第4章2-翻译后转运.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,Media Connections,翻 译 后 转 运,四、小泡运输的机制,小泡的萌发、形成及融合需要许多蛋白质参与,（,1,）小泡的类型,（,2,）小泡的融合,小泡运输过程中保持生物膜的不对称性,蛋白质不会因小泡的萌发和融合而释放到胞液中,（,1,）小泡的类型,根据,小泡外包被蛋白的不同,，可将小泡分为,三种,，,每一种小泡可逆性聚合，所需蛋白质有很大差异,网格蛋白（,clathrin,）包被的小泡,包被蛋白,（,COP,）包被的小泡,包被蛋白,（,COP,）包被的小泡,网格蛋白（,clathrin,）包被的小泡,哺乳动物细胞表面有一,些内陷的区域，称为,有,被小窝,（,coated pit,）,这些有被小窝的形成需,要,三种蛋白质,成分：,a.,网格蛋白（,clathrin,）,b.,连接蛋白（,adapter protein,）,c.,发动蛋白（,dynamin,）,AP1,：,高尔基体 内体（,endosome,）,AP2,：,质膜 内体,AP3,：,高尔基体 溶酶体，液泡,（,vacuole,），黑素小体,（,melanosome,），血小板小,体（,platelet vesicles,）,不同的连接子介导不同转运过程,c.,发动蛋白（,dynamin,）,一种细胞质蛋白，约由,900,个氨基酸组成,能结合并水解,GTP,发动蛋白的亚基围绕萌发,小泡的,“,颈部,”,进行多聚化,，然后水解,GTP,，使小泡与膜相连的部位收缩，直至小泡解离,小泡萌发时各种蛋白质的掺入及对膜蛋白的选择,被排除的膜蛋白,网格蛋白,连接子,发动蛋白,网格蛋白包被小泡的解聚,网格包被小泡形成后就进行解聚,解聚由细胞质伴侣蛋白,Hsp70,催化,生成的网格蛋白可再利用,包被蛋白,（,COP,）包被小泡,COP,：,含,7,个亚基（,，,，,，,，,，,，,）。各亚基聚集在一起形成,包被体（,coatomer,）,ADP,核糖基化因子（,ADP,ribosylation,factor,ARF,）：,一种小,GTP,结合蛋白。,包被体与,ARF,结合，引起局部的,膜突起,小泡与膜解离需要,脂酰辅酶,A,（,fatty,acyl,CoA,）的参与，但具体机制未知,COP,小泡的形成,脂酰辅酶,A,COP,小泡的解聚,核糖基化因子（,ARF,）脱落,COP,小泡的功能,介导蛋白质从,高尔基体向内质网,运输,介导蛋白质在,高尔基体内,部进行逆向转运（,retrograde transport,）,包被蛋白,（,COP,）包被小泡,COP,小泡的形成过程,与,COP,相似,，,但所需要的,蛋白成分不同,COP,的包被和连接蛋白包括：,Sec23/24,复合物，,Sec13/31,复合物，,Sec16,COP,的小,GTP,结合蛋白是,Sar1,介导蛋白质从,内质网运输到高尔基体,（,2,）小泡的融合,运输小泡有不同的包被蛋白，但小泡与靶膜,的融合有着共同的特征,相关因子：,N-,乙酰马来亚胺敏感因子（,N-ethyl maleimide-sensitive,factor,，,NSF,）,同源四聚体，能,结合并水解,ATP,。,可溶性,NSF,连接蛋白（,soluble NSF attachment proteins,，,SNAP,）,：如,-,，,-,，,SNAP,，,辅助,NSF,与膜结合,SNAP,受体（,V-SNARE,）：,小泡萌发时掺入小泡，与特异的靶,膜,SNAP,受体（,T-SNARE,）作用，,引导小泡与特定的靶膜融合,Rab,蛋白：,GTP,结合蛋白，,GTP,置换,GDP,，,Rab,构象变化，与特,定小泡膜表面蛋白结合。,GTP,水解使,Rab,蛋白释放出来并进,入下一个循环。,Rab,蛋白在小泡融合过程中起调节作用,小泡与受体膜的融合,V-SNARE,与,T-SNARE,相互作,用使小泡附着在受体膜上,前融合复合物形成。需要许多,V-,SNARE,与,T-SNARE,相互作用，,GTP,水解。能被,N-,乙酰马来亚,胺阻断，证明,NSF,是必需的,融合，具体机制未知,解离，可能由,NSF,和,SNAP,催化,含有,V-SNARE,的小泡重新形成,V-SNARE,T-SNARE,Rab-GTP,受体膜,卷曲螺旋型,螺旋,Rab-GDP,囊泡,靶膜,各 种 类 型 的 小 泡 运 输,网格蛋白包被的小胞：,胞吞作用；高尔基体,到内体、溶酶体等,COP,包被的小泡：,高尔基体到内质网；,高尔基体内部逆向,转运,COP,包被的小泡：,内质网到高尔基体,Media Connections,小 泡 运 输,五、受体介导的胞吞作用和内化蛋白质的分拣,受体介导的胞吞作用,（,receptor mediated endocytosis,）,:,指细胞表面的,特异受体识别细胞外配体,并与之紧密结合，受,体,-,配体复合物的细胞膜区,内化（,internalization,）,形成转运小泡，从而使受体,-,配体复合物得到运输,配体内化的效率取决于其在,细胞表面受体的浓度,一些,由,小窝蛋白（,caveolin,）组成的小窝（,caveolae,）,含有一些受体蛋白，能介导特定类型的胞吞作用。但,大多数,受体介导的胞吞作用是,网格蛋白包被的小窝和小泡,膜受体的胞质侧含有特异的分拣信号，它们决定蛋白质形成小泡的类型以及运输的到位位置,不同蛋白质的分拣信号,（,X=,任何氨基酸，,=,体积较大的疏水氨基酸）,受体运输,到质膜进,行再循环,LDL,的胞吞,LDL,颗粒,包被,小泡,LDL,受体,早期,内体,晚期内体,溶酶体,氨基酸,胆固醇,脂肪酸,LDL,降解,低,pH,下,LDL,与受体解离,网格蛋白,转铁蛋白循环,铁转铁蛋白,脱辅基转铁蛋,白在中性,pH,下与受体解离,pH 7.0,网格蛋白,pH 6.0,脱辅基转铁蛋白,晚期内体,转铁蛋白受体,铁离子释放到细胞质,低,pH,使铁离子与配体解离，,但配体仍与受体结合,pH 5.0,方式 受体去向 配体去向 举例,1,再循环 再循环 运铁蛋白,2,再循环 降解,LDL,3,降解 降解 上皮生长因子,运出细胞 运出细胞 母体的免疫球蛋,白通过胎盘,受体介导的胞吞作用中受体与配体的去向,一些蛋白质,通过,受体介导的内吞作用,进入细胞后就留在细胞内，然后进行轻度加工，如卵黄原蛋白（,vitellogenin,）。,一些蛋白质,转运是通过,胞转作用,（,transcytosis,）完成的。,胞转作用,是一种跨越细胞的运输过程，即,在细胞的一侧通过,胞吞,作用使物质进入细胞，然后通过,胞吐,作用在细胞,的另一侧将物质分泌到细胞外。,如母体免疫球蛋白通,过初生小鼠的小肠内皮细胞进入小鼠体内的过程就是,胞转作用,内皮细胞,肠腔,F,c,受体,内 体,F,c,区,I,g,G,肠腔膜,基底膜,血液和肠液,（,pH 7.0,）,初 生 小 鼠 免 疫 球 蛋 白 的 胞 转 作 用,（,pH 6.0,）,受体介导的胞吞作用的功能,将胞外代谢物运输到胞内,。如铁离子、,LDL,、维生素,B,12,等,是,细胞应答肽类激素和生长因子,的调节方式之一。通过胞吞,作用使细胞表面受体数目减少，使细胞对激素及生长因子的应答减弱，称为,受体的下降调节,将需要,降解的蛋白质,通过内吞作用进入细胞后转运到,溶酶体,。如巨噬细胞清除血液循环中被损伤的蛋白质,某些,病毒或细菌毒素,能通过这种作用,进入细胞,。如,HIV,病,毒、白喉毒素等,Media Connections,LDL 的 胞 吞,第二节 蛋白质的加工与修饰,二硫键的形成,内质网中蛋白质的质量控制,蛋白质的共价修饰,蛋白质前体的加工,多亚基蛋白的组装,蛋白质糖基化,肽链的加工修饰包括两个方面：,一些是氨基酸残基侧链的修饰,一些是肽键的断裂和肽段的切除,包括：,N,端信号肽的切除。,真核信号肽的切除与内质网膜上的信号肽酶（亚基分子量,12kDa,18kDa,21kDa,22/23kDa,和,25kDa,）相关，其中,18kDa,和,21kD,亚基含有丝氨酸为中心的活性部位，与酵母中的,Sec11p,是同系物。,前肽的激活。,酶原和激素原,（如弗林酶，胰岛素原），酶,切位点主要是原肽旁侧的氨基,酸（,1,个，,2,个和,4,个碱性氨基酸，,Arg,Lys,）,一个前体可产生一组肽。,N,C,垂体中叶,肽转换酶（,PC1/3,）,ACTH,-LPH,PC2,垂体前叶和中叶,-MSH,CLIP,内啡肽,-LPH,阿黑皮素原,CLIP:,染色单体连接蛋白,(chromatid linking protein),LPH:,促脂解激素,MSH,：,促黑激素,ACTH,：,促肾上腺皮质激素,肽链的自我剪接。,蛋白质自我切去内含肽（,intein,），保留外显肽（,extein,）,蛋白质除去内含肽,内含肽的剪切,mRNA,剪切的比较,1.,二硫键的形成,在真核细胞中，,二硫键是在粗面内质网腔中形成,的，所以,只有分泌性蛋白和膜蛋白的腔面结构域含有二硫键,谷光甘肽（,glutathione,）,是一种三肽，是真核细胞中含有巯基的主要分子。,细胞质中,GSH,与,GSSG,的比例是,50:1,，说明细胞质中没有二硫键形成,GSH,二硫键的形成的顺序,。首先在一条多肽链的小结构域内形成，然后在距离较远的片段之间形成。,蛋白质合成到成熟需要进行二硫键的重排，,催化二硫键重排的酶是,蛋白质二硫键异构酶,（,protein disulfide isomerase,PDI,）,。二硫键异构酶是一种含有巯基的酶，能随机切断及催化多种蛋白质中二硫键的形成。,PDI,催化的二硫键重排,如果,PDI,与蛋白质结合后，形成了不可逆的错误，,PDI,可从错误折叠的蛋白质上脱离。,2.,内质网中蛋白质的质量控制,（,1,）蛋白质折叠,（,2,）未折叠或错误折叠的蛋白质留在内质网,（,3,）泛素介导的蛋白酶解,（,4,）内质网蛋白从内侧高尔基体运回内质网,（,1,）蛋白质折叠,许多变性的蛋白质在,体外能自发地进行折叠,，但往往需要,几个小时,才能完成。而,体内,分泌性蛋白质在内质网腔中的折叠仅需,几分钟,内质网含有多种蛋白质，能,加速新合成蛋白质的折叠,，,如,伴侣蛋白,Bip,、钙连接蛋白（,calnexin,）、钙网蛋白（,calreticulin,）、蛋白质二硫键异构酶（,PDI,）、肽基脯氨酰异构酶（,peptidylprolyl,isomerases,PPI,）,钙连接蛋白介导糖蛋白肽链的正确折叠,GT,：,葡萄糖转移酶,葡萄糖苷酶,蛋白质肽键绝大多数是反式构型,，但有,6%,的肽基与,Pro,残基之间的肽键是顺式的,。顺式,Pro,有利于肽键的折叠,肽基脯氨酰异构酶,能催化多肽链中未折叠肽段中肽基和,Pro,残基间的肽链旋转。,这种异构化作用往往是蛋白质结构域折叠的限速步骤,（,2,）未折叠或错误折叠的蛋白质留在内质网,大多数情况下，,未正确折叠的蛋白质永久性地与内质网伴侣蛋白结合，再不能进行转运到位。,当过多的未折叠蛋白积累于,ER,，会加重,ER,肽链折叠的负担，这时细胞会发出信号，通知核糖体暂停工作，以缓解,ER,的压力，该过程称未折叠蛋白反应（应答）（,unfolding protein response,UPR,）,也称内质网应激（,ER stress,）。,HAC1,能够激活编码内质网伴侣蛋白和其他酶的基因,1,2,3,4,内质网跨膜激酶,细胞对未正确折叠蛋白质的反应,是,增加内质网伴侣蛋白和其他酶的表达量。,起关键作用的是,IRE1,（内质网跨膜激酶）,IRE1,的,内质网腔面结构域,有,未折叠蛋白质的结合位点,，而,细胞核面结构,域,有,激酶活性（功能未知）和核酸内切酶（,endonuclease,）活性,。在内质网,腔内,IRE1,与未折叠蛋白质结合，促进转录因子,HAC1,的表达,HAC1,进一步,促进,UPR,相关基因,(BiP,、,calnexin,、,PDI,等,),的转录,.,ER,中最重要的,分子伴侣是,Bip/GRP78,在,ER,中的浓度约,100mg/ml,平时,Bip,多与,IRE1,、,ATF6,和,PERK,结合。,当大量新生肽进入,ER,需,BIP,时，,Bip,与,IRE1,、,ATF6,和,PERK,解离。,ATF6,进入高尔基体加工后入核激活,UPR,相关基因,;IRE1,二聚化,激活激酶和,Rnase(,也加工其,mRNA);PERK,二聚化激活,使,eIF2,磷酸化,降低,eIF2-GTP-tRNAmet,的形成,.,需肌醇的蛋白激酶,/RNase,激活转录因子,6,蛋白激酶样内质网激酶,X,盒结合蛋白,1,错误折叠蛋白形成聚集体,一些错误折叠蛋白降解前，在,动力蛋白,的作用下沿微管向细胞核旁中心体附近的,微管组织中心（,MTOC,）募集,，在波形蛋白（中间丝蛋白）作用下形成聚集体（,aggresome,）,即包含体。此时分子伴侣和泛蛋白体系也向聚集体靠拢。,新生肽链折叠的质量控制的两种方式,a:,原核细胞,b:,真核细胞,（,3,）泛素介导的蛋白酶解,泛素,/,泛蛋白（,ubiquitin,）,:,76,个氨基酸残基的碱性蛋白质，广泛存在于真核细胞，在进化中高度保守,泛素,C terminal Gly,的羧基,能与靶蛋白质中,Lys,残基的,氨基,形成肽键，使泛素与蛋白质共价结合。,酶,1,酶,1,酶,1,酶,2,酶,2,酶,2,酶,3,ATP,靶蛋白,靶蛋白,蛋白质泛素化,多聚泛素的蛋白质进入胞质中的蛋白体（,proteosome,）然后被其中的蛋白酶降解。需要,ATP,供能。,泛素介导的蛋白酶解,反面扁囊,无蛋白酶细胞器中蛋白质降解,新生蛋白进入内质网的通道可能是双向的。一些折叠异常的、带糖链的蛋白质可以通过所谓的内质网相关降解途径（,ERAD,）返回到细胞质中。经泛素标记，切除糖链后，在蛋白酶体中降解。,蛋白酶体与蛋白质降解,蛋白酶体是一个约,20S,的颗粒，是细胞质中的一种蛋白复合体，但在细胞核中也有，还可与内质网结合的形式存在。不同物种蛋白酶体不同。,真核细胞中的蛋白酶体的蛋白质降解,抗原提呈,细胞,:,又叫辅佐细胞,.,指能摄取,加工,处理抗原并将抗原信息提呈给淋巴细胞,蛋白酶体可分解为两部分：中间是,20S,的桶状结构，有,4,个环样层次，中间是,2,个,亚基环，两侧,亚基环；,20S,的上下方是,2,个帽样,19S,复合物，约,20,个亚基，其中,6,个有,ATP,酶活性,蛋白质的寿命,蛋白质的半衰期在数十秒到,100,余天，大多数在,70,80,天。哺乳动物细胞内蛋白质的平均周转率,1,2,天。,蛋白质的半衰期与氨基酸序列和,N,端,AA,有关，称,N,端,规则,。,如,N,末端,Met,的酵母蛋白质半衰期大于,20 Min,，而,Arg,取代则为,2 Min,；,Arg,、,Asp,使,N,末端不稳定便于泛素化，而,Met,、,Ser,则相反。,代谢关键酶半衰期短，便于代谢迅速平衡。,决定蛋白质半衰期的信号在各种生物中均是类似的，已在进化过程中保留了几十亿年，但控制蛋白质降解的信号还待阐明（有很大进展）。蛋白质半衰期不是恒定的，与生理状态相关。,PEST,假设：,含,PEST,序列（富含,Pro,Glu,Ser,和,Thr,）的蛋白质，在细胞质中很快被降解。缺失该肽段的蛋白质寿命延长。,鸟氨酸和组氨酸脱羧酶等氨基酸脱羧酶的,PEST,模体,重要的蛋白酶,组织蛋白酶（,Cathepsin,）,酸性蛋白酶类,巯基蛋白酶家族,(,主要为溶酶体蛋白酶,),依赖,ATP,的蛋白酶：,主要是,蛋白酶体中的蛋白酶，是一类新的蛋白酶,（不同于已知的：,丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、羧基蛋白酶和金属蛋白酶,）。其,亚基的氨基酸与上述蛋白酶无同源性，且上述蛋白酶抑制剂对其无影响,细胞质中依赖于钙离子的蛋白酶,遍在型需钙蛋白酶,组织特异性需钙蛋白酶,三边帽蛋白酶：,蛋白酶体辅助蛋白酶,，其底物是蛋白酶体降解的寡肽，将,6,12,肽,2-4,肽，属丝氨酸蛋白酶家族。亚基为,1071AA,，亚基先形成二聚体，,3,个二聚体形成,720kDa,的六聚体。,亚基组装的二聚体,两亚基间局部作用,最终组装的二十面体,胱天蛋白酶家族：,即半胱氨酸依赖性天冬氨酸特异性蛋白酶（,cysteine-dependent aspartate-specific protease,caspase,）,.,与程序性细胞死亡密切相关。,激活复合物的组装,与引发调亡的上游因子结合，聚集，利用自身激活,（,4,）,修饰后的,内质网蛋白从内侧高尔基体运回内质网,内质网蛋白的,寡糖链,是在内侧高尔基体中由酶催化形成的，故内质网蛋白至少被运输到内侧高尔基体,内质网蛋白含有特异的,C terminus,分拣信号,Lys-Asp-Glu-Leu,（,KDEL,）,，其受体位于内质网和内侧高尔基体。,内质网蛋白从内侧高尔基体运回内质网的机制,3.,蛋白质的共价修饰,（,1,）氨基酸残基的修饰,（,2,）蛋白质与膜中脂类共价结合,（,3,）肽链中,L,氨基酸的,D,构型化,（,1,）氨基酸,残基,的修饰,细胞内几乎所有的蛋白质在核糖体合成后都要,经过共价修饰,蛋白质的,共价修饰,发生在肽链,N terminus,、,C,terminus,或内部残基侧链,的活性基团上,蛋白质的这种修饰作用能改变其,活性、寿命及,细胞内定位,氨基的甲基化和乙酰化,氨基甲基化不多,:,已知有肌动蛋白中,His,残基,N,3,位的甲基化，组蛋白中,Lys,残基的,氨基甲基化，细胞色素,c,、钙调蛋白（,calmodulin,CaM,）的甲基化等。,Lys,残基甲基化可消除正电荷,乙酰化十分普遍：,估计体内,80%,的,蛋白质有,末端氨基的乙酰化,乙酰化能,延长蛋白质在细胞内存在的时间,，而组蛋白的乙酰化与,染色质活化、染色质复制与组装、细胞分化和细胞癌变,等有关,羧基末端的酰胺化,蛋白质羧基端酰胺化能,保护蛋白质免受羧肽酶降解,C terminus,是,Gly,的蛋白质常被,酰胺化,。,蛋白质,CO-NH-CH,2,-COOH,蛋白质,CO-NH-CH(OH),-COOH,蛋白质,CONH,2,+CHOCOOH,肽链,N terminus,的,Glu,残基可通过氨基与,羧基脱水形成吡咯酮羧酸（,PCA,），以,消除,N terminus,氨基,Gly 羟基化,脱乙醛酸,磷酸化,蛋白质磷酸化是由蛋白激酶催化,ATP,中的磷酸基团转移到氨基酸残基的功能基团上,。常见的磷酸化修饰基团是,Ser,、,Thr,和,Tyr,羟基,蛋白激酶,可分为三类：,丝,/,苏氨酸蛋白激酶,，如,PKA,、,PKC,、癌基因产物,Raf,等,Tyr,蛋白激酶（,TPK,）,，如生长因子受体、胰岛素受体、,Src,蛋白等,双功能蛋白激酶,，如丝裂原激活的蛋白激酶激酶（,MAPKK,）,蛋白质磷酸化修饰及其生理调控,可逆性,。所以磷酸化既有活化又有抑制效应,快速高效,。若涉及转录因子及基因表达则效应较慢但较持久,级联式反应,。一连串的磷酸化，构成级联反应，放大效应,变构效应和易位,。变构效应能调控酶的活性，易位使酶在不同亚细胞区域发挥其催化作用,广泛存在与时空分布,。广泛存在于几乎一切生命活动中，但有些蛋白质的磷酸化修饰存在,细胞周期性、发育阶段性、组织特异性,而呈现时空特异性,谷氨酸残基的,羧基化,修饰,修饰在内质网中进行,，由,依赖于维生素,K,的羧化酶,在,Glu,残基的,碳原子上添加羧基，生成,-,羧基谷氨酸（,Gla,）,Glu,的,碳原子有两个羧基，能,螯合钙离子,，在,凝血,过程中起重要作用,脯氨酸和赖氨酸残基的羟基化与 蛋白质分子内和分子间的共价交联,Pro,和,Lys,在,羟化酶,的作用下分别生成,羟脯氨酸（,Hyp,）和,羟赖氨酸（,Hyl,）,Hyp,和,Hyl,能通过,醛醇缩合,反应、,希夫氏碱,（,Schiff base,）反应等对蛋白质进行,分子内和分子间的共价交联,羟化酶的活力依赖于维生素,C,5-,羟赖氨酸,3-,羟脯氨酸,5-,羟脯氨酸,ADP,核糖基化,普遍存在于原核及真核细胞中，分为,单,ADP,核糖基化,和,多聚,ADP,核糖基化,哺乳动物,细胞核外蛋白质,以单,ADP,核糖基化修饰为主。,ADP,核糖基转移酶,催化将,NAD,+,中的,ADP,核糖基转移到,Arg,、,Asn,或白喉酰胺（,diphthamide,，一种修饰的,His,）残基侧链的氮原子上，两者之间以,N,糖苷键,相连,.,霍乱肠毒素,肠粘膜上皮细胞,GM1,受体,A1,片段进入细胞,NAD+Gsa,ADP,核糖基化转移酶,ADPR-Gsa+,烟酰胺,+H+,GTP+Gsa-GDP,激活腺苷酸环化酶,ATPcAMP,肠粘膜分泌大量水和电解质 ,腹泻、呕吐、电解质紊乱、循环衰竭等,注,:,NAD:,辅酶,I,尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸,;,Gsa:,G-,调节蛋白激活型,a,亚基,;,ADPR:,ADP,核糖基,多聚,ADP,核糖基化修饰主要发生在,细胞核内,。,ADP,核糖基聚合酶,（,PARP,）将,NAD,+,中的,ADP,核糖基转移,到,底物蛋白,（可以是,PARP,本身）中某些,Glu,残基侧链的羧基,，两者以,O,糖苷键相连，然后在,ADP,核糖基上,继续添加,ADP,核糖基单位,形成含有,数百个,ADP,核糖基,的侧链，并可以有,分枝,。,PARP,与促进,DNA,损伤的修复有关,（,2,）蛋白质与膜中脂类共价结合,一些膜周边蛋白质通过共价修饰与膜中脂类结合。,这些蛋白质,定位于膜的方式有两种,：,蛋白质与糖基磷脂酰肌醇（,GPI,）共价结合,定位于膜,胞液中的可溶性蛋白质通过,脂肪酰化或异戊烯基化,与膜共价结合。,这一类膜蛋白是在胞液中游离的核糖体中合成的，在合成的同时或合成,完毕之后进行,N terminus,或,C terminus,脂肪酰化或异戊烯基化，然后,定位于膜，如,N terminus,豆蔻酰化、棕榈酰化、,C terminus,法尼基化,（,farnesylation,）和龙牛儿龙牛儿基化（,geranylgeranylation,）,等,蛋白质肽链的各种脂质修饰,Hedgehog,蛋白（,Hh,）是胚胎发育中的重要分子。参与反应的前几步与内含肽切除类似，由于缺乏内含肽中的其他模体，后几步反应则由胆固醇替代。,（,3,）肽链中,L,氨基酸的,D,构型化,在,微生物、无脊椎动物和脊椎动物,中都存在，如,南美树栖蛙,（,phyllomedusa sauvagii,）皮肤分泌的具有吗啡样镇痛作用,皮,啡肽（,dermorphin,）和皮脑啡肽（,dermenkephalin,）,分别含有,D-Met,和,D-Ala,。这些小肽是从多蛋白体加工产生的，,D,构型化,后才有生物活性,皮啡肽,Tyr-,D-Met,-Phe-His-Leu-Met-Asp-(NH,2,),皮脑啡肽,Tyr-,D-Ala,-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-(NH,2,),4.,蛋白质前体的加工,一些小的分泌性蛋白质和病毒膜蛋白,的信号序列被蛋白酶,切除后就成为成熟形式。,但,部分质膜蛋白和大多数分泌性蛋白,开始合成的是相对较长、无活性的前体，称为,蛋白原（,proprotein,）,。蛋白原需要进一步加工才能产生成熟、有活性的蛋白质,蛋白原的加工一般发生在小泡,从外侧高尔基体到质膜,的运,输过程中。正常情况下，成熟小泡的形成融合多种不成熟,的小泡，而这些不成熟的小泡就含有蛋白原,.,哺乳动物细胞含一大类,内切蛋白酶（,endoptoteases,）,如,弗林蛋白酶,（,furin,），,前激素转换酶,（,prohormone convertases,）,PC1,、,PC2,、,PC3,等。这些,酶能识别蛋白质前体中,ArgArg,、,LysArg,、,LysLys,等双碱性氨基酸残基,序列，在该序列的,C terminus,切断肽链,内切蛋白酶的功能相同，但有不同的分工。,弗林蛋白酶：,分布在各种类型的细胞中，负责,组成型表达,的蛋白质前体的,加工，如白蛋白原（,proalbumin,）；,前激素转换酶,PC,：负责受调控的,分泌性激素,前体的切割。如胰岛素原,（,proinsulin,）,白蛋白原的加工,弗林蛋白酶,PC3,前激素转换酶,PC2,前激素转换酶,羧肽酶,胰岛素原的加工,弗林蛋白酶,5.,多亚基蛋白的组装,两条或两条以上的肽链组成的蛋白称寡聚体。,寡聚体蛋白是在内质网中形成的。,如,血凝素,，,由,3,个相同的亚基聚合而成。,亚基是,型膜蛋白,，,3,个亚基互作用结合在一起,血凝素,6.,蛋白质糖基化,糖链和蛋白质的连接方式可分为,两类,，即,O-,连接,糖基,或糖链和,N-,连接糖基,或糖链,O-,连接糖基,或糖链是指糖基或糖链与蛋白质中的,Ser,、,Thr,或,Hyl,（羟赖氨酸）,连接，仅在高尔基体中形成,N-,连接糖基,或糖链指的是糖基或糖链与蛋白质中的,Asn,连接,，,N-,连接糖基或糖链的形成起始于内质网，然后在高尔基体中完成,N-,聚糖的合成,首先在内质网中合成连接在,长萜醇（,dolichol,）焦磷酸,上的,十四糖,。这个十四糖是一切,N-,聚糖的前身。在,糖基转移酶,的作用下，十四糖被转移到新生肽链,Asn-X-Ser,或,Asn-X-Thr,的,Asn,上,N-,聚糖的合成,肽链上的,十四糖,被内质网,葡萄糖苷酶,和,切掉,3,个葡萄糖,，,然后由内质网,甘露糖苷酶,切掉几个甘露糖，形成,高甘露糖寡糖链,.,N-,聚糖的合成,进入高尔基体后，由甘露糖苷酶,切掉,1,个甘露糖，然后由,N-,乙酰葡萄糖转移酶催化下加上,1,个,N-,乙酰葡萄糖。这样就产生了一个,内部核心（,inner core,）,，能抵抗内切糖苷酶,H,（,Endo H,）的降解,最后在内部核心上再加上,N-,乙酰,葡萄糖、半乳糖（,galactose,）及唾,液酸（,sialic acid,）等，形成,内,部核心末端区（,terminal region,）,内部核心,内部核心,末端区,Media Connections,蛋 白 质 糖 基 化,