高考生物微生物的应用考点汇总(含高考真题解析).doc

2013年高考生物：微生物的应用考点汇总

 1．（2012北京理综．5,6分）高中生物学实验中，在接种时不进  行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是    (    )
  A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中  B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上
  C．将转基因植物叶片接种到无菌培养基上  D．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上
 2．（2012山东基本能力．55.1分）除了高温加热以外，其它灭菌  方法还有    (    )
  A．紫外线照射    B．真空包装  C．用保鲜膜密闭    D．添加防腐剂

  (1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有①____，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现②    色环带。
  (2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是③____灭菌。
    A．高压蒸汽    B．紫外灯照射C.70%酒精浸泡    D．过滤  (3)步骤X表示④    。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液⑤    一到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得⑥____菌落。
  (4)在培养时，需将培养皿倒置并放在⑦____中。若不倒置培养，将导致⑧____。
  (5)临床上用“C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将“C标记的⑨    分解为NH3和“CO2。
4．[2012上海单科．（四）．10分]回答下列关于微生物和酶的  问题。

(1)①过程称为_____，②过程是为了____。
(2)I号培养基称为____（按功能分）；该培养基  中除了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分  --O
   A．琼脂    B．葡萄糖  C．硝酸铵  D．碳酸氢钠
(3)-般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了
    ——。
    在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度
范围进行测定。图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相
对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时
间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数
据为酶的热稳定性数据，即图中的曲线②。

 (4)根据图中的数据，判断该酶使用的最佳温度范围是--0
A．40℃  - 50℃    B．50℃  - 60℃ C．60℃  - 70℃    D．70 ℃一80℃   (5)据图判断下列叙述错误的是_____。
    A．该酶只能在最佳温度范围内测出活性B．曲线②35℃数据点是在80℃时测得的C．曲线①表明80℃ 是该酶活性最高的温度D．曲线②表明该酶的热稳定性在70℃ 之后急剧下降5．（2011课标，39 ,15分）有些细菌可分解原油，从而消除由原  油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤巾筛  选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
  (1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以    为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于培养基。
  (2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即    和    。
  (3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力    。
  (4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、    和    。无菌技术要求实验操作应在酒精灯    附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
6．（2010山东理综，34,8分）生物柴油是一种可再生的清洁能  源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。
  科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇  反应能够合成生物柴油（如下图）。

 (1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用    、方法从油料作物中提取。
(2)筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供_____，培养基灭菌采用的最适方法是___ 法。
(3)测定培养液中微生物数量，可选用    法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测____，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用技术使脂肪酶能够重复使用。
(4)若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的一技术。
7．（2009宁夏理综．40 ,15分）(1)在大肠杆菌培养过程中，除考  虑营养条件外，还要考虑____、一    和渗透压等条  件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、  ___  _、_  ___等优点，因此常作为遗传学研究的实验  材料。
  (2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行    （消毒、灭菌）；操作者的双手需进行清洗和    ；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能    。
  (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的____。
  (4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的    一。
  (5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。
    对于固体培养基应采用的检测方法是____--O  (6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过    处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
答案：1．C本题主要考查几种常见生物学实验对无菌操作的要求。生产果  酒和腐乳时对无菌的要求不是很高，接种不需要进行严格的无菌操  作；土壤浸出液中含有多种杂菌，所以利用选择培养基筛选土壤浸出  液中特定微生物时，不进行严格无菌操作也不会影响实验结果；植物  组织培养技术成功的关键是无菌条件，若接种时不进行严格无菌操作  将可能导致实验失败，故C项符合题意。
2．A此题考查灭菌的方法。灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内  外所有的微生物（包括芽孢和孢子）。本题中真空包装、添加防腐剂、  用保鲜膜密闭都起到了抑菌作用，紫外线照射使细菌的蛋白质变性，  核酸受破坏，是灭菌方法。
3．答案(1)脲酶红  (2)D  (3)接种涂布单  (4)恒温培养箱无法形成单菌落  (5)尿素  解析此题考查微生物的分离与培养知识。(1)幽门螺杆菌(Hp)  含有脲酶，能以尿素为氮源，在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培  养Hp，由于尿素经脲酶的降解可产生碱性的NH3，NH，能使培养基中  的酚红由红黄色变成红色，故菌落周围会出现红色环带。(2)由于尿  素加热会分解，对尿素溶液进行灭菌最好用C6玻璃砂漏斗过滤。
  (3)微生物的分离和培养步骤是：配制培养基一灭菌、倒平板一接种  一培养。为获得单菌落，接种操作前应先将菌液稀释，然后将菌液涂  布到培养基平面上即可。(4)微生物培养时需将培养皿倒置并放在  恒温培养箱中，若不倒置培养，则无法形成单菌落。(5)幽门螺杆菌  能将“C标记的尿素分解为NH3和14 CO：，故临床上常用14C呼气试验  检测人体内幽门螺杆菌的存在。
4．答案(1)稀释单个菌落的筛选（或筛选）  (2)选择培养基C  (3)杀死培养基中的细菌芽孢  (4)C  (5)A  霉解析本题主要考查微生物培养及酶的相关知识。欲培养和分离  嗜热菌单个菌落可采用稀释涂布平板法；①为稀释过程，②为筛选过  程；I号培养基为选择培养基，加入硝酸铵的目的主要是补充氮元素；  高温灭菌的目的是杀死包括细菌芽孢等在内的全部生物；据图可知，  工业生产中该酶的最佳温度范围为60qC -70C。
5．霉答案(1)原油选择  (2)平板划线法稀释涂布平板法  (3)强  (4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰  霉解析(1)从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株，  使用的培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基，通过控制碳源这  种营养成分，来促进能高效降解原油的菌株的生长，抑制其他微生物  的生长。(2)菌种纯化培养时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法  接种。(3)当固体培养基上长出单菌落后，可通过比较菌落周围分解  圈的大小，来判断菌株降解原油能力的大小。一般来说，分解圈越大  说明该菌株的降解能力越强，反之则越弱。(4)实验室培养微生物的  过程中，常用灼烧灭菌法对接种环、接种针、试管口、瓶口等进行灭菌；  用高压蒸汽灭菌法对培养基、试管等进行灭菌；用于热灭菌法对玻璃  器皿（吸管、培养皿）和金属用具等进行灭菌。实验操作应在酒精灯  火焰旁进行，因为酒精灯火焰旁可形成一个无菌环境，可防止微生物  的污染。
6．裙答案(1)压榨萃取（注：两空顺序无先后）  (2)碳源高压蒸汽灭菌  (3)显微镜直接计数酶活性（或：酶活力）固定化酶（或：固定化细  胞）  (4) PCR（或：多聚酶链式反应，聚合酶链式反应）  醵解析(1)因为植物油不易挥发，不能选用蒸馏法，可以用压榨法、  萃取法从油料作物中提取。(2)微生物的生长需要水、碳源、氮源和  无机盐等，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供碳源。分析  灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等实验室常用灭菌方法的特点可  知，培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法。(3)测定培养液  中微生物的数量，可选用显微镜直接计数法直接计数。提取的脂肪酶  在应用于实验或生产之前，要先检测其活性，以确定其应用价值。固  定化酶技术可以实现酶的反复利用，降低了生产成本。(4)在应用  PCR技术扩增DNA片段时，DNA合成（延伸）时温度要控制在72aC，  需要具有较强的耐热性的DNA聚合酶催化。
7．露答案(1)温度酸碱度易培养生活周期短  (2)灭菌消毒损伤DNA的结构  (3)比例合适  (4)鉴定（或分类）  (5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基  上是否有菌落产生  (6)灭菌  罐解析(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易  培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑  温度、酸碱度和渗透压等条件。(2)灭菌是用强烈的理化因素杀死物  体内外所有的微生物，所以对培养基和培养皿进行灭菌；消毒是用较  为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害  的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变  性，还能损伤DNA的结构。(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列  的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的  表而，进行培养，应保证样品稀释的比例适合。(4)对获得的纯菌种  还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。
  （5、培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固  体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放  置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。(6)因为有的大肠杆  菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，使用过的  培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的  扩散。