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植物研究 2023，43（5）：647 656Bulletin of Botanical Research滇西北冷杉属植物结实特性及种子特征研究王丹 张中帅 曾庆银 韩学敏*（中国林业科学研究院林木遗传育种全国重点实验室，北京 100091）摘 要 探究滇西北冷杉属（Abies）植物的结实特性和种子特征及其变异模式，为促进冷杉林的更新及恢复提供材料支持和理论依据。收集滇西北分布7种冷杉的标本及球果，分析种子形态特征、种子生活力和结实特性，探究其种间及地区间差异。结果发现：滇西北7种冷杉种子的长、宽、厚分别是6.0410.22、2.033.32、1.262.24 mm，千粒质量是4.2630.50 g，千粒质量与种子长度、宽度、厚度均显著相关（r0.8，P0.8，P0.01）.The average rates of plump，empty and insect-eaten seeds of seven Abies species in Northwest Yunnan were 27.51%，4.92%and 67.58%，respectively.The rate of plump seed was low，and that of empty and insect-eaten seeds was high.Abies ernestii var.salouenensis was not further analyzed in this article due to field investigations revealing that most of them had no cone and only one tree s cones were collected in this study.For the other six species，the rate of insect-eaten seeds did not differ significantly between species（P=0.750），or between regions（P=0.204）.However，there were interspecies differences in the rate of plump seeds（P=0.005）and empty seeds（P=0.007）.There were interspecific（P=0.008）and interregional（P=0.036）differences in Abies seed viability.Therefore，seed viability of Abies was affected by both species characteristics 基金项目：国家重点研发计划项目（2022YFD2200102）；中国林业科学研究院基本科研业务费（CAFYBB2019ZY002）第一作者简介：王丹（1996），女，硕士研究生，主要从事林木基因功能研究。*通信作者：E-mail：收稿日期：2023-05-08Foundation item：National Key Research and Development Program of China（2022YFD2200102）；Fundamental Research Funds of Chinese Academy of Forestry（CAFYBB2019ZY002）First author introduction：WANG Dan（1996），female，master candidate，mainly engaged in research on gene function of forest trees.*Corresponding author：E-mail：Received date：2023-05-0843 卷植物研究and environmental factors.Key words Abies；seed characteristics；fruiting characteristics；viability种子是植物繁殖的主要手段之一，在极端恶劣的环境（冰冻、火灾、洪水、动物吞食等）下生存，通过休眠等待有利于发芽和生长的条件，完成种子萌发和植株生长1。植物种子在物理特征（大小、形状和颜色）、生物化学和生理学上均具有多样性，是植物研究的基础。种子的大小影响种子扩散、幼苗生长发育及对非生物胁迫的耐受性，继而影响后续种群的更新2-4。种子大小和数量可以被视为植物适应度的指标，因此在进化和生态学研究中具有重要意义5-6。另外，种子还可以作为分类特征，如通过48份野豌豆属（Vicia）植物种子百粒质量、种脐颜色、种皮颜色、种皮纹理等17个指标的比较，将其区分为14个种，为野豌豆属植物的分类鉴定提供依据7。石竹属（Dianthus）、白及属（Bletilla）植物种子的解剖结构也具有重要的分类学价值8-9。因此，种子特征研究具有重要的理论价值和实践指导意义。冷杉属（Abies）为松科（Pinaceae）第二大属，在全球约有50种，间断分布于北半球温带及亚热带高山地区的高海拔地带，是亚高山暗针叶林的主要建群树种，是生态屏障重要的组成部分10。冷杉可以提取树脂、提炼精油，亦是优良的纸浆材，具有重要的经济价值。冷杉属植物对所处生境的要求较高，分布常具有地理局限性，种群的种类和数量也相对较小11。据 Flora of China12记载，中国天然分布冷杉28种，含7个变种，是世界上冷杉属植物种类最丰富、分布地域最广的国家。冷杉属植物在我国 20个省份呈现由北向南的间断分布，其中横断山区分布相对较多13。滇西北横断山区是我国冷杉一个主要的多样性分布中心，冷杉种类相对较多，包括中甸冷杉（A.ferreana）、云南黄果冷杉（A.ernestii var.salouenensis）、怒江冷杉（A.nukiangensis）、急尖长苞冷杉（A.georgei var.smithii）、苍山冷杉（A.delavayi）、川滇冷杉（A.forrestii）和长苞冷杉（A.georgei）共7种冷杉12。滇西北地区整体地势自西向东南倾斜，具有高度差达3 000 m的高山和峡谷，地理环境复杂。因此滇西北地区分布的冷杉是研究冷杉种子特征及其变异模式的理想研究材料。冷杉林是我国重要的森林类型之一，不仅具有巨大的社会效益和经济效益，而且具有特殊的生态价值。然而冷杉属植物结实率、种子饱满率和萌发率较低，幼苗期和幼林期生长极缓慢，天然更新能力差，造成冷杉林植被恢复缓慢，自然更新存在严重障碍，呈现明显退化趋势14-16。为提高冷杉种苗繁育的效率，降低繁育成本，本研究对滇西北地区冷杉种子特性开展了系统研究，收集并鉴定了滇西北分布的7种冷杉及其球果，解析滇西北7种冷杉的结实特性、种子形态特征、种子生活力及其限制因素，为冷杉大量快速繁育提供材料和理论支持。1 材料与方法1.1研究材料研究材料2020年1011月在滇西北5个地点共采集52株冷杉，单株收集冷杉针叶、枝条及球果，并根据Flora of China12冷杉属检索表中描述的球果颜色、苞鳞、小枝颜色及被毛、叶形态和树脂道等分类学性状进行鉴定，采集信息如表1所示。将冷杉球果在干燥通风处悬挂晾晒约1个月，待采集到的球果开裂、种子脱落，通过100目筛子去除种鳞和苞鳞，获得冷杉种子，用于结实特性和种子特征分析。鉴于野外调查时发现大多数云南黄果冷杉均没有结实，而结实的云南黄果冷杉树高均大于 20 m，只采集到 1株树（LS048）的种子，因此仅对滇西北分布的其他6种冷杉种子的结实特性及生活力进行种间及地区间的差异分析。1.2滇西北冷杉种子形态特征和结实特性研究滇西北冷杉种子形态特征和结实特性研究通过四分法从每株冷杉的种子中随机选取30粒。使用数显式游标卡尺（分辨率为0.01 mm）测量每颗冷杉种子的长度、宽度、厚度。通过四分法从每株冷杉的种子中随机取100粒，使用电子天平测定100粒种子的总质量，重复取样并测量4次，计算种子千粒质量。通过四分法从每株冷杉的种子中随机取100粒进行解剖。解剖后种子内部有虫子的认为是虫蚀粒，种子中空的认为是空秕粒，只有内部饱满且没有虫子的种子被认为是饱满粒。统计每株冷杉上的种子的虫蚀粒数量、空秕粒数量和正常饱满粒数量，计算每株冷杉种子的虫蚀粒率、空秕粒率和饱满率。1.3滇西北冷杉种子生活力测定滇西北冷杉种子生活力测定种子生活力是指种子的发芽潜在能力或种 648王丹等：滇西北冷杉属植物结实特性及种子特征研究5 期胚所具有的生命力，一般指具有生命力种子数占种子总数的比例。种子生活力的测定采用2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法。参考 种子生活力测定原理和方法17对种子饱满率12%以上的35株冷杉的种子进行染色。染色结束后取出种胚，根据其着色部位和着色程度，依照ISTA种子检验规程18的标准图，鉴定冷杉种子生活力。1.4统计分析统计分析使用 IBM SPSS 20.0（IBM Corp，Armonk，NY，USA）软件，进行千粒质量与种子长度、宽度和厚度的线性回归分析，不同地区、不同种冷杉种子特征和结实特性的单因素方差分析和 Duncan多重比较及独立样本t检验。2 结果与分析2.1滇西北冷杉的种子形态特征分析滇西北冷杉的种子形态特征分析采集的 52 株冷杉种子数达到 500 粒，可用 于冷杉种子形态特征和结实特性的研究，52 株 冷杉种子的平均长度、宽度、厚度及千粒质量分别为 6.0410.22 mm，2.033.40 mm，1.262.24 mm，4.2630.50 g，长度、宽度、厚度及千粒质量的均值分别为7.91、2.81、1.81 mm和18.91 g。不同种、不同地理位置冷杉种子的形态特征差别很大，其中苍山冷杉 LS001 种子最小，种子长度为（6.040.59）mm，宽度为（2.030.24）mm，厚度为（1.260.18）mm；急尖长苞冷杉LS024种子最大，种子长度为（10.220.80）mm，宽度为（3.520.20）mm，厚度为（2.240.18）mm。冷杉种子千粒质量的变异也较大，苍山冷杉 LS009 种子千粒质量最小，为（4.260.17）g，而急尖长苞冷杉LS024种子千粒质量最大，为（30.500.46）g。对不同地区、不同种冷杉种子的长度、宽度、厚度及千粒质量分别进行单因素方差分析及Duncan多重比较，结果如表2所示，与其他冷杉相比，采自苍山的苍山冷杉种子长度、宽度、厚度及千粒质量，采自香格里拉小中甸镇的中甸冷杉的种子长度，以及采自云岭乡的云南黄果冷杉的种子宽度和千粒质量存在显著差异。表1样本采集信息Table 1Sample collection information物种Species苍山冷杉A.delavayi（Ade）中甸冷杉A.ferreana（Afe）中甸冷杉A.ferreana（Afe）中甸冷杉A.ferreana（Afe）川滇冷杉A.forrestii（Afo）长苞冷杉A.georgei（Ag）长苞冷杉A.georgei（Ag）长苞冷杉A.georgei（Ag）怒江冷杉A.nukiangensis（Anu）急尖长苞冷杉A.georgei var.smithii（Ags）急尖长苞冷杉A.georgei var.smithii（Ags）急尖长苞冷杉A.georgei var.smithii（Ags）云南黄果冷杉A.ernestii var.salouenensis（Aes）采集地点Location云南大理苍山（CS）Cangshan Mountain，Dali，Yunnan云南德钦县白马雪山（BMXS）Baima Snow Mountain，Deqin County，Yunnan云南香格里拉小中甸镇（XZD）Xiaozhongdian Town，Shangri La，Yunnan云南德钦县云岭乡（YLX）Yunling Township，Deqin County，Yunnan云南贡山县丙中洛镇（BZL）Bingzhongluo Town，Gongshan County，Yunnan云南德钦县白马雪山（BMXS）Baima Snow Mountain，Deqin County，Yunnan云南香格里拉小中甸镇（XZD）Xiaozhongdian Town，Shangri La，Yunnan云南德钦县云岭乡（YLX）Yunling Township，Deqin County，Yunnan云南贡山县丙中洛镇（BZL）Bingzhongluo Town，Gongshan County，Yunnan云南德钦县白马雪山（BMXS）Baima Snow Mountain，Deqin County，Yunnan云南香格里拉小中甸镇（XZD）Xiaozhongdian Town，Shangri La，Yunnan云南德钦县云岭乡（YLX）Yunling Township，Deqin County，Yunnan云南德钦县云岭乡（YLX）Yunling Township，Deqin County，Yunnan样本数量Sample size26514612610531海拔Altitude/m3 9004 0004 2004 3003 4003 6003 3003 4003 3003 4003 5003 8003 5003 6003 8003 9002 5002 7003 7004 1003 4003 6003 3003 7002 8002 90064943 卷植物研究将所有52株冷杉个体的千粒质量分别与种子长度、种子宽度和种子厚度进行线性回归分析（图1），发现相关系数分别为 0.82、0.83 和 0.83，而且 P值均小于0.01，因此千粒质量和种子长度、宽度和厚度显著相关。2.2滇西北不同地区同种冷杉种子形态特征差滇西北不同地区同种冷杉种子形态特征差异分析异分析对 采 自 香 格 里 拉 小 中 甸 镇（海 拔 3 400 3 550 m）的5株中甸冷杉和德钦县白马雪山（海拔3 7704 050 m）的6株中甸冷杉种子的长度、宽度、厚度及千粒质量进行比较分析，发现小中甸镇和白马雪山采集的中甸冷杉种子的形态差异显著（图2）。采自小中甸镇的中甸冷杉种子的长度、厚度及千粒质量分别显著大于采自德钦县白马雪山的中甸冷杉种子长度、厚度及千粒质量（P0.05），采自小中甸镇的中甸冷杉种子的宽度极显著大 于采自德钦县白马雪山的中甸冷杉种子宽度 （P0.01）。表2滇西北7种冷杉种子的形态特征分析Table 2Analysis of seed morphological characteristics of seven species of Abies in Northwest Yunnan物种SpeciesAdeAfeAfeAfeAfoAgAgAgAnuAgsAgsAgsAes采集地点LocationCSBMXXZDYLXBZLBMXXZDYLXBZLBMXXZDYLXYLX种子长度Length/mm6.060.54a7.991.18b8.500.50e7.660.69b7.420.71b8.291.17d7.940.58cd7.830.78c7.710.98bc8.221.20d8.250.98d7.720.70bc8.230.75d种子宽度Width/mm2.140.25a2.910.41c2.810.27f2.760.42de2.670.34c2.900.40de2.800.22cd2.540.52b2.870.37d2.790.48cd3.010.35ef2.690.29c3.290.28g种子厚度Thickness/mm1.330.21a1.850.27c1.680.24fg1.720.23cde1.800.47cde1.830.25def1.830.18def1.590.22b1.720.22c1.810.31cde1.870.3efg1.720.21cd1.940.28g千粒质量Thousand-grain mass/g6.391.67a16.282.65b23.014.30d22.350.62d15.881.66b21.24.26d19.980.21cd13.460.60b17.254.57bc20.194.63cd22.193.94d16.022.19b29.391.07e注：数据为平均值标准误；不同小写字母表示不同样本间差异显著（P0.05）；下同Note：The data in the table were meanstandard error；Different lowercase letters indicated significant differences among different samples（P0.05）；The same as below.图1滇西北7种冷杉种子千粒质量与种子长度（A）、宽度（B）和厚度（C）的相关性Fig.1Correlation analysis between thousand-seed weight and seed length（A），width（B），and thickness（C）of 7 species of Abies in Northwest Yunnan650王丹等：滇西北冷杉属植物结实特性及种子特征研究5 期本研究还对采自香格里拉小中甸镇（5株），德钦县白马雪山（10株）及德钦县云岭乡（3株）急尖长苞冷杉种子的长度、宽度、厚度及千粒质量进行比较分析（见图3）。结果发现只有小中甸镇分布的急尖长苞冷杉种子的宽度极显著大于云岭乡采集的急尖长苞冷杉种子的宽度（P0.01），千粒质量显著大于云岭乡采集的急尖长苞冷杉种子（P0.05）。2.3滇西北同一地区不同种冷杉种子形态特征滇西北同一地区不同种冷杉种子形态特征差异分析差异分析本研究分析了采自香格里拉小中甸镇的5株中甸冷杉与5株急尖长苞冷杉种子的长度、宽度、厚度及千粒质量的差异，结果如图4所示，中甸冷杉和急尖长苞冷杉种子的长度、宽度、厚度及千粒质量均不存在显著差异（P0.05），小中甸镇分布的2种冷杉的种子特征差异不明显。将采自德钦县白马雪山的6株中甸冷杉、6株长苞冷杉及10株急尖长苞冷杉种子的长度、宽度、厚度及千粒质量进行比较分析，结果如图5所示，中甸冷杉种子的长度显著小于长苞冷杉和急尖长苞冷杉的种子长度（P0.05），中甸冷杉种子厚度和千粒质量均显著小于长苞冷杉（P0.05）。2.4滇西北冷杉结实特性和种子生活力分析滇西北冷杉结实特性和种子生活力分析对52株7种冷杉种子进行解剖观察，发现滇西北分布冷杉的种子饱满率、虫蚀粒率和空秕粒率的平均值分别为27.51%、4.92%和67.58%，种子饱满率不高、空粒和虫粒严重。通过TTC染色法，对种子饱满率 12%以上的 35株冷杉的种子生活力进 行 测 试，结 果 发 现 种 子 生 活 力 的 27.27%100.00%，差异较大。对不同地区、不同种冷杉结图2滇西北不同地区分布的中甸冷杉的种子形态特征*表示差异显著（P0.05）；*表示差异极显著（P0.01）；下同Fig.2Seed morphological characteristics of A.ferreana distributed in different regions in Northwest YunnanP0.05 was considered as significant difference；P0.01 was considered as extremely significant difference；The same as below.图3滇西北不同地区分布的急尖长苞冷杉的种子形态特征Fig.3Seed morphologocal characteristics of A.geoegei var.smithii distributed in different regions in Northwest Yunnan65143 卷植物研究实特性及种子生活力分别进行单因素方差分析及Duncan多重比较（表 3），云岭乡采集的中甸冷杉的空秕粒率和饱满率与同地区的长苞冷杉、云南黄果冷杉差异显著，但是与同地区的急尖长苞冷杉差异不显著。小中甸镇采集中甸冷杉和急尖长苞冷杉的空秕粒率、生活力均显著高于、而饱满率显著低于白马雪山和云岭乡采集的这 2种冷杉。不同地区、不同种冷杉的虫蚀粒率均未发现显著差异。对滇西北分布6种冷杉种子的虫蚀粒率、空秕粒率、饱满率及生活力进行分析，结果发现苍山冷杉和怒江冷杉种子的虫蚀粒率最低，而长苞冷杉和急尖长苞冷杉种子的虫蚀粒率高于其他种的冷杉种子（图6A）。长苞冷杉种子的空秕粒率也是6种冷杉种子中最高的，其次是苍山冷杉的种子，中甸冷杉和川滇冷杉种子的空秕粒率是最低的（图6B）。由于长苞冷杉种子的虫蚀粒率和空秕粒率都很高，所以其种子的饱满率是 6种冷杉中最低的，而中甸冷杉种子的饱满率是6种冷杉中最高的（图6C）。将不同种冷杉种子生活力进行比较发现，川滇冷杉种子生活力高于其他5种冷杉种子生活力，怒江冷杉和中甸冷杉种子生活力仅次于川滇冷杉种子生活力，而长苞冷杉种子生活力最低（图6D）。将采自白马雪山、苍山、丙中洛镇、小中甸镇及云岭乡这5个地区的冷杉种子的虫蚀粒率、空秕粒率、饱满率及生活力进行比较分析，发现采自苍山的冷杉种子的虫蚀粒率最低，而采自小中甸镇的冷杉种子的虫蚀粒率最高（图 7A）。采自小中甸镇和苍山地区的冷杉种子的空秕粒率高于采自其他地区的冷杉种子的空秕粒率（图7B）。采自白马雪山和丙中洛镇的冷杉种子的饱满率较高，而采自小中甸镇的冷杉种子的饱满率最低（图7C）。通过对采自不同地区的冷杉种子生活力比较分析发现，采自小中甸镇的冷杉种子生活力高于采自其他地区的种子生活力，采自云岭乡的冷杉种子生活力在5个采集地区的种子生活力最低（图7D）。图5白马雪山分布冷杉种子特征Fig.5Seed characteristics of Abies distributed in Baima Snow Mountain图4小中甸镇分布冷杉种子特征Fig.4Seed characteristics of Abies distributed in Xiaozhongdian652王丹等：滇西北冷杉属植物结实特性及种子特征研究5 期表3滇西北冷杉结实特性和生活力分析Table 3Analysis of fruiting characteristics and viability of Abies in Northwest Yunnan物种SpeciesAdeAfeAfeAfeAfoAgAgAgAnuAgsAgsAgsAes地点LocationCSBMXSXZDYLXBZLBMXSXZDYLXBZLBMXSXZDYLXYLX虫蚀粒率Insect/%0.500.71a0a8.808.61a3.00a5.257.93a4.835.57a3.00a0a1.171.60a8.2012.16a6.409.97a11.3316.29a0a空秕粒率Empty/%80.009.90cde47.3310.21ab70.4015.53bcde38.00a62.7523.37abc68.6722.49bcd95.00de98.500.71e67.6718.47abcd63.9017.98abc81.4015.24cde57.338.51abc100.00e饱满率Plumpness/%19.5010.61a52.6710.21bc20.8014.86a59.00c32.0021.89abc26.5023.48ab2.00a1.500.71a31.1718.58abc27.8021.05ab12.206.54a31.3316.62abc0a生活力Viability/%67.5036.06ab73.0012.23ab85.673.51b44.00a96.504.95b54.3319.64a83.509.11b52.8319.77a85.0012.73b48.677.10a注：“”种子饱满率低，本研究没有测定其生活力Note：“”the seed plumpness rate was low，and its viability was not measured in this study图6滇西北六种冷杉的结实特性Fig.6Fruiting properties of six Abies species in Northwest Yunnan图7滇西北5个地区冷杉的结实特性Fig.7Fruiting properties of Abies species in five regions of Northwest Yunnan65343 卷植物研究另外，对滇西北地区6种冷杉的物种、采集地点与虫蚀粒率、空秕粒率、饱满率及生活力的相关性进行了多元线性回归分析，结果如表4所示，虫蚀粒率与种间及地区间差异的显著性P值分别为0.204和0.750，差异不显著；空秕粒率与种间及地区间差异的显著性P值分别为0.007和0.493，种间差异显著而分布地区差异不显著；饱满率与种间差异显著（P=0.005）而分布地区差异不显著（P=0.215）；冷杉种子生活力与种间（P=0.008）及地区间（P=0.036）均存在显著差异。3 讨论3.1滇西北冷杉种子形态特征具有丰富的多滇西北冷杉种子形态特征具有丰富的多样性样性种子的体积与形状是种子形态特征的三维表现形式，与种子的传播、持久土壤种子库和种子萌发都有一定的关系，是研究种子形态性状的重要指标之一。质量比较轻、表面积与体积比高或者具有种翅、羽毛等特殊构造的种子，可以通过风力传播2，19-20，形状扁平或细长，或有特殊钩状结构的种子，比较容易粘附到动物皮毛上，进行较远距离的传播21，而体积小、形状近圆形的种子寿命会较长，且更容易形成持久的土壤种子库22。本研究采集的冷杉种子，大多分布于滇西北地区海拔 3 000 m以上的山地，采样地多为海拔高、气温低、湿度大的地区，除云南黄果冷杉的种子是非常明显的三角形，其他冷杉种子多为长椭圆形，种子的长度、宽度、厚度及千粒质量的均值分别为7.91、2.81、1.81 mm和18.91 g，种子质量和体积较小，主要通过风力传播。同一分布区内的不同种冷杉的种子形态特征，以及不同分布区的同种冷杉种子形态特征均具有丰富的多样性。3.2滇西北冷杉种子形态特征的地理变异规律滇西北冷杉种子形态特征的地理变异规律植物生长的环境对种子形态特征也有很大的影响，研究表明植物种间种子形态存在明显的地理变异规律，种子的千粒质量、体积、厚度等性状与热量、水分因子、年均温、无霜期等条件显著相关23。罗大庆等24研究发现西藏色季拉山东坡低海拔区域急尖长苞冷杉在单果种子数量、种子千粒质量及饱满率等方面高于高海拔地区，而本研究对香格里拉小中甸镇（海拔3 4003 550 m）和德钦县白马雪山（海拔3 7704 050 m）分布的中甸冷杉种子形态特征的比较分析也发现，低海拔的小中甸镇分布的中甸冷杉种子的长度、宽度、厚度及千粒质量均显著大于高海拔的德钦县白马雪山分布的中甸冷杉（P0.1）；空秕粒率和饱满率存在种间差异（P0.1）；冷杉种子生活力存在种间（P=0.008）及地区间（P=0.036）的差异，因此生活力同时受物种特性及环境因素的影响。白马雪山分布的3种冷杉的种子特征分析发现，中甸冷杉、长苞冷杉和急尖长苞冷杉种子特征也存在差异（图6）。因此，将种子特征、结实特性和生活力与物种及当地的气候条件、地形地势等因素相结合，探究影响冷杉种子发育和萌发的关键因素，为挽救冷杉属濒危植物、促进冷杉林更新恢复提供材料和理论支持。参考文献1 BEWLEY J D，BRADFORD K J，HILHORST H W M，et al.Seeds：Physiology of development，germination and dormancy M.3rd ed.New York：Springer，2013：133-179.2 HOWE H F，SMALLWOOD J.Ecology of seed dispersalJ.Annual Review of Ecology and Systematics，1982，13：201-228.3 WESTOBY M，JURADO E，LEISHMAN M.Comparative evolutionary ecology of seed size J.Trends in Ecology&Evolution，1992，7（11）：368-372.4 WESTOBY M，LEISHMAN M，LORD J.Comparative ecology of seed size and dispersal J.Philosophical Transactions of the Royal Society of London.Series B：Biological Sciences，1996，351（1345）：1309-1318.5 MORALES A，TEAPAL J，AMMERLAAN J M H，et al.A high throughput method for quantifying number and size distribution of Arabidopsis seeds using large particle flow cytometry J.Plant Methods，2020，16（1）：27.6 LARIOS E，VENABLE D L.Selection for seed size：The unexpected effects of water availability and density J.Functional Ecology，2018，32（9）：2216-2224.7 刘博文，黎桂阳，常媛飞，等.野豌豆属种子形态多样性与种子分类鉴定方法的研究 J.草地学报，2021，29（7）：1375-1385.LIU B W，LI G Y，CHANG Y F，et al.Study on seed morphological diversity and seed classification and identification method of Vicia J.Acta Agrestia Sinica，2021，29（7）：1375-1385.8 董连新，关雪莲.石竹属种子形态及其分类学意义 J.植物研究，2010，30（3）：257-261.DONG L X，GUAN X L.Seed morphology of Dianthus and its significance for taxonomy J.Bulletin of Botanical Research，2010，30（3）：257-261.9 王明君，张雅琼，黄莉，等.白及属4个种种子形态特征的电镜扫描分析 J.分子植物育种，2017，15（11）：4659-4666.WANG M J，ZHANG Y Q，HUANG L，et al.Electron microscopic scanning analysis of the morphological characteristics of seeds from four species in Bletilla J.Molecular Plant Breeding，2017，15（11）：4659-4666.10 FARJON A，Rushforth K D.A classification of Abies Miller（Pinaceae）J.Notes from the Royal Botanic Garden，Edinburgh，1989，46（1）：59-79.11 向巧萍，于永福.中国冷杉属的保护植物 J.植物杂志，1999（5）：1.XIANG Q P，YU Y F.Conservation plants of Abies in China J.Plants，1999（5）：1.12 FU L G，LI N，Mill R R.Pinaceae M/WU Z Y，RAVEN P H.Flora of China：Vol.4.Beijing：Science Press，1999：11-52.13 向小果，曹明，周浙昆.松科冷杉属植物的化石历史和现代分布 J.云南植物研究，2006，28（5）：439-452.XIANG X G，CAO M，ZHOU Z K.Fossil history and modern distribution of the genus Abies（Pinaceae）J.Acta Botanica Yunnanica，2006，28（5）：439-452.14 赖江山，李庆梅，谢宗强.濒危植物秦岭冷杉种子萌发特性的研究 J.植物生态学报，2003，27（5）：661-666.LAI J S，LI Q M，XIE Z Q.Seed germinating characteristics of the endangered plant Abies chensiensis J.Chinese Journal of Plant Ecology，2003，27（5）：661-666.15 李庆梅.秦巴山地两种冷杉种实特性研究与秦岭冷杉濒危原因探讨 D.北京：北京林业大学，2008.LI Q M.Characteristics of cones and seeds of two firs in the Qinling-Daba mountains and endangering causes for Abies chensiensis D.Beijing：Beijing Forestry University，2008.16 唐润琴，李先琨，欧祖兰，等.濒危植物元宝山冷杉结实特性与种子繁殖力初探 J.植物研究，2001，21（3）：403-408.TANG R Q，LI X K，OU Z L，et al.The fruiting characteristics and reproductive capacity of seeds of Abies Yuanbaoshanensis J.Bulletin of Botanical Research，2001，21（3）：403-408.17 胡晋.种子生活力测定原理和方法 M.北京：中国农业出版社，2009：23-28.HU J.Principles and methods of seed viability determination M.Beijing：China Agricultural Machinery Press，65543 卷植物研究2009：23-28.18 国际种子检验协会.1985国际种子检验规程 M.颜启传，毕辛华，译.北京：农业出版社，1985：249-253.International Seed Testing Association（ISTA）.1985 International rules for seed testing M.YAN Q C，BI X H，Trans.Beijing：Agricultural Publishing House，1985：249-253.19 潘燕，王帅，王崇云，等.云南松与云南油杉种子风力传播特征比较 J.植物分类与资源学报，2014，36（3）：403-410.PAN Y，WANG S，WANG C Y，et al.Comparison of seed weed-dispersed characteristics between Pinus yunnanensis and Keteleeria evelyniana J.Plant Diversity