血清中的总蛋白测定.ppt

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,血清总蛋白测定,总蛋白简介,血清蛋白质是各种蛋白的复杂混合物。可利用不同的方法将其分离。血浆中的白蛋白、,a1,、,a2,、,球蛋白，纤维蛋白原，凝血酶原和其它凝血因子等均由肝细胞合成。,球蛋白主要来自浆细胞。当肝脏发生病变时，肝细胞合成蛋白质的功能减退，血浆中蛋白质即会发生质和量的变化。临床上用各种方法检测,血浆蛋白,的含量来协助诊断肝脏疾患，并作为疗效观察，预后判断的指标。,测定原理,原理：血清,(,浆,),中蛋白质的肽键,(-CO-NH-),在碱性溶液中能与,2,价铜离子作用生成稳定的紫红色络合物。此反应和,2,个尿素分子缩合后生成的双缩脲,(H2N-OC-NH-CO-NH2),在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应相似，故称之为双缩脲反应。这种紫红色络合物在,540nm,处有明显吸收峰，吸光度在一定范围内与血清蛋白含量呈正比关系，经与同样处理的蛋白质标准液比较，即可求得蛋白质含量。,标本要求,血清或血浆（肝素或,EDTA,）抗凝,血清标本贮存在,2-8,稳定三天，,-20,稳定六个月。,临床意义,1.,总蛋白升高,2.,总蛋白降低,血清总蛋白增高：,(1),血液浓缩，导致总蛋白浓度相对增高：见于严重腹泻、呕吐、高热时急剧失水，血清总蛋白浓度可明显升高。休克时，由于毛细血管通透性增加，血液中水分渗出血管。血液可发生浓缩，慢性肾上腺皮质功能减退的患者，由于丢失钠的同时伴随水的丢失，血浆也可出现浓缩现象。,(2),血浆蛋白质合成增加：主要见于球蛋白合成增加，多发性骨髓瘤患者、巨球蛋白症、系统性红斑狼疮等。,血清总蛋白降低：,(3),蛋白质合成障碍：如慢性肝炎、急性干细胞坏死、肝硬化等。,(5),摄人不足和消耗增加：食物中长期缺乏蛋白质或慢性胃肠道疾病所引起的消化吸收不良，因患消耗性疾病，如大失血、严重结核病、甲状腺功能亢进、肾病综合征、长期营养不良、恶性肿瘤等，均可造成血清蛋白浓度降低。,(6),蛋白质丢失：严重烧伤时大量血浆渗出，大量失血，肾病综合征时大量蛋白尿，溃疡性结肠炎时肠道长期丢失一定量的蛋白质，这些病理改变均可使血清总蛋白浓度降低。,注意事项,1.,黄疸血清，严重溶血，葡萄糖，酚酞及溴磺酞钠对本法有明显干扰，故用标本空白管来消除。但如标本空白管吸光度太高，可影响测定的准确度。,(4),血液稀释，导致总蛋白浓度相对降低：如静脉注射过多低渗溶液或因各种原因引起的钠、水潴留。,注意事项,血清总蛋白生理性波动。直立体位由于体液分布原因，血液相对浓缩，而长久卧床者血液较直立体位稀。因此长久卧床者血清总蛋白比直立活动时约低,3,5g/L,。新生儿血清总蛋白可比成人低,5,8g/L,。,60,岁以上的老年人约比成人低,2g/L,。,评价,1.,双缩脲显色反应仅和蛋白质中肽键数成正比关系，与蛋白质的种类、分子量及氨基酸的组成无明显关系，各种蛋白质的显色程度基本相同。,本法重复性好，,RCV,为,4%,，,CCV,为,3.9%,；线性范围为,0,140g/L,；本法干扰少，并且大多可以避免；使用单一的稳定试剂，操作简便、快速，既适于手工操作，也便于自动化分析，已被推荐为测定血清总蛋白的参考方法。,唯一的缺点是灵敏度较低，但本法的检出限为,0.2,1.7g/L,，已能满足临床生化检验的需要。,