核苷酸酶的检测和临床意义课件.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。,一,.,定义,5-,核苷酸酶全称,5-,核糖核苷酸磷酸水解酶（,5-Nucleoticlase,5-NU,或,5-NT,）。,5-,核苷酸酶,(5-NT),是一种对底物特异性不高的水解酶，可作用于多种核苷酸。主要参与核酸的分解代谢。能特异性的催化核苷,5-,核苷酸酶和次黄嘌呤核苷酸,。,5-NT,在人体的运动，细胞生长发育，纤维蛋白合成，提高表皮或内皮屏障功能，神经传递及淋巴细胞的再循环及黏附，免疫应答等方面均发挥重要的作用。,广泛分布在肝、胆、胰、肠、心、脑、肺、肾、垂体、甲状腺、前列腺、睾丸等脏器和组织中，定位在细胞膜上，肝胆系统是血清中,5-,核苷酸酶的主要来源。在肝内主要存在于胆小管和窦状间隙内。,二,.,来源和去路,5-NT,要释放入血必须要经肝胆系统内的高浓度胆汁酸去垢处理,三,.,检测方法,钼蓝比色法,化学发光法,酶法,偶联速率法,四,.,实验原理,5-,核苷酸酶（,5-NT,）催化,5-,次黄嘌呤核苷酸水解生成次黄苷和氨，次黄苷在嘌呤核苷磷酸化酶（,PNP,）作用下生成次黄嘌呤，次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶（,XOD,）作用下生成尿酸和过氧化氢（,H2O2,），,H2O2,与,4-,氨基安替比林（,4-AA,）和,TOOS,在过氧化物酶（,POD,）作用下生成醌亚氨化合物，通过测定相应波长处吸光度变化值得出样本中,5-NT,活性,。,五,.,标本的采集及保存,1,细胞培养物：离心后收集上清液，并将标本保存于,-20,。,2,血清：室温放置,2,小时内或,2-8,24H,，,1000 x g,离心,20,分钟。,3,血浆：可用,EDTA,或肝素作为抗凝剂，标本采集后,30,分钟内于,1000 x g,离心,15,分钟。,4.2-8,可放置,24,小时，,-20,可放置一星期，但应避免反复冻融。,标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。,六,.,参考范围,速率法：正常成人血清,5-NT,酶活性为：,0-11U/L,钼蓝双色法：健康成年人,5-NT,活性为,2-17U/L,，儿童稍低。,60,岁以上老人的均值约为青壮年的,2,倍。,七,.,临床意义,5-NT,活性增高常见于原发性和转移性肝癌、胆道癌、胰腺癌、胆道阻塞、胆管炎、急、慢性肝炎、肝硬化、药物性肝损伤。其活性增高可达,2,6,倍，且与病情严重程度呈正相关。,5-NT,是诊断肝肿瘤非常灵敏的酶学指标。在病变早期，当肝功能、肝扫描和有关肝病检查阴性时本酶活性已明显增高。对于,AFP,阴性病例，其与,AFP,互补诊断肝癌的阳性率可达,94,。,特异性高，能协助判断碱性磷酸酶（,ALP,）增设是肝胆系统疾病，还是骨髓系统疾病（如骨癌、骨肉瘤、骨转移癌、佝偻病等）。,ALP,在肝胆系统疾病和骨骼系统疾病时均可增高。除,5-NT,除肝胆系统疾病增高外，骨骼系统疾病一般均不升高。,有助于鉴别诊断肝细胞性黄疸和阻塞性黄疸。后者,5-NT,明显高于前者。,5-NT,已作为肝功能常规项目检查进入临床，将能使临床医生更全面地了解患者肝脏情况，提高其临床应用价值。,谢谢,