠热症,伤寒沙门菌等经口,吸附小肠黏膜细胞上,在肠壁、肠系膜淋巴组织中繁殖（致敏）,血流（第一次菌血症）,肠出血、肠穿孔,肠热症,临床过程,潜伏期2,W,发病初期：,第1,W（,第一次菌血症），发热、不适、全身疼痛等前驱症状，此期血液（80%）、骨髓（90%）有大量细菌,发病极期：,第2-,3W，,高热、相对缓脉、肝脾肿大、皮疹、,WBC,等全身中毒症状，此期血、骨髓中仍有菌，但粪便（60%）、尿（20%）、皮疹液中可查到细菌，,由于型变态反应并发症发生，,血液抗体达到阳性标准肥达反应,恢复期：,第四周末，体温下降，症状消失，恢复期带菌1年（粪便仍阳性），血液抗体仍高,病菌在肠粘膜、肠壁固有层和肠系膜淋巴结大量繁殖,胃肠炎（食物中毒）,潜伏期短，6-24,h，,起病急，病程短2-4天，发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻,败血症,经口感染，经肠道入血，败血症症状明显而肠道症状不明显,带菌者,健康带菌者，恢复期带菌者,细菌寄居的部位：胆囊、尿道,年龄、性别与无症状带菌密切相关,免疫性,伤寒和副伤寒病后有牢固免疫。,胞内寄生菌,，以细胞免疫为主，体液免疫为辅,。,微生物学检查与防治,分离培养与鉴定,标本采取,肠热症：,第1-2,W，,血、骨髓；第2-3,W，,粪便、尿,食物中毒：,粪便、呕吐物、可疑食物,败血症：,血,分离鉴定,分离鉴定步骤,粪便、尿,增菌培养,SS,或,中国兰,挑取不发酵,乳糖菌落,血清学鉴定：直接玻片凝集,血液,骨髓标本,伤寒杆菌表现,葡萄糖,+,乳 糖,-,动力,+,H,2,S +/-,双糖管,血清学诊断肥达反应,（,Widal,）,原理,用已知伤寒沙门氏菌,O,抗原及,H,抗原，以及引起副伤寒的沙门氏菌,H,抗原的诊断菌液与待检血清作试管或微孔板凝集试验，测定待检血清中有无相应抗体及其效价。（,TO、TH、PA、PB）,方法：,试管凝集法（定量）,TO1：80，TH1：160，PA、PB,均1：80才有意义,动态观察：双份血清抗体四倍升高有诊断意义,结果分析及临床意义,O,抗体（,IgM），H,抗体（,IgG）,O、H,抗体均升高，,患伤寒的可能性大,O、H,抗体不升高，,患伤寒的可能性小,只有,H,升高，,则可能是预防接种过或非特异性回忆反应，,只有,O,升高而,H,不高,，则可能是感染早期或其他沙门菌的交叉反应。,O 1:160,H 1:320,PA 1:40 N,PB 1:20 N,PC 1:40 N,伤寒,甲型副伤寒,O 1:160,H 1:40 N,Pa 1:160,Pb 1:20 N,Pc 1:40 N,O 1:160,H 1:320,PA 1:40 N,PB 1:80,PC 1:40 N,混合感染,混合感染,O 1:160,H 1:160,PA 1:160,PB 1:20 N,PC 1:80,防治原则,一般性预防,特异性预防,过去：,Ty21a,活菌苗,目前：伤寒,Vi,抗原荚膜多糖疫苗,治疗,首选：氯霉素,耐药株：氨苄青霉素、复方三甲氧烯胺,目前：环丙氟哌酸,第四节 霍乱弧菌,(V.cholerae),霍乱弧菌属弧菌属（,Vibrio,），,为一大,群菌体短小，弯曲成弧，,G,-,单毛菌，运动极,活泼，分布广泛，多存在于水中，对人有致,病性主要为霍乱弧菌和副溶血弧菌,霍乱弧菌的疫源地,霍乱是一种,烈性肠道传染病,，有3个,疫源地,印度恒河三角洲（,O1,群，古典生物型）：,六次世界性大流行，始于1817年,印尼苏拉威西岛（,O1,群，,EL Tor,生物型）：,第七次世界大流行，始于1961年至今未停止，累及140多个国家,孟加拉湾（,O139，Beolgal）：,始于1992年，危害相同,WHO,规定：疑为霍乱病例，三种同时检测,生物学性状,形态染色,G,弧菌，,单,鞭毛，穿梭样运动，,鱼群状,排列，有菌毛，个别有荚膜，无芽胞,培养特性,兼性厌氧，氧气充分生长良好,营养要求不高，故用,pH8.8-9.0,碱性培养基,，,耐碱不耐酸,（,pH7.4-9.6），,形成光滑透明湿,润的“水滴样”菌落，能在无盐培养基中生长,（区别其它弧菌）,抗原构造与分型,耐热的,O-Ag,（有特异性）不耐热的,H-Ag,（无特异性）,古典生物型,EI Tor,生物型,抗原,O1,群分型,血清群,200,多个,其中,O1,群和,O139,群引起霍乱,其余不致病或仅引起胃肠炎,El Tor,生物型强，流行时间持续长，带菌者更多,抵 抗 力,怕干,干燥时易死亡，水环境中可存活两周（水源 性传播，水性爆发）,怕酸,正常胃酸,4min,不耐热,100,，,1-2min,对消毒剂抗生素敏感,抵抗力,较弱,致病性与免疫性,致病物质,侵袭力,鞭毛与黏液素酶,鞭毛运动,利于细菌穿过黏膜黏液,黏液素酶液化黏液,菌毛使细菌定植于小肠,致病物质,霍乱肠毒素最强烈的致泻毒素,其致病机制与,ETEC,的,LT,相似，但作用强烈得多,A,亚单位 活性亚单位,B,亚单位 与受体介导,A,亚单位进入细胞,1A+5B,B,亚单位与小肠粘膜上皮细胞,GM1,神经节苷脂受体结合，介导,A,亚单位进入细胞,致病机理,A,亚单位裂解为,A1,和,A2,两条多肽，,A1,亚单位发挥毒性作用,霍乱弧菌肠毒素与,大肠杆菌,LT,有,80%,同源性,胞内,cAMP,，导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进，分泌,Na,+,、,K,+,、,HCO,3,-,和水，大量水和电解质在肠腔堆积，引起剧烈腹泻与呕吐,G,蛋白,Gs,活化腺苷酸环化酶,ATP cAMP,A1,所致疾病,霍乱（,甲类法定传染病,02,）,传染源：病人粪便污染的水源或食品,传染途径：经口（暴饮暴食者）,感染所需菌量：,10,10,10,2,10,4,潜伏期：,2-3,d,前驱期：,不明显，少数有轻度吐泻、腹胀不适,吐泻期：,剧烈吐泻、米泔样，每日数十次，无腹,痛，持续2-3天，失水12000,ml,对于一个,50,公斤的人来说：脱水,0.5,公斤就会出现口渴，脱水,1,公斤就会严重口渴，出现不舒服、压抑和没有食欲之感，脱水,4,公斤则会出现头晕、青紫、语言不清、无力和精神紊乱，脱水,7.5,公斤就会死亡。,病 程 与 临 床表现,脱水期：,严重吐泻引起水电解质紊乱，脱水酸,中毒，肾衰、循环衰竭、休克、死亡,表现：神志不安、淡漠“霍乱面容”呈,脱水貌，眼窝下陷，舟状腹等,恢复期：,吐泻停止、紊乱纠正、症状消失、病,程平均为,3-7天,免疫力：,病人,愈后可获得牢固免疫,以,体液免疫,为主,病人,米泔水样,粪便，肛拭子,（流行病学调查包括水样）,标 本,直接镜检,分离培养,碱性蛋白胨水增菌,选择培养基为,TCBS,玻片凝集反应,涂片见,G,-,性弧菌，鱼群状排列,悬滴法,观察细菌呈穿梭样运动,标本必须密封专送，专训人员检测,三微生物学检查,快速诊断 荧光菌球法，,SPA,协同凝集试验,四防 治 原 则,治疗,预防,对症处理，及时补充液体和电解质,抗生素等药物的应用,如四环素、强力霉素、氯霉素等,加强国境检疫，加强水源及粪便管理,及时检出病人，隔离封锁疫区,疫苗接种,第五节 副溶血弧菌,嗜盐性弧菌，沿海地区常见，存在于近海海水、海泥、海产品中，1950年首发于日本大阪，主要引起食物中毒,一、生物学性状,1,G,弧菌（多形性），单鞭毛,2 具有耐盐性，在含有3.5%,NaCl,培养基中生长良,好，无盐不长，8%也不长。,3 神奈川试验（,KP）,：在高盐培养基上中使人或,兔红细胞发生溶血（,溶血）,二、致病性,1.致病机制不甚明确,2.引起食物中毒,好发夏季，误食未熟海产品,或盐腌制品,而致，潜伏期短5-72,h（24h），,急性胃肠炎症状，水样便，病程短，可自愈（个别死亡）,3.病后免疫力不牢固，可重复感染,第六节 幽门螺杆菌（,HP,）,G,，,菌体弯曲呈螺旋型、,S,形、海鸥形，有鞭毛（丛毛菌）,微需氧，营养要求高，生化反应不活跃，但尿素酶丰富（主要鉴定依据）,致病机制不清,慢性胃炎,胃溃疡,本菌检出率很高,胃癌,（,80-100%,）,胃黏膜相关,B,细胞淋巴瘤,第七节 弯曲菌,G,-,，菌,体弯曲呈,S,形或螺旋状，常,2-3,个菌连接排列，单毛,/,双毛菌，运动活泼（螺旋样运动）,微需氧，（,5%,O,2,+10%CO,2,+85%N,2,）,营养要,求高，生化反应不活泼,空肠弯曲菌细菌性胃肠炎（经口,10,4,感染）,胎儿弯曲菌肠外感染（心内膜炎、血栓性静脉炎，关节炎等）,海鸥弯曲菌尿路感染,第八节 其它,一克雷伯菌属,（5,个种）,肺炎克氏菌（,3,个亚种）的肺炎亚种，俗称,肺炎杆菌，,与人类感染有关,G,-,球杆菌，无动力，有较厚的荚膜，多有菌毛,普通平板呈,M,型菌落（易拉成丝）,存在正常人体，,目前为除大肠埃希菌以外最重要的条件致病菌。,二变形杆菌,G,-,杆菌，有多形性，周身鞭毛，运动活泼，,在普通培养基上呈扩散性生长，称为迁徙生,长现象,变形杆菌的周身鞭毛,迁徙生长,迅速分解尿素，,尿素（,+,）为本菌特征,，,外斐试验（,Weil-Felix）：,本菌某些特殊菌株如,X,19,、X,2,、X,K,的,O,抗原与某些立克次氏体有共同抗原成分，临床上应用,OX,19,、OX,2,、OX,K,代替立克次氏体抗原与斑疹伤寒或恙虫病患者血清做凝集试验，以辅助诊断立克次体病,为条件致病菌,原发感染食物中毒,继发感染尿路感染（仅次于大肠埃希菌）、创伤、腹膜炎、败血症等,Widal test,肥达试验 迁徙现象,Weil-Felix test,外斐试验,肠热症病人如何进行微生物学检查？,判断肥达试验结果并分析其临床意义？,大肠埃希菌在卫生细菌学检查中有何意义,简述霍乱弧菌的生物学特性。,简述霍乱弧菌的致病性 及临床表现和防治原则。,复 习 要 点,简述肠道杆菌的共同特点,致病性大肠杆菌的种类及致病机理,学习进步,身体健康,