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第一章 蛋白质
一、单选题
1．有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pI分别为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3。电泳时欲使其中4种泳向正极，缓冲液的pH应当是 (D)
A．5.0 B．4.0 C．6.0 D．7.0 E．8.0
2．下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时最先被洗脱的是 (B)
A．血清清蛋白(分子量68 500) B．马肝过氧化物酶(分子量247 500)
C．肌红蛋白(分子量16 900) D．牛胰岛素(分子量5 700)
E．牛β乳球蛋白(分子量35000)
3．蛋白质分子引起280nm光吸取的最重要成分是 (D)
A．肽键
B．半胱氨酸的-SH基
C．苯丙氨酸的苯环
D．色氨酸的吲哚环
E．组氨酸的咪唑环
4．含芳香环的氨基酸是 (B)
A．Lys B．Tyr C．Val D．Ile E．Asp
5．下列各类氨基酸中不含必需氨基酸的是 (A)
A．酸性氨基酸 B．含硫氨基酸 C．支链氨基酸
D．芳香族氨基酸 E．碱性氨基
6．变性蛋白质的特点是 (B)
A．黏度下降 B．丧失原有的生物活性 C．颜色反映减弱
D．溶解度增长 E．不易被胃蛋白酶水解
7．蛋白质变性是由于 (B)
A．蛋白质一级结构改变 B．蛋白质空间构象的改变
C．辅基的脱落 D．蛋白质水解
E．以上都不是
8．以下哪一种氨基酸不具有不对称碳原子 (A)
A．甘氨酸 B．丝氨酸 C．半胱氨酸 D．苏氨酸 E．丙氨酸
9．下列有关蛋白质β折叠结构的叙述对的的是（E）
A．β折叠结构为二级结构　　
B．肽单元折叠成锯齿状　
C．β折叠结构的肽链较伸展
D．若干肽链骨架平行或反平行排列，链间靠氢键维系　
E．以上都对的
10．可用于蛋白质定量的测定方法有（B）
A．盐析法　　B．紫外吸取法　　C．层析法　　D．透析法　　E．以上都可以
11．镰状红细胞贫血病患者未发生改变的是（E）
A．Hb的一级结构　　B．Hb的基因　　C．Hb的空间结构
D．红细胞形态　　　 E．Hb的辅基结构
12．维系蛋白质一级结构的化学键是（B）
A．氢键 B．肽键 C．盐键 D．疏水键 E．范德华力
13．天然蛋白质中不存在的氨基酸是（B）
A．半胱氨酸 B．瓜氨酸 C．羟脯氨酸 D．蛋氨酸 E．丝氨酸
14．蛋白质多肽链书写方向是（D）
A．从3¢ 端到5¢ 端 B．从5¢ ¢端到3¢ 端 C．从C端到N端
D．从N端到C端 E．以上都不是
15．血浆蛋白质的pI大多为pH5～6，它们在血液中的重要存在形式是（B）
A．兼性离子　B．带负电荷　 C．带正电荷　 D．非极性分子　 E．疏水分子
16．蛋白质分子中的α螺旋和β片层都属于（B）
A．一级结构　　B．二级结构　　C．三级结构　　D．域结构　　E．四级结构
17．α螺旋每上升一圈相称于氨基酸残基的个数是（B）
A．4.5　　B．3.6　　C．3.0　　D．2.7　　E．2.5
18．下列具有两个羧基的氨基酸是（E）
A．缬氨酸　　B．色氨酸　　C．赖氨酸　　D．甘氨酸　　E．谷氨酸
19．组成蛋白质的基本单位是（A）
A．L-α-氨基酸 　 B．D-α-氨基酸 C．L，β-氨基酸
D．L，D-α氨基酸　 E．D-β-氨基酸
20．维持蛋白质二级结构的重要化学键是（D）
A．疏水键 B．盐键 C．肽键 D．氢键 E．二硫键
21．蛋白质分子的β转角属于蛋白质的（B）
A．一级结构 B．二级结构 C．结构域 D．三级结构 E．四级结构
22．关于蛋白质分子三级结构的描述错误的是（A）
A．具有三级结构的多肽链都具有生物学活性
B．天然蛋白质分子均有这种结构
C．三级结构的稳定性重要由次级键维系
D．亲水基团多聚集在三级结构的表面
E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸序列
23．有关血红蛋白(Hb)和肌红蛋白(Mb)的叙述不对的的是（D）
A．都可以与氧结合　 B．Hb和Mb都含铁　
C．都是含辅基的结合蛋白 D．都具有四级结构形式　
E．都属于色蛋白类
24．具有四级结构的蛋白质特性是（E）
A．分子中必然具有辅基
B．四级结构在三级结构的基础上，多肽链进一步折叠、盘曲形成
C．依赖肽键维系四级结构的稳定性
D．每条多肽链都具有独立的生物学活性
E．由两条或两条以上的多肽链组成
25．关于蛋白质的四级结构对的的是（E）
A．一定有多个不同的亚基　　
B．一定有多个相同的亚基
C．一定有种类相同，而数目不同的亚基数　　
D．一定有种类不同，而数目相同的亚基
E．亚基的种类，数目都不一定相同
26．蛋白质的一级结构及高级结构决定于（C）
A． 亚基　　B．分子中盐键　　C．氨基酸组成和顺序　
D．分子内部疏水键　　E．分子中氢
27．蛋白质形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定（E）
A．溶液pH大于pI　　 B．溶液pH小于pI　
　C．溶液PH等于pI D．在水溶液中　　
E．溶液pH等于7.4
28．蛋白质的等电点是（E）
A．蛋白质溶液的pH等于7时溶液的pH
B．蛋白质溶液的PH等于7.4时溶液的pH
C．蛋白质分子呈负离子状态时溶液的pH
D．蛋白质分子呈正离子状态时溶液的pH
E．蛋白质的正电荷与负电荷相等时溶液的pＨ
29．蛋白质溶液的重要稳定因素是（C）
A．蛋白质溶液的黏度大　　
B．蛋白质在溶液中有“布朗运动”
C．蛋白质分子表面带有水化膜和同种电荷　　
D．蛋白质溶液有分子扩散现象
E．蛋白质分子带有电荷
30．蛋白质分子中存在的含巯基氨基酸是（C）
A．亮氨酸 B．胱氨酸 C．蛋氨酸 D．半胱氨酸 E．苏氨酸
31．维持血浆胶体渗透压的重要蛋白质是（A）
A．清蛋白 B．αl球蛋白 C．β球蛋白 D．γ球蛋白 E．纤维蛋白原
32．血清在饱和硫酸铵状态下析出的蛋白质是（D）
A．纤维蛋白原 B．球蛋白 C．拟球蛋白 D．清蛋白 E．β球蛋白
33．胰岛素分子A链与B链交联是靠（D）
A．疏水键 　 B．盐键 　C．氢键 　 D．二硫键 　 E．范德华力
34．蛋白质中含量恒定的元素是（A）
A．N 　 B．C 　C．O 　 D．H 　 E．Fe
35. 下列哪项与蛋白质的变性无关？（A）
A. 肽键断裂 B．氢键被破坏
C．离子键被破坏 D．疏水键被破坏
36. 氨基酸在等电点时具有的特点是：（E）
A．不带正电荷 B．不带负电荷
C．A和B D．溶解度最大
E．在电场中不泳动
37. 在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链？（D）
A．凯氏定氮法 B．双缩尿反映 C．紫外吸取法 D．茚三酮法
二、多选题
1．关于蛋白质的组成对的的有（ABCD）
A．由C，H，O，N等多种元素组成 B．含氮量约为16％
C．可水解成肽或氨基酸 D．由α-氨基酸组成 E．含磷量约为10％
2．蛋白质在280nm波长处的最大光吸取是由下列哪些结构引起的（BC）
A．半胱氨酸的巯基 B．酪氨酸的酚基 C．色氨酸的吲哚基
D．组氨酸的异吡唑基 E．精氨酸的胍基
3．关于蛋白质中的肽键哪些叙述是对的的（ABC）
A．比一般C—N单键短
B．具有部分双键性质
C．与肽键相连的氢原子和氧原子呈反式结构
D．肽键可自由旋转
E．比一般C—N单键长
4．谷胱甘肽（BCE）
A．是一种低分子量蛋白质 B．在氨基酸吸取过程中起作用
C．可进行氧化还原反映 D．由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸组成
E．其还原型有活性
5．蛋白质的α螺旋结构（ACD）
A．多肽链主链骨架＞C=O基氧原子与＞N－H基氢原子形成氢键
B．脯氨酸和甘氨酸对α螺旋的形成无影响
C．为右手螺旋　　
D．每隔3.6个氨基酸残基上升一圈
E．侧链R基团出现在螺旋圈内
6．关于蛋白质结构的叙述对的的有（ABCD）
A．蛋白质的一级结构是空间结构的基础
B．亲水氨基酸侧链伸向蛋白质分子的表面
C．蛋白质的空间结构由次级键维持
D．有的蛋白质有多个不同结构和功能的结构域
E．所有蛋白质都有一、二、三、四级结构
7．关于蛋白质变性的叙述哪些是对的的（BD）
A． 尿素引起蛋白质变性是由于特定的肽键断裂
B．变性是由于二硫键和非共价键破坏引起的
C．变性都是可逆的
D．变性蛋白质的理化性质发生改变
E．变性蛋白质的空间结构并无改变
8．下列哪些蛋白质具有铁（ABCD）
A．细胞色素氧化酶 B．肌红蛋白 C．血红蛋白 D．过氧化酶 E．卵清蛋白
9．下列哪些方法基于蛋白质的带电性质（AC）
A．电泳 B．透析和超滤 C．离子互换层析 D．凝胶过滤 E．超速离心
10．蛋白质的α螺旋结构十分牢固，但假如在多肽链中出现下列哪些情况，将会妨碍α螺旋形成？（ABC）
A．连续的天冬氨酸　　 B．连续的碱性氨基酸 C．脯氨酸 　
D．丙氨酸　　 E．苏氨酸
11．已知卵清蛋白pI=4.6，β乳球蛋白pI=5.2，糜蛋白酶原pI=9.1，上述蛋白质在电场中的移动情况为（BC）
A．缓冲液pH为7.0时，糜蛋白酶原向阳极移动，其他两种向阴极移动
B．缓冲液pH为5.0时，卵清蛋白向阳极移动，其他两种向阴极移动
C．缓冲液pH为9.1时，糜蛋白酶原在原地不动，其他两种向阳极移动
D．缓冲液pH为5.2时，β乳球蛋白在原地不动，卵清蛋白向阴极移动，糜蛋白酶原移向阳极
E．缓冲液pH为5.0时，卵清蛋白向阴极移动，其他两种向阳极移动
12．蛋白质处在pH等于其pI的溶液时，蛋白质分子解离状态可为（AB）
A．蛋白质分子解离为正、负离子的趋势相等，为兼性离子
B．蛋白质的净电荷为零　　　
C．具有相等量的正离子和负离子
D．蛋白质分子处在不解离状态　　　
E．蛋白质分子解离带同一种电荷
13．组成人体蛋白质的氨基酸（AD）
A．都是α-氨基酸 B．都是β-氨基酸
C．除甘氨酸外都是D系氨基酸 D．除甘氨酸外都是L系氨基酸
E．L系和D系氨基酸各半
14．属于蛋白质二级结构的有（ABCE）
A．α螺旋　　B．β折叠　　C．β转角　　D．亚基　　E．无规卷曲
15．含羟基的氨基酸有（ABD）
A．苏氨酸　B．丝氨酸　C．赖氨酸　D．酪氨酸　E．半胱氨酸

三、填空题
1. 组成蛋白质的元素有_______、______、______、______。含量恒定的元素是______其平均含量为______。【C、H、O、N；N；16%】
2. 酸性氨基酸基酸有______、______；碱性氨基酸有______、______、______。含巯基的氨基酸是______。【谷氨酸、天冬氨酸；精氨酸、赖氨酸、组氨酸；半胱氨酸】
3. 蛋白质的二级结构形式有______、______、______、______。【α-螺旋、β-折叠、β-转角、无规卷曲】
4. 维持蛋白质空间构象的非共价键有______、______、______、______。【疏水作用、盐键、氢键、Van der Waals力）】
5. 分离纯化蛋白质的方法有______、______、______、______、______等。【透析、超滤、盐析、有机溶剂沉淀、层析、电泳、超速离心等任填】
6. 在蛋白质分子中，一个氨基酸的α碳原子上的________与另一个氨基酸α碳原子上的________脱去一分子水形成的键叫________，它是蛋白质分子中的基本结构键。
7. 蛋白质颗粒表面的_________和_________是蛋白质亲水胶体稳定的两个因素。【电荷层 水化膜】
8. 蛋白质变性重要是由于破坏了维持和稳定其空间构象的各种_________键，使天然蛋白质原有的________与________性质改变。【次级键 物理化学 生物学】
9. 按照分子形状分类，蛋白质分子形状的长短轴之比小于10的称为_______，蛋白质分子形状的长短轴之比大于10的称为_________。按照组成分分类，分子组成中仅含氨基酸的称_______，分子组成中除了蛋白质部分还分非蛋白质部分的称_________，其中非蛋白质部分称_________。【球状蛋白质 纤维状蛋白质 单纯蛋白质 结合蛋白质 辅基】
10.蛋白质具有两性电离性质，大多数在酸性溶液中带________电荷，在碱性溶液中带_______电荷。当蛋白质处在某一pH值溶液中时，它所带的正负电荷数相待，此时的蛋白质成为 _________，该溶液的pH值称为蛋白质的__________。【正 负 两性离子（兼性离子） 等电点】
四、名词解释题
1. 蛋白质的等电点(isoelectric point of protein)：
【蛋白质所带正负电荷相等时的溶液pH值。】
2. 蛋白质的二级结构(secondary structure of protein)
【蛋白质多肽链局部主链原子的空间排布】
3. 变构效应(allosteric effect)
【效应剂与蛋白质结合引起蛋白质构象改变的同时蛋白质功能发生改变的现象。】
4. 协同效应(cooperative effect)
【一亚基结合配体后影响该寡聚体另一亚基与配体的结合能力。】
5. 蛋白质的变性作用(denaturation of protein)
【在某些理化因素作用下，蛋白质的空间结构破坏，理化性质改变，生物活性丧失。】
6. 亚基(subunit)
【寡聚蛋白中独立具有三级结构的多肽链。】
7. 结构域(domain)
【分子量大的蛋白中具有1到数个具有一定功能的结构紧密区。】
8. 模体(motif)
【某些蛋白质分子中，2到3个具有二级结构的肽段在空间上互相靠近形成的特殊空间构象。有特性性氨基酸序列。】
10. 分子伴侣(molecular chaperone)
【细胞内的一类促进蛋白质折叠形整天然空间构象的蛋白质。】
11. 辅基(prosthetic group)
【结合蛋白质中与蛋白质结合紧密的非蛋白质部分。】

五、问答题
1. 试举例说明什么是分子病。
【由于基因突变，蛋白质的结构、功能发生改变导致的疾病。】
2. 蛋白质含氮量平均为多少?为什么能用蛋白质的含氮量表达蛋白质的相对含量?如何计算?
【16%。各种来源的蛋白质含氮量基本恒定。
每可样品含氮克数╳6.25╳100=100克样品蛋白质含量（g%）】
3. 自然界中组成蛋白质的氨基酸有多少种?如何进行分类?
【20种。根据侧链的结构和性质分为4类：
①极性、中性氨基酸；②酸性氨基酸 ③碱性氨基酸 ④非极性、疏水性氨基酸。】
4. 何谓蛋白质的一级结构?简述蛋白质的一级结构测定方法。
【指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序。
一级结构测定方法：①水解纯化蛋白质，测定各种氨基酸的百分含量；②测定多肽链N端与C端的氨基酸；③多肽链水解为肽段，分离纯化各肽段，用Edman降解法等测定各肽段氨基酸的排列顺序；④经组合排列对比得出完整肽链氨基酸的排列顺序。】
5. 蛋白质的二级结构?蛋白质的二级结构重要有哪些形式?各有何结构特性?
【蛋白质分子中某段肽链局部主链原子的空间排布。
重要形式和特性有：α-螺旋：多肽链盘绕形成右手螺旋，每圈含3.6氨基酸残基，螺距0.54nm,相邻两圈螺旋间形成氢键且与螺旋长轴平行。β-折叠：多肽链相对伸展，肽单元折叠成锯齿状，两条以上肽链顺向或反向平行排列，通过氢键联系成片层结构。β-转角：发生在多肽链进行180度转折处，由4个氨基酸构成，氢键维系。无规卷曲；无拟定规律的肽段。】
7. 何谓蛋白质的三级机构?维系蛋白质三级结构的化学键有哪些?
【多肽链中所有原子的空间排部。通过疏水作用、盐键、氢键、Van der Waals力维系。】
六．本章要点总结：
1. 蛋白质的结构
蛋白质是具有特定构象的大分子，为研究方便，将蛋白质结构分为四个结构水平，涉及一级结构、二级结构、三级结构和四级结构。一般将二级结构、三级结构和四级结构称为三维构象或高级结构。
一级结构指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序。肽键是蛋白质中氨基酸之间的重要连接方式，即由一个氨基酸的α-氨基和另一个氨基酸的α-之间脱去一分子水互相连接。肽键具有部分双键的性质，所以整个肽单位是一个刚性的平面结构。在多肽链的具有游离氨基的一端称为肽链的氨基端或N端，而另一端具有一个游离羧基的一端称为肽链的羧基端或C端。
蛋白质的二级结构是指多肽链骨架盘绕折叠所形成的有规律性的结构。最基本的二级结构类型有α-螺旋结构和β-折叠结构，此外尚有β-转角和自由回转。右手α-螺旋结构是在纤维蛋白和球蛋白中发现的最常见的二级结构,每圈螺旋具有3.6个氨基酸残基，螺距为0.54nm,螺旋中的每个肽键均参与氢键的形成以维持螺旋的稳定。β-折叠结构也是一种常见的二级结构，在此结构中，多肽链以较伸展的曲折形式存在，肽链（或肽段）的排列可以有平行和反平行两种方式。氨基酸之间的轴心距为0.35nm,相邻肽链之间借助氢键彼此连成片层结构。
结构域是介于二级结构和三级结构之间的一种结构层次，是指蛋白质亚基结构中明显分开的紧密球状结构区域。
超二级结构是指蛋白质分子 中的多肽链在三维折叠中形成有规则的三级结构聚集体。
蛋白质的三级结构是整个多肽链的三维构象，它是在二级结构的基础上，多肽链进一步折叠卷曲形成复杂的球状分子结构。具有三级结构的蛋白质一般都是球蛋白，这类蛋白质的多肽链在三维空间中沿多个方向进行盘绕折叠，形成十分紧密的近似球形的结构，分子内部的空间只能容纳少数水分子，几乎所有的极性R基都分布在分子外表面，形成亲水的分子外壳，而非极性的基团则被埋在分子内部，不与水接触。蛋白质分子中侧链R基团的互相作用对稳定球状蛋白质的三级结构起着重要作用。
蛋白质的四级结构指数条具有独立的三级结构的多肽链通过非共价键互相连接而成的聚合体结构。在具有四级结构的蛋白质中，每一条具有三级结构的皑链称为亚基或亚单位，缺少一个亚基或亚基单独存在都不具有活性。四级结构涉及亚基在整个分子中的空间排布以及亚基之间的互相关系。
维持蛋白质空间结构的作用力重要是氢键、离子键、疏水作用力和范德华力等非共价键，又称次级键。此外，在某些蛋白质中尚有二硫键，二硫键在维持蛋白质构象方面也起着重要作用。
蛋白质的空间结构取决于它的一级结构，多肽离岸主链上的氨基酸排列顺序包含了形成复杂的三维结构（即对的的空间结构）所需要的所有信息。
2. 蛋白质结构与功能的关系
不同的蛋白质，由于结构不同而具有不同的生物学功能。蛋白质的生物学功能是蛋白质分子的天然构象所具有的性质，功能与结构密切相关。
2.1．一级结构与功能的关系
蛋白质的一级结构与蛋白质功能有相适应性和统一性，可从以下几个方面说明：
（1）一级结构的变异与分子病
蛋白质中的氨基酸序列与生物功能密切相关，一级结构的变化往往导致蛋白质生物功能的变化。如镰刀型细胞贫血症，其病因是血红蛋白基因中的一个核苷酸的突变导致该蛋白分子中β-链第6位谷氨酸被缬氨酸取代。这个一级结构上的细微差别使患者的血红蛋白分子容易发生凝聚，导致红细胞变成镰刀状，容易破裂引起贫血，即血红蛋白的功能发生了变化。
（2）一级结构与生物进化
研究发现，同源蛋白质中有许多位置的氨基酸是相同的，而其它氨基酸差异较大。如比较不同生物的细胞色素C的一级结构，发现与人类亲缘关系接近，其氨基酸组成的差异越小，亲缘关系越远差异越大。
（3）蛋白质的激活作用
在生物体内，有些蛋白质常以前体的形式合成，只有按一 定方式裂解除去部分肽链之后才具有生物活性，如酶原的激活。
2.2．蛋白质空间结构与功能的关系
蛋白质的空间结构与功能之间有密切相关性，其特定的空间结构是行使生物功能的基础。以下两方面均可说明这种相关性。
（1）.核糖核酸酶的变性与复性及其功能的丧失与恢复
核糖核酸酶是由124个氨基酸组成的一条多肽链，具有四对二硫键，空间构象为球状分子。将天然核糖核酸酶在8mol/L脲中用β-巯基乙醇解决，则分子内的四对二硫键断裂，分子变成一条松散的肽链，此时酶活性完全丧失。但用透析法除去β-巯基乙醇和脲后，此酶经氧化又自发地折叠成原有的天然构象，同时酶活性又恢复。
（2）血红蛋白的变构现象
血红蛋白是一个四聚体蛋白质，具有氧合功能，可在血液中运送氧。研究发现，脱氧血红蛋白与氧的亲和力很低，不易与氧结合。一旦血红蛋白分子中的一个亚基与O2结合，就会引起该亚基构象发生改变，并引起其它三个亚基的构象相继发生变化，使它们易于和氧结合，说明变化后的构象最适合与氧结合。
从以上例子可以看出，只有当蛋白质以特定的适当空间构象存在时才具有生物活性。
3.蛋白质的重要性质
蛋白质是两性电解质，它的酸碱性质取决于肽链上的可解离的R基团。不同蛋白质所具有的氨基酸的种类、数目不同，所以具有不同的等电点。当蛋白质所处环境的pH大于pI时，蛋白质分子带负电荷，pH小于pI时，蛋白质带正电荷，pH等于pI时，蛋白质所带净电荷为零，此时溶解度最小。
蛋白质分子表面带有许多亲水基团，使蛋白质成为亲水的胶体溶液。蛋白质颗粒周边的水化膜（水化层）以及非等电状态时蛋白质颗粒所带的同性电荷的互相排斥是使蛋白质胶体系统稳定的重要因素。当这些稳定因素被破坏时，蛋白质会产生沉淀。高浓度中性盐可使蛋白质分子脱水并中和其所带电荷，从而减少蛋白质的溶解度并沉淀析出，即盐析。但这种作用并不引起蛋白质的变性。这个性质可用于蛋白质的分离。
蛋白质受到某些物理或化学因素作用时，引起生物活性的丧失，溶解度的减少以及其它性质的改变，这种现象称为蛋白质的变性作用。变性作用的实质是由于维持蛋白质高级结构的次级键遭到破坏而导致天然构象的解体，但未涉及共价键的断裂。有些变性是可逆的，有些变性是不可逆的。当变性条件不剧烈时，变性是可逆的，除去变性因素后，变性蛋白又可从新回复到原有的天然构象，恢复或部分恢复其原有的生物活性，这种现象称为蛋白质的复性。
4. 测定蛋白质分子量的方法
4.1．凝胶过滤法
凝胶过滤法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子量的大小。由于不同排阻范围的葡聚糖凝胶有一特定的蛋白质分子量范围，在此范围内，分子量的对数和洗脱体积之间成线性关系。因此，用几种已知分子量的蛋白质为标准，进行凝胶层析，以每种蛋白质的洗脱体积对它们的分子量的对数作图，绘制出标准洗脱曲线。未知蛋白质在同样的条件下进行凝胶层析，根据其所用的洗脱体积，从标准洗脱曲线上可求出此未知蛋白质相应的分子量。
4.2．SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法
蛋白质在普通聚丙烯酰胺凝胶中的电泳速度取决于蛋白质分子的大小、分子形状和所带电荷的多少。SDS（十二烷基磺酸钠）是一种去污剂，可使蛋白质变性并解离成亚基。当蛋白质样品中加入SDS后，SDS与蛋白质分子结合，使蛋白质分子带上大量的强负电荷，并且使蛋白质分子的形状都变成短棒状，从而消除了蛋白质分子之间原有的带电荷量和分子形状的差异。这样电泳的速度只取决于蛋白质分子量的大小，蛋白质分子在电泳中的相对迁移率和分子质量的对数成直线关系。以标准蛋白质分子质量的对数和其相对迁移率作图，得到标准曲线，根据所测样品的相对迁移率，从标准曲线上便可查出其分子质量。
4.3．沉降法（超速离心法）
沉降系数（S）是指单位离心场强度溶质的沉降速度。S也常用于近似地描述生物大分子的大小。蛋白质溶液经高速离心分离时，由于比重关系，蛋白质分子趋于下沉，沉降速度与蛋白质颗粒大小成正比，应用光学方法观测离心过程中蛋白质颗粒的沉降行为，可判断出蛋白质的沉降速度。根据沉降速度可求出沉降系数，将S带入公式，即可计算出蛋白质的分子质量。
第二章　 酶
一、单选题
1．下列对酶的叙述，哪一项是对的的（E）
A．所有的蛋白质都是酶 B．所有的酶均以有机化合物作为作用物
C．所有的酶均需特异的辅助因子 D．所有的酶对其作用物都有绝对特异性
E．所有的酶均由活细胞产生
2. 以下哪项不是酶的特点（A）
A．酶只能在细胞内催化反映 B．活性易受pH、温度影响
C．只能加速反映，不改变反映平衡点 D．催化效率极高
E．有高度特异性
3. 结合酶在下列那种情况下才有活性（D）
A．酶蛋白单独存在 B．辅酶单独存在 C．亚基单独存在
D．全酶形式存在 E．有激活剂存在
4．下列哪种辅酶中不含核苷酸（C）
A．FAD B．FMN C．FH4 D．NADP+ E．CoA-SH
5．下列哪种辅酶中不含维生素（D）
A．CoA-SH B．FAD 　C．NAD+ 　D．CoQ 　E．FMN
6．酶的辅助因子的作用不涉及（E）
A．稳定酶的空间构象 B．参与构成酶的活性中心
C．在酶与作用物的结合中起桥梁作用 D．传递电子、质子
E．决定酶的特异性
7．酶的必需基团是指（B）
A．维持酶一级结构所必需的基团
B．位于活性中心以内或以外，与酶活性密切相关的基团
C．酶的亚基聚合所必需的基团
D．维持酶分子构象的所有基团
E．构成全酶分子的所有基团
8．酶分子中使作用物转为变为产物的基团称为（B）
A．结合基团 B．催化基团 C．碱性基团 D．酸性基团 　E．疏水基团
9．有关同工酶的对的叙述是（A）
A．不同组织中同工酶谱不同 B．同工酶对同种作用物亲和力相同
C．同工酶的基因相同 D．组成同工酶的亚基一定相同
E．同工酶是同一多肽链经翻译后加工产生的
10．含LDH5丰富的组织是（A）
A．肝组织 B．心肌 C．红细胞 D．肾组织 E．脑组织
11．关于酶原激活，对的的是（B）
A．酶原与酶一级结构相同　　B．酶原与酶空间结构不同
C．所有酶都由酶原生成　　　D．酶原有活性中心
E．激活剂使酶原激活
12．关于变构酶的结构特点的错误叙述是（D）
A．常有多个亚基组成 B．有与作用物结合的部位
C．有与变构剂结合的部位 D．催化部位与别构部位都处在同一亚基上
E．催化部位与别构部位既可处在同一亚基，也可处在不同亚基上
13．关于变构剂的错误叙述是（B）
A．可与酶分子上别构部位结合 B．可使酶蛋白与辅基结合
C．可使酶与作用物亲和力减少 D．可使酶分子的空间构象改变
E．有激活或克制作用
14．国际酶学委员会将酶分为六大类的重要根据是（D）
A．酶的来源 B．酶的结构 C．酶的理化性质
D．酶促反映性质 E．酶催化的作用物结构
15．关于酶促反映特点的错误描述是（B）
A．酶能加速化学反映 B．酶在生物体内催化的反映都是不可逆的
C．酶在反映前后无质和量的变化 D．酶对所催化的反映有选择性
E．能缩短化学反映到达反映平衡的时间
16．关于诱导契合学对的的是（E）
A．发生在酶原激活时 B．发生在变构调节时
C．诱导契合时仅发生酶构象改变 D．诱导契合时仅发生底物构象改变
E．诱导契合有助于形成酶与底物复合物
17．其他因素不变，改变作用物的浓度时（A）
A．在低底物浓度下反映速度与底物浓度成正比
B．反映速度随底物浓度增长而下降
C．反映速度随底物浓度增长连续增长
D．反映速度先慢后快
E．反映速度不变
18．在酶浓度不变的条件下，以反映速度v-对作用物[S]作图，其图象为（C）
A．直线 B．S形曲线 C．矩形双曲线 　D．抛物线 　E．钟罩形曲线
19．作用物浓度达成饱和后，再增长作用物浓度（C）
A．反映速度随作用物增长而加快 B．随着作用物浓度的增长酶逐渐失活
C．反映速度不再增长　　 D．如增长克制剂反映速度反而加快
E．形成酶-作用物复合体增长
20．Michaelis-Menten方程式是（C）
A．υ= _Km +[S] B．υ= Vmax+[S]
Vmax+[S] K m+[S]
　C．υ= Vmax[S] 　　D．υ= Km + [S]
Km+[S] Vmax[S]
E．υ= Km[S]
Vmax+[S]
21．Km是（D）
A．作用物浓度饱和时的反映速度
B．是最大反映速度时的作用物浓度
C．作用物浓度达50%饱和时的反映速度
D．反映速度达最大反映速度50%时的作用物浓度
E．减少反映速度一半时的作用物浓度
22．酶的Km值大小与（A）
A．酶性质有关 B．酶浓度有关 C．酶作用温度有关
D．酶作用时间有关 E．酶的最适pH有关
23．己糖激酶以葡萄糖为作用物时，Km=1/2[S], 其反映速度υ是V的（A）
A．67% B．50% C．33% D．15% E．9%
24．酶促反映速度υ达成最大反映速度V 的80%时，作用物浓度[S]为（D）
A．1 Km B．2 Km C．3 Km D．4 Km E．5 Km
25. 为了防止酶失活，酶制剂存放最佳（A）
A．在低温 B．在室温 C．最适温度 D．加入克制剂 E．不避光
26．含唾液淀粉酶的唾液经透析后，水解淀粉的能力显著降解，其因素是（B）
A．酶变性失活 B．失去激活剂 C．酶一级结构破坏
D．失去辅酶 E．失去酶蛋白
27．能使唾液淀粉酶活性增强的离子是（A）
A．氯离子 　B．锌离子 C．碳酸氢根离子 　 D．铜离子 　 E．锰离子
28．各种酶都具有最适pH，其特点是（B）
A．最适pH一般即为该酶的等电点
B．最适pH时酶的活性中心的可解离基团都处在最适反映状态
C．最适pH时酶分子的活性通常较低
D．大多数酶活性的最适pH曲线为抛物线形
E．在生理条件下同一个体酶的最适pH均相同
29．属于不可逆性克制作用的克制剂是（B）
A．丙二酸对琥珀酸脱氢酶的克制作用
B．有机磷化合物对胆碱酯酶的克制作用
C．磺胺药类对细菌二氢叶酸还原酶的克制作用
D．ATP对糖酵解的克制作用　　　　E．反映产物对酶的反馈克制
30．对可逆性克制剂的描述，哪项是对的的（C）
A．使酶变性失活的克制剂
B．克制剂与酶是共价键相结合
C．克制剂与酶是非共价键结合
D．克制剂与酶结合后用透析等物理方法不能解除克制
E．可逆性克制剂即指竞争性克制
31．丙二酸对琥珀酸脱氢酶的克制作用是属于（C）
A．反馈克制 B．非竞争克制 C．竞争性克制
D．非特异性克制 E．反竞争性克制
32．反竞争性克制剂具有下列哪一种动力学效应（E）
A．使Km值升高，V不变 B．使Km值减少，V不变
C．使Km值不变，V升高 D．使Km值不变，V减少
E．使Km值和V均减少
33．存在下列那种物质的情况下，酶促反映速度不变、Km值减少（D）
A．无克制剂存在 B．有竞争性克制剂存在
C．有反竞争性克制剂存在 D．有非竞争性克制剂存在
E．有不可逆克制剂存在
34．纯化酶制剂时，酶纯度的重要指标是（D）
A．蛋白质浓度 B．酶量 C．酶的总活性
D．酶的比活性　　 E．酶的理化性质
35．有关酶的以下描述哪项是对的的（E）
A．同工酶是一组功能与结构相同的酶
B．诱导酶是指细胞中固有而含量又多的酶
C．在酶的活性中心中只有侧链带电荷的氨基酸直接参与酶的催化反映
D．酶催化反映处速度取决于酶的浓度
E．竞争性克制剂只能改变Km值，而不改变Vmax
36．组织损伤后，血浆特异酶的活性变化重要依赖于（D）
A．损伤前酶在该组织中的浓度 B．损伤前酶在血液中的浓度
C．损伤前酶在组织中的合成速率 D．损伤时损害的面积与限度
E．损伤后采集血标本的时间
37．下列关于ribzyme 的叙述哪一个是对的的（C）
A．即核酸酶 B．本质是蛋白质 C．本质是核糖核酸
D．最早发现的一种酶 E．其辅酶是辅酶A
二、多选题
1． 关于酶的叙述哪些是对的的（ABCD）
A．酶的化学本质是蛋白质 B．所有的酶都是催化剂
C．酶可以减少反映活化能 D．酶能加速反映速度，不改变平衡点
2． 酶与一般催化剂相比有以下特点（ACD）
A．反映条件温和，可在常温，常压下进行
B．加速化学反映速度，可改变反映平衡点
C．专一性强，一种酶只作用一种或一类物质，产生一定的产物
D．酶的催化效率极高
3. 证明多数酶是蛋白质的证据是（ABCD）
A．水解产物是氨基酸 B．有和蛋白质一致的颜色反映
C．可被蛋白酶水解 D．可使蛋白质变性的因素，也使酶变性
4. 蛋白与辅酶（辅基）的关系有（ABCD）
A．一种酶只有一种辅酶（辅基） B．不同的酶可有相同的辅酶（辅基）
C．只有全酶才有活性 D．酶蛋白决定特异性，辅酶参与反映
5. 对全酶的对的描述指（BD）
A．所有的酶都有全酶和蛋白质两种形式 　　B．由蛋白质和非蛋白质部分构成
C．酶蛋白-辅酶-激动剂-作用物聚合物 　 D．由酶蛋白和辅酶（辅基）组成的酶
6. 酶的辅助因子可以是（ABC）
A．金属离子 B．某些小分子有机化合物
C