微生物的实验室培养.doc

微生物的实验室培养
1.实验名称：微生物的实验室培养。
2.实验目的：
⑴.了解有关培养的基础知识，能进行无菌技术操作和微生物的培养。
⑵.掌握培养基的制备，高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作，熟练规范地进行无
菌操作，成功地培养微生物。
3.实验原理：
⑴.牛肉膏蛋白胨固体培养基配方：
牛肉膏 5.0g
蛋白胨 10.0g
NaCl 5.0g
琼脂 20.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定溶至1000ml。
⑵.纯化大肠杆菌：
①. 平板划线法：

②. 稀释涂布平板法：

4.实验条件：
⑴.牛肉膏蛋白胨的原料。
⑵.消毒，灭菌器材(酒精灯，干热灭菌箱以及高压蒸汽灭菌锅)。
⑶.实验器材：天平，玻璃棒，称量纸，琼脂，锥形瓶，烧杯，牛皮纸，旧报纸，培养皿。
5.实验方法与步骤：
⑴.计算、称量。
⑵.溶化。
⑶.调pH值:pH=7.6　。
⑷.过滤：这一步可以省去。
⑸.分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染
分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
⑹.加塞。
⑺.包扎。
⑻.灭菌：将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。
⑼．倒平板：待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。

2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种.
⑽.纯化大肠杆菌（方法见实验原理）。
6.实验测量与记录：
观察对象
（菌落）
形状
大小
隆起程度
颜色
实验结果

7.实验结果与分析。