自身抗体-张.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,自身抗体检测及临床应用价值,张虹,1,自身抗体是诊断自身免疫性疾病的重要依据,自身免疫,泛指机体,免疫系统,受某些内因、外因或遗传等因素作用产生,针对,自身正常或变性的组织、器官、细胞、蛋白质或酶类等,自身抗原发生的免疫应答反应,，,出现自身抗体或自身致敏淋巴细胞的现象,。,因自身免疫招致组织器官损伤或功能障碍所致疾病称,自身免疫性疾病,(AID),。,自身抗体,是自身免疫性疾病的重要标志,。,2,自身免疫性疾病的共同特征,1,.,可以有诱因，也可以无诱因，但多数病因不清。,2.,患者以女性居多，随年龄增加发病率有所增加。,3.,有遗传趋向。,4.,血清中有自身抗体或体内有针对自身组织细胞的致敏淋巴细胞。,自身抗体,在不同的自身免疫病中有,交叉和重叠,现象。,5.,疾病的重叠现象,即一个病人可同时患一种以上自身免疫病。,6.,自身免疫病一般病程较长,病情发展和缓解呈反复交替现象,易成为终生痼疾。免疫抑制剂治疗可取得一定疗效。,3,自身抗体的意义,1.,可帮助临床诊断，评价疗效，估计预后。,2.,自身抗体是自身免疫性疾病特征,-,称标志抗体，,*,标志抗体检出有助于临床医生确诊疾病,*,自身抗体的检测有助于临床医生更早发现疾病,4,自身抗体可以在,AID,临床发病前检测到,PBC,患者任何临床症状前,10,年可检测到,AMA,（抗线粒体抗体）,RA,患者在临床症状前,4-5,年检测到抗,CCP,抗体,5,自身抗体的分类,抗细胞内抗原的抗体,:,抗细胞核成分的抗体,(ANA),抗细胞浆成分的抗体,(ANCA),抗细胞膜成分的抗体,:,抗磷脂成分抗体,抗细胞表面抗原抗体,:,抗红细胞,Rh,抗原,抗细胞外抗原的抗体,:RF,、凝血因子,6,抗核抗体谱,抗,DNA,抗体,抗核糖体,P,抗体,抗组蛋白抗体,抗,ENA,抗体,抗,Sm,抗体,抗,U1RNP,抗体,抗,Ro/,抗,SSA,抗体,抗,La/,抗,SSB,抗体,肌炎特异性抗体（,MSA,）,抗合成酶抗体,抗,SRP,抗体,抗,Mi2,抗体,与系统性硬化相关的抗体,抗拓扑异构酶,1,抗体,抗着丝点抗体,抗核仁抗原的抗体,抗中性粒细胞胞浆抗体,C-ANCA,P-ANCA,抗磷脂抗体,狼疮抗凝物,抗心磷脂抗体,2,糖蛋白,抗内皮细胞抗体,类风湿关节炎相关抗体,类风湿因子（,RF,）,抗,CCP,抗体,抗核周因子抗体,自身免疫性肝病相关抗体,SMA,，,LKM,，,SLA,，,AMA,，,Sp100,gp210,等,7,抗核抗体（,ANA),抗核抗体,（,antinuclear antibody,，,ANA,）,传统定义：将针对细胞核内成分的抗体称为,ANA,。现在对,ANA,靶抗原的理解已从细胞核扩大到整个细胞。是指抗核酸（,nucleic acid,）和核蛋白（,nucleoprotein,）抗体的总称。,8,ANA,的检测方法,间接免疫荧光法（,IIF,）,:,现多以,Hep-2,细胞（人喉癌上皮细胞）为底物（,Ag,），抗原抗体结合，加入荧光标记的二抗体。,用荧光显微镜观察,ANA,荧光着染强度和免疫荧光图形（核型）。,稀释待检血清可检测,ANA,效价,9,ANA,常见核型,核型 对应抗原 相关疾病,均质型 组蛋白和,DNA,所有的,CTD,及药物性狼疮,斑点型,ENA SLE,、,SSc,、,pSS,、,MCTD,周边型,n-DNA SLE,、也见于,SSc,核仁型,RNA,多聚 酶,SSc,、也见于,SLE,、,pSS,SCL-70,着丝点型 染色体,CREST syn,（,局限性系统硬化症,）,10,ANA,的检测方法,酶免疫测定试验（,ELISA-ANA),商品化的试剂盒，包括吸附有抗原的固相（微孔板）、酶标记的检测抗体、洗液、底物、终止液及阴阳性质控物。,通过酶标仪读取,OD,值，跟,cutoff,值比较来界定阴性和阳性。,11,抗核抗体的分类,（,1,）抗,ENA,抗体,可提取性核抗原（,extractable nuclear antigens,，,ENA,）,（,2,）抗组蛋白抗体,（,3,）抗,DNA,抗体,抗双链,DNA,抗体（抗,dsDNA,）,抗单链,DNA,抗体（抗,ssDNA,）。,（,4,）抗着丝点抗体,（,5,）抗核小体抗体,12,ENA,不同的自身免疫病可产生不同的抗,ENA,抗体。通过检测抗,ENA,抗体的类型及其组合，可综合诊断自身免疫病的类型,。,抗,Sm,抗体,抗,U1RNP,抗体,抗,Ro/,抗,SSA,抗体,抗,La/,抗,SSB,抗体,肌炎特异性抗体,JO-1,与系统性硬化相关的抗体,SCL-70,13,ENA,检测方法,双向免疫扩散,对流免疫电泳,斑点酶免疫技术,免疫印迹技术,14,免疫印迹技术（最常用）,欧蒙印迹法试剂盒,用于体外定性检测血清或血浆中的人抗,nRNP,、,Sm,、,SS-A,（天然,SS-A,和,Ro-52,）、,SS-B,、,Scl-70,、,Jo-1,、,CENP B,、,dsDNA,、核小体、组蛋白和核糖体,P,蛋白等,14,种不同抗原,lgG,类抗体。,15,免疫印迹技术,(IBT),1.,将提取的抗原,经,SDS-,聚丙烯酰胺凝胶电泳,然后将各抗原区带转印至硝酸纤维膜上制成膜条。,2.,将待测血清加在已切成细条的硝酸纤维膜上,3.,当再加入酶标记抗人,IgG,抗体,4.,再加入酶的底物,出现显色反应。,凡有抗体与膜上抗原结合的位置,均会因酶促反应而显色。,参照此时抗原区带的分子量及各区带的相应位置,可辨读出各特异性抗体,.,16,抗,ENA,抗体的主要类型及,临床意义,抗,Sm,抗体,抗,Sm,是,SLE,的特异性标志之一，对,SLE,高度特异（超过,90%,），约,5%-40%,患者阳性，同时伴抗,DS-DNA,抗体和,U1-RNP,抗体阳性。,抗,u1-nRNP,抗体,抗,nRNP(nuclear RNP),：以抗核内的核糖核蛋白而得名。临床上应用较多的是,u1RNP,抗体。,抗,u1RNP,抗体在,混合性结缔组织病（,MCTD,）,中几乎均为阳性，且其滴度很高；是区分结缔组织病和非结缔组织病的有力指标。,25,30,的,SLE,患者存在该抗体，一般与抗,Sm,抗体一同出现。,抗,u1RNP,抗体阳性的病人，常有双手肿胀、雷诺现象、肌炎和指（趾）端硬化。,17,抗,SSA,抗体,抗,SSA/Ro,抗体,与各类自身免疫性疾病相关，最常见于,干燥综合征,（,40-80%,）。,SLE,（,20-60%,）与狼疮肾病的发生相关。,抗天然,SS-A,（,60kDa,）抗体对,SS,和,SLE,的特异性高。,抗,Ro-52,抗体,不具有疾病特异性，而且还可与抗,Jo-1,和,RNP,抗体发生交叉反应。,既往认为抗,SS-A,靶抗原为分子量,52KD,和,60KD,，,RO-52,和,RO-60,是同一大分子复合体，现在认为,RO-52,和,RO-60,抗体并不属于同一抗体系统，两者是独立的抗体系统，而且具有不同的临床意义。,18,抗,SSB/La,抗体,在原发性,SS,病人中，抗,SSA/Ro,和抗,SSB/La,阳性率分别为,60%,和,40%,，它们是诊断干燥综合征的血清学标志。,抗,SSB,抗体较抗,SSA,抗体诊断,干燥综合征更为特异。,另：,SSA,和抗,SSB,抗体阳性可造成新生儿狼疮及婴儿心脏传导阻滞等先天性心脏病。,抗,SSA,和抗,SSB,抗体常与血管炎、淋巴结肿大、白细胞减少、光过敏、皮损、紫癜等临床症状相关。,19,抗,Jo-1,抗体,几乎仅见于或最常见于,多发性肌炎,/,皮肌炎,（,PM/DM,）或,PM/DM,重叠综合征。,存在于,35,至,40,的肌炎患者中。,临床表现为：肌炎、间质性肺疾病、关节炎以及常出现雷诺现象的一组临床表现的特征性；,患者的手指侧面常出现角化过度，并伴有脱屑、裂纹和色素沉着，从而形成许多肮脏的横纹。即“技工手”,.,50,至,70,发生间质性肺疾病。,肌炎常常难以通过治疗达到完全缓解。,20,SCL-70,抗体,抗拓扑异构酶,1,抗体（抗,scl 70,抗体）：,存在于,25,至,75,的患者；主要见于患有,弥漫型硬皮病以及存在系统性损害（特别是肺间质变）,的患者。,抗体滴度与疾病活动性无关。,21,抗,DNA,抗体,已确认出两大类抗体特异性：,天然的,双链,DNA,（,dsDNA,）：,SLE,患者,的特征性标志,变性的,单链,DNA,（,ssDNA,）,抗,dsDNA,抗体在,SLE,的发病机制中起重要作用，,SLE,并发的狼疮性肾炎是由该抗体介导的免疫复合物病，抗,dsDNA,抗体可形成多种冷沉淀而致血管炎，,SLE,肾炎及典型的蝶形红斑均与该抗体有关。,抗,dsDNA,抗体诊断,SLE,的特异性可达,95%,100%,，但其敏感性仅为,30%,50%,，因此抗,dsDNA,抗体阴性不能排除,SLE,的诊断。,抗体水平与,疾病活动度相关,，随着疾病活动的控制，抗,dsDNA,抗体滴度可以下降或消失。,22,抗组蛋白抗体（,Anti-Histone Antibody,，,AHA,）,组蛋白是染色质基本结构,-,核小体的重要组成部分；,在,药物性狼疮,的患者中出现率很高（,78-,95%,）；,在多种,结缔组织,病中出现。,服用异烟肼的病人中最高，但临床上并没有出现狼疮的临床症状。,23,抗组蛋白抗体,组蛋白有,H1,H2A,H2B,H3,H4,亚型,抗,H1 H2A H2B H3 H4,系统性红斑狼疮,+,长期服异烟肼,+,类风湿关节炎,+,24,抗核小体抗体（,antinucleosome antibodies,AnuA,）,核小体是染色体的功能亚单位，是,DNA,与组蛋白形成的复合体，存在于细胞核中，核小体是,SLE,主要的自身抗原；,AnuA,对,SLE,诊断的敏感性和特异性分别为,56.0%-64.2%,和,97.0%-98.8%,，敏感性优于抗,dsDNA,，是,SLE,的标记抗体之一。,AnuA,可出现于,SLE,疾病进程的各个时期，并且是,狼疮肾炎,的标记性抗体。,AnuA,与抗,dsDNA,抗体可不同时出现，,AnuA,出现早于抗,dsDNA,抗体，这对,SLE,的早期诊断更为有利。,25,核糖体,P,蛋白,抗核糖体,P,蛋白为,SLE,特异性自身抗体，检出不高，通常为,10%,，该抗体与疾病的活动度不相关。,抗着丝粒抗体,90,的局限性系统性硬化症,CREST,综合征患者存在该抗体；见于患有原发性或继发性雷诺病的患者。,26,系统性红斑狼疮,(SLE),靶抗原阳性率,(%),dsDNA,标志性抗体,30-90,Sm,标志性抗体,5-30,核糖体,P,蛋白标志性抗体,5-15,核小体标志性抗体,50-95,组蛋白,40-80,U1-nRNP 15-40,SS-A 20-60,SS-B 10-20,27,新生儿红斑狼疮（,NEL,）,靶抗原阳性率,(%),SS-A,100,药物诱导的红斑狼疮（,DIL,）,靶抗原阳性率,(%),组蛋白,95,原发性干燥综合征（,SS,）,靶抗原阳性率,(%),SS-A,40-95,SS-B 40-95,混合性结缔组织病（,MCDT,）,靶抗原阳性率,(%),RNP,95-100,28,弥漫型进行性系统性硬化症,靶抗原阳性率,(%),Scl-70,标志性抗体,25-75,局限型进行性系统性硬化症,靶抗原阳性率,(%),着丝点,80-95,多发性肌炎和皮肌炎（,PM/DM,）,靶抗原阳性率,(%),Jo-1 25-35,29,2025/8/21 周四,30,自身免疫性肝病相关抗体,是与自身免疫密切相关的特殊类型的肝病，,其诊断和治疗完全不同于一般的慢性病毒性肝炎,自身免疫性肝炎,(AIH),原发性胆汁性肝硬化(,PBC),原发性硬化性胆管炎,(PSC),自身免疫性胆管炎（,AIC,）,重叠综合征,每种自身免疫性肝病都具有特征性自身抗体谱，,自身抗体检测对自身免疫性肝病的诊断及鉴别具有重要意义。,31,原发性胆汁性肝硬化,（,primary biliary cirrhosis,PBC,）,女性；,胆酶升高（,ALP,r-GT,）为主，碱性磷酸酶（,ALP,）,/AST3,；,IgM,明显升高,胆汁酸,血脂及胆固醇升高,;,肝内小胆管的非化脓性炎症和梗阻，淤胆；肝内阻塞性胆汁性肝硬化；,常合并其他自身免疫病如,SS,、桥本氏甲状腺炎等。,32,抗,AMA-M2,（抗线粒体抗体）,该抗体为原发性胆汁肝硬化（,PBC),的特异性指标，对,PBC,特异性最强,(95%),敏感性最高,(95%),。可早于发病,10,年查出抗体。,PBC,诊断不及时危害大,PBC,早期隐匿，晚期疗效甚微。晚期确诊,PBC,患者死亡率很高。,PBC,误诊率可高达,90%,。,最常见误诊为：慢性病毒性肝炎。,某传染病医院数据（,2001-2010,年,),显示：近半数,PBC,患者伴有乙肝病毒感染，疾病还同时伴发各种类型肝炎（乙肝最常见）。,33,自身免疫性肝炎,autoimmune hepatitis,AIH,AIH,临床特点：,大多隐匿起病,女性多见（女：男,=4-6,：,1,）,类似病毒性肝炎的症状和体征：疲乏无力、右上腹不适、肝肿大、黄疸、腹水,肝功能异常：肝酶（,ALT,、,AST,）升高为主，明显高于胆酶，,AST/ALP3,；,血清,IgG,升高，,1.5,倍,r-,球蛋白,2,倍；,各种病毒学指标 检查均为阴性,;,（自免肝禁忌用干扰素，诊断自免肝必须排除病毒性肝炎）。,34,AIH,（自免肝）相关的自身抗体,是,AIH,诊断和分型的重要依据和必备条件,抗核抗体（,ANA,）,抗平滑肌抗体（,SMA,）,抗肝肾微粒体抗体（,LKM,）,抗肝细胞溶质蛋白,1,抗体（,LC-1,）,抗可溶性肝抗原抗体（,SLA,）,抗肝胰抗体（,LP,）,35,自身免疫性肝炎的分型,I,型:,最常见，约占,80%,抗平滑肌抗体（,SMA）,，,ANA：,常,同时出现 （,85%-90%,），,ANA,及,SMA,被公认是 诊断,I,型,AIH,的特异性抗体,;,II,型:,LKM-1(,肝肾微粒体抗原）；,LC-1(,肝细胞胞质抗原,),少见，儿童多见,III,型:,SLA(,可溶性肝抗原,)LP(,肝胰抗原,),36,原发性硬化性胆管炎（,primary sclerosing cholangitis,PSC,病变特征为胆管广泛炎症纤维化、梗阻、狭窄，进而发生胆汁性肝硬化，临床特点为阻塞性黄疸。,PSC,血清免疫球蛋白常增高,以,IgM,多见。,ANCA,阳性在,PSC,高达,87%,。,血清中可发现,ANA,和,SMA,，但滴度都比较低，一般,没有抗线粒体抗体,，这一点与,PBC,相反。,胆管造影,(ERCP),显示有硬化性胆管炎的典型改变，肝内外胆管狭窄与扩张相间而呈串珠状改变（决定性）。,37,ANCA-,抗中性粒细胞胞浆抗体,ANCA,代表一组抗中性粒细胞胞浆特定的成分为靶抗原的抗体谱。,其靶抗原成分包括：丝氨酸蛋白酶,3,（,PR-3,）、髓过氧化物酶（,MPO,）、通透性杀菌蛋白（,BPI,）、丝氨酸蛋白酶、人白细胞弹性蛋白酶（,HLE,）、乳铁蛋白（,LF,）、组织蛋白酶,G,（,CG,）、,葡萄糖醛酸酶、溶菌酶等。,在显微镜下观察，常见到两种结合类型：,C-ANCA,：胞浆中细颗粒类型，,主要靶抗原为,PR-3,；,P-ANCA,：核周染色。,其靶抗原主要为,MPO,；,A-ANCA,或,X-ANCA,：前两者的混合物，非典型,ANCA,38,ANCA,的测定,1,间接免疫荧光法,(IIF),最常用,胞浆型,c-ANCA,核周型,p-ANCA,不典型,a-ANCA,2,免疫印迹法,39,细胞质呈弥漫性颗粒样染色（不均匀）,环绕细胞核周围的细胞质亮染,40,ANCA,两种荧光染色型,核周型,ANCA,（,pANCA,）,胞浆型,ANC,（,cANCA,）,41,C-ANCA/,PR3-ANCA,丝氨酸蛋白酶,3（PR3）,为,C-ANCA,的主要靶抗原，约占,C-ANCA,的,80%90%,。,C-ANCA,诊断,WG,的特异性大于,90%,，外加,PR3-ANCA,可超过,95%,。,敏感性取决于疾病的活动性和病期阶段，在初发不活动的韦格纳肉牙肿（,WG,）,中，阳性率只有,50%,，而活动性典型的,WG,，几乎,100%,阳性。,总体敏感性为,60,70,。,C-ANCA,滴度与病情活动一致，,强烈的致病作用。,常被作为,WG,，判断疗效、估计复发的指标。,在,HIV,感染和阿米巴肝脓肿的患者中也可能检测到该抗体。,PR3-ANCA,在其他原发性血管炎中也可被检测到，如,MPA(,显微镜下多动脉炎）、坏死性新月体型肾小球肾炎（,NCGN,）、,PAN,（结节性多动脉炎）等。,42,P-ANCA/,MPO-ANCA,主要靶抗原为：,抗髓过氧化物酶（,MPO,），弹性蛋白酶、乳铁蛋白及其它尚未被确认的胞质成分为抗原。,主要与,50,显微镜下,多动脉炎（,MPA,）,、坏死性新月体型肾小球肾炎（,NCGN,）,等相关。,MPO-ANCA,还可见于其它一些疾病，如,PAN,（结节性多动脉炎）、抗肾小球基底膜疾病（抗,GBM,病）、,WG,、,SLE(10%15%,）、,RA,伴关节外损害及血管炎、药物性狼疮、,Felty,综合征,(,类风关合并,WBC,少）等。,MPO-ANCA,与原发性血管炎相关不及,PR3-ANCA,与,WG,相关性那样紧密。但每一个怀疑血管炎或肾小球肾炎患者，只要原因不明，就应查,ANCA,。,体内、体外资料显示,MPO-ANCA,参与血管炎相关疾病的致病机理。,MPO-ANCA,与病情活动相关，可用于判断疗效、估计复发和指导治疗。,43,ANCA,不仅与原发性小血管炎相关,也可见于许多其它炎症性疾病,例如炎症性肠病,包括溃疡性结肠炎和克隆氏病,;,自身免疫性肝胆疾病,如原发性硬化性胆管炎,;,类风湿性关节炎,;,和某些肺部非感染性炎症性疾病,如囊性纤维化、肺间质纤维化等。,但上述,ANCA,相关的疾病并不识别,PR3,和,MPO,其特异性,ANCA,靶抗原为其它胞浆成分。,44,甲亢治疗监测,血管炎病变不仅累及血管本身，还累及血管所支配的组织和脏器，有些可以致命。,甲亢：目前我国女性人群患病率达,2%,。甲亢未经治疗，,ANCA,阳性率可达到,3.5%,，治疗甲亢（血管炎）,ANCA,阳性率,35%,，,ANCA,阳性必须停药。,45,类风湿关节炎相关抗体,类风湿因子,（,R,heumatoid,F,actor,RF,）,抗环瓜氨酸肽,（,Cyclic citrullinated peptide,，,CCP,）抗体,抗核周因子（,antiperinuclear factor,，,APF,）,抗角蛋白抗体（,antikeratin antibody,，,AKA,）,抗钙蛋白酶抑制蛋白抗体,(,ACAST,),抗,RA33,抗体,46,类风湿因子（,RF,）,抗原：为变性的,IgG Fc,段 通常为,IgM,型,是诊断,RA,的标准之一，不是唯一标准，更非,RA,特有,作为,类风湿关节炎,（,RA,）的筛选试验有一定的价值，至少,75,的患者,RF,（）,作为血清阴性脊柱关节病区分标准。,正常人,2%,阳性，老年人可达,5%,阳性。,RF,与其他蛋白、半抗原有交叉反应。,多种结缔组织病（,SLE,，,SD,，,SS,，,PM/DM,）感染疾病（,SBE,，,TB,，,hepatitis,）,肝硬化，弥漫性肺纤维化，结节病等均可阳性。,病后半年才产生，有关节外表现者，滴度高。持续高滴度,RF,预示疾病严重，预后差。,47,抗环瓜氨酸肽（,Cyclic citrullinated peptide CCP,）抗体,抗,CCP,抗体所针对的靶抗原是,APF,、,AKA,的共同抗原决定簇，是由,19,个氨基酸残基组成的瓜氨酸多肽链，,ELISA,法检测。,抗,CCP,抗体对,RA,诊断的特异性高（,90.4%,98%,），敏感性约,80%,；,有助于,RA,的早期诊断：该抗体可先于,RA,临床表现，,90%,以上的血清抗,CCP,抗体阳性的未分类的关节炎在年内进展为,RA,。,与,RA,的活动性及预后相关,浓度高往往提示预后不佳，发生关节侵蚀的危险大。,是,RA,最好的独立参数预测指标。,48,RA,自身抗体谱及临床意义,RF60,RA,中出现，量与,RA,活动性及严重,性呈正相关，,亦在其它,CTD,出,现,抗,CCP,在,50,RA,中出现,（,聚角蛋白微丝蛋白）,特异性高，,95,AKA,（,抗角蛋白抗体）,在,40,RA,阳性,，特异性,90%,APF,（,抗核周因子）,在52,RA,阳性,，特异性,90%,抗,RA33RA,阳性率为35,抗,Sa,在部分,RA,阳性,以上抗体阳性有助于早期,RA,及不典型RA的诊断和早期开展治疗，改善预后,。,49,风湿病学中的自身抗体：结论,单单出现自身抗体并不一定是风湿性疾病。,试验结果阴性常常并不能除外某种风湿性疾病。,必须要根据临床才能作出风湿性疾病的最终诊断。,将抗体检测与临床表现结合起来，能够帮助我们鉴别这些数量众多的风湿性疾病，同时抗体的检测也有助于对疾病的活动度进行监测。,50,其它自身抗体及临床意义,胰岛细胞抗体（,ICA,),1,型糖尿病高度预测性,胰岛素自身抗体（,IAA,),1,型糖尿病,谷氨酸脱羧酶抗体（,GAD,),1,型糖尿病,抗血小板抗体,自身免疫性血小板减少症,抗红细胞抗体 溶血性贫血,51,HLA-B27,HLA,即主要组织相容性抗原，又叫人类白细胞抗原。,HLA,位于人类第,6,条染色体的短臂上，包括,A,、,B,、,C,、,D,、,DR,、,DQ,、,DP,七个位点的,164,个抗原。,HLA-B27,是,B,位点上的抗原。,辅助诊断：,强直性脊椎炎,52,HLA-B27,相关疾病,疾病,HLA-B27,阳性率,(%),强直性脊椎炎,90,银屑病性关节炎,55,沙门氏菌感染,29.7,志贺氏菌感染,20.7,耶尔森氏菌感染,17.6,淋病双球菌感染,14.0,正常人群,2,7,53,强直性脊柱炎,Ankylosing Spondylitis,，,AS,患病率：,0.3%,，,20-30,岁，男女比例,10:1,，有家族倾向；,主要侵犯：中轴关节（骶髂关节、脊柱骨突、脊柱旁软组织），可伴发外周关节及关节外表现，严重者发生脊柱畸形和关节强直。,B27,检测可作为有相关症状或高危人群,AS,早期的筛选方法！,54,HLA-B27,与,AS,HLA-B27,阴性的,AS,约,5-10%,的,AS,患者为,HLA-B27,阴性,AS,患者的,HLA-B27,阳性率达,90-95%,我国汉族人群,HLA-B27,阳性率,2-7%,（,3,千万,-1,亿），,AS,患病率为,0.3%,（,4,百万），大部分,HLA-B27,阳性者并不发生,AS,。,55,HLA-B27,检测（,ELISA),原理：应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中,HLA-B27,水平。用纯化的,B27,抗体包被微孔板，依次加入,HLA-B27,抗原（待检标本）、生物素化的抗,HLA-B27,抗体、,HRP,标记的亲和素，形成双抗体夹心反应，经过彻底洗涤后用底物,TMB,显色。,TMB,在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的,HLA-B27,呈正相关。,56,自身抗体临床检测至关重要,57,谢谢！,58,2025/8/21 周四,59,