真菌课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌学,1,具有典型细胞结构（细胞核、细胞器、细胞壁）,细胞壁含几丁质和（或）纤维素,无根、茎、叶，不含叶绿素,以腐生或寄生方式摄取养料,能进行有性生殖和（或）无性繁殖,真菌概述,真菌,(,fungus),2,病毒界,原核生物界,原生生物界,真菌界,植物界,动物界,自然生物分类(6界),接合菌门,担子菌门,子囊菌门,半知菌亚门,分类:界、门、纲、目、科、属、种,3,第一节 概述,真菌分单细胞和多细胞两类：,单细胞真菌,呈圆形或椭圆形，称为酵母菌（,yeast,）,或类酵母菌（如隐球菌、念珠菌）。,多细胞真菌,由,菌丝和孢子,组成，菌丝分枝交织成团形成菌丝体,称,丝状菌,（,filarmentous fungus,）,，,并长有各种孢子，这类真菌即一般称为霉菌,（,Mold),。,4,二相性真菌,（,dimorphic）,有些真菌在不同寄生环境和培养条件下出现两种形态，称二相性真菌。,即在机体内或含动物蛋白的培养中37孵育，呈现酵母型菌落，而在沙保氏培养基上室温或25孵育，则形成丝状菌落。,（如球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、皮炎芽生菌等。）,5,一、真菌的形态与结构,真菌比细菌大几倍至几十倍。,细胞结构比细菌复杂，细胞壁缺乏肽聚糖，其坚韧性主要依赖于多聚,N-,乙酰基葡萄糖构成的甲壳质(,Chitin)（75%）,和蛋白质（25%）。,由于不含肽聚糖，真菌不受青霉素或头孢菌素的作用。,真菌的细胞膜,与细菌的细胞膜区别在于前者,有固醇,(,sterol),而后者无。,细胞内有较为典型的核结构和细胞器。,6,A.,单细胞真菌,单细胞真菌,呈圆形或卵圆形，常见于酵母和类酵母菌，,对人类有致病的主要有：新生隐球菌的白假丝酵母菌。,这类真菌,以出芽方式繁殖,，,芽生孢子脱落后形成新的,独立个体。,7,多细胞真菌能长出菌丝，菌丝延伸分枝，并可以长出孢子。,菌丝和孢子的形,态,不同，,常作为,鉴别多细胞真菌,的重要标志,。,B.,多细胞真菌,8,(,一,),、菌丝,（,hypha）,真菌的孢子以出芽方式繁殖，在适宜的环境下由孢子长出芽管，芽管延长呈丝状，称菌丝。,菌丝又可长出许多分枝，交织成团称为菌丝体。,按功能分,营养菌丝,气生菌丝,生殖菌丝,9,(,一,),、菌丝,按物理性,状分,有隔菌,丝,无隔菌,丝,按形态分,螺旋状,球拍状,结节状,鹿角状,梳状,10,11,孢子系真菌的繁殖结构，按形成方式分为有性孢子和无性孢子两种,有性孢子,无性孢子,真菌孢子与细菌芽胞的区别,(,二,),、孢子,（spore）,12,由生殖菌丝末端的细胞分裂或收缩形成，也可在菌丝侧面出芽形成。,按形态分：,大分生孢子,小分生孢子,无性孢子,(1)分生孢子,图示：石膏样小孢子菌的梭状大分生孢子,13,由菌丝内细胞直接形成,芽生孢子:菌丝体细胞出芽生成（假菌丝）,厚膜孢子：菌丝体内胞浆浓缩，胞壁增厚，环境不利形成。环境转好，厚膜孢子又可以出芽生殖。,关节孢子：陈旧的培养物中，菌丝细胞变厚，形成长方形的节段，呈链状排列。,无性孢子,(2)叶状孢子,14,芽生孢子、厚膜孢子、关节孢子,15,菌丝的末端膨大成孢子囊，内含许多小孢子，孢子成熟则破囊而出。多见于毛霉、根霉等。,无性孢子,(3)孢子囊孢子,16,真菌孢子形态,17,18,19,20,真菌孢子和细菌芽胞的区别,真菌孢子,细菌芽胞,抵抗力,不强，,60-70,短时间杀死,强，煮沸短时间不死,数目,一条菌丝可产生多个孢子,一个细菌体只形成一个芽孢,作用,为繁殖方式之一,不是繁殖方式,形成位置,可在细胞内外形成,只在细菌细胞内形成,形状,形态、色泽多样,圆形或椭圆形,21,二、培养特性,沙保弱培养基,：,皮肤癣菌生长较慢，1-4周，腐生性真菌生长较快，24小时。,成分：1%蛋白胨 4%葡萄糖 2%琼脂,pH5.5,抑菌剂：放线菌酮和氯霉素,前者抑制污染真菌，后者抑制普通细菌,22,1、酵母型菌落,酵母型菌落，为单细胞真菌的菌落形态，菌落光滑湿润，柔软而致密。与一般细菌菌落相似，如新生隐球菌。,酵母样菌落（类酵母菌落），部分单细胞真菌在出芽繁殖后，芽管延长不与母细胞脱落，形成假菌丝。假菌丝由菌落向下生长，伸入培养基中，这样的菌落称酵母样菌落，如白假丝酵母菌。,23,酵母型菌落、酵母样菌落,24,是多细胞真菌的菌落形式，由许多疏松的菌丝体构成。菌落呈棉絮状、绒毛状或粉末状，菌落正背两面呈不同颜色。,其形态、结构、颜色常作为鉴定真菌的参考。,丝状真菌有形成圆形菌落的倾向，所以临床癣类疾病常表现为环形或多环形。,2、丝状菌落,25,棉絮状菌落、环癣,26,大多数真菌,营养要求不高,，常用沙保氏培养基（,SDA,）培养。,浅部病原性真菌的最适温度为,22,28,，生长缓慢，大多于,1,4,周出现典型菌落。,深部病原性真菌培养,在,37,中生长最好，,生长较快，,经,3-4,天即长出菌落。,27,真菌菌落类型,类型,定义,特征,颜色,举例,酵母型菌落,为单细胞真菌的菌落，形态与一般细菌菌落相似，以出芽形式繁殖,光滑、湿润，,一般为乳白色,新型隐珠菌,类酵母型菌落,外观似酵母菌落，但可见,伸入培养基中的假菌丝,，由伸长的芽生孢子形成,光滑、湿润，,一般为乳白色,白色念珠菌,丝状菌落,为多细胞真菌的菌落，由许多管状、分枝菌丝体组成,绒毛状、絮状、粉末状、颗粒状、石膏状。,可产生各种色素。,毛癣菌,28,1,、变异性,真菌易发生变异，在人工培养基中多次传代或孵育过久，可出现,形态结构、菌落性状、色素及毒力等改变,。,三、变异性与抵抗力,29,2,、抵抗力,真菌对干燥、阳光、紫外线及一般化学消毒剂,有一定的耐受力,，但充分暴露于阳光，紫外线及干燥情况下大多数真菌可被杀死，且对,2.5%,碘酒，,10%,福尔马林都敏感，一般可用福尔马林薰蒸被真菌感染的房间。,对热敏感,，一般,601,小时可杀死真菌菌丝和孢子。,30,第二节 真菌的致病性与免疫性,致病条件,1、毒力：具有内毒素样活性的胞壁糖蛋白，烟曲霉、黄曲霉致组织出血坏死。,2、粘附力：白假细酵母菌，芽管形成，粘附力增强,3、抗吞噬作用：新生隐球菌荚膜可有效抵抗吞噬细胞的吞噬作用。,4、改变宿主细胞功能：烟曲霉和白假细酵母菌的热休克蛋白,HSP90,可与宿主细胞和血清蛋白结合使之功能改变。,31,致病形,式,1、致病性真菌感染：多见于外源性真菌感染。浅部真菌病如皮癣。,2、条件致病性真菌感染：多见于内源性真菌感染。深部真菌病如肺假丝酵母菌病。多见于机体抵抗力下降患者。,3、真菌超敏反应性疾病：食入或吸入某此真菌的孢子或菌丝体时引发的各种超敏反应。如荨麻疹、变应性皮炎、哮喘等。,32,皮癣、肺真菌病、荨麻疹,33,4、真菌性中毒症：摄入真菌或其产生的毒素后引起急、慢性中毒。可引起肝肾功能损伤，或造血系统抑制，或神经系统功能紊乱。,5、真菌毒素与肿瘤的关系：黄曲霉,双呋喃氧杂萘邻酮的衍化物，毒性强，与致癌有密切关系,致病形式,34,1、固有免疫：主要指机体粘膜的天然屏障作用，如果屏障机制不完善或被破坏，则易引发真菌感染。,如插管、破损、创伤,免疫力低下,菌群失调,儿童皮脂腺分泌不饱和和不饱和脂肪酸的水平较低，易患头癣；成人手足汗较多，且掌跖部缺乏皮指腺，故易患手癣。,免疫性,35,头癣和手癣,36,2、获得性免疫：因真菌细胞壁厚，所以感染后形成的抗体滴度较低，且很难发挥中和抗体的杀菌作用。但特异性抗体可阻止真菌转为菌丝体从而提高吞噬率，并抑制真菌粘附于体表。,主要是靠细胞免疫：抗原刺激特异性淋巴细胞增殖释放,IFN-、IL-2,激活巨噬细胞、,NK,细胞、,CTL,细胞杀伤真菌,播散性真菌病多见于,T,细胞功能抑制。,免疫性,37,真菌的常规检验,各种真菌的形态和结构有一定的特殊性,一般可用,直接镜检,分离培养,两种方法进行鉴定,38,一、标本采集及处理,浅部真菌：75%乙醇棉球擦拭局部后取皮屑、毛发、指（趾）甲屑等,深部真菌：根据病情取痰、血液、脑脊液等,39,方法：,二、直接镜检和意义,10%,KOH,皮肤癣菌：湿片，不染色；,假丝酵母菌：革兰染色；,隐球菌：墨汁染色,40,三、分离培养,皮肤、毛发、甲屑等标本经70%乙醇或2%石炭酸浸泡2-3,min,杀死杂菌，再用无菌生理盐水洗净后接种于沙保弱培养基中。,阴道、口腔粘膜标本接种于血平板上。,血液标本先增菌，脑脊液取沉淀物接种于血平板上。,疑为假丝酵母菌，需先做芽管生成试验。,41,三、分离培养,培养基：,培养基,用途,沙保弱氏培养基,放线菌酮,-,氯霉素琼脂,玉米粉聚山梨酯,-80,琼脂,马铃薯葡萄糖琼脂,尿素琼脂,心脑浸液葡萄糖血琼脂,真菌的常规培养,同上,观察白假丝酵母菌的厚膜孢子,观察真菌菌落色素，用于鉴别,用生化反应鉴别真菌（红色与石膏样癣菌）,深部真菌培养（二相性真菌）,42,三、分离培养,培养方法,1,、直接培养法,2,、试管培养,3,、大培养,4,、小培养：,（,1,）玻片培养,（,2,）郭可大钢圈小培养法,43,真菌的鉴定,主要有生化反应、芽管形成、厚膜孢子生成、免疫学及分子生物学试验等。,1,、糖醇类发酵试验：五糖,2,、同化碳源试验：,3,、同化氮源试验：,4,、明胶液化试验：,5,、尿素分解试验：,6,、测定淀粉样化合物：,7,、牛乳分解试验：,44,大部分真菌基本都是通过孢子传播，因此阻断孢子的传播途径，破坏孢子的萌发环境犹为重要。,表皮破损、潮湿温暖环境、直接或间接接触。,（黄曲霉的毒素作用）,真菌感染的预防,45,真菌感染的治疗,局部用药（表浅局部感染）,全身用药（深部或全身感染）,皮肤科用药：5%硫磺软膏、咪康唑软膏、克霉唑软膏、0.5%碘伏,口服抗真菌药：二性霉素、制霉菌素、咪康唑、酮康唑、氟康唑、伊曲康唑等,46,第二节,常见病原性真菌,依据侵犯部位和临床表现分为 浅部感染真菌,深部感染真菌,47,一、浅部感染,真菌,部 位,:,寄生或腐生于角蛋白组织,（,表皮角质层、毛发、甲板,）,分 类：,皮肤癣菌,角层癣菌,感染源：,接触患者或患畜,接触染菌物体,48,（一）,皮肤癣菌,疾 病：皮肤癣（,tinea,），手足癣最多见,三个属：表皮癣菌属（,pidermophyton,）,毛癣菌属（,Trichophyton,）,小孢子癣菌属（,Microsporum,）,49,表皮癣菌属,（,Epidermophyton,）,致病菌种：絮状表皮癣菌（,E.floccosum,）,侵犯部位：侵犯表皮、指甲，不侵犯毛发,疾 病：体癣、足癣、手癣、股癣和甲癣,形态学特征：,大分生孢子：侧生或顶生，棍棒状，壁薄,小分生孢子：无,50,絮状表皮癣菌引起的感染,51,毛癣菌属,（,Trichophyton,）,致病菌种：红色毛癣菌（,T.rubrum,）,石膏样毛癣菌（,T.gypseum,）,侵犯部位：侵犯表皮、指甲、毛发,疾,病：体癣、足癣、手癣、股癣、甲癣、发癣,形态学特征：,大分生孢子：细长、薄壁、棒状、两端钝圆,小分生孢子：侧生、散在，呈葡萄状,52,小孢子菌（,Microsporum,）,致病菌种：铁锈色小孢子菌（,M.ferrugineum,）,犬小孢子菌,(M.,canis),石膏样小孢子菌,(M.,gypseum),侵犯部位：毛发，皮肤,疾 病：头癣、体癣,形态学特征：大分生孢子：厚壁，梭形,小分生孢子：卵圆形，侧枝末端,53,犬小孢子菌菌落,犬小孢子菌大分生孢子（,400,）,54,石膏样小孢子菌分生孢子（,400,）,55,皮肤癣菌的种类、侵犯部位及传染来源,真菌种类,种数,感染部位,传染源,皮肤,毛发,甲板,人,动物,表皮癣菌属,1,+,-,+,絮状表皮癣菌,无,小孢子菌属,1,+,+,-,奥杜安小孢子菌,犬小孢子菌,石膏样小孢子菌,毛癣菌属,20,+,+,+,石膏样毛癣菌,红色毛癣菌,石膏样毛癣菌,56,（二）皮下感染真菌,种 类：着色真菌,孢子丝菌,侵入途径：外伤,感染部位：局部，也可扩散至周围组织,扩 散：着色真菌：血行或淋巴管,孢子丝菌：淋巴管,疾 病：着色真菌病,深部组织,慢性感染,中枢神经系统,脑内感染,57,腐生性、双相型,培养：,沙保弱培养基（,25,）：灰褐色皱膜状菌落,形态特征：分隔菌丝，成群梨形小分生孢子,感染途径：创伤皮肤接触染菌土壤或植物经口或,呼吸道侵入,疾病：孢子丝菌性下疳（,sporotrichotic,chancre,）,申克孢子丝菌,58,深部真菌：,侵犯表皮及其附属器以外的组织和器官,病原性真菌或条件致病性真菌,发病率增加：,抗生素 皮质类固醇激素,免疫抑制剂 抗肿瘤药物,器官移植 介入性治疗,二、深部感染真菌,59,白假丝酵母菌（白色念珠菌）,假丝酵母菌属中,10,个种有致病性。,白假丝酵母菌是本属最常见的致病菌，皮肤、黏膜及内脏的白假丝酵母菌病（,candidiasis),。,60,生物学性状特征,1,.形态：菌体圆形或卵圆形,2,.方式繁殖：芽生,3,.组织内：芽生孢子及假菌丝,培养时：厚膜孢子（本菌特征之一）,4,.菌落：类酵母型菌落,5,.营养要求：不高,61,白假丝酵母菌菌落,62,致病性,条件致病菌，正常存在于口腔、上呼吸道、肠道与阴道黏膜，菌群失调或抵抗力降低时可患白假丝酵母菌病。,所致疾病：,1,.皮肤、黏膜感染,2.,内脏感染,3.,中枢神经系统感染,63,分 布：鸽粪；人类体表、口腔、粪便,形态特征：圆形的酵母样细胞,外周有一层肥厚的胶质样荚膜,繁殖方式：芽生，无假菌丝,菌 落：酵母型菌落,荚膜多糖：,A,、,B,、,C,、,D,四个血清型,临床分离株：,A,、,D,型,新生隐球菌,（,Cryptococcus neoformans,）,64,致病性,隐球菌病（,cryptococcosis,）,感 染：外源性（多数）,内源性（少数）,致病物质：荚膜多糖,感染途径：呼吸道,所致疾病：肺部感染,播散感染：最易侵犯CNS，预后不良,65,新生隐球菌菌落,66,曲霉属（,Aspergillus,）,分布广泛,种类繁多,属于条件致病菌,主要条件致病菌：,烟曲霉（,A.fumigatus,）：最常见,黄曲霉（,A.flavus,）,黑曲霉（,A.niger,）,土曲霉（,A.terreus,）,构巢曲霉（,A.nidulans,）,67,烟曲霉菌落,烟曲霉形态（,400,）,68,致病性,感染类型：直接感染,超敏反应,毒素中毒,所致疾病：肺曲霉菌病,全身性曲霉菌病,中毒与致癌,69,接合菌亚门；广泛存在；条件致病菌，引起毛霉病（,mucormycosis,）,培养特征：生长迅速,镜下特征：,菌丝：无隔，粗大，直角分枝,孢子囊：球形，孢子囊梗顶生，内,有大量孢子囊孢子,致病性,引起脑膜炎，发病急，进展快，诊断困难。,毛霉属（,Mucor,）,70,毛霉孢子囊及孢子囊孢子,（,400,）,毛霉菌落,71,谢 谢,72,