肿瘤的生物治疗.ppt

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,.,*,单击此处编辑母版标题样式,恶性,肿瘤的免疫,和基因,治疗,复旦大学附属肿瘤医院,肿瘤内科 李 进,Edward Jenner,现代免疫学奠基人,牛痘的发明者(1796),细胞免疫的基本概念,Tumor cell,为什么肿瘤细胞能够逃避机体的免疫监控？,肿瘤细胞合成免疫抑制因子,癌细胞表面缺乏,MHC II,分子,肿瘤细胞低表达MHC I分子,由于缺乏第二信号导致免疫耐受,机体的免疫监视功能低下,(,抗原递呈效率下降）,肿瘤免疫反应,免疫系统能够识别肿瘤抗原并产生免疫反应。,体液免疫在肿瘤病人普遍存在，但不起主要作用。,细胞免疫:杀伤性,T,细胞,(,CD8+),辅助性,T,细胞,(,CD4+),。,免疫治疗的主要分类,非特异性主动免疫治疗,细胞因子（白介素,2,，干扰素，肿瘤坏死因子）,胞壁佳,短小棒状杆菌,卡介苗,高聚金葡素,单克隆抗体,(,美罗华、赫赛叮、西妥昔、贝伐）,过继免疫治疗,(,TIL,细胞、,CIK,细胞、,LAK,细胞,),特异性主动免疫治疗,核酸疫苗(,DNA,RNA),肿瘤细胞疫苗,抗原蛋白疫苗或多肽疫苗（包括基因重组蛋白）,树突状细胞疫苗,免疫治疗的主要分类,干扰素,用法：,300-900,万单位，每周,2-3,次，连续使用,8,周,抑制肿瘤细胞的增殖；,诱导,NK,细胞,、CTL,，并协同,IL-2,增强,LAK,的活性；诱导肿瘤细胞表达,MHC-,类抗原，增加对杀伤细,胞的敏感性。,适应症：,联合化疗治疗,毛细胞白血病、多发性骨髓瘤、肾癌、恶性黑色素瘤和淋巴瘤的治疗有效。,白介素-2,用法：,40-80,万单位，每周,2-3,次,皮下或局部注射,特点：,对恶性黑色素瘤、肾癌有效,有效率大约在20%左右,对其它恶性肿瘤的治疗效果不明显。,局部应用比全身应用效果好,。,腹腔灌注,IL-2,治疗卵巢癌（,II,期临床）,方法：,IL-2 60,万单位/,m,2,1/,周 共十六周,病人：,泰素、顺铂抗拒的卵巢癌病人,31,例,副作用：,可耐受，无,IL-2,相关的3/4级毒性,结果：,24 可评价病人中,4 CR,2 PR,7 SD,11 PD,总有效率 25.0%,R.P.Edwards,et al ASCO2003,肿瘤坏死因子,用法：,100-400,万单位，每周,2-3,次,肌肉或局部注射,特点：,野生型有严重的毒副作用,国内改构型已上市,联合化疗对肺癌和淋巴瘤可提高疗效,真正的临床应用价值还有待进一步评价。,单克隆抗体,又称之为生物导弹技术，通过补体系统和自然杀伤细胞起抗肿瘤作用。,嵌合型单抗达到95以上,人源化,减少了免疫原性,美罗华治疗恶性淋巴瘤,赫赛汀治疗乳癌，联合,化疗增强疗效,单克隆抗体,贝伐是针对,VEGF,的单克隆抗体,除了对肿瘤细胞的杀伤作用外,还可以封闭血管内皮生长因子。,西妥昔是针对,EGFR,的单克隆抗体，抑制细胞信号传导通路，通过补体和细胞依赖的免疫反应杀伤肿瘤,单抗也可以与同位素或毒素耦联，通过靶向作用将放射性同位素或细菌毒素聚集肿瘤组织内，达到抗肿瘤目的。,MAb Name,Trade Name,Used to Treat:,Approved in:,Rituximab,Rituxan,Non-Hodgkin lymphoma,1997,Trastuzumab,Herceptin,Breast cancer,1998,Gemtuzumab ozogamicin,*,Mylotarg,Acute myelogenous leukemia,(AML),2000,Alemtuzumab,Campath,Chronic lymphocytic leukemia(CLL),2001,Ibritumomab tiuxetan*,Zevalin,Non-Hodgkin lymphoma,2002,Tositumomab*,Bexxar,Non-Hodgkin lymphoma,2003,Cetuximab,Erbitux,Colorectal cancer,2004,Bevacizumab,Avastin,Colorectal cancer,2004,*,conjugated monoclonal antibodies,美国,FDA,批准的单克隆抗体,过继免疫治疗,Rosenberg,八十年代首创了,LAK,细胞，,TIL,取自浸润淋巴细胞,在,LAK,细胞的基础上得到进一步提高,迄今为止在临床上应用最为广泛的过继免疫治疗,特点：,繁琐的制备过程和严重的副作用限制了临床上推广,治疗疗效有限,CD,3,AK,和,CIK,的问世没有产生新的局面,对恶性黑色素瘤、肾癌、癌性胸腹水的治疗效果比较好,特异性主动免疫治疗肿瘤疫苗,细胞瘤苗,：最常采用转基因肿瘤制备；,分子疫苗：,单独的分子抗原性弱，需要佐剂；,多肽疫苗：,8-10个氨基酸的多肽是,T,细胞识别的基础；,重组蛋白疫苗：,与细胞因子、毒素等重组形成融合蛋；,病毒疫苗：,用病毒作为载体进行蛋白的表达；,树突状细胞疫苗,：抗原需要被提呈并致敏原始,T-,淋巴细胞，需要树突状细胞,，,是获得有效免疫反应的关键。,体内最强大抗原递呈细胞,树突状细胞,树突状细胞的分离培养激活,血细胞分离,细胞培养,抗原冲击,细胞回输,树突状细胞对抗原的递呈,MHC I,途径,激活,CD8,T,细胞,MHC II,途径,激活,CD4,T,细胞,外源性蛋白,内源性蛋白,抗原冲击,DC,治疗乳腺癌（,I/II,期临床）,病人：,高表达,HER2,的转移性乳腺癌病人 16例,方法：,HER500,冲击的自体,APC 2,10,8,to 5,10,9,，,二周一次，共三次。,副作用：,主要为寒战和发热，没有,级的毒副反应,结果：,12,个可评价的病人 1例,PR,结论：,HER500,冲击的自体,DC,使用安全，有一定,疗效，但效率仍不够高。,J.W.Kylstra,et al.ASCO2003,CEA,病毒感染的,DC（I,期临床）,方法：,表达,CEA,禽痘病毒感染的,DC,（,5,10,6,），,每周二,次，一个月一个疗程，,1,3,疗程,病例数：,6,个病人,副作用：,没有明显的毒副作用,结果：,一个病人,CEA,水平从,46,降低到,6.8，,并有锁骨上,淋巴结的部分退缩。,5/6,个病人外周血淋巴细胞,对,CEA,表达的载体有增殖反应。,M.A.Morse,ASCO 2003,细胞溶解物冲击的,DC（I/II,期临床）,病人：,转移性肾癌 15例,方法：,肿瘤细胞溶解物冲击的,DC 3.95,10,6,淋巴结内注射,副作用：,无明显的毒副作用,结果：,7例进展，7例稳定，1例部分退缩,(14.4,10,6,),结论：,肿瘤细胞溶解物冲击的,DC，,即使在有大负荷肿瘤时,也有效，在大剂量使用时更有效，无毒副作用。,Marten A,et al.Cancer Immunol Immunother.2002;51:637-44,蛋白分子靶向疫苗的优势,特异性与,DC,结合与病毒体外激活具同样效率。,费用低廉，可大规模生产，制作比病毒更简单。,为重组蛋白，不存在安全性问题。,皮下给药，使用方便。,可重复使用。,热休克蛋白疫苗临床试验,III,期：,肾癌,恶性黑色素瘤,全球有,150,医学中心在收集病例进行肿瘤抗原热休克蛋白复合物疫苗临床实验,I,、,II,期：,慢性髓性白血病,淋巴瘤,胰腺癌,胃癌、大肠癌,DCs,疫苗,对恶性黑色素瘤和肾癌，总有效率大约在,30-40,；,其它肿瘤方面有效率在,10-30,左右；,是所有方案中比较理想的疫苗；,需要很高的技术要求，离推广应用还有一段距离；,目标是预防术后复发，使40%的病人得到根治。,免疫治疗的临床地位,免疫治疗是最有前途的抗肿瘤手 段之一,目前尚未起主导作用,定位于手术、放化疗后清除残留病灶,目标是,预防复发,关键是抗原在体内有效地被递呈并激,活,T,淋巴细胞,基因治疗,(Gene therapy),用正常基因校正或置换致病基因,过程是将目的基因导入到靶细胞内并使之表达,目标是直接或间接消灭肿瘤细胞,概念的扩展：采用分子生物学的方法和原理，在核酸水平上开展的疾病治疗方法都可称为基因治疗。,基因治疗策略,基因增补,（,Gene augmentation,）又称基因修饰，目的基因的表达产物能修饰或加强缺陷细胞的功能,基因灭活,（,Gene inactivation,）：利用,反义核酸技术,或,核酶,特异地封闭基因表达或降解转录产物,前体药转换,（,Prodrug acitvation,）：采用给予前体药物的方法减少化疗药物对正常细胞的损伤。,基因治疗的途径,体外途径,：安全，但操作烦琐，设备要求比较高,体内途径,：基因导入所使用的载体的安全性需要进行复杂的论证。,自杀基因治疗,HSV-TK/GCV,系统,tk,基因多为单纯疱疹病毒（,HSV,）和水痘疱疹病毒（,VZV,）中的胸苷激酶基因。,毒性效应来自于,GCV,磷酸化,其通过抑制,DNA,聚合酶的活性，阻断,DNA,的合成,VZV-TK,激酶能将,6,甲氧嘌呤阿拉伯糖苷（,ara-M,）转化为,6,甲氧嘌呤阿糖苷腺苷三磷酸（,ara-MTP,）,CD-5-FC,系统,人及其他哺乳动物中不表达,CD,酶可将胞嘧啶脱氨基转变为尿嘧啶,高剂量的,5-FC,在体内转变为,5-FU,从而将细胞杀伤作用。,自杀基因治疗的缺点,只对处于分裂期的肿瘤细胞有杀伤作用,而瘤体内有相当数量的细胞群体处于非增殖分裂状态。,肿瘤细胞的异质性使得有些细胞克隆对自杀基因系统的敏感性不同。,基因转移的效率还很低，无法使所有的肿瘤细胞均能被导入相应的目的基因。,某些肿瘤特异的表达元件的活性较低，不足以表达足够的自杀基因产物。,复制型病毒治疗,利用病毒在肿瘤细胞内的增殖作用裂解肿瘤细胞,已经取得了可喜的进步,特异性启动子使病毒靶向性复制,主要方式：,单纯疱疹病毒,和,腺病毒,基因治疗的临床定位,载体或病毒的转染效率应得到进一步提高。,减少免疫原性，避免被体内免疫系统清除。,基因治疗的安全性仍然受到关注。,除了溶瘤病毒外,其它基因治疗在临床上的实用性还有待提高。,直接肿瘤基因治疗有着良好的应用前景。,西妥昔,-,联合一线方案,治疗转移性结直肠癌,西妥昔,+,FOLFOX4,1,西妥昔,+,IFL,2,西妥昔,+,FOLFIRI,3,西妥昔,+,FUFIRI,4,可评价病人,42,25,22,19,RR(CR+PR),81%,44%,46%,74%,(,CR+PR+SD),98%,N/A,87%,N/A,M TTP(,月),N/A,N/A,10.9,N/A,1,Tabernero,et al.ASCO 2004,Abstract 3512(updated data from ASCO presentation).,2,Rosenberg AH,et al.ASCO 2002,Abstract 536.,3,Rougier,et al.ASCO 2004,Abstract 3513.,4,Folprecht,et al.EORTC 2004,Abstract 300.,黑暗依然笼罩大地，但我们已经看到了曙光。生物治疗就,象那东升的旭日，将给人类带来无限光明。,谢谢！,关爱健康，关爱生命是我们共同的奋斗目标！,fudanlijin,