DB3301∕T 1081-2018 三叶青种苗生产技术规程(杭州市).pdf

ICS 65.020.20B 21DB3301浙江省杭州市地方标准DB 3301/T 10812018三叶青种苗生产技术规程2018 - 06 - 20 发布2018 - 07 - 20 实施杭州市质量技术监督局发 布DB3301/T 10812018I前言本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由杭州市农业局提出并归口。本标准起草单位：杭州中泽生物科技有限公司、杭州万向职业技术学院、浙江省中药研究所、浙江大学。本标准主要起草人：陈加红、李梦君、沈晓霞、沈斌斌、吴殿星、周志丹、杨峰。DB3301/T 108120181三叶青种苗生产技术规程1范围本标准规定了三叶青种苗生产的术语定义、扦插繁殖场地选择和准备、扦插育苗、组培育苗、病虫害防治、出圃、档案管理、模式图等。本标准适用于三叶青种苗生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 3095环境空气质量标准GB 5084农田灌溉水质标准GB/T 8321 农药合理使用准则GB 15618土壤环境质量标准NY/T 1276 农药安全使用规范总则3术语和定义下列术语和定义用于本标准。3.1三叶青又名三叶崖爬藤（学名：Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg），葡萄科多年生草质藤本，块根入药。3.2母本株生长健壮，作为营养繁殖材料采集对象的三叶崖爬藤植株。3.3组培苗利用侧芽作为外植体，采用组织培养技术生产的种苗。4产地选择及准备4.1产地环境产地土壤环境应符合GB 15618规定的二级标准；空气质量应符合GB 3095规定的二级标准；灌溉水质应符合GB 5084规定的二级标准。4.2温室育苗DB3301/T 108120182扦插及组培苗移植通常选择在配备各类移动苗床的温室中进行， 如无移动苗床， 地面需覆盖园艺地布。遮光率为50%60%。4.3露地育苗露地育苗场地表面应平整无杂草， 覆盖园艺地布， 搭建荫棚， 其上覆盖遮光率为50%60%的遮阳网。5扦插育苗5.1扦插基质以70%园土+20%泥炭+10%草木灰作扦插基质， 加施基质量1.5%2.5%的腐熟有机肥或缓释肥作基肥，充分拌匀，消毒。扦插前装入50孔穴盘，压紧。5.2扦插时间3月上旬6月中旬，10月上旬11月下旬。5.3插穗选择在母本株上选择二年生健壮枝条，斜剪成2节3节、810长的插穗，上部留1叶。5.4插穗处理扦插前用甲基托布津 （70粉剂） 500倍液浸泡插穗全株1h2h,然后用IBA 500/L浸泡插穗基部1min后马上扦插。5.5扦插方法将插穗斜插入穴孔，每穴1株，入土深度为技条的1/31/2，插后压紧，浇透水。5.6插后管理5.6.1浇水扦插后35d40d生根出叶前，每天喷水（浇水）1次2次，保持基质潮湿。生根后减少浇水次数，增加单次浇水量。5.6.2保温保湿可在穴盘上方搭建小拱棚，保持60%80%的空气相对湿度和1525温度。5.6.3施肥扦插后20d，每隔15d喷施1次浓度为0.3%磷酸二氢钾肥液，一般喷施3次4次。5.6.4炼苗扦插后60d80d，视根系及枝叶生长情况，分次逐步延长通风时间、提高光照强度，最后达到栽培正常条件。6组培育苗DB3301/T 1081201836.1组培流程外植体选取外植体消毒外植体切段初代培养增殖培养生根培养炼苗组培苗移植6.2外植体的获得和处理6.2.1外植体的选取选择无病虫害、无病毒侵染的生长健壮的当年生嫩枝。6.2.2外植体的消毒将采取的外植体嫩枝，用洗涤剂水刷洗，经自然水冲洗干净。在超净工作台上，将外植体嫩枝先放入75%的乙醇溶液中浸泡10s后， 用无菌水洗净， 再放入0.1%HgCl2或2%次氯酸钠溶液中消毒10min20min后，用无菌水冲洗3次5次。6.2.3外植体的切段在超净工作台上，用火焰灭菌的解剖刀、镊子将嫩枝均匀切分成长0.8cm1.0cm的小段，每段含1个腋芽，接种于事先准备好的诱导培养基中，每瓶5株10株。芽朝上插入培养基中。6.3初代培养6.3.1初代培养基基本培养基为MS培养基。 植物激素为： 0.3 mg/L0.5mg/L浓度的苄氨基腺嘌呤 （6-BA） ；0.01mg/L0.05mg/L浓度的萘乙酸(NAA）。6.3.2培养条件培养温度为252。前期暗培养，待有芽萌发后光照强度3000lx5000lx培养，光照时间为10h/d12h/d，待组培苗生长满瓶后再增殖培养。6.4增殖培养6.4.1增殖培养基基本培养基为MS培养基。植物激素为2.0 mg/L4.0mg/L浓度的苄氨基腺嘌呤（6-BA）；0.1 mg/L0.3mg/L浓度的萘乙酸(NAA）。6.4.2培养条件培养温度为252。光照强度3000lx5000lx，光照时间为10 h/d12h/d。待组培苗生长至大于2cm后，可以将小苗切断进行生根培养。6.5生根培养6.5.1生根培养基基本培养基为1/2MS培养基。植物激素为0.5mg/L2.0mg/L浓度的吲哚丁酸（IBA）。6.5.2培养条件DB3301/T 108120184培养温度为252。光照强度3000 lx5000lx，光照时间为10 h/d12h/d。待组培苗生长至大于5cm后，可以将小苗移至温室进行炼苗。6.6炼苗移植前，将培养瓶放置在温室自然散射光下，封口炼苗3d7d。然后再开口炼苗3d7d，开口炼苗时可在培养基表面洒薄薄一层水，温度控制在253。6.7组培苗移植6.7.1基质以60%泥炭土+40%珍珠岩作移栽基质，要求疏松透气且有一定肥力。调节pH值至5.56.0。6.7.2移栽炼苗完成后，加水将培养基打散倒出，再将小苗清洗干净后，栽植于穴盘中。6.8移植后的管理6.8.1水分管理移栽时浇足水，以后每2d3d淋水一次。2周3周后，相对湿度控制在80%90%，当第一片新叶完全张开后，降低湿度至60%70%。6.8.2光照和温度管理移栽后，光照强度控制在2000lx3000lx。整个育苗期，温度宜控制在1530之间。6.8.3施肥移栽后第4周8周，每周喷施1次浓度为0.3%磷酸二氢钾肥液。7病虫害防治三叶青苗期病虫害较少，可通过降低湿度、加强通风、保持生产环境清洁等方法防治病害；可采用杀虫灯、 沾虫板、 防虫网减轻虫害。 如有必要也可采取药剂防治， 使用农药应符合NY/T 1276和GB/T 8321的规定。8出圃组培苗移栽培育80d100d，扦插苗完成炼苗后，新根5条以上，平均根长超过3，新叶3片5片以上，植株生长健壮、无病虫害、叶色翠绿即可出圃。9档案管理9.1生产单位应完整保存真实的产地环境质量资料、管理和销售记录。9.2管理和销售记录包括投入物品品种、来源、数量、购买时间和地点、使用方法、使用时间、生产管理操作时间与方法、操作人员、种苗出圃时间及销售情况等。DB3301/T 10812018510模式图三叶青种苗生产技术规程模式图参见附录A、附录B。DB3301/T 108120186附录A（资料性附录）三叶青种苗生产技术规程模式图(扦插育苗)三叶青种苗生产技术规程模式参见图A.1。图 A.1三叶青种苗生产技术规程模式图(扦插育苗)DB3301/T 108120187BA附录B（资料性附录）三叶青种苗生产技术规程模式图(组培育苗)三叶青种苗生产技术规程模式 (组培育苗)参见图B.1。图 B.1三叶青种苗生产技术规程模式图(组培育苗)DB3301/T 108120188_